Alzheimer病患者海马神经元退变与原位癌基因c—fos

为探讨原位癌基因ｃ－ｆｏｓ与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病（ＡＤ）海马神经元变性的关系，我们以尸检人脑海马标本为研究对象，根据患者年龄分为青年组、老年组（此两组作为对照组）和Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病组，用原位分子杂交技术对海马神经元中原位癌基因ｃ－ｆｏｓ信使核糖核酸（ｍｅｓｅｎｇｅｒｒｉｂｏｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄ，ｍＲ－ＮＡ）进行研究，并以图像分析技术定量分析海马神经元中ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ含量。结果显示：与对照组比较，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病海马神经元中原位癌基因ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ的着色面积和积分吸光度明显增加。提示原位癌基因ｃ－ｆｏｓ的过度表达，可能在Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病病理过程中起一定作用。     

用逆转录——多聚酶链反应检测局灶脑缺血及再灌注后c—fo…

本研究应用逆转录－多聚酶链反应方法检测大鼠局灶脑缺血模型中即早基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ的表达。结果发现缺血１５ｍｉｎ时可见到ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ ｍＲＮＡ表达缺血３０ｍｉｎ时引起轻微左侧局灶脑缺血改变，可诱导左侧局灶脑缺血区ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍＲＮＡ广泛的表达；缺血９０ｍｉｎ后，导致大面积局灶脑缺血改变，诱导上述两种基因在同侧缺血区与同侧非大脑中动脉供血区的海马中表达。后者有相当轻的缺血症状。再     

大鼠脑缺血再灌注后脑组织C－fos原癌基因表达水平的变化

本文采用核酸分子斑点杂交技术制作脑缺血模型，观察脑缺血１０分钟及再灌注后不同时间脑组织Ｃ－ｆｏｓ原癌基因表达的变化，结果发现：与对照组比较，脑缺血１０分钟，Ｃ－ｆｏｓｍＲ－ＮＡ即增加（Ｐ＜０．０５）。缺血后再灌注４５分钟Ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ达到峰值（Ｐ＜０．０１），１５０分钟降至对照组水平，提示脑缺血后再灌注可诱导脑组织Ｃ－ｆｏｓ原癌基因一过性增高     

脑缺血选择性海马CA1区神经元损害的实验研究

采用Ｐｕｌｓｉｎｅｌｉ－Ｂｒｉｅｒｌｅｙ４血管阻塞脑缺血模型观察了大鼠全脑缺血２０ｍｉｎ再灌流８ｈ，ｃ－ｆｏｓ基因表达及再灌流７ｄ海马ＣＡ１区迟发性神经元损害。在缺血再灌流早期（８ｈ）海马ＣＡ１区极少ｃ－ｆｏｓ表达，而齿状回、海马ＣＡ３区、杏仁核大量ｃ－ｆｏｓ表达。缺血再灌流晚期（７ｄ）镀银染色显示海马ＣＡ１区神经元及其突触终末带呈黑色溃变相，而齿状回、海马ＣＡ３区、杏仁核呈金黄色正常相。相邻切片ＨＥ染色示缺血组海马ＣＡ１区核完整的锥体细胞数（５±２．６个／２００μｍ）与对照组（４０±２．９个／μｍ）比较差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）。脑缺血诱导的ｃ－ｆｏｓ基因表达对于缺血易损海马ＣＡ１区迟发性神经元坏死可能起直接的调控作用。     

沙鼠脑缺血再灌注后海马中c—fos蛋白表达及纳洛酮 …

目的 观察沙鼠脑缺血再灌注后纳洛酮对海马神经元ｃ－ｆｏｓ蛋白表达及神经元形态改变的影响。方法 采用沙鼠急性全脑缺血模型,用免疫组织化学及组织化学方法观察海马ｃ－ｆｏｓ蛋白表达及细胞形态改变。结果 纳洛酮能明显加强急性全脑缺血沙鼠海马各区ｃ－ｆｏｓ蛋白的表达,ＣＡ１区尤为明显。同时纳洛酮能明显改善缺血后ＣＡ１区神经元细胞的变性坏死。结论 纳洛酮对缺血后海马神经元细胞的保护作用可能与加强ｃ－ｆｏｓ蛋白     

