人乳头状瘤病毒16型E6基因的序列及其在HeLa细胞中的表达

人乳头状瘤病毒 (Ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ,ＨＰＶ) 16型Ｅ6原癌蛋白作为抗原 ,能诱发机体产生细胞免疫和体液免疫 ,是宫颈癌治疗性疫苗研究的热点[1] 。我们用ＰＣＲ方法从重庆宫颈癌组织中扩增出ＨＰＶ16Ｅ6基因 ,并在ＨｅＬａ细胞中成功表达Ｅ6原癌蛋白 ,为宫颈癌治疗性核酸疫苗的研究打下了基础。1　资料与方法1.1　资料1.1.1　宫颈癌活检组织　　取自重庆医科大学附属第二医院门诊患者。病理诊断为宫颈鳞状细胞癌。组织离体后迅速投入液氮 ,-70℃冷冻保存。1.1.2　引物　　根据标准株[2 ] 序列设计 ,上下游引物是 5’…     

宫颈癌DNA倍体,人乳头瘤病毒16／18,ras p21和p53蛋白表达综合研究

应用人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）核酸分子斑点杂交法、流式细胞技术和细胞免疫荧光法，检测宫颈癌ＤＮＡ倍体、ＨＰＶ、ｒａｓ ｐ２１和ｐ５３蛋白表达，并对其进行综合研究。结果显示，宫颈癌组ＤＮＡ指数平均值明显高于正常组，且与肿瘤细胞分化有关；癌变组ＤＮＡ异倍体率与肿瘤分化程度关系密切；在１７例ＨＰＶ１６／１８型阳性病例中，均有ｒａｓ ｐ２１和或ｐ５３蛋白阳性表达。说明宫颈癌变是多因素综合作用的结果，ＨＰＶ１６     

PCR法检测宫颈癌细胞中人乳头瘤病毒

采用ＰＣＲ（聚合酶链反应）技术对宫颈癌细胞中ＨＰＶ（人乳头瘤病毒）和ＨＰＶ１６、１８型的感染状况分别进行了研究。在新鲜组织中，宫颈癌细胞内ＨＰＶ和ＨＰＶ１６、１８型的感染率分别达８０％和７５％。但石蜡标本中ＨＰＶ和ＨＰＶ１６、１８型的感染率则为３３．３％和２６．７％。说明宫颈癌细胞中ＨＰＶ的感染率极高，且主要系ＨＰＶ１６、１８型的感染。ＰＣＲ技术检测宫颈癌细胞中的ＨＰＶ方法简便快速，灵敏度高。可广泛用于流行病学调查和高危致癌ＨＰＶ感染妇女的追踪观察。对宫颈癌的早期发现和早期诊断有重要意义     

人乳头瘤病毒与肺,食管鳞癌的相关性

自从人乳头瘤病毒 (ＨｕｍａｎＰａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｏｕｓ ,ＨＰＶ)被发现以来 ,与人类的许多疾病相伴随 ,大量证据表明与宫颈癌、膀胱癌关系非常密切。随着研究的深入及广泛 ,近年来ＨＰＶ与胸科鳞癌的关系日益受到重视。本文就这方面的研究现状和进展综述如下。1　ＨＰＶ基础概况分类学上ＨＰＶ属于乳多空病毒科乳头瘤病毒属。基因组为双链共价封闭的环状ＤＮＡ ,长约 7.8～ 8.0ｋｂ。病毒颗粒直径为 5 5ｎｍ ,核壳为 2 0面体对称型 ,由 72个壳粒组成 ,在ＣＳＣＬ密度梯度溶液中浮密度为 1.34 ｇ/ｍｌ。基因分型的原则是以 5 0 %的同…     

宫颈癌组织中H—ras基因突变与高危型HPV感染关系的研究

采用ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ等方法检测５１例宫颈组织（其中宫颈癌标本３８例，正常宫颈组织标本１３例）中高危型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）－１６，１８感染情况及Ｈ－ｒａｓ基因突变情况。研究结果显示，宫颈组织中ＨＰＶ－１６，１８感染率为７４％（２８／３８），表明高危型ＨＰＶ－１６，１８是宫颈癌发生的重要因素。Ｈ－ｒａｓ基因突变率为２９％（１１／３８）。正常宫颈组织中上述检测结果均为阴性。Ｈ－ｒａｓ基因突变与多种肿瘤发生有关；显示该基因突变与宫颈癌发生有关，但不是早期事件，也不能作为临床恶变与预后判断的指标；Ｈ－ｒａｓ基因突变与ＨＰＶ－１６，１８型感染具有相关性     

