跟腱创伤伴随颅脑损伤后跟腱异位骨化机制研究

目的 探讨跟腱创伤伴随颅脑损伤后跟腱异位骨化发生的机制。方法 选取42只雄性SD大鼠,采用随机数字表法将其随机分为3组,其中,空白对照组6只,跟腱创伤组(HO组)18只,跟腱创伤伴随颅脑损伤组(TBI组)18只。在造模后1、2、4周,通过micro-CT比较HO组、TBI组大鼠跟腱局部开始出现异位骨化的时间、异位骨化的骨密度(BMD)及骨体积占比(BV/TV);通过苏木素伊红染色比较异位骨化的骨小梁厚度(Tb.Th);通过免疫组化检测跟腱创伤局部的焦亡相关蛋白的表达水平;通过透射电镜(TEM)检测HO组、TBI组大鼠跟腱局部早期的病理性矿化。结果 TBI组大鼠出现异位骨化的时间早于HO组,且造模4周后,TBI组的BMD及BV/TV均大于HO组,差异有统计学意义(P<0.05);同时,TBI组大鼠异位骨化的Tb.Th也大于HO组,差异有统计学意义(P<0.05)。在造模1周后,TBI组损伤跟腱组织中的NLRP3⁺、CASPASE-1⁺、GSDMD⁺的细胞均高于HO组,差异均有统计学意义(P<0.05)。同...     

糖尿病大鼠表皮角质形成细胞生物学变化的机制研究

目的 通过体内、外2部分实验,研究糖尿病状态下表皮角质形成细胞(KCs )增殖能力的变化及其信号转导途径.方法 STZ(streptozotocin,链脲佐菌素)诱导正常SD大鼠,成模后8周(晚期糖尿病大鼠模型),荧光自显影技术检测皮肤组织中晚期糖基化终末产物(advanced glycation end-products,AGEs)的沉积;ELSA法检测表皮层中EGF(epidermal growth factor表皮生长因子)含量;提取大鼠KCs,用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法测定细胞增殖速度;检测细胞周期;观察KCs核内NF-κB活性.分离培养正常SD大鼠KCs,加入不同浓度AGEs干预细胞,选择细胞反应敏感,差异显著的100mg/L AGEs干预组进行实验:测定细胞增殖速度;细胞对EGF的利用;检测KCs周期的变化,观察KCs核内NF-κB的活化状态.抑制NF-κB活性后观察细胞周期、细胞对EGF利用的变化.结果 晚期糖尿病大鼠KCs细胞周期循环阻滞,细胞的增殖能力受到了抑制;体外100mg/L AGEs可以明显抑制KCs的增殖.抑制NF-κB的活性后,部分恢复细胞的增殖能力.结论 AGEs可以通过NF-κB途径影响糖尿病大鼠表皮角质形成细胞的增殖能力.     

血管内皮祖细胞局部移植防治血管内皮损伤后再狭窄形成的实验研究

目的 探讨血管内皮祖细胞(EPC)局部移植防治血管成形术后再狭窄形成的可行性.方法 分离、鉴定并培养新西兰大白兔外周血(EPC),用2.5 F球囊扩张并损伤兔右侧颈动脉血管内皮,对损伤血管进行局部EPC移植.共作细胞移植兔13只,其中3只移植荧光标记EPC;对照组8只,局部灌注生理盐水.细胞移植后4 d,对2只荧光标记细胞移植兔取移植细胞后受损伤血管行病理组织学检查,其余实验兔4周后对损伤血管行病理组织学检查.结果 荧光标记细胞移植后4 d,病理学检测显示损伤血管内皮有强荧光表达;4周后,细胞移植组血管壁轻度增厚,对照组血管壁增厚明显,血管腔明显狭窄.两组间血管壁厚度差异有统计学意义(P＜0.01).结论 介入法局部移植同种异体血管内皮祖细胞可防治血管成形术后再狭窄的形成.     

