骨碎补柚皮苷对人牙周韧带细胞增殖和成骨分化潜能的影响

目的:探讨骨碎补柚皮苷对人牙周韧带细胞的增殖能力以及成骨分化潜能的影响.方法:MTT法检测在含有不同浓度骨碎补柚皮苷的细胞培养液中人牙周韧带细胞的增殖特性;检测不同浓度骨碎补柚皮苷作用后人牙周韧带细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性的改变.结果:骨碎补柚皮苷≥0.01 μmol/L时能增进人牙周韧带细胞增殖(P<0.05),并能增加其ALP活性(P<0.05).结论:骨碎补柚皮苷可提高人牙周韧带细胞的增殖能力及成骨分化的潜能.     

从骨碎补中制备新北美圣草苷和柚皮苷对照品的研究

目的 建立从骨碎补中制备新北美圣草苷和柚皮苷对照品的方法.方法 结合大孔树脂富集、硅胶柱色谱、中性氧化铝吸附、Sephadex LH-20柱色谱和重结晶方法对骨碎补乙醇提取物进行分离纯化,通过MS、IR、UV、1H-NMR和13C-NMR进行结构鉴定.结果 制备得到的新北美圣草苷和柚皮苷质量分数分别为99.5 %、99.3%.结论 建立的制备方法简单,对照品质量分数高,可作为骨碎补药效物质基础研究和骨碎补药材质量控制的对照品.     

柚皮苷对骨细胞的作用以及负载柚皮苷的羟基磷灰石复合支架治疗骨缺损的研究

由外伤、感染、肿瘤等因素引起的骨缺损是骨科常见的疾病,也是世界性的难题。随着医疗技术的提高,对骨缺损修复材料的要求也越来越高。在骨缺损处植入支架材料可以恢复损伤局部的组织结构,促进骨缺损的修复。柚皮苷是中药骨碎补的有效活性单体成分,具有促进成骨细胞增殖、分化、修复骨缺损的作用。研究表明,负载柚皮苷的羟基磷灰石复合支架具备良好的生物相容性、骨传导性、可降解性以及缓释性等性能,可用于骨缺损的修复。笔者通过总结柚皮苷对骨细胞的作用以及负载柚皮苷的羟基磷灰石复合支架治疗骨缺损的研究进行概括,为临床和科研上研究柚皮苷及复合支架修复骨缺损提供相关依据。     

健膝胶囊的质量标准研究

目的建立健膝胶囊的质量标准研究。方法用TLC法对黄芪、骨碎补、淫羊藿进行定性鉴别;用HPLC法测定骨碎补中柚皮苷的含量。结果薄层色谱图斑点清晰,阴性对照无干扰;柚皮苷在0．05928～0．65208μg范围内线性关系良好,平均回收率为99．26％,RSD为1．62％（n=9）。结论该方法专属性强,灵敏度高,重现性好,可用于健膝胶囊的质量控制。     

负载骨碎补活性成分的骨缺损修复支架材料的最新研究进展

近年来，骨组织工程技术应用于骨缺损修复逐渐受到学者重视，在支架材料中植入具有成骨作用的中药或其活性成分成为骨缺损修复的一个重点研究方向。骨碎补及其主要成分骨碎补总黄酮、柚皮苷可促进骨组织再生，促进成骨，进而修复骨缺损。本文对负载骨碎补或其主要活性成分的支架材料在骨缺损修复应用中的研究进展进行综述，旨在为骨缺损的临床治疗提供理论依据。     