宫颈癌变的细胞分子生物学研究进展

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤。研究证实人乳头状瘤病毒（ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ，ＨＰＶ）感染与宫颈癌的发生密切相关，ＨＰＶ作为外源性因素对机体内源性因素产生影响，如ＨＰＶ的Ｅ６、Ｅ７癌蛋白可使原癌基因激活，抑癌基因失活，进一步引起细胞增殖和凋亡的调节异常，从而导致组织癌变。此外ＨＰＶ感染后细胞粘附因子ＣＤ４４ｖ表达增加，对组织恶变、侵袭和转移产生一定影响。１　ＨＰＶ感染和宫颈癌变１．１　ＨＰＶ的结构和测定：自１９７６年ＺｕｒＨａｕｓｅｎ首次从宫颈癌组织中分离出ＨＰＶ１６、１８以来，至…     

宫颈癌及癌旁组织中人乳头瘤病毒DNA检测

目的：探讨人乳头瘤病毒（ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ,ＨＰＶ） 与宫颈癌及癌旁组织的关系。方法：应用原位ＰＣＲ技术（ＩＳＰＣＲ）对４４ 例宫颈癌、１８ 例癌旁组织及３０ 例慢性宫颈炎和１５ 例正常宫颈组织中的ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ进行检测。结果：４４ 例宫颈癌组织中ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性３５ 例（７９－５％ ）,ＨＰＶ１８ＤＮＡ 阳性５ 例（１１－３ ％） 。其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ均阳性４ 例;ＨＰＶ１８ＤＮＡ 阳性而ＨＰＶ１６ＤＮＡ阴性１ 例;ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性而ＨＰＶ１８ＤＮＡ 阴性３１ 例。１５ 例癌旁组织伴宫颈上皮内新生物（ｃｅｒｖｉｃａｌｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｎｅｏｐｌａｓｍ , ＣＩＮ） Ⅱ～Ⅲ级,ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性１２ 例（８０％ ）,其他３ 例癌旁组织中１ 例ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性;３０ 例慢性宫颈炎有４ 例ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性（１３－３％ ） ;１５ 例正常宫颈组织ＨＰＶＤＮＡ均阴性。结论：宫颈癌及癌旁伴ＣＩＮⅡⅢ与ＨＰＶ１６、１８ 感染有密切关系,以ＨＰＶ１６ 感染为主     

喉癌疾病患者病变组织中人乳头状瘤病毒感染的研究

研究证明 ,喉部良、恶性肿瘤组织中可以检测出人乳头状瘤病毒 (ＨＰＶ)ＤＮＡ序列 ,而与喉癌关系最密切的为ＨＰＶ 16型[1] ,与喉部良性病变最密切的则为ＨＰＶ 6 / 11型[2 ] 。鉴于黑龙江省为喉癌的高发地区 ,我们应用聚合酶链反应技术(ＰＣＲ)进行有关ＨＰＶ感染的研究 ,旨在找出ＨＰＶ感染与喉癌发生的联系。一、对象与方法1.对象 :1995～ 1999年 ,哈尔滨医科大学附属第二医院耳鼻咽喉科收治的患者 ,所有患者均分布于黑龙江省区域内 ,在地域位置和级别规模上具有一定的代表性。随机收集了喉癌标本 40 0例及喉息肉标本 40 0例。每例标本均…     

人乳头瘤病毒16型早期基因E7的克隆及其在原核细胞中的表达

目的 进一步研究与宫颈癌密切相关的人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）Ｅ７基因的生物学活性。方法 采用ＰＣＲ法从妇女宫颈癌标本中扩增ＨＰＶ１６早期基因Ｅ７,测人ＤＮＡ诉序列,结果 克隆的ＨＰＶ１６Ｅ７基因与标准型进行比较表明,前者无核苷酸突变。将此基因装入原核表达载体,能在Ｅ．Ｃｏｌｉ中高效表达出谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）－Ｅ７蛋白,Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析表明,此融合蛋白能在Ｅ７抗体特异地结合。结论     