大鼠间充质干细胞的体外分离培养及CFSE标记

目的 探讨体外分离、培养及荧光染料CFSE标记大鼠间充质干细胞(MSCs)的方法.方法 Wistar大鼠10只.用密度梯度离心及贴壁法相结合的方法分离纯化大鼠MSCs并进行鉴定.荧光染料CFSE标记MSCs,荧光显微镜检测标记率,CCK-8法检测标记细胞的增殖能力.结果 原代MSCs 72h贴壁,呈梭形,集落样生长;传代后,细胞变为形态均一,排列有序的成纤维细胞样.CFSE标记当天,荧光显微镜下大鼠MSCs呈明亮的绿色荧光,标记率达100%,随着培养时间延长,荧光强度逐渐减弱,标记率随之下降,标记4周后,标记率下降至78%;标记细胞的增殖能力与未标记细胞相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 利用密度梯度离心法结合贴壁法可以获得比较纯的MSCs;CFSE短期标记MSCs效率很高,且标记细胞的增殖能力不受影响,但荧光强度及标记率随着时间延长而下降.     

肝细胞生长因子在大鼠心肌细胞放射损伤中的抗凋亡作用

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对60Co γ射线照射诱导的体外培养心肌细胞凋亡的保护作用.方法 体外培养新生Wistar大鼠心肌细胞,分为未照射组(A组)、单纯照射组(B组)、HGF(20ng/ml)处理照射组(C组)、HGF(40ng/ml)处理照射组(D组).B、C、D组分别用60Co γ射线20Gy单剂量照射心肌细胞,C、D组细胞在照射前3h分别用终浓度为20、40ng/ml的HGF孵育.照射后48h检测培养上清中的LDH浓度,用流式细胞仪检测心肌细胞生长周期及细胞凋亡率变化.结果 照射后48h,B、C、D组细胞培养上清中的LDH浓度较A组升高,C、D组的LDH浓度较B组下降;B、C、D组细胞生长周期较A组无明显变化,但凋亡细胞比例较A组升高,经HGF孵育的心肌细胞凋亡率则呈下降趋势.结论 60Co γ射线单剂量照射可造成体外培养的心肌细胞损伤,促进心肌细胞凋亡,HGF可抑制60Co γ射线对体外培养的大鼠心肌细胞的促凋亡作用,其机制仍需进一步研究.     

光动力学疗法与白花蛇舌草联合应用对大鼠C6胶质瘤细胞的作用

目的探讨光动力学疗法(photodynamictherapy,PDT)与白花蛇舌草联合应用对大鼠C6胶质瘤细胞的作用。方法常规培养的Wistar大鼠C6胶质瘤细胞用MTT法、吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)双荧光染色法和流式细胞术观察PDT联合白花蛇舌草对体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞存活率的影响、检测凋亡、分析对细胞形态学及细胞周期的影响。结果白花蛇舌草可明显抑制C6胶质瘤细胞的生长;使肿瘤细胞聚集在S期并诱导其凋亡。PDT与各浓度白花蛇舌草联合可抑制C6胶质瘤细胞增殖(P<0.01)。白花蛇舌草和PDT均可在一定程度上诱导C6胶质瘤细胞凋亡,二者联用后诱导细胞凋亡作用显著增强,这种作用在白花蛇舌草浓度为5.0μg/ml作用12h时最明显。结论白花蛇舌草可与PDT协同抑制C6胶质瘤细胞的增殖。其协同作用的机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

125I粒子持续低剂量率照射对人前列腺癌细胞的抑制作用

目的探讨^125I粒子持续低剂量率照射对人前列腺癌细胞株（PC3）增殖抑制以及对细胞周期的影响。方法^125I粒子（初始剂量率2.77cGy/h）和^60Coγ射线（吸收剂量率2.215Gy/min）对体外培养的PC3细胞进行0、0.5、1、1.5、2、4、6和8Gy照射,用细胞计数、锥虫蓝染色和集落形成法检测细胞增殖、细胞活力和细胞存活率的情况;用单击多靶模型拟合剂量存活曲线;用流式细胞仪检测细胞周期。结果随着照射剂量的增加,^125I粒子照射组的细胞生长比^60Coγ射线组更加明显地受到抑制（P〈0.05）。^125I粒子照射PC3细胞D0值为2.243,Dq为0.87,N为1.618,SF2为0.5。^60Co照射组PC3细胞放射生物学参数D0值为2.824,Dq为1.08,N为1.587,SF2为0.7。^60Co和125I粒子的RBE比值为1.4。与空白对照组相比,^125I粒子组和^60Co组4Gy照射细胞24h后均出现G2期阻滞。结论^125I粒子照射能抑制人前列腺癌细胞的增殖并能使PC3细胞阻滞于G2期。     