中脑导水管周围灰质和海马在ACTH镇痛中的相互关系

以往工作发现，中脑导水管周围灰质（ＰＡＧ）和海马在非阿片肽ＡＣＴＨ痛觉调制中占有重要地位。但它们之间的相互影响在ＡＣＴＨ痛觉调制中的作用，尚未阐明。本工作利用免疫组织化学和病阈测定方法，进一步观察大鼠ＰＡＧ和海马在ＡＣＴＨ镇痛时的相互关系，并与吗啡镇痛作用相比较。结果如下：（１）海马内注射ＡＣＩＨ（０．５ｕ／４μｌ）或吗啡（５μｇ／４μｌ），痛阈明显升高（１１９．３±４．７％，１２２．７±２６．８％）与对照组比较有显著差异（Ｐ＜０．０１），该明显效应均可被ＰＡＧ内注射阿片受体拮抗剂纳络酮所阻断；（２）ＰＡＧ内注射吗啡或ＡＣＴＨ后病阈提高更显著（１８０．９±５０．３％，２１９．８±７７．０％，Ｐ＜０．０１），但海马内注射纳络酮可阻断前者的效应（Ｐ＜０．０５）而对后者却无影响（Ｐ＞０．０５）；（３）伤害性刺激福尔马林（Ｆ）可诱发大鼠脊髓腰膨大背角原癌基因ｃ－ｆｏｓ显著表达，以Ⅰ、Ⅱ层较显著，海马或ＰＡＧ内注射ＡＣＴＨ均可抑制其背角ｃ－ｆｏｓ表达。结果提示：ＰＡＧ、海马均参与ＡＣＴＨ和阿片系统对脊髓痛信息传递的调制作用，在ＡＣＴＨ痛觉调制作用中，表明ＰＡＧ、海马之间的相互影响是复杂的。     

癫痫状态大鼠海马GAD67mRNA,GABA—TmRNA表达水平的动态观察

为了研究癫痫状态下大鼠海马区ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ、ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ的表达水平，采用马桑内酯（ｃｏｒｉａｒｉａｌａｃｔｏｎｅ，ＣＬ）侧脑室注射所致大鼠癫痫状态模型，动态观察ＣＬ致痫前后大鼠海马ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ、ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达水平的变化，同时观察了动物行为学改变及脑电图变化。实验结果显示，侧脑室注射ＣＬ后约１５分钟，大鼠海马及皮质ＥＥＧ出现阵发性棘慢波及高波幅慢波；ＣＬ注射后１５～３０分钟，实验鼠均出现明显的连续发作性四肢抽动、尖叫等症状，且持续６～８小时。ＣＬ侧脑室注射后３０分钟、１小时、２小时、４小时或８小时各时限点组大鼠海马ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ表达水平均低于正常对照组。ＣＬ注射后３０分钟组大鼠海马ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达水平高于正常对照组，但３０分钟后各时限组ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达水平与正常对照组比较增加不明显。提示ＣＬ所致癫痫持续状态的后期，大鼠海马ＧＡＤ６７ｍＲＮＡ、ＧＡＢＡ－ＴｍＲＮＡ表达信号的减弱，可能与致痫因素及癫痫持续后期合并的缺血、缺氧性脑损害致使海马区ＧＡＤ、ＧＨＢＡ－Ｔ免疫反应阳性细胞死亡有关。     

万拉法新对强迫游泳大鼠下丘脑和海马c-fos及c-jun蛋白表达的下调作用

目的　探索新一代抗抑郁药万拉法新对大鼠下丘脑和海马内ｃｆｏｓ 和ｃｊｕｎ 蛋白表达的影响。方法　采用特异性抗体的原位免疫细胞化学方法,在强迫游泳大鼠抑郁模型上,观察万拉法新慢性给药（ 腹腔内注射每日１ 次,连续７ 次）对大鼠游泳不动时间和下丘脑及海马核团ｃｆｏｓ 和ｃｊｕｎ 表达的影响;用图像分析技术对大鼠下丘脑室旁核（ Ｐ Ｖ Ｎ） 、视上核（ Ｓ Ｏ Ｎ） 和海马齿状回（ Ｄ Ｇ） 内的ｆｏｓ 和ｊｕｎ 阳性细胞的相对切面面积比和平均目标灰度进行分析。结果　强迫游泳可使大鼠下丘脑和海马内多个核团的ｃｆｏｓ 和ｃｊｕｎ 蛋白表达水平增加,而万拉法新明显缩短了强迫游泳大鼠的不动时间。图像分析结果提示,万拉法新使强迫游泳大鼠下丘脑 Ｐ Ｖ Ｎ 和 Ｓ Ｏ Ｎ 及海马 Ｄ Ｇ 内ｆｏｓ 和ｊｕｎ 阳性细胞相对切面面积比明显降低（ Ｐ＜００５） ,而平均目标灰度显著增加（ Ｐ＜ ００１） 。结论　下丘脑 Ｐ Ｖ Ｎ、 Ｓ Ｏ Ｎ 和海马 Ｄ Ｇ 可能是介导抗抑郁药抑制大鼠绝望行为的重要中枢核团,ｆｏｓ 和ｊｕｎ 蛋白可能是抗抑郁药发挥受体后作用的传导物质。     