真核表达人乳头瘤病毒16型L1蛋白在检测宫颈癌患者相 …

用真核表达ＨＰＶ１６Ｌ１蛋白为抗原，酶联免疫吸附测定６４例宫颈癌患者血清和阴道分泌物的相应抗体，并用型特异性聚合酶链反应检测宫颈癌组织ＨＰＶ１６Ｌ１基因。结果：宫颈癌组血清ＨＰＶ１６Ｌ１抗体阳性率为６４．１％，对照组２０．８％；宫颈癌组阴道分少物ＨＰＶ１６Ｌ１抗体阳性率６４．１％，对照组２５％；宫颈癌组ＨＰＶ１６Ｌ１基因检出率为４２．２％，对照组１０％。有显著差异。结论：高危型ＨＰＶ感染，宫颈癌患     

奥平加中星光治疗宫颈糜烂临床观察

宫颈糜烂是妇女常见多发病 ,是宫颈癌发病的高危因素之一 ,近年来大量流行病学调查资料提示 ,宫颈炎和宫颈癌的发生与单纯疱疹病毒 (ＨＳＶ)和人乳头瘤病毒 (ＨＰＶ)感染密切相关 ,其中ＨＰＶ16、18型与宫颈癌发病关系更为密切。我院近几年来采用α-干扰素栓 (奥平 )联系中星光     

PCR技术在诊断无症状女性HPV感染中的价值

人类乳头瘤病毒 (ＨＰＶ)主要侵犯人体皮肤、粘膜 ,其中ＨＰＶ - 6、11、16、18型可引起外生殖器尖锐湿疣并与宫颈癌的发生密切相关[1] ,发病率在我国性传播疾病 (ＳＴＤ)中占第二位。我院应用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术 ,对 5 4例已确诊的尖锐湿疣男性患者的配偶进行ＨＰＶ检测并追踪观察 2个月 ,同时对淋球菌 (ＮＧ)、沙眼衣原体 (ＣＴ)和解脲支原体 (ＵＵ)的感染进行了检测 ,报告如下。1　材料与方法1.1一般资料　已确诊尖锐湿疣男性患者的配偶 5 4例 ,年龄 2 1～ 35岁 ,均无临床症状。用无菌生理盐水湿润的棉拭子取阴道和宫颈口的分泌物…     

α-干扰素栓与甲硝唑栓交替治疗宫颈糜烂108例疗效观察

宫颈糜烂是妇女最常见的疾病 ,约有 5 0 %育龄妇女患有此病[1] 。其病因与单纯疱疹病毒 (ＨＳＶ)、人乳头瘤病毒 (ＨＰＶ)、厌氧菌、葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌等多种病原体感染有关[2 ] 。近年来我院采用α -干扰素栓与甲硝唑栓交替使用治疗宫颈糜烂 ,疗效显著 ,现报告如下。1　资料与方法1 1　一般资料　 1999年 1月 - 2 0 0 1年 6月在我院门诊就诊的宫颈糜烂患者 32 4例 ,年龄 2 2～ 4 8岁 ,平均年龄 31 2岁 ,治疗前常规宫颈刮片 ,除外宫颈癌和癌前病变 ,白带检查排除滴虫、念珠菌、淋球菌或衣原体感染。1 2　方法　使用α -干扰素栓 (…     

鲍温样丘疹病10例临床分析

鲍温样丘疹病 (ｂｏｗｅｎｏｉｄｐａｐｕｌｏｓｉｓ ,ＢＰ)是近 2 0年来才提及的一种并不常见的具有多种临床表现的皮肤病 ,把它与鲍温病 (ｂｏｗｅｎ ｓｄｉｓｅａｓｅ)一起归入外阴上皮内瘤样病变 (ＶＩＮ)已得到普遍认同[1] 。近年来 ,随着人类乳头状瘤病毒 (ＨＰＶ)感染发病率的升高 ,本病的发病率也有升高 ,但尚未引起临床医生的重视 ,对其误诊误治较普遍 ,作者就本病的病因、临床表现、诊断、治疗进行了分析与讨论。1　资料与方法1 1　一般资料　 1999年 1月至 2 0 0 0年 12月在本院经临床和病理证实的鲍温样丘疹病患者 10例。年龄为…     

宫颈癌病理学类型与人乳头瘤病毒感染型别的关系

探讨宫颈癌病理学类型与人乳头瘤病毒感染型别的关系。方法每例宫颈癌标本取样两份,一份进行组织病理学检查,包括ＨＥ、ＰＡＳ和粘液卡红染色;另一份用于提取ＤＮＡ,分别用于ＨＰＶ－１６和ＨＰＶ－１８基因组探讨针进行核酸杂交。结论宫颈鳞癌与ＨＰＶ－１６感染密切相关,宫颈腺癌与ＨＰＶ－１８感染密切相关;而宫颈鳞癌中的不同类型与ＨＰＶ－１６之间的以及宫颈腺癌中的不同类型与ＨＰＶ－１８之间均无明显的相关性。     

