低分子量灰树花多糖的分离、纯化和抗肿瘤活性

目的：从灰树花菌丝体中分离纯化低分子量多糖并进行结构鉴定和抗肿瘤活性检测．方法：采用大孔吸附树脂和离子交换纤维素进行分离，SephadexG200柱层析纯化，HPGFC测定分子量，紫外光谱、红外光谱、薄层色谱和高效液相色谱和气相色谱等进行纯度和结构鉴定．用荷瘤小鼠检测抗肿瘤活性．结果：得到大、小两种多糖组分，其中低分子量多糖为白色粉末状，分子量约为2600，单糖组成为D-葡萄糖，含α—1，3，α-1，6，α-1，4-糖苷键，对S180肉瘤、EAC腹水瘤、Heps实体瘤都有明显抑制作用。结论：分离得到一种灰树花菌丝体多糖，为低分子量的α-葡聚糖，初步药效试验表明其具有抗肿瘤作用。     

灰树花发酵液及其胞内纯化物的降血脂作用

 目的检测药用真菌灰树花发酵液及胞内多糖纯化物降血脂作用。方法建立小鼠高血脂动物模型，并灌胃给药灰树花发酵液GFL和胞内多糖纯化物GIP。结果药理实验表明，灰树花发酵液GFL在160，80 mg·kg^-1的剂量下，胞内多糖纯化物GIP在40，20，10 mg·kg^-1的剂量下，具有较显著的调节血脂作用。结论灰树花发酵液及胞内多糖纯化物在一定的剂量下，具有降血脂作用。     

灰树花多糖的免疫作用实验研究

目的：研究灰树花多糖在免疫方面的药理作用。方法：小鼠50只，分为空白对照组。阳性对照组和灰树花高、中、低3个剂量组，各组动物给药后，观察其对小鼠吞噬细胞的吞噬功能、对鸡红细胞致敏小鼠血清溶血素水平的影响，以及对小鼠免疫器官重量的影响。结果：灰树花多糖在180mg／kg和120mg／kg剂量下，可明显增强小鼠吞噬细胞的吞噬功能，增强小鼠的体波免疫能力，并能提高小鼠免疫器官的重量。结论：灰树花多糖具有提高机体免疫力作用。     

灰树花多糖对CIF模型磷酸化p38 MAPK表达的影响

目的:观察灰树花多糖对化疗相关性疲劳(CIF)模型疲劳程度的改善情况,并初步探讨其可能的机制。方法:6~8周龄SPF级C57BL/6小鼠60只随机分为4组,即空白组,模型组,灰树花多糖低剂量组(5 mg·kg~(-1))和灰树花多糖高剂量组(10 mg·kg~(-1)),每组15只。将除空白组以外的小鼠腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-Fu,40 mg·kg~(-1)),每天给药1次,连续5 d,同时灰树花多糖低剂量组和灰树花多糖高剂量组给予不同剂量灰树花多糖灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,期间测量体重和抓力变化。第15天处死动物取材测血尿素氮、血乳酸和肝糖原含量及腓肠肌p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)mRNA和磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的表达情况。结果:低剂量和高剂量的灰树花多糖均能明显增强CIF小鼠的抓力(P0.01);低剂量和高剂量灰树花多糖均可明显降低CIF小鼠运动后的血尿素氮值(P0.05);高剂量灰树花多糖可以明显降低CIF小鼠运动后的血乳酸值(P0.01);低剂量和高剂量灰树花多糖均可明显降低腓肠肌p38 MAPK mRNA和p-p38 MAPK蛋白的表达水平。结论:灰树花多糖可以有效改善化疗相关性疲劳,可能与下调p38 MAPK基因与p-p38 MAPK的表达有关。     

