液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳的实验对比

目的评价液体试剂与干粉试剂酶法测定血清总二氧化碳(TCO2)的可靠性.方法依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)有关文件对2种试剂测定血清TCO2进行相关性比较并对其线性、精密度进行评价.结果液体试剂与干粉试剂相关良好(r=0.976 0),预期相对偏差在15 mmol/L时为0.07%,在25 mmol/L时为0.16%,在50 mmol/L时为0.22%.2种试剂的线性范围均较宽,线性回归方程分别为Y=0.995 9X-1.429 2和Y=0.978 7X-0.574 8,r分别为0.999 8和0.999 7.2种试剂的精密度均很好,其批内不精密度及总不精密度(CV)均<6.1%.结论液体试剂与干粉试剂测定血清中的TCO2的相关性、线性、精密度均很好,具有可比性,而液体试剂使用更为方便.     

酶法与电极法测定血清总二氧化碳的实验室评价

[目的]评价酶法与电极法测定血清中总二氧化碳(TCO2)的可靠性及临床应用，为临床方法的选择和实验结果的评价提供理论依据。[方法]据美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)有关文件对酶法与电极法测定血清中TCO2进行相关性比较以及对两种测定方法的线性、精密度进行评价。[结果]酶法与电极法相关性比较，相关系数r=0．9811，预期相对偏差在15mmol／L时为-1．30％，在25mmol／L时为0.94％，在50mmol／L时为2．62％。酶法与电极法线性范围较宽，线性回归方程分别为Y=0．9814X-1．4247和Y=0.9871X-0．6005，相关系数均为r=0．9997。两种方法的精密度均很好，酶法与电极法批内及总不精密度(用CV表示)均小于5．3％。[结论]酶法与电极法测定血清中的TCO2的相关性、线性、精密度均很好，具有可比性，均适用于临床实验室检测，各实验室可根据自己的条件选择不同的检测方法。     

干片试剂与液体试剂测定血清总二氧化碳的比较

目的评价干片试剂法测定血清中总二氧化碳（TCO2）的可靠性。方法依据美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）有关文件，分别用液体试剂法和干片试剂法测定血清中TCO2，并进行比较，以及对干片试剂测定方法的线性、精密度进行评价。结果干片试剂法与液体试剂法测定结果差异无统计学意义（P〉0．05），干片试剂法线性和精密度较好，线性回归方程Y=1．0029x—0．3229，r^2=0．999。结论液体试剂法和干片试剂法测定血浆中TCO2相关性均较好，干片试剂更为快速，适合临床需求。     

电极法与酶法测定血清总二氧化碳的实验对比

目的评价电极法与酶法测定血清中总二氧化碳（TCO2）的可靠性及临床应用，为临床方法的选择和实验结果的评价提供理论依据。方法依据美国国家临床实验室标准委员会（NC—CLS）有关文件对酶法与电极法测定血清中TCO2进行相关性比较以及对两种测定方法的线性、精密度进行评价。结果酶法与电极法相关性比较，相关系数r=0．9811，预期相对偏差在15mmol／L时为-1．30％，在25mmol／L时为0．94％，在50mmol／L时为2．62％。酶法与电极法线性范围较宽，线性回归方程分别为Y=0．9814X-1．4247和Y=0．9871X-0．6005，相关系数均为r=0．9997。两种方法的精密度均很好，酶法与电极法批内及总不精密度（用CV表示）均小于5．3％。结论酶法与电极法测定血清中的TCO2的相关性、线性、精密度均很好，具有可比性，均适用于临床实验室检测，各实验室可根据自己的条件选择不同的检测方法。     

新的稳定偶氮胂Ⅰ试剂测定血清镁的研究

目的探讨新的稳定偶氮肿Ⅰ试剂,用于测定血清镁的含量.方法采用贝克曼CX5全自动生化分析仪,终点法测定,并与UVP 2450分光光度计,原子吸收法测定结果相比较.结果①测定波长,570nm为主波长,700nm为次波长;②稳定性,显色后30分钟内稳定;③线性范围,在0.25～2.41mmol/L之间线性良好,回归方程Y=1.006X+0.03,r2=0.9971:④回收率,98～101%之间;⑤精密度,批内3.1%,批间1.1%;⑥方法学比较,与原子吸收法测定结果相比较,Y=1.05X-0.06,r2=0.9900,相关良好.⑦在钙离子浓度为0.80～6.40mmol/L范围内,不受干扰;⑧稳定性,开盖后至少稳定3天.结论应用新的稳定偶氮肿Ⅰ试剂进行血清镁的全自动分析测定,其抗干扰性、络合镁特异性、反应的灵敏度、精密度均良好.且试剂安全、稳定,适合于临床应用.     