尖锐湿疣的诊断和治疗进展

尖锐湿疣 (ＣＡ)是一种由人乳头瘤病毒 (ＨＰＶ)引起的生殖道性传播疾病 (ＳＴＤ)。近年来 ,其发生率迅速增加。据我国性病检测报道 ,生殖器ＨＰＶ检出率为 3 0 69/ 1 0万 ,仅次于淋病 ,占我国生殖道性传播疾病的第二位 ,而尖锐湿疣只是ＨＰＶ感染后有症状的部分 ,有报道认为 ,尖锐湿疣与无症状ＨＰＶ感染的比率为 1∶1 0。迄今已发现 70余种ＨＰＶ类型 ,据其致病力大小分为低危型和高危型 ,低危型主要导致生殖道、肛门、皮肤和阴道下部的外生殖器湿疣类病变和低度宫颈上皮内瘤样病变 (ＣＩＮＩ级 ) ,主要有ＨＰＶ6、1 1、3 9,而高危型主要…     

奥平栓治疗宫颈糜烂112例分析

宫颈糜烂约占已婚妇女的 5 0 %以上 ,且与宫颈癌的发生有一定关系。大量的流行病学调查资料显示 :宫颈糜烂、宫颈癌的发生 ,均与单纯疱疹病毒Ⅱ型 (ＨＳＶ -Ⅱ )、人乳头瘤病毒(ＨＰＶ - 16 )、巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)相关。因此 ,抗病毒治疗对宫颈糜烂的治疗、预防宫颈癌的发生 ,提高妇女健康水平 ,具有重要意义。我院从 2 0 0 1- 0 7～ 2 0 0 2 - 0 3采用奥平栓治疗宫颈糜烂 112例 ,均收到明显疗效 ,现报道如下。1　资料与方法1 1　资料112例患者均为妇科门诊确诊为宫颈糜烂患者 ,已婚。年龄 19～ 5 2岁。近 3个月内未接受其他方法治疗 ,…     

宫颈癌及癌旁组织中人乳头瘤病毒DNA检测

目的：探讨人乳头瘤病毒与宫颈癌及癌旁组织的关系。方法：应用原信ＰＣＲ技术对４４例宫颈癌、１８例癌旁组织及３０例慢性宫颈炎和１５例正常宫颈组织中的ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ进行检测。结果：４４例宫颈癌组织中在６ＤＮＳ阳性３５例，ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性５例。其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ均阳性４例；ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性而ＨＰＶ１６ＤＮＡ阴性１例；ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性而ＨＰＶ１８ＤＮＡ阴性     

中国山东地区妇女宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16E6E7基因 …

目的 分析中国山东地区宫颈癌患者ＨＰＶ１６型Ｅ６Ｅ７基因结构特点。方法 从中国山东地区宫颈癌活检组织中提取ＤＮＡ,经ＨＰＶ多重引物ＰＣＲ法鉴定标准中感染ＨＰＶ型别,选感染ＨＰＶ１６型的标本ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增,获得ＨＰＶ１６Ｅ６Ｅ７基因,将其重组入ｐＡＬＴＥＲ－１载体,进行双向测序、分析。结果 构建了含中国山东地区宫颈癌患者组织中ＨＰＶ１６Ｅ６Ｅ７的重组质粒,命名为ＨＰＶ１６Ｅ６Ｅ７－ＳＤ。     

干扰素治疗宫颈糜烂疗效观察

宫颈糜烂是已婚妇女的常见病 ,多发病 ,也是宫颈癌的高危因素。近年来大量临床研究证明 ,人乳头状瘤病毒(ＨＰＶ)和单纯疱疹病毒乙型 (ＨＳＶ 2 )的感染是宫颈糜烂的主要病因之一[1] ,因此用干扰素抗毒治疗对改善宫颈糜烂 ,预防宫颈癌有重要意义。我院妇科门诊采用干扰素治疗宫颈糜烂患者 16 0例 ,疗效较好 ,现分析如下。1　一般资料1 1　对象1997年 1月～ 2 0 0 0年 1月在我院门诊就诊的宫颈糜烂患者 ,年龄在 5 0岁内 ,愿意接受药物治疗者 16 0例 ,其中宫颈轻度糜烂者 40例 ,中度糜烂者 96例 ,重度糜烂者 2 4例。1 2　诊断标准根据高等医学…