早期即刻基因与老年性痴呆

早期即刻基因(ｃ－ｆｏｓ)在脑中参与神经元的信号转导及凋亡过程,认为其与认知功能和学习记忆有关,ｃ－ｆｏｓ基因表达对长期记忆的保持是必须的;Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病患者大脑皮层及海马中发现ｃ－ｆｏｓ过度表达,推测ｃ－ｆｏｓ可能在ＡＤ的病理中起一定作用。了解ｃ－ｆｏｓ的生理特性、研究ｃ－ｆｏｓ与学习记忆的关系、探讨ｃ－ｆｏｓ基因突变在ＡＤ发病中的作用,将对明确ＡＤ的发病机理、寻求防治原则提供参考依据。     

脑缺血再灌注后脑组织c-fos基因表达与丹参的影响

采用线栓法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，用地高辛精标记ｃ－ｆｏｓ探针进行原位杂交。结果示缺血再灌注鼠栓塞侧皮层及海马ｃ－ｆｏｓ基因表达显著增多，图像分析灰阶值为１１８．６±５．１，对侧为１５９．６±３．１（Ｐ＜０．００１）。丹参组栓塞侧皮层及海马ｃ－ｆｏｓ基因表达亦增多，灰阶为１３５．００±２．０５，对侧为１６７．００±２．００（Ｐ＜０．００１）。丹参组与缺血再灌注组比较，栓塞侧丹参组ｃ－ｆｏｓ基因表达显著低于缺血再灌组（Ｐ＜０．０５），而两组栓塞对侧比较无显著差异。本实验表明，脑缺血再灌注后脑组织ｃ－ｆｏｓ基因表达显著增多，丹参能部分抑制缺血后ｃ－ｆｏｓ基因的表达，这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。     

大鼠脑缺血再灌注后脑组织C—fos原癌基因表达水平的变化

本文采用核酸分子斑点杂交技术制作脑缺血模型，观察脑缺血１０分钟及再灌注后不同时间脑组织Ｃ－ｇｏｓ原癌基因的变化。结果发现：与对照组比较，脑缺血１０分钟，Ｃ－ｆｏｓ ｍＲ－ＮＡ即增加。缺血后再灌注４５分钟Ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ达到峰值，１５０分钟降至对照组水平，提示脑缺血后再灌注可诱导脑组织Ｃ－ｆｏｓ原部基因－过性增高。     

用逆转录-多聚酶链反应检测局灶脑缺血及再灌注后c-fos和c-jun基因表达

本研究应用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测大鼠局灶脑缺血模型中即早基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ的表达。结果发现缺血１５ｍｉｎ时可见到ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ表达缺血３０ｍｉｎ时引起轻微左侧局灶脑缺血改变，可诱导左侧局灶脑缺血区ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎｍＲＮＡ广泛的表达；缺血９０ｍｉｎ后，导致大面积局灶脑缺血改变，诱导上述两种基因在同侧缺血区与同侧非大脑中动脉（ＭＣＡ）供血区的海马中表达。后者有相当轻的缺血症状。再灌流６０ｍｉｎ后诱导两种基因的共同表达立即达高峰。我们采用标准化的大鼠局灶脑缺血及再灌注模型，在分子水平上动态观察缺血／再灌注后基因变化特征，为缺血性脑损害的防治提供实验依据。     

脑局部缺血后C—fos基因表达的意义及机理研究

目的：探讨脑局部缺血后神经元损伤的分子机制。方法：经颞骨开窗结扎大鼠大脑中动脉，制成脑局部缺血模型，采用地高辛标记Ｃ－ｆｏｓ探针原位杂交法，观察脑缺血后大脑皮层及海马等区域Ｃ－ｆｏｓ基因的表达状况，用Ｃ－ｆｏｓ阳性细胞密度作定量研究指标。结果：脑缺血组、氯胺酮组和对照组，在大脑皮层及海马区域Ｃ－ｆｏｓ阳性细胞分别呈高密度、低密度和散在分布，三组间相差显著（Ｐ＜０．０１）。在脑的其余部位，包括丘脑、脑干、小脑等区域，三组Ｃ－ｆｏｓ阳性细胞均呈散在分布，无组间差异。结论：脑局部缺血可诱发大脑皮层及海马Ｃ－ｆｏｓ基因表达，Ｃ－ｆｏｓ基因表达可能是缺血致神经元损伤的分子机制之一；氯胺酮对脑缺血后Ｃ－ｆｏｓ基因表达有部分抑制作用；ＮＭＤＡ受体激活可能参与了缺血后Ｃ－ｆｏｓ基因表达过程     

