上海地区血清胆碱酯酶检测情况调查

目的通过对上海地区各临床实验室胆碱酯酶(CHE)检测情况的调查,了解上海地区CHE检测的整体情况,为开展上海地区CHE的室间质量评价提供相关依据。方法将4个不同水平的CHE人血清基质调查质控品发放给上海地区69家不同等级、不同类型的临床实验室,所有实验室均在规定的时间内进行检测并统一反馈检测结果。对各实验室的检测结果按检测方法和试剂品牌进行统计。结果 69家临床实验室共涉及3种检测方法,共分为4个方法组:德国临床化学协会(DGKC)推荐的以丁酰硫代胆碱/六氰高铁酸钾(Ⅲ)为底物的比色法(简称DGKC法)、以丁酰硫代胆碱/5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)为底物的比色法(简称DTNB法)、日本临床化学协会(JSCC)推荐的酶偶联法(简称JSCC法)以及干化学法(反应原理同DGKC法)。4个方法组检测结果的组内变异情况较好[变异系数(CV)均10%],JSCC法的检测结果与其他3个方法组有很大差异。干化学法的检测结果与DGKC法有明显差异,而DGKC法与DTNB法的差异较小,各样本间检测结果的偏差均3%。上海地区CHE检测试剂的原理以DGKC法和DTNB法为主(约占85%),2种方法的试剂品牌数量比例相当,但使用DGKC法试剂的临床实验室数(38家)明显多于使用DTNB法试剂的临床实验室数(14家)。结论此次调查结果为上海地区开展CHE的室间质量评价提供了相关依据。     

液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳的实验对比

目的评价液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳(TCO2)的可靠性.方法依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)有关文件对2种试剂测定血清TCO2进行相关性比较并对其线性、精密度进行评价.结果液体试剂与干粉试剂相关良好(r=0.976 0),预期相对偏差在15 mmol/L时为0.07%,在25 mmol/L时为0.16%,在50 mmol/L时为0.22%.2种试剂的线性范围均较宽,线性回归方程分别为Y=0.995 9X-1.429 2和Y=0.978 7X-0.574 8,r分别为0.999 8和0.999 7.2种试剂的精密度均很好,其批内不精密度及总不精密度(CV)均<6.1%.结论液体试剂与干粉试剂测定血清中的TCO2的相关性、线性、精密度均很好,具有可比性,而液体试剂使用更为方便.     

液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳的实验对比

目的　评价液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳 (TCO2 )的可靠性。方法　依据美国国家临床实验室标准化委员会 (NCCLS)有关文件对 2种试剂测定血清TCO2 进行相关性比较并对其线性、精密度进行评价。结果　液体试剂与干粉试剂相关良好 (r =0 .976 0 ) ,预期相对偏差在 15mmol/L时为 0 .0 7% ,在 2 5mmol/L时为 0 .16 % ,在 5 0mmol/L时为 0 .2 2 %。 2种试剂的线性范围均较宽 ,线性回归方程分别为Y =0 .995 9X - 1.4 2 92和Y =0 .9787X - 0 .5 74 8,r分别为 0 .9998和 0 .9997。 2种试剂的精密度均很好 ,其批内不精密度及总不精密度 (CV)均 <6 .1%。结论　液体试剂与干粉试剂测定血清中的TCO2 的相关性、线性、精密度均很好 ,具有可比性 ,而液体试剂使用更为方便。     