双试剂酚红比色法全自动测定血清碳酸氢根方法学研究

目的　建立一种能适合各级实验室常规和急诊检测血清HCO-3 的方法。方法　应用自配双试剂建立两步终点测定法 ,可同时满足全自动和半自动手工测定 ,用日立 70 6 0生化仪对本方法进行方法学评价。结果　比色液吸收峰为 5 5 8nm ,线性范围可达 5 0mmol/L ,批内CV 3.16 % ,批间CV4 .5 5 % ,平均回收率 10 2 .3% ,与血气分析仪测定结果相关性良好 ,Y =1.0 0 5 9X - 0 .10 38,r=0 .9813(n =6 0 ) ,黄疸、脂血、溶血标本对结果无影响 ,健康人静脉血HCO-3 浓度 2 1.2～ 31.2mmol/L。结论　该方法操作简便、灵敏准确、试剂稳定、成本低廉 ,可用于血清碳酸氢根的常规分析 ,更适合自动分析     

双试剂酚红比色法测定血清碳酸氢根

目的　建立一种能适合各级实验室常规和急诊检测血清HCO3 -的方法。方法　应用自配双试剂建立了两步终点测定法 ,可同时满足全自动和半自动手工测定 ,用日立 70 6 0生化仪对本方法进行方法学评价。结果　比色液吸收峰为 5 5 8nm ,线性范围可达 5 0mmol/L ,批内CV3.4 5 % ,批间CV4 .88% ,平均回收率 10 2 .3% ,与血气分析仪 (X)相关良好 ,Y =1.0 0 5 9X -0 .10 38,r =0 .9813(n =6 0 ) ,黄疸、脂血、溶血标本对结果无影响 ,健康人静脉血HCO3 -浓度 2 1.2～ 31.2mmol/L。结论　本法操作简便、灵敏准确、试剂稳定、成本低廉     

以新的水溶性吡啶偶氮染料5-Br-PADCAP为显色剂双试剂自动分析法测定血清锌

目的　建立简便、灵敏的双试剂自动化分析法测定血清锌。方法　在表面活性剂存在下 ,用 2 (5 溴 2 吡啶偶氮 ) 5 [(N ,N 二羧基甲基 )氨基 ]苯酚 (5 Br PADCAP)为显色剂测定血清锌。结果　该法线性范围 0～ 80 μmol/L ,平均回收率为 10 0 .0 % ,批内变异系数 (CV)和批间变异系数分别为 0 .0 2 0、0 .0 2 6 ,与原子吸收分光光度法比较具有良好的相关性 ,线性回归方程和相关系数分别为Y =1.0 0 87X - 0 .194 4 ,r=0 .9917。 75例健康人血清锌含量为 8.6 3～2 2 .0 7μmol/L( x± 2s)。结论　用 5 Br PADCAP双试剂自动化分析法测定血清锌方法简便、灵敏可靠 ,适合临床应用。     

血清总蛋白双试剂双缩脲法消除脂浊和胆红素的干扰

建立血清总蛋白双试剂双缩脲自动分析法。以氢氧化钠和硫酸钠溶液作第一试剂 ,浓缩双缩脲试剂作第二试剂 ,在自动分析仪上用两点终点法测定。结果 ,在 0 6mol/L氢氧化钠中加入 7mmol/L的硫酸钠使脂浊血清的空白吸光度稳定 ,蛋白质与双缩脲双试剂的反应在 7分钟内完成 ;线性范围 0～ 140g/L ,平均回收率 99 8% ,低蛋白含量和正常蛋白含量的批内CV为 0 5 2 %和 0 40 % ,批间CV为 0 80 %和 0 77% ;双试剂法与参考方法比较 ,r =0 9984,Y=0 982 5X 0 783,t =0 5 2 2 ,P>0 5 ,n=90 ;脂肪乳糜、高胆红素、血红蛋白颜色对测定无干扰。结果表明 :双试剂法能去除样品中脂浊、高胆红素及血红蛋白的干扰 ,具有很好的准确度和精密度 ,适合在自动分析仪上使用。     