丹参酮ⅡA、人参皂苷Rg_1和人参皂苷Rb_1配伍对平滑肌细胞的抑制作用

目的:探讨丹参酮ⅡA与复方丹参方中另两种有效成分人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1不同剂量配伍时对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、迁移的作用.方法:血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)0.1 μmol/L诱导大鼠VSMC增殖,随后采用MTT法检测增殖细胞的活性、细胞划痕损伤实验检测细胞迁移数目、流式细胞术检测细胞周期的分布.结果:两味药配伍组中 Rg1 10 μmol/L Rb1 7 μmol/L、三味药配伍组中ⅡA 4 μmol/L Rg1 1 μmol/L Rb1 7 μmol/L抑制VSMC增殖的作用显著高于其他各组,且可以抑制细胞迁移,使细胞阻滞在G1期(P<0.01).结论:上述两种配伍可以明显抑制VSMC的增殖、迁移.     

甲状腺滤泡细胞对γ射线与质子照射反应的比较:1.DNA损伤、微核形成、细胞凋亡、细胞存活和细胞周期分布等的基本特征

目的 :研究不同质的辐射对甲状腺滤泡上皮细胞 DNA和染色体损伤、细胞杀死及细胞周期的影响。方法 :大鼠甲状腺细胞 FRTL - 5在 DMEM/ F12培养基中培养 ,以 6 0 Co源照射 0～ 12 Gy(剂量率 1.5 Gy/ min)和同步加速器产生的 2 5 0 Me V质子照射 (剂量率约 0 .7Gy/ min)。照射后不同时间收获 FRTL- 5细胞。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的荧光素 (FITC)共轭溴脱氧尿苷 (Brd U)参入核酸的自由 3′端 ,以激光扫描细胞仪测量 DNA链的断裂 ;用胞质分裂阻断方法测定微核 ;以荧光素共轭 annexin V标记 ,用激光扫描细胞仪测定细胞凋亡 ;用…     

大鼠心肌缺血再灌注损伤中的心肌细胞凋亡

 目的 观察MIRI时心肌细胞凋亡现象及其病理组织学改变,探讨细胞凋亡在MIRI中的意义.方法 采用SD大鼠MIRI模型,用原位末端标记染色检测心肌细胞凋亡和HE染色法检测心肌病理组织学改变.结果 假手术组及MIRI大鼠左室非缺血心肌组织中均末发现凋亡细胞出现,MIRI60 min、90 min和120 min大鼠缺血心肌中均可见凋亡细胞,且凋亡细胞的个数随再灌注时间的延长而增多,分别为36.3±8.76个/视野,38.41±14.21个/视野和48.01±23.87个/视野..结论 缺血后再灌注损伤可诱发心肌细胞凋亡.     

Gesamtvergütung/Krankenkasse/Landesverband/ Vertragsarzt/Verzugszinsen/Prozeßzinsen

Abstrakt 1. Mit der übertragung der Kompetenz zum Abschluss von Vertr?gen über die vertrags?rztliche Versorgung auf den zust?ndigen Landesverband von Krankenkassen ist diesem die Rechtsmacht zugewiesen worden, die beteiligten Krankenkassen zur Zahlung der auf sie entfallenden Gesamtvergütung an die Kassen?rztliche Vereinigung zu verpflichten. 2. Die Krankenkasse kann im Rechtsstreit mit der Kassen?rztlichen Vereinigung keine gerichtliche überprüfung der auf sie entfallenden Gesamtvergütung erreichen. 3. Die Kassen?rztliche Vereinigung hat keinen Anspruch auf Verzugszinsen gegen eine Krankenkasse, die f?llige Gesamtvergütungen nicht zahlt (Best?tigung der st?ndigen Rechtsprechung seit BSG, SozR Nr. 3 zu x 288 BGB). 4. Die Kassen?rztliche Vereinigung hat Anspruch auf Prozesszinsen gegen eine Krankenkasse nach Eintritt der Rechtsh?ngigkeit einer Klage auf Zahlung f?lliger Gesamtvergütungen (Aufgabe der bisherigen Rechtsprechung); aus Gründen des Vertrauensschutzes gilt das nur für Klagen, die nach dem 28. 9. 2005 anh?ngig werden.     