三种抗环瓜丝氨酸抗体检测试剂性能评价及临床应用

目的评价3种抗环瓜丝氨酸(CCP)抗体检测试剂盒的分析性能,并比较临床应用。方法收集93例类风湿性关节炎(RA)患者、118例非RA疾病(自身免疫性疾病82例、骨关节炎36例)患者以及20名表面健康人群的血清样本,评价罗氏、欧蒙、富纯3种抗CCP抗体试剂的分析性能,比较不同试剂间的相关性,评估各自的初步临床应用价值。结果 3种试剂检测精密度差异无统计学意义,批内、天间变异系数(CV)均<10%。罗氏和欧蒙2种试剂在检测范围内呈线性,富纯试剂的真实线性范围为25.0～1 027.9 RU/mL。3种试剂检测结果相关性较好,罗氏与欧蒙、富纯试剂的相关系数(r)分别为0.90、0.87,欧蒙、富纯试剂的相关系数(r)为0.97。根据厂商提供的Cut-off值,诊断灵敏度可达83.9%～86.0%,特异性为92.0%～97.1%。罗氏、欧蒙、富纯检测试剂的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.91、0.92和0.89,比较任意2种检测试剂的AUC,差异均无统计学意义(Z值分别为0.27、0.89、0.63,P均>0.05)。结论总体来说,不同方法抗CCP抗体检测试剂的检测结果之间具有一定的可比性,临床应用的诊断特性差异不明显,但标准化仍存在问题。     

4种丙型肝炎病毒荧光定量试剂可比性分析

目的了解不同厂家HCV-RNA定量检测试剂盒测定结果的可比性。方法采用RT-PCR技术对4种HCV-RNA试剂精密度(批内、批间)、线性、阳性检出率、试剂间可比性进行评价。结果本方法评价表明各厂家试剂盒批内变异系数(CV)均小于10%、批间变异系数(CV)均小于12%、线性r>0.97、阳性检出率均大于81%、试剂间结果相关性均r<0.60。结论不同试剂盒检测结果稳定,但不同厂家试剂盒间可比性差,不利于丙型肝炎患者在不同医院诊治,各试剂厂家需建立溯源体系,统一标准。     

肝功能相关酶学检测指标国产诊断试剂的质量比对研究

目的 评价在罗氏MODULAR P-800全自动生化分析仪(简称P-800)上应用国产诊断试剂检测肝功能相关指标的可行性.方法 应用上海复星长征医学科学有限公司和罗氏原装配套试剂,在P-800上同时测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)和碱性磷酸酶(ALP).评价国产试剂的批内批间精密度、线性范围、抗干扰能力以及与罗氏原装配套试剂进行相关性分析.结果 精密度试验结果表明,国产试剂检测结果批内、批间变异系数(CV)均<5%;线性范围验证试验表明国产试剂基本达到说明书声称的线性范围;干扰试验表明国产试剂与原装配套试剂的抗干扰能力无明显差异;方法学比对试验结果表明,应用国产试剂和原装配套罗氏试剂同时检测40份临床样本,其检测结果基本一致(P>0.05),相关性较好(r>0.975,b在1.0±0.05之间).结论 对于该研究涉及的四项肝功能相关酶学诊断指标,应用国产试剂与罗氏原装配套试剂相比,其相关性较好、精密度较高、线性范围达到说明书规定范围,对胆红素和乳糜有较好地抗干扰能力;肝功能相关国产诊断试剂检验结果与罗氏原装配套试剂具有可比性,可替代进口试剂,实现国产化.     

偶氮胂Ⅲ法和邻甲酚酞络合酮法检测血清总钙的方法学比较

目的对检测血清总钙最常用的偶氮胂Ⅲ法和邻甲酚酞络合酮（OCPC）法进行方法学比较。方法使用偶氮胂Ⅲ法和0CPC法进行方法学评价试验,并统计分析两种方法的精密度、线性范围、准确度及干扰因素等。结果偶氮胂Ⅲ法和OCPC法的精密度差异无统计学意义,准确性均符合要求[回收率达到（100±5）％）],检测结果差异无统计学意义,有良好的相关性（r=0．9863,P〈0．01,且符合r≥0．975）,线性上限均为3．75mmol／L,能满足临床要求,两种方法基本上不受黄疸、溶血及脂血的干扰。结论偶氮胂Ⅲ法与OCPC法在精密度、准确度、线性范围及抗干扰方面基本一致,而且试剂单一,使用方便,是一种值得推广的血清总钙的日常测定方法。     