邻苯二甲醛双试剂法测定血清尿素的探讨

目的 对邻苯二甲醛双试剂自动分析测定血清尿素的方法进行探讨。方法 用优选法对试剂成份进行优化组合。以含邻苯二甲醛67 mmol/L、硫酸1.6 mol/L和磷酸1.6 mol/L的混合溶液作为第一试剂;以含偏钒酸铵4.3 mmol/L,安替比林0.21 mmol/L的混合溶液为第二试剂测定血清尿素。结果线性范围0-35 mmol/L,回收率98.1％-101.1％,平均回收率为99.6％;批内CV:低尿素含量血清为1.32％,高尿素含量血清为0.91％。批间CV:低尿素含量血清为2.04％,高尿素含量血清为1.08％。与UV-GLDH法比较,r=0.992,回归方程Y=1.02X+0.127,P>0.05;脂肪乳糜和溶血标本对测定结果无影响。结论 该法线性范围宽,精密度好,回收率高,试剂配制方便、稳定,易于保存,适用于手工操作和自动化分析。     

尿酸原装试剂与国产试剂性能对比研究

目的研究国产尿酸试剂取代原装试剂在奥林巴斯AU-640全自动生化分析仪上应用的可行性。方法通过考察国产尿酸试剂的精密度、线性范围、干扰实验等产品性能,并与原装试剂在奥林巴斯AU-640全自动生化分析仪上做临床比对实验。结果国产尿酸试剂的批内精密度及天间精密度均在5%以下,线性范围0～1 000μmol/L,干扰物质胆红素含量达15mg/dL,抗坏血酸含量达7mg/dL,血红蛋白含量达3.75g/L时,相对偏差在10%以内,属于临床可接受范围。与原装试剂在奥林巴斯AU-640全自动生化分析仪上进行临床比对实验,决定系数r2为0.999 5,相关性良好。结论在奥林巴斯AU-640全自动生化分析仪上可用国产尿酸试剂替代原装试剂。     

水中余氯两种测定方法的比较

目的比较两种水中余氯测定方法的特点,以便合理选择与应用。方法分别采用方法 1和方法 2,测定生活饮用水中余氯量,以比较此两种方法的特点。结果方法 1检测结果得到回归方程Y=0.197X+0.00197,相关系数(r)=0.999;平均回收率为99%～101%,RSD分别为3.72%和1.46%;最低检测浓度为0.01 mg/L。方法 2检测结果达到回归方程Y=0.119X-0.00198,相关系数(r)=0.999;平均回收率为95.6%～101%,RSD为1.31%～3.71%;最低检出限为0.03 mg/L。结论以国家标准GB/T 5750.11-2006推荐的方法(即方法 1)综合优点更多一些,且在实际工作中更加易于掌握。     

免疫比浊法检测糖化血红蛋白A1c的性能评价

目的评价Roche公司第3代免疫比浊法检测糖化血红蛋白A1c(HbA1c)的性能。方法分析免疫比浊法检测HbA1c的精密度、线性,评价Hb、胎儿Hb(HbF)、三酰甘油(TG)、总胆红素(T-Bil)和不稳定HbA1c对HbA1c检测的影响、抗干扰能力及其与HPLC法测HbA1c结果的相关性;比较免疫比浊法检测HbA1c与高效液相色谱(HPLC)法的一致性。结果免疫比浊法检测HbA1c的变异系数(CV)均<2.5%。在4.7%～15.4%范围内,理论值与实测均值呈线性相关,r2值达0.999。Hb、HbF、T-Bil、TG水平分别在57～177 g/L、1.7%～11.7%、27～265μmol/L、3.2～9.85 mmol/L范围时,差异百分比均<5%;当HbF>13.5%时,差异百分比>5%。不稳定GHb(样本葡萄糖糖含量0～55.56 mmol/L)对HbA1c检测无影响。免疫比浊法(X)与高效液相色谱法(Y)相关性良好,Y=1.0188X-0.2271,r2=0.971 3。结论免疫比浊法检测HbA1c性能良好,适合临床应用。     

用患者样本进行方法学对比及在两种葡萄糖测定法中的应用

目的 用患者样本分析葡萄糖氧化酶-氧电极法(简称电极法)和己糖激酶(HK)法测定血清葡萄糖(GLU)时的偏倚。方法 依据美国临床实验室标准化委员舍(NCCLS)EP9—A文件，每天取患者样本8份，分别用两种方法测定血清葡萄糖含量，共测定5d，记录检验结果，去除离群点，计算线性方程和相关系数，并进行偏倚估计。结果 在进行患者葡萄糖测定时，电极法(Y)和HK法(X)测定结果的回归方程为：Y＝0．9857X 0．08967，r^2=0．9992；电极法和HK法测定结果的预期相对偏倚在GLU＝15mmo1／L时为0．80％，GLU＝9mmo1／L时为0．44％，GLU＝6mmo1／L时为0．00％，GLU＝3mmo1／L时为1．67％。结论 电极法和HK法测定血清葡萄糖时，测定结果在低浓度时偏倚较大，在中、高浓度时偏倚较小，两法间有良好的相关性。     