实验性癫痫时大鼠海马内兴奋性氨基酸受体对阿片肽含量的影响

应用免疫组织化学方法观察了青霉素致痫及海马内微量注射ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＭＫ８０１（５－ｍｅｔｈｙ１－１０，１１－ｄｉｈｙｄｒｏ－５Ｈ－ｄｉｂｅｎｚｏ（ａ，ｄ）ｃｙｃｌｏｈｅｐｔａｎ－５，１０－ｉｍｉｎｅｍａｌｅａｔｅ）和非ＮＭＤＡ受体拮抗剂ＤＮＱＸ＊（６，７－ｄｉｎｉｔｒｏｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ－２，３－ｄｉｏｎｅ）后，大鼠海马内吗啡肽Ａ１－１７和亮啡肽的含量变化，结果发现，在青霉素致痫４ｈ后，海     

马桑内酯致痫大鼠大脑皮层,海马NMDA受体亚单位1（NMDAR1） …

目的 探讨癫痫发病的发子机制。方法 采用原位杂交技术，研究了马桑内酯致痫大鼠大脑皮层、海马Ｎ－甲基－Ｄ－天安门冬氨酸受体亚单位１（ＮＭＤＡＲ１）ｍＲＮＡ表达的变化。结果 马桑内酶致痫大鼠顶叶大脑皮层及海马齿回ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡＡ水平显著高于生理盐水对照组（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．０５）。结论 马桑内酯上调脑组织内ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ水平，此可能是其致痫及惊痫及惊厥易感性增加的分子机制之一。     

脑缺血再灌注后脑内脑源性神经营养因子的基因表达与调节

探讨：探讨脑缺血再灌注损伤后脑内脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）ｍＲＡＮ水平的变化,推测ＢＤＮＦ对损伤病理的影响。方法线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模,原位交检测大鼠海马神经元内ＢＤＮＦｍＲＮＡ,图像分析间接定量ＢＤＮＦｍＲＮＡ水平。结果（１）脑缺血及缺血再灌注均能诱导双侧海马神经元ＢＤＮＦｍＲＮＡ水平增高;（２）缺血损伤过重后海马神经元ＢＤＮＦｍＲＮＡ水平增高的程度反而小;（３）再灌注后ＢＤＮＦｍＲＮ     

AVP_(4-8)增加海马组织内NGF mRNA和蛋白含量

本文采用了Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和ＥＬＩＳＡ法，观察了神经肽ＡＶＰ４－８对大鼠海马组织中神经生长因子（ＮＧＦ）ｍＲＮＡ和蛋白水平的影响，结果显示：给大鼠皮下注射ＡＶＰ４－８１２ｈ后，海马组织中ＮＧＦｍＲＮＡ的水平明显高于生理盐水对照组。而给大鼠皮下注射精氨酸加压素（ＡＶＰ）和催产素（ＯＴ）对ＮＧＦｍＲＮＡ的水平均无显著影响。另外，用ＡＶＰ４－８孵育离体大鼠海马组织切片，能使ＮＧＦ蛋白表达量升高，且在４．５ｈ左右达到高峰。     

马桑内酯致痫大鼠大脑皮质,海马NMDA受体亚单位1mRNA表达的 …

ＮＭＤＡ受体与惊厥和癫痫易感性的形成密切相关。为了探讨癫痫发病的分子机制，采用原位杂交技术，研究了马桑内酯致痫大鼠大脑皮质、海马ＮＭＤＡ受体亚单位１（ＮＭＤＡＲ１）ｍＲＮＡ表达的动态变化。结果显示，马桑内酯致痫大鼠顶叶大脑皮质及海马齿状回ＮＭＤＡＲ１ ｍＲＮＡ水平显著高于生理盐水对照组（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０．０５）。提示：马桑内酯上调脑组织内ＮＭＤＡＲ１亚单位ｍＲＮＡ水平，可能是其致痫及使惊厥易感     

局灶性脑缺血大鼠海马bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达水平的改变

局灶性脑缺血大鼠海马ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ、ＢａｘｍＲＮＡ表达水平的改变张苏明王伟选用局灶性脑缺血模型，观察缺血及再灌注期大鼠海马细胞程序性死亡（ＰＣＤ）调控基因ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ、ＢａｘｍＲＮＡ表达水平的变化，以期了解缺血与神经元ＰＣＤ二者的关系。材料...     

癫痫敏感大鼠脑内GFAP——免疫反应活性的变化

用红藻氨酸（ＫＡ）１０ｍｇ／ｋｇ（ｓ．ｃ）诱发大鼠出现癫病发作一个月后，经免疫细胞化学方法观察大鼠脑内神经胶质原纤维酸性蛋自（ＧＦＡＰ）－免疫反应产物的查化。发现海马的ＣＡ１，ＣＡ２，海马下脚和腹侧海马的海马门都位以及梨状皮层，内嗅皮层，隔区，杏仁核，伏隔核和尾核尾部的ＧＦＡＰ免疫染色阳性明显增强，这一现象可能与动物癫痫发作及发作后，癫痫敏感脑区的神经元损伤有关。