不同国产人血尿素氮诊断试剂的性能评估

目的 评估3种国产人血尿素氮诊断试剂的性能.方法 评价的性能指标包括精密度、线性范围、抗干扰性、稳定性及检测结果相关性.结果 3种国产试剂检测结果批内、批间变异系数均小于5%,批间差的相对偏差均符合厂商声明;试剂在各自的线性范围内线性良好;血红蛋白浓度小于或等于0.5 mg/mL,游离胆红素小于或等于200 mg/L,结合胆红素小于或等于400 mg/L,乳糜福尔马肼浊度(FTU)达到10 000时,对3种尿素氮检测试剂均无显著干扰;各系统检测结果具有良好相关性(r2>0.99).结论 3种国产尿素氮诊断试剂精密度、线性范围、抗干扰性、稳定性均符合临床使用要求,与进口原装试剂相关性较好.     

ABI ViiA 7 Taqman HBV-DNA检测系统性能验证

目的验证ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA检测系统性能,确定该系统是否稳定、准确、可靠。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的相关文件,从精密度、准确度、线性、可比性等方面对ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA检测系统进行性能评价;通过稀释标本直至低于检测下限进行定量检出限验证实验;并与质量目标要求和厂商声明的分析性能进行比较。结果ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA分析系统的批内精密度(CV批内)分别为1.485%、1.990%和0.932%;总精密度(CV总)分别为1.876%、3.361%和1.891%;准确度最大偏移为-6.8%;r2为0.998 3,回归方程为Y=0.974 8 X+0.050 7,线性范围为1.00E2~2.00E8;定量检出限为100IU/mL;ABIViiA7与ABI7500两台PCR仪的可比性:P=0.115,r2=0.994,线性比对直线回归方程为Y=0.987 2 X+0.051 7。结论 ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA检测系统具有优良的精密度、准确度、灵敏度、线性,与ABI7500检测系统有良好的相关性,可用于临床标本检测。     

同位素稀释液相色谱-串联质谱法检测血清睾酮候选参考方法的建立及应用

目的建立基于液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术的血清睾酮候选参考方法,并采用该方法对临床常规检测方法(微粒子化学发光法)的正确性进行评价。方法采用睾酮-2,3,4-~(13)C_3作为内标,以等体积比的正己烷-乙酸乙酯溶液对样本进行液液萃取,上清液采用氮气吹干后用流动相复溶,进行LC-MS/MS分析。采用五点包括法计算血清睾酮浓度。参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)C62-A文件和EP15-A3文件对建立的同位素稀释液相色谱-串联质谱(ID-LC-MS/MS)方法进行性能评价(方法残留、特异性、线性范围、精密度、准确度),参考CLSI EP9-A3文件对微粒子化学发光法的正确性进行评价。结果建立的ID-LC-MS/MS方法检测血清睾酮的分析时间为5min,特异性好,无残留,线性范围为0.034～22.00ng/mL,批内不精密度≤2.3%,批间不精密度≤2.2%,测定有证参考物质SRM971(Level male)的相对偏移为0.2%,测定2017 RELA-A、2017 RELA-B样本的相对偏移分别为-2.9%、-3.3%,测定2017 RELA-A样本的不确定度为0.11 ng/mL。微粒子化学发光法与ID-LC-MS/MS的相关性较好(r=0.963),但偏差较大[总平均偏差为-24.4%,低浓度样本(≤1 ng/mL)平均偏差为-62.4%,高浓度样本(1 ng/mL)平均偏差为6.3%]。结论成功建立了检测血清睾酮的ID-LC-MS/MS候选参考方法。该方法的精密度、准确度均较好,且操作简单,分析时间短。     

