中药膜贴预处理对随后佐剂性关节炎大鼠早期炎症的影响

目的探讨贴敷预处理对随后佐剂性关节炎(AA)大鼠炎症的影响。方法应用福氏完全佐剂制作AA动物模型,24只Wistar大鼠随机分为正常组、AA组和预贴敷组(自制中药膜剂贴敷大鼠大椎穴),观察3组大鼠关节局部炎症和血清IL-1、IL-6、TNF-α含量。结果预贴敷组、AA组大鼠的足肿胀率和炎性因子与正常组有显著性差异;与AA组相比,预贴敷组大鼠足肿胀程度明显减轻(P<0.01),TNF-α含量有下降趋势,IL-1和IL-6含量下降(P<0.01和P<0.05),而且HE染色关节滑膜及软骨炎细胞浸润、血管增生及软骨破坏亦明显减轻。结论贴敷预处理能减轻随后AA大鼠早期炎症反应和关节病理损害程度,具有一定抵抗随后疾病损伤的保护作用。     

咯利普兰对佐剂关节炎大鼠腹腔巨噬细胞体外释放炎性细胞因子的影响

目的探讨选择性磷酸二酯酶(PDE)4抑制剂咯利普兰对脂多糖(LPS)诱导的佐剂关节炎(AA)大鼠腹腔巨噬细胞(PM)体外释放促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)的影响,为选择性PDE4抑制剂治疗类风湿关节炎(RA)提供理论依据。方法制备AA大鼠模型,收集PM,体外给予LPS及不同浓度咯利普兰共同孵育,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1β水平,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定细胞内TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达,并与正常对照相比较。结果 AA大鼠PM培养上清中TNF-α、IL-1β、细胞内TNF-αmRNA、IL-1βmRNA表达均高于对照组大鼠,分别为(386.80±63.24)ng/L vs(48.53±6.47)ng/L(P<0.01)、(317.77±29.33)ng/L vs(77.75±11.60)ng/L(P<0.01)、77.92±12.55vs 15.97±4.37(P<0.01)、49.30±10.06vs 10.15±1.34(P<0.01)。咯利普兰能够剂量依赖性地抑制LPS刺激的AA大鼠PM体外表达TNF-αmRNA、IL-1βmRNA,并抑制TNF-α、IL-1β产生。结论咯利普兰能抑制LPS诱导的AA大鼠PM体外释放促炎性细胞因子,提示其可能通过抑制炎症反应用于RA的治疗。     

佐剂关节炎大鼠心功能变化与细胞因子的相关性研究

目的:观察佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠一般情况、心功能变化、细胞因子以分析AA大鼠心功能变化与细胞因子的相关性.方法:将24只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组和模型组,每组12只,于模型组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(FCA)致炎,复制成AA模型.分别在造模前1天、致炎后第18天、给药后每3天检测2组大鼠体重、足跖肿胀度(E)及关节炎指数(AI),致炎48d后,通过小动物心功能仪检测心功能,采用ELISA法检测外周血中白介素-6(Interleukin 6,IL-6)、白介素-10(Interleukin 10,IL-10)、白介素-17(Interleukin 17,IL-17)和肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor alpha,TNF-α)水平.结果:①与正常组相比,模型组大鼠心功能各参数中心率(HR)、心脏质量指数(HI)、左室收缩末压(LVSP)显著升高(P<0.01),左室内压上升/下降最大速率(±dp/dtmax)显著降低(P<0.05或P<0.01);体重明显减轻、足跖肿胀度、关节炎指数明显增高(P<0.01);血清中TNF-α、IL-17、IL-6的表达水平明显升高(P<0.01或0.05),IL-10的表达水平则显著降低(P<0.01);②Spearman相关分析结果显示,AA大鼠心功能指标HI与体重、IL-10呈负相关,与足跖肿胀度、TNF-α呈明显正相关;LVEDP与足跖肿胀度、TNF-α呈明显正相关,而与IL-10呈明显负相关;LVSP与足跖肿胀度、TNF-α呈正相关;+dP/dtmax与足跖肿胀度呈明显正相关而与TNF-α呈正相关,IL-10呈负相关;HR与足跖肿胀度呈正相关而与TNF-α呈明显正相关,与IL-10呈明显负相关;并且以上相关性均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论:AA大鼠在足跖肿胀度、关节炎指数升高的同时出现心功能下降,并且心功能变化与关节炎指数、足跖肿胀度、细胞因子呈相关性,提示炎症可能为AA大鼠心功能改变的重要因素.     