柚皮苷通过Fas膜受体通路调控髓核细胞凋亡的机制研究

[目的]观察中药骨碎补单体柚皮苷（Naringin）对人退变椎间盘髓核细胞凋亡的影响,为治疗椎间盘退变提供理论依据。[方法]对体外培养的人退变椎间盘髓核细胞利用番红O染色和甲苯胺蓝染色进行鉴定,并对P3代细胞分别用柚皮苷0 g/mL （对照组）、柚皮苷20 g/mL、柚皮苷40 g/mL、柚皮苷80 g/mL的培养基培养人髓核细胞48 h,噻唑蓝（MTT）法选择其抑制人退变椎间盘髓核细胞凋亡的最佳浓度,并用流式细胞仪测定各组细胞凋亡率。实时定量聚合酶链锁反应（qRT-PCR）检测Fas、FasL、Caspase-8基因表达。蛋白免疫印迹法（Western-blot）检测Fas蛋白表达。[结果]MTT法和流式细胞检测均测定20 g/mL柚皮苷为抑制髓核细胞凋亡的最佳浓度（P<0.05）。qRT-PCR检测20 g/mL柚皮苷能够抑制Fas、FasL、Caspase-8 mRNA表达（P<0.05）。Western-blot检测显示20 g/mL柚皮苷能够抑制Fas、FasL、Caspase-8蛋白表达。[结论]柚皮苷可能通过调控Fas/Fasl死亡受体凋亡通路抑制人退变椎间盘髓核细胞凋亡。     

利用液相色谱法测定中药的柚皮苷含量

目的 建立HPLC法测定常见中药中柚皮苷的方法,测定常见中药中柚皮苷含量.方法 WatersSymmetry C18柱(4.6x150mm,3.5μm),流动相为甲醇:乙腈:磷酸缓冲液(0.01mol/L pH3.5)=9:3:8,检测波长为280nm.结果 柚皮苷的出峰时间为2min,柚皮苷1.80～350mg/L范围内具有良好的线性关系,R2值为0.9999,平均回收率分别为99.5%-102.5%,相对标准偏差小于5%;香橼、枳实和橘红的柚皮苷含量分别为2.89-5.67%、0.21-0.26%、11.97-2.44%,不同产地的香橼、枳实、橘红中柚皮苷含量的相对标准偏差分别为28.88%、10.63%和26.42%;四磨汤、胃痛丸、橘红丸颗粒和抗骨增生丸中柚皮苷的含量分别为5.99mg/g、2.25mg/g、1.71mg/g、0.30mg/g,不同厂家生产的四磨汤、胃痛丸、橘红丸颗粒和抗骨增生丸中柚皮苷浓度的相对标准偏差分别为8.43%、14.72%、9.90%和3.42%.结论 建立了一种简便、准确、适用性广泛地测定中药中柚皮苷的方法,产地对香橼及橘红中柚皮苷含量的影响较大,而不同厂家生产的中成药中柚皮苷的含量偏差相对较小.     

HPLC法同时测定瓜蒌薤白片中3种成分的含量

目的:建立瓜蒌薤白片中代表性成分丹酚酸B、柚皮苷、盐酸小檗碱的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定瓜蒌薤白片中丹酚酸B、柚皮苷、盐酸小檗碱的含量。结果:建立同时测定中药复方制剂瓜蒌薤白片中表性成分丹酚酸B、柚皮苷、盐酸小檗碱含量的方法。每片中丹酚酸B的含量不低于2.1mg、柚皮苷的含量不低于2.1mg、盐酸小檗碱含量不低于1.2mg。结论:本实验首次建立的HPLC法同时测定中药复方制剂瓜蒌薤白片中丹酚酸B、柚皮苷、盐酸小檗碱含量的定量分析方法,该法简便准确,可用于瓜蒌薤白片的质量控制。     

骨碎补提取工艺的实验研究

目的：优选骨碎补提取的最佳工艺条件。方法：以骨碎补中柚皮苷及骨碎补总黄酮的含量为指标,采用L^9（3^4）正交设计法对骨碎补的提取条件进行研究。结果：提取次数是骨碎补有效成分提取的关键因素,其次是溶媒用量,提取时间和乙醇浓度为最次要因素。结论：最佳提取工艺条件是14倍量55%乙醇回流提取3次,2h/次。     