2种国产化学发光检测系统与电化学发光检测系统检测CA72-4的一致性评价

目的评价电化学发光检测系统和2种国产化学发光检测系统检测糖类抗原72-4(CA72-4)结果的一致性。方法根据美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP09-A3文件,以cobas e601电化学发光免疫分析仪及配套试剂组成的检测系统(简称e601检测系统)作为参比系统(X),以MAGLUMI 4000全自动化学发光分析仪及配套试剂组成的检测系统(简称MAGLUMI 4000检测系统)作为待评系统1(Y1),以CL-2000i化学发光分析仪及配套试剂组成的检测系统(CL-2000i检测系统)为待评系统2(Y2)。收集42例覆盖线性范围的临床血清样本,每份样本用3种检测系统进行单次检测。使用广义极端学生化偏差(ESD)法进行离群值检验,选择最优的回归模型拟合回归方程,计算医学决定水平处的偏移,以1/2室间质评平均偏移(±7.65%)作为可接受标准。结果散点图显示e601检测系统(X)与MAGLUMI 4000检测系统(Y1)和CL-2000i检测系统(Y2)的相关性均良好,目测各发现1个离群值,广义ESD法确认CA72-4检测结果无离群值。通过Deming回归分析(X和Y1)和Passing-Bablok回归分析(X和Y2)得回归方程分别为Y1=5.020 6+1.149 8X,Y2=0.726 3+0.830 0X。将CA72-4的医学决定水平(6.9 U/mL)代入回归方程,计算得e601检测系统(X)和MAGLUMI 4000检测系统(Y1)的相对偏移为60.96%,其相对偏移大于1/2室间质评偏移,比对不可接受;e601检测系统(X)与CL-2000i检测系统(Y2)的相对偏移为-6.74%,比对结果可以接受。结论 e601检测系统与MAGLUMI 4000检测系统之间CA72-4的检测结果不具有可比性,e601检测系统与CL-2000i检测系统之间CA72-4的检测结果具有可比性。CLSI EP09-A3文件可用于不同标记免疫检测系统之间的可比性研究。     

电化学发光法测定鳞状上皮细胞癌抗原的性能验证

目的对电化学发光法检测鳞状上皮细胞癌抗原(SCCA)进行性能验证。方法依据美国临床实验室标准化委员会系列文件,对电化学发光法检测SCCA的精密度、正确度、线性范围、参考区间及可报告范围进行验证和评价。结果电化学发光法检测SCCA高、低值质控血清批内变异系数(CV)分别为1.20%和2.19%,批间CV分别为2.72%和5.43%,均小于厂家声明的不精密度;正确度验证试验中高、低值质控血清相对偏差分别为0.98%和3.68%,均<1/2允许总误差;线性回归方程和判定系数为Y=1.020 3X-0.277 9,r^2=0.998 5,线性范围为0.142~58.120ng/mL;20例健康体检者检测结果均在厂家提供的参考区间内,可报告范围上限为944.000ng/mL。结论电化学发光法检测SCCA的验证指标均达到规定要求,可用于临床检测。     

速率法检测血清α-L-岩藻糖苷酶（AFU）改良试剂中添加烷基糖苷的实验性能评价

目的 探讨添加烷基糖苷(alkyl glycosides,APG)改良试剂速率法检测血清α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fucosidase,AFU)的实验性能评价。方法 通过优化反应体系,对速率法检测AFU改良试剂的精密度、线性范围、干扰性、结果比对及稳定性进行实验。结果 改良试剂精密度为批内CV低中高值分别为2.10%,1.19%和0.67%;批间CV低中高分别为2.62%,1.90%和1.20%,且两组试剂结果表明差异均有统计学意义(均P<0.01)。线性实验显示方程为Y=1.0045X-0.548 5,相关系数r²=0.999 7,线性范围0～300U/L。干扰实验表明样本中抗坏血酸≤12g/L,胆红素≤550μmol/L,脂血指数≤0.5mg/L,血红蛋白≤3g/L,对改良试剂无干扰。同时与进口试剂比对实验回归方程为Y=0.9978 X+0.085 3,相关性良好(r²=0.999 8)。稳定性实验结果显示改良试剂在2～8℃存放12个月测定结果稳定,CV_低值=1.04%,CV_高值=1.1...     