化学沉淀法测定小而密低密度脂蛋白方法的建立

目的利用化学沉淀原理建立小而密低密度脂蛋白(sdLDL)快速、简便的检测方法。方法通过比较不同种类及不同浓度沉淀剂对血清样本中脂蛋白的分离效果,确定最终沉淀剂,并对化学沉淀法测定血清sdLDL-C的精密度、线性范围和回收率进行分析。结果最终选择140 U/mL肝素-90 mmol/L Mg2+作为沉淀剂测定血清sdLDL胆固醇(sdLDL-C)含量。化学沉淀法测定sdLDL-C在0.14~1.44 mmol/L范围内线性关系良好,回归方程为Y=1.025X-0.197,r=0.988;对高、低2组不同sdLDL-C浓度的样本批内变异系数(CV)分别为2.83%、3.19%,批间CV分别为5.49%、6.13%;回收率为83.81%。结论 sdLDL化学沉淀法具有样本用量少、操作简便、成本低廉等优点,更适合常规实验室检测血清sdLDL-C含量。     

糖化血清蛋白测定的自动分析

目的建立双试剂测定糖化血清蛋白的自动分析方法.方法根据测定条件的优化实验采用双试剂酶法直接测定.结果该法180 s达反应终点,线性达1 306μmol/L(y=0.983 5X+0.124,r=0.999 7);批内CV＜1.45%,日间CV＜3.56%,总CV＜4.19%;平均回收率100.3%;加入TG＜7.6mmol/L,BIL＜456 μmol/L,Hb＜200g/L,UA＜1 240 μmol/L,GLU＜75.2 mmol/L时无显著干扰.结论该法适合全自动分析.     

免疫增强透射比浊法测定超敏C-反应蛋白的实验研究

目的对免疫增强透射比浊法测定超敏C-反应蛋白（hs—CRP）进行实验研究。方法用国产试剂检测该方法的分析范围、最低检测限、精密度、准确度、抗于扰能力，同时与国外试剂进行对比试验。结果国产试剂免疫增强透射比浊法测定hs—CRP的分析范围为0．1～17．0mg／L，最低检测限为0．1mg／L。而且当调整仪器设定参数，使反应时间缩短至4min，分析范围可增宽为0．1～20．0mg／L，批内精密度小于4．3％，天间精密度小于5．3％，偏倚小于12．7％；抗干扰能力强，尤其对类风湿因子，当它小于700U／mL时没有观察到干扰。对比试验显示，相关系数为0．988，回归方程Y=1．1176 X-0．7822。结论国产试剂免疫增强透射比浊法在全自动生化分析仪上测定hs—CRP具有灵敏度高、稳定性好、抗干扰能力强、准确度高、成本低、测定更快速等特点，适宜于在临床推广应用。     

基因组DNA甲基化的高效毛细管电泳定量检测

目的：建立快速准确的高效毛细管电泳（ HPCE ）定量基因组 DNA 甲基化的方法。方法以含有十二烷基磺酸钠（SDS）的碳酸氢钠溶液作为背景电解质溶液,优化运行电压、柱温,对DNA组成单元脱氧核苷酸进行分离定量。结果5种脱氧核糖核苷和5种核糖核苷在10 min 内实现基线分离。脱氧胞苷（dC）的标准曲线为Y ＝172540.15X-6.19,相关系数（R）为0.999,线性范围从2×10^-3 mol／L 到2×10^-1 mol／L。5-甲基脱氧胞苷（5 mdC）的标准曲线为 Y ＝170271.74X-46.19,相关系数（R）为0.995,线性范围从1×10^-4 mol／L 到2×10^-2 mol／L。日内相对标准偏差（RSD％）〈5％,日间相对标准偏差（ RSD％）〈9％。5 mdC 和 dC 的检测限均为1×10^-5 mol／L。样品的甲基化程度以（5 mdC ）含量占总脱氧胞苷（5 mdC ＋ dC ）的比率表示。应用本方法分析小牛胸腺 DNA 的甲基化水平,结果为6.18％,与本研究组所得液质联用（LC-MS／MS）的定量结果（6.77％）和文献报导中应用液相色谱-紫外检测器（HPLC-UV）的检测结果（6.26％）对比,一致性好。结论本研究建立的方法分析速度快,准确性高,稳定性好,灵敏度满足微量样本的检测需求,可以用于临床甲基化诊断。