Krankenhausarzt/Erm?chtigung/MRT-Leistungen/Versorgungsbedarf/Planungsbereich

Für den bei Erm?chtigungen erforderlichen Versorgungsbedarf ist grunds?tzlich das Versorgungsangebot im Planungsbereich ma?gebend. Nur in Ausnahmef?llen k?nnen Versorgungsangebote in anderen Planungsbereichen berücksichtigt werden.     

Krankenhausarzt/Ermächtigung/MRT-Leistungen/Versorgungsbedarf/Planungsbereich

Abstrakt Für den bei Erm?chtigungen erforderlichen Versorgungsbedarf ist grunds?tzlich das Versorgungsangebot im Planungsbereich ma?gebend. Nur in Ausnahmef?llen k?nnen Versorgungsangebote in anderen Planungsbereichen berücksichtigt werden.     

Krankenhausarzt/Krankenhausambulanz/Ermächtigter Krankenhausarzt/Ambulantes Operieren/Haftung

Abstrakt 1. Auch nach Inkrafttreten des Gesundheitsstrukturgesetzes vom 21.12.1992 ist Vertragspartner eines Kassenpatienten, der in einer Krankenhausambulanz behandelt wird, grunds?tzlich der zur vertrags?rztlichen Versorgung erm?chtigte Krankenhausarzt. 2. Werden in den R?umen des Krankenhauses durch angestellte ?rzte des Krankenhaustr?gers ambulante Operationen durchgeführt, ohne dass die behandelnden ?rzte oder der die Ambulanz betreibende Chefarzt zur vertrags?rztlichen Versorgung erm?chtigt ist, haftet grunds?tzlich der Krankenhaustr?ger.     

Disziplinarverfahren / Verfolgungsverjährung / Einleitungshindernis / Verfahrenshindernis

Ohne Zusammenfassung     

Ermächtigung/HNO-Ärzte/Phoniater/Pädaudiologen/Bedarfsplanung/55-Jahresgrenze/Begründungspflicht

Abstrakt 1. Zur Prüfung des Bedarfs phoniatrisch-p?daudiologischer Leistungen in der ambulanten vertrags?rztlichen Versorgung dürfen nicht alle zugelassenen HNO-?rzte berücksichtigt werden, sondern nur die Phoniater und P?daudiologen, soweit sie nach der WBO eine eigene Arztgruppe bilden. 2. Der EBM (Einführung vor 1612) hat Leistungen nach Abschnitt L. IV auch HNO-?rzten erm?glicht; diese Leistungen bleiben aber für HNO-?rzte dennoch weiterhin fachfremd. 3. Die ?ffnung des EBM insoweit ist ein starkes Indiz für einen quantitativen Bedarf für phoniatrisch-p?daudiologische Leistungen. Vor der Feststellung eines Erm?chtigungsbedarfs ist aber zu prüfen, ob die Sicherstellung auch durch Mitbehandlung niedergelassener HNO-?rzte gew?hrleistet werden kann. 4. Unter qualitativ/speziellen Gesichtspunkten (BSG, SozR 5520 x 116 Nr. 24) kann ein Erm?chtigungsbedarf bestehen, falls die niedergelassenen Phoniater und P?daudiologen über einzelne Leistungsangebote nicht oder nicht ausreichend verfügen.     

Abrechnungsbetrug / Rabattgewährung / Kontrastmittel / Entsorgungskosten

Ohne Zusammenfassung