3种肌钙蛋白Ⅰ试剂在自动生化仪上的分析性能验证

目的对3种应用于自动生化分析仪的胶乳增强免疫比浊法检测血肌钙蛋白I(cTnI)试剂进行分析性能验证,并初步应用于临床。方法参考CLSI EP6-A、EP15-A、EP7-P方案对3种方法的精密度、线性范围、干扰因素(胆红素、血红蛋白、乳糜)进行评估,并与美国贝克曼库尔特公司生产的化学发光免疫分析仪及配套试剂进行比对。参考CLSI C28-A2方案对试剂A、B、C的参考范围进行验证,评估试剂A、B、C与贝克曼ACCESS2化学发光免疫分析仪判定cTnI异常的一致率。结果试剂A、B、C的CV批内、CV总均小于试剂盒声明不精密度,定量测定下限可分别达0.11、0.23、0.07ng/mL,基本满足检测要求,线性范围分别为0.12～26.3ng/mL(r=0.994),0.20～25.3mg/L(r=0.997),0.10～26.9mg/L(r=0.999),线性相关均良好。胆红素、血红蛋白、乳糜浊度分别不超过684μmol/L、3.88g/L及1240FTU时,对试剂A检测结果无显著干扰,试剂B、C后两项数值较试剂A高。乳糜血清标本高速离心后,试剂A、B、C测定cTnI浓度较离心前的平均偏倚分别为-7.31%、1.42%、1.02%。试剂A、B、C与ACCESS2化学发光免疫分析仪检测结果具有较好相关性和一致性。结论应用于自动生化分析仪的3种胶乳增强免疫比浊法测定cTnI试剂盒,具有较高的精密度和灵敏度,与ACCESS2化学发光免疫分析仪结果相关良好;可满足临床测试要求.但抗干扰能力存在差异,部分试剂参考范围也有待进一步验证。     

血清Lp-PLA2质量与活性检测结果的一致性评价

目的评价两种测定脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)质量与活性的试剂在雅培C16000自动生化分析仪上检测结果的一致性。方法根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)文件相关要求,评价两种试剂的精密度、正确度、线性范围及参考区间,同时对A、B两种试剂检测患者标本的一致性进行评价。结果 A试剂和B试剂各水平重复性分别为1.96%和2.43%、0.58%和0.78%,实验室内精密度分别为3.10%和3.23%、0.76%和1.96%,均小于厂商声称的重复性,即A试剂重复性≤5%,B试剂重复性≤10%;正确度验证A试剂和B试剂偏倚分别为0.33%和2.17%、2.94%和3.92%,均小于所选用的1/2允许总误差(12%)的标准;线性范围A试剂为29.0～792.5ng/mL,B试剂为74～1 486U/L,回归系数R2分别为0.997 0和0.999 6,相关系数(r)分别为0.998 5和0.999 8,A、B试剂线性均符合CLSI EP6-A文件及试剂厂家的要求;A、B两种试剂方法学比较中,回归系数R2=0.599 1,r=0.774 0,两种试剂检测方法间有一定相关性,但一致性较差;参考区间A试剂的验证范围:10～200ng/mL,B试剂的验证范围:男性230～728U/L,女性194～640U/L(18～49岁),208～698U/L(50～88岁),均通过验证,两种试剂厂家提供的参考区间可运用于临床。结论两种应用于全自动生化分析仪C16000测定Lp-PLA2的试剂精密度、正确度及线性均良好,提供的参考区间可用,但两种试剂方法学间比较一致性较差。     

三种直接胆红素检测系统的性能评价

目的对钒酸盐氧化法、改良J-G法和3,5-二氯苯重氮四氟硼酸盐法（3,5-DCB-4FB）检测直接胆红素（DBil）进行性能评价,探讨3,5-DCB-4FB法是否适用于DBil检测。方法用钒酸氧化法、改良J-G法和3,5-DCB-4FB法分别测定血清DBil,探讨3种方法的精密度、线性、敏感性、抗干扰性和回收率。并分别与Doumas法（手工）进行比较。结果 3种方法平均精密度均在1%～5%之间;平均回收率为103.28%、99.04%、100.69%;线性范围（敏感性）为1.06～335.10μmol/L（1.06）、1.01～310.00μmol/L（1.01）、0.76～310.00μmol/L（0.76）。钒酸盐氧化法抗血红蛋白（Hb）干扰能力优于后2种方法;3种方法与Doumas法进行比较具有良好相关性（r2〉0.975）,医学决定水平处的系统误差（SE）分别为-9%、-7%、-1.1%。结论 3,5-DCB-4FB法具有良好的精密度、敏感性、抗干扰能力、线性范围和相关性,与改良J-G法具有很好的一致性。3,5-DCB-4FB法适用于临床常规检测。     