从阴阳自和角度探讨灰树花多糖对CIF模型线粒体自噬蛋白PINK1和Parkin的调节效应

目的:探讨灰树花多糖调节化疗相关性疲劳(CIF)模型骨骼肌线粒体异常的机制。方法:将60只6～8周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、灰树花多糖低剂量组(5 mg·kg~(-1))和灰树花多糖高剂量组(10 mg·kg~(-1)),每组15只。将除空白组以外的小鼠腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-Fu,40 mg·kg~(-1)),每天给药1次,连续5 d,同时灰树花多糖低、高剂量组分别给予不同剂量灰树花多糖灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,期间测量体质量及抓力。第13天处死动物取腓肠肌,测SOD和MDA含量,透射电镜观察腓肠肌线粒体形态,Western Blot法检测线粒体自噬相关蛋白PINK1和Parkin的表达情况。结果:与空白组相比,模型组抓力显著下降(P0.05),SOD显著降低(P0.01),MDA显著升高(P0.01),灰树花多糖组抓力显著高于模型组(P0.05),灰树花多糖高剂量组SOD显著高于模型组(P0.05),灰树花多糖组MDA显著低于模型组(均P0.01)。电镜结果显示模型组骨骼肌线粒体肿胀变形,且有大量空泡变性,线粒体内嵴排列紊乱或不清晰,灰树花多糖组骨骼肌肌节仍有部分排列紊乱或断裂现象,但可见较多自噬的线粒体。Western Blot结果显示模型组线粒体自噬相关蛋白PINK1和Parkin的表达显著下降(P0.01),灰树花多糖可显著增加PINK1和Parkin的表达(P0.01)。结论:灰树花多糖可以改善CIF骨骼肌SOD与MDA失衡,增强线粒体自噬相关蛋白PINK1和Parkin的表达,促进线粒体自噬。     

灰树花多糖对脾虚小鼠T细胞亚群和Th1/Th2亚群的影响

目的观察灰树花多糖对脾虚小鼠T细胞亚群和Th1/Th2亚群的影响,探讨其免疫调节机制。方法健康雄性清洁级昆明小鼠48只随机分为空白组、脾虚组、阳性组(香菇多糖)及灰树花多糖低、中、高剂量组,每组8只,各给药组给予相应药物,滤菌后腹腔注射10 d,第11日处死动物。流式细胞术检测各组小鼠外周血CD3+、CD4+及CD8+T细胞百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的含量。结果高剂量灰树花多糖能明显升高脾虚小鼠外周血CD4+T淋巴细胞百分率(P＜0.05);中、高剂量灰树花多糖可以明显升高脾虚小鼠的 CD4+/CD8+T 细胞比值(P＜0.01)。中、高剂量灰树花多糖可以明显升高脾虚小鼠 CD3+T 淋巴细胞百分率(P＜0.01)。灰树花多糖中、高剂量组可以明显升高脾虚小鼠血清 IFN-γ含量(P＜0.01),灰树花多糖高剂量组可以明显降低脾虚小鼠血清IL-4含量(P＜0.01)。结论灰树花多糖可改善脾虚时所致CD4+/CD8+T细胞比值降低,使Th2细胞向Th1细胞转化,从而达到治疗脾虚证的目的。     

灰树花多糖的复合酶-微波提取、超滤纯化及生物学评价

目的 研究灰树花多糖的复合酶解-微波萃取、超滤纯化工艺及纯化多糖的抗肿瘤活性.方法 灰树花子实体经微波萃取、复合酶解(木瓜蛋白酶、纤维素酶、果胶酶的质量比为2:2:1)、活性炭脱色和超滤纯化得到具有不同相对分子量的灰树花多糖;采用正交试验结合响应模型,优化灰树花多糖的超滤纯化工艺;将110只荷瘤小鼠分成生理盐水组对照组和3个实验组,分别灌胃生理盐水,环磷酰胺、灰树花子实体原糖、超滤截留液和超滤透过液,研究其对荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用.结果 优化的灰树花多糖超滤工艺为:超滤温度35℃、多糖浓度20g/L,超滤压力0.12 MPa,pH为7,超滤时间20 min;灰树花子实体原糖GFP、超滤截留液GFP-Ⅰ和超滤透过液GFP-Ⅱ对荷瘤小鼠的肿瘤抑制率最高分别可达40.23%、51.65%、36.24%.结论 建立的响应模型能很好拟合实验结果;超滤温度和多糖浓度之间、超滤温度与PH值之间、多糖浓度与超滤压力间的交互作用极为显著;超滤时间、超滤压力对试验指标有极为显著的影响.在相同剂量下,经100kDa超滤膜分离后的超滤截留液GFP-Ⅰ的肿瘤抑制率明显高于未经超滤处理多糖以及超滤滤过液多糖.     