柚皮苷对动脉粥样硬化大鼠主动脉PPAR-δ、VCAM-1mRNA表达的影响

目的:探讨黄酮类化合物柚皮苷对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)大鼠主动脉过氧化物酶体增殖物激活受体-δ(peroxisome proliferator-activated receptorsδ,PPAR-δ)、内皮细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecular-1,VCAM-1)表达水平的影响。方法:通过喂养高脂饲料造成动脉粥样硬化的大鼠模型。实验动物分为正常对照组,AS模型组和柚皮苷AS组。实验结束后测定血中甘油三脂、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白的水平,应用RT-PCR法检测大鼠主动脉PPAR-δ、VCAM-1的基因表达。结果:柚皮苷AS组血中甘油三脂、总胆固醇、低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白的水平比AS模型组明显降低,高密度脂蛋白水平明显升高(P0.01);柚皮苷AS组主动脉PPAR-δ的基因表达高于模型组,而VCAM-1的基因表达则低于模型组(P0.05);结论:柚皮苷可降低AS大鼠的血脂水平,上调主动脉PPAR-δ的基因表达,下调VCAM-1的基因表达,可能为其抗AS的机制之一。     

柚皮苷-稀土配合物的合成及抗肿瘤活性的研究

目的:研究柚皮苷-稀土配合物的抗肿瘤活性及其在脐橙中能否自然生成。方法:合成了Pr-柚皮苷配合物和Y-柚皮苷配合物并对其进行了结构表征;用噻唑蓝(MTT)还原法测试上述配合物对肺癌细胞95-D、肝癌细胞Hep G-2和乳腺癌细胞ZR-75-30的抑制作用;模拟在脐橙自然生长p H及温度下稀土-柚皮苷配合物的生成。结果:Pr-柚皮苷配合物和Y-柚皮苷配合物中稀土离子与柚皮苷的络合比例为1∶1;Y-柚皮苷配合物对肺癌细胞95-D有抑制作用;在室温下,p H=5.57时,Y3+与柚皮苷发生配位。结论:在脐橙果皮中存在具有抗肿瘤活性的Y-柚皮苷配合物。     

骨碎补中柚皮苷含量测定方法的优化研究

目的探讨骨碎补不同溶液制备中柚皮苷含量的最佳测定方法。方法供试品溶液分别采用回流3 h与6 h、称质量回流3 h、索氏回流3 h与6 h等5种方法制备。HPLC法测定含量,以Hypersil C18色谱柱为固定相;甲醇-醋酸-水(40∶3∶60)为流动相;流速1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长283 nm。结果柚皮苷在0.15~1.22μg范围线性关系良好(r=0.999 6),加样回收率为98.5%,RSD=1.8%(n=6);5种不同制备方法所得供试液中柚皮苷的含量分别是1.19%、1.11%、1.29%、1.18%、1.15%。结论该法操作简单,结果更准确,重复性好,可用于柚皮苷的含量测定。     

不同产地酸橙枳实中柚皮苷的含量对比研究

目的：建立测定酸橙枳实中柚皮苷含量的方法,测定不同产地酸橙枳实中柚皮苷的含量,寻找酸橙枳实优质药材产地.方法：Dikma ODS C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）;以乙腈-水（30：70）（冰醋酸调pH =3.5）作为流动相;流速：1.0mL·min-1,柱温：300C,检测波长：283nm.结果：柚皮苷平均回收率及RSD分别为：99.95％,RSD=0.23％.结论：该方法简便、准确,可用于酸橙枳实药材的质量控制;江西新干产酸橙枳实中柚皮苷的含量最高.     