4种丙型肝炎病毒荧光定量试剂诊断HIV感染的调查

目的 了解不同厂家HCV-RNA定量检测试剂盒测定结果的可比性.方法 采用RT-PCR技术对4种HCV-RNA试剂精密度(批内、批间)、线性、阳性检出率、试剂间可比性进行评价.结果 本方法评价表明各厂家试剂盒批内变异系数(CV)均小于10%、批间变异系数(CV)均小于12%、线性r>0.97、阳性检出率均大于81%、试...     

基于Pre-NAT全自动核酸检测系统的HBV-DNA超敏检测试剂方法学性能验证

目的对基于Pre-NAT全自动核酸检测系统的HBV-DNA超敏检测试剂进行方法学性能验证。方法参考美国国家临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的相关文件,分别选用HBV国家标准品、室内质控品、临床高/低值及阴性样本,对基于PreNAT全自动检测系统的HBV-DNA超敏检测试剂进行准确性、灵敏度、线性范围、精密度及特异性的评估;并与基于手工提取的HBV-DNA普通定量检测试剂进行比对。结果 HBV-DNA超敏检测试剂的准确性能够通过国家标准品标准;室内质控品批间精密度CV为2.01%;临床高值、低值样本的批内精密度CV分别为3.21%、5.26%;检测下限为20 IU/m L,高于HBVDNA普通检测试剂(100 IU/m L);对丙型肝炎、戊型肝炎、巨细胞、风疹、单纯疱疹等病毒核酸无交叉反应性;HBV-DNA超敏检测试剂与HBV-DNA普通检测试剂检测结果呈高度相关性(r=0.987,P0.05),回归方程为Y=0.911X+0.215;配对t检验显示两者差异有统计学意义(t=3.765,P0.05)。结论 HBV-DNA超敏检测试剂有较好的准确性、精密性、特异性、灵敏度、线性范围,其基于全自动核酸检测系统可广泛应用于临床。     

以国际通用标准评价五种胱抑素C试剂的方法学性能

目的 对五个不同厂家血清胱抑素C(Cys C)检测系统的分析性能进行评价和验证.方法 采用美国雅培C16000全自动生化分析仪与五个不同厂家胱抑素C试剂组成的检测系统测定血清胱抑素C,评价的方法学性能指标为精密度、线性、抗干扰性及偏倚.结果 Cys C浓度在0.9～7.1 mg/L时,各厂家试剂总不精密度(CV)＜6%.在0.6～5.6 mg/L浓度范围,各厂家均有良好的线性范围.血清中一定浓度的胆红素、血红蛋白和乳糜对五个厂家Cys C的测定结果产生不同程度的影响,但与厂家声明相符.除利德曼外各厂家的偏倚均小于15%.结论 五个厂家Cys C试剂的主要分析性能:精密度、线性、抗干扰性、偏倚的验证结果与厂家声明基本一致,但利德曼试剂测定结果与Randox质控品存在偏差.     

AU2700生化分析仪检测血清糖化清蛋白的性能评价

目的应用AU2700生化分析仪对酶法测定血清糖化清蛋白(GA)试剂盒进行性能评价。方法依据CLSI-EP有关文件对Lucica GA-L测定试剂盒的精密度、准确度、线性范围及参考范围进行性能评价;比较两种试剂盒(酶法)检测结果的相关性。结果该试剂精密度高(CV3%);稀释线性良好;GA的平均回收率为97.7%,清蛋白(ALB)的平均回收率为96.43%;两种试剂盒检测结果具有良好的相关性(r2=0.976,P0.01)。结论 Lucica GA-L测定试剂盒在该实验室AU2700全自动生化仪上分析性能良好与厂家声明一致,可较好的应用于临床。