灰树花多糖体内抗S_(180)肉瘤实验研究

目的:研究灰树花多糖(PFP)抗实验性肉瘤作用的效果。方法:制备荷瘤小鼠动物模型,多糖溶液和环磷酰胺分别灌胃,检测小鼠的体重、胸腺指数、脾指数、抑瘤率。结果:灰树花多糖、环磷酰胺对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为47.92%、41.55%,多糖组荷瘤小鼠脾脏指数、胸腺指数明显高于环磷酰胺组、生理盐水组,但体重不降低。结论:灰树花多糖具有抗肿瘤作用,其机制可能是通过增强小鼠的免疫调节功能来实现的。     

灰树花多糖对宫颈癌细胞增殖和转移的影响及机制

目的探讨灰树花多糖对宫颈癌Caski细胞增殖、凋亡、侵袭迁移及PI3K/AKT(磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B)信号通路的影响。方法 50、100、200μg/mL灰树花多糖处理Caski细胞48 h,通过MTT比色法、Transwell小室及Annexin V-FITC/PI双染法分别检测细胞增殖、侵袭迁移及凋亡率,Western blot检测AKT、p-AKT、PCNA(增殖细胞核抗原)、Cleaved caspase-3(裂解的半胱天冬酶3)和E-cadherin蛋白(上皮钙黏蛋白)表达。使用PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002(10μmol/L)单独或联合灰树花多糖(10μmol/L LY294002和200μg/mL灰树花多糖)处理Caski细胞48 h,检测各组细胞增殖、侵袭迁移、凋亡及AKT、p-AKT、PCNA、Cleaved caspase-3和E-cadherin蛋白表达。结果随着灰树花多糖质量浓度增加细胞增殖、侵袭和迁移能力降低,凋亡率升高,p-AKT和PCNA表达降低,Cleaved caspase-3和E-cadherin表达升高(P0.05)。LY294002可增强灰树花多糖对Caski细胞增殖、侵袭迁移、凋亡及p-AKT、PCNA、Cleaved caspase-3和E-cadherin表达的影响。结论灰树花多糖可通过阻断PI3K/AKT信号通路抑制宫颈癌Caski细胞增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡。     

灰树花提取物对脾虚小鼠腹腔巨噬细胞和脾细胞的影响

目的:探讨灰树花提取物对脾虚小鼠的免疫调节机制。方法:健康雄性清洁级昆明小鼠30只随机分为6组,即空白对照组、脾虚组、阳性对照组(香菇多糖,2 mg·kg-1)、灰树花提取物低剂量组(5 mg·kg-1),灰树花提取物中剂量组(10 mg·kg-1)、灰树花提取物高剂量组(20 mg·kg-1),每组5只,滤菌后ip 10 d,第11天处死动物。检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红、产生一氧化氮(NO)能力(Griess法),以及MTT法检测淋巴细胞转化率、自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤活性。结果:高剂量灰树花提取物可明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力(P<0.05)和产生NO能力(P<0.01);高剂量灰树花提取物能明显提高小鼠脾脏B细胞增殖能力(P<0.01);中、高剂量灰树花提取物能明显提高小鼠脾脏T细胞增殖能力(P<0.05和P<0.01)灰树花提取物中、高剂量组小鼠脾脏NK细胞杀伤能力均明显高于脾虚组(P<0.01)。结论:灰树花提取物可以通过提高巨噬细胞吞噬能力和产生NO能力、以及淋巴细胞转化率、NK细胞杀伤活性的途径提高脾虚小鼠的免疫功能。     

肩痛散通电加热外敷治疗实验性兔肩关节周围炎的相关生物化学指标观察

作者以肩痛散通电加热外敷治疗实验性兔肩周炎，并测定了模兔患肩肌腱组织中的羟脯氨酸、ＤＮＡ和蛋白质，结果治疗组三种测定指标含量在治疗各时相均与健侧无明显差异。     

慢性胃脘痛证型与胃电图,幽门螺杆菌感染的关系

对９６例慢性胃脘痛患者证型与胃电图的关系进行研究，结果表明：脾胃虚寒证组的胃电幅值在餐前，餐后均低于正常人组和其它三个实证组（Ｐ〈０．０５），而三个实证组与正常人组间两两比较，胃电幅值和频率餐前，餐后无明显差异（Ｐ〈０．０５），同时对３７例作了幽门螺杆菌检查的病例进行研究，发现：慢性萎缩性胃炎餐前波幅下降，明显低于其它三组和正常人（Ｐ〈０．０５）。而慢性浅表性胃炎，消化性溃疡，十二指肠球炎和正常     