骨碎补中柚皮苷治疗股骨头坏死研究进展

柚皮苷(Naringin,NG)为中药骨碎补主要活性单体成分,是一种双氢睾酮类黄酮化合物,具有愈骨折、强筋骨、温肾阳之功用,可调节骨质代谢。股骨头坏死是一种多因素骨病,治疗方式多样,早期治疗旨在延缓病程,防治塌陷,最大限度保留髋部功能。柚皮苷可用于股骨头坏死的治疗,既可促进成骨细胞增殖、分化益于骨形成,又可抑制破骨细胞对骨质的吸收,抑制成脂分化、炎症反应,抑制血管内皮细胞凋亡,促进内皮祖细胞增殖及血管形成,增加血管形成的长度和面积,利于骨坏死修复,降低股骨头坏死率。     

“生血保元汤”临床疗效观察

作者比较中药生血保元汤和常用的升白细胞药对恶性肿瘤患者放(化)疗期间出现的白细胞减少的疗效。结果表明,生血保元汤有效率为85.3%,对照组为53.3%;二者差异有显著性意义(P<0.05)。此外,生血保元汤还能增进食欲,改善病人一般状况,对心、肝、肾功能无不良影响。     

HPLC测定壮骨关节丸中柚皮苷的含量

目的 采用RP-HPLC法测定壮骨关节丸中骨碎补的活性成分柚皮苷的含量.方法 色谱柱为Inertsil C1（8 250 mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（梯度洗脱）,流速为1 ml/min,检测波长为285nm.结果 柚皮苷在0.087 4～8.74 μg范围内呈良好的线性关系（r=0.9998）,平均回收率为（99.4±2.35）％,RSD=2.36％（n=5）.结论 该方法简便、快速、可靠,可用于评价制剂质量.     

胶束电动毛细管电泳法测定柑橘属药材中柚皮苷和橙皮苷的含量

建立了一种测定芸香料柑橘属药材中柚皮苷及橙皮苷含量的新方法,即以苯甲酸钠为内标物,采用胶束电动毛细管电泳地,可将上述药材中柚皮苷、橙皮苷和内标物较好分离。加样回收率柚皮苷为９８．５％,橙皮苷为９６．７％,该方法简便、准确、重现性好,可作为柚皮苷和疲苷的含量控制方法。     

超微粉碎对骨碎补理化性质的影响

目的 比较骨碎补超微粉和普通粉的粉体学特征及溶出特点,为骨碎补超微粉体的粒径控制与应用提供实验依据。方法 通过考察骨碎补粉体的粒径及分布、吸湿性、粉体的形貌结构等粉体学特征和体外溶出行为,研究骨碎补粉体的粒径对其粉体学特性和体外溶出行为的影响。结果 骨碎补超微粉和普通粉的粉体学特征、体外溶出行为差异显著;除微粉Ⅲ外,骨碎补超微粉中柚皮苷溶出的速度与程度要高于普通粉。结论 适度的微粉化能促进骨碎补有效成分的溶出,超微粉碎技术应用于骨碎补具有可行性。骨碎补超微粉体粒径宜控制在61.4～23.5 μm。     

柚皮苷对经TNF-α诱导体外培养兔关节软骨细胞增殖及SOD NOS影响

目的:观察骨碎补柚皮苷对经肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导体外培养兔关节软骨细胞增殖的影响.及对体外培养免关节软骨细胞超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法:原代分离软骨细胞经DMEM(含10?S)培养得到贴壁细胞并传代,行甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化鉴定;传代细胞经TNF-α诱导,用MTT法测增殖率,以及检测上清液中SOD,NOS的活性.结果:100ug/mL,50ug/mL,25ug/mL柚皮苷组对软骨细胞的增殖有明显的促进作用,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05),其中25ug/mL的促进作用最强,A值最高.各浓度组柚皮苷均可显著提高软骨细胞的SOD活性.与空白对照组和实验对照组相比均有显著性差异(P<0.05).不同浓度的柚皮苷组,软骨细胞NOS活性均高于空白对照组,低于实验对照组,与空白对照组相比,50ug/mL组有显著性差异(P<0.05)与实验对照组相比,各浓度组柚皮苷NOS活性差异有显著性(P<0.05).结论:骨碎补柚皮苷可促进软骨细胞的增殖,显著提高SOD的活性,降低NOS的活性,从而保护软骨细胞免受肿瘤坏死因子等细胞因子的损伤.