海螵蛸接骨动物实验的组织学研究

本文采用化学方法处理后的海螵蛸作为接骨材料，在８６只家兔身上行实验研究，并与同种异体家兔骨相比较，术后行一般情况及组织学检查，海螵蛸植入动物体内，周围组织不引起炎症、毒性及免疫反应，从节段缺损、空洞缺损的修复情况看，处理后的海螵蛸与兔骨在成骨方面无明显差异，检查结果表明海螵蛸具有良好的组织相容性以及良好的成骨支架作用。     

天麻不同变异类型药材中天麻素含量比较

目的比较四种天麻不同变异类型药材中天麻素的含量。方法高效液相色谱法。结果四种天麻不同变异类型中天麻素的平均含量分别为:乌天麻1.440%,绿天麻1.697%,黄天麻0.904%,红天麻1.519%。结论以乌天麻和绿天麻作为重点保护和种植品种。     

盐锁阳与锁阳对小鼠睾丸、附睾和包皮腺组织学的比较研究

盐锁阳可使正常和阳虚模型小鼠睾丸曲细精管初级精母细胞分裂活跃，间质细胞及其胞核体积明显增大；附睾管扩张，管腔增大；包皮腺成熟细胞数量增多。锁阳的作用则相反。揭示盐销阳对睾丸、附睾及包皮腺的功能有显著促进作用，而锁阳则有一定抑制作用。     

喜树硷抑制兔结膜成纤维细胞的实验研究

用兔眼球结膜体外细胞培养和活体兔结膜下埋线并分别用喜树硷和５－氟脲嘧啶对埋线周围成纤维细胞的增殖进行抑制实验。结果证明，喜树硷无论在体内还是在体外，实验组与空白对照组相比，均有显著的抑制成纤维细胞增生的作用（Ｐ〈０．０１），体内实验组与５－氟脲嘧啶组相比，效果差异无显著性，但喜树硷所致的局部组织反应较５－氟脲嘧啶组轻，且对眼组织无毒副作用。     

汉防己甲素和长春新碱对人视网膜母细胞瘤细胞系HXO－Rb_（44）生长的抑制作用

用汉防己甲素（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ＴＤＲ）、长春新碱（ｒｉｎｃｒｉｓｌｉｎｅ，ＶＣＲ）分别对人视网膜母细胞瘤细胞系ＨＸＯ－Ｒｂ＿（４４）生长的影响进行观察，结果显示：ＴＤＲ在１～４０μｇ／ｍｌ范围内对ＨＸＯ－Ｒｂ＿（４４）细胞有明显抑制作用（Ｐ＜０．０５），半数抑制浓度ＩＣ５０为２．４５μｇ／ｍｌ；ＶＣＲ对该细胞系也有较强的抑制作用，ＩＣ５０为０．３１μｇ／ｍｌ。提示ＴＤＲ与ＶＣＷ一样，在体外对Ｒｂ细胞有较强的抑制作用，可能成为治疗视网膜母细胞瘤的新药。     

中药预防抗精神病药物所致副反应初探

目的：研究中药对于抗精神病药物所致高血糖、高血脂与其它副反应的预防作用。方法：对110例男性病人随机分为两组，对照组57例单服抗精神病药物，研究组53例在服抗精神病药物的同时加服中药。治疗结束时，用治疗中需要处理的不良反应症状量表（TESS）进行测评，并测定空腹血糖、血胆固醇和甘油三酯。结果：研究组6项症状的发生率均少于对照组（P〈0．05），对照照组血糖、胆固醇、甘油三脂均值显著高于研究组（P〈0．05）。结论：中药对于抗精神病药物所致高血糖、高血脂及其他副反应有预防作用。     

千斤拔的品种调查与质量研究

对千斤拔的品种调查表明,蔓性千斤拨、大叶千斤拔和宽叶千斤拨是当前的主流品种,经对３种千斤拔药材性状,组织结构、化学成分预试,ＴＬＣ、ＵＶ比较,以及浸出物、总黄酮含量测定,急性性与药效学试验,结果表明３才所含成分大致相似,经理作用无明显差异,认为可等同入药。