佐剂关节炎大鼠血小板参数和细胞因子的变化及其相关性研究

目的观察佐剂关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠血小板参数(血小板计数PLT、血小板压积PCT、血小板平均体积MPV、血小板分布宽度PDW)、细胞因子(IL-1β、TNF-α、IL-10)的变化并对其行相关性分析。方法将16只SD雄性大鼠随机分为健康对照组、模型组,每组8只,用弗氏完全佐剂(Freund's com-plete adjuvant,CFA)向模型组大鼠右后足跖皮内注射0.1ml诱发大鼠产生关节炎,观察两组大鼠血小板参数(PLT、PCT、PDW、MPV)和细胞因子(IL-1β、TNF-α、IL-10)的变化。结果与健康对照组相比,模型组大鼠血小板参数PLT、PCT、IL-1β、TNF-α显著升高,IL-10降低(P<0.05或P<0.01)。AA大鼠的血小板参数PLT、PCT与IL-1β、TNF-α、足跖肿胀度、关节炎指数呈正相关,与IL-10呈负相关(P<0.01或P<0.05)。结论佐剂关节炎大鼠PLT、PCT是升高的,且与IL-1β、TNF-α、IL-10、足跖肿胀度、关节炎指数具有正相关性;升高机制可能与致炎因子IL-1β和TNF-α升高,抑炎因子IL-10下降有关。     

秦艽对佐剂性关节炎大鼠JAK2/STAT3信号通路的调控作用

目的:研究秦艽醇提物抑制佐剂性关节炎(adjuvantinduced arthritis,AA)大鼠及阻断Janus激酶2-信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的可能机制。方法:雄性,SD大鼠,48只,随机分为6组,每组8只。除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导AA大鼠模型。致炎第12天后,各组给予相应药物,每日1次,连续16d,处死,对大鼠体质量进行监测,并对大鼠进行关节评分;HE染色,对固定部位踝关节进行病理学观察;酶联免疫吸附实验(ELISA)法测SD大鼠血清中IL-6、IL-10和TNF-α的含量;Western blot法检测磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)的相对蛋白表达。结果:与模型组相比,秦艽醇提物(2.5、5、10g/kg)组不仅可减轻大鼠关节病理损伤程度,减少血管翳生成,减轻组织增生,还可明显抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白的相对表达。结论:秦艽醇提物对AA大鼠具有较好的抑制作用,可能通过抑制JAK2及STAT3过度激活磷酸化,即抑制p-JAK2、p-STAT3蛋白相对表达水平,进而阻断JAK2/STAT3信号转导通路有关。     

佐剂性关节炎大鼠胸腺血小板CD40L的变化及新风胶囊对其影响

目的:观察佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠血小板CD40配体(ligand,L)的变化及新风胶囊对其的影响。方法:将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组和甲氨喋呤、雷公藤多苷片、新风胶囊治疗组,每组12只,用弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant,FCA)0.1ml分别向除正常对照组以外的其余大鼠右后足跖皮内注射诱发大鼠产生关节炎,免疫组化法观察各组大鼠胸腺组织中血小板CD40L的变化,常规光镜观察大鼠关节软骨组织病理形态变化。结果:①与正常对照组相比,模型对照组大鼠血小板CD40L阳性表达率、病理损伤半定量积分、足跖肿胀度、关节炎指数显著升高(P<0.05或P<0.01)。②与模型对照组相比,治疗组均能降低血小板CD40L的阳性表达、关节病理损伤积分、足跖肿胀度、关节炎指数(P<0.05或P<0.01)。3.AA大鼠的血小板CD40L的阳性表达率与关节病理损伤积分、足跖肿胀度、关节炎指数呈正相关(P<0.01或P<0.05)。结论:AA大鼠存在血小板的活化。血小板CD40L的阳性表达率与关节病理损伤积分、足跖肿胀度、关节炎指数具有相关性。由活化血小板表达的CD40L在关节炎中起着重要介导作用。新风胶囊与甲氨喋呤、雷公藤多苷片一样能降低AA大鼠的足跖肿胀度、关节炎指数、PLT、PCT,而且在增加大鼠体重方面优于其他两个治疗组。XFC可能通过降低血小板CD40L,抑制血小板活化引起的炎症反应,改善关节病变。     

雷公藤多苷通过抑制炎性因子及调整细胞基质改善佐剂性关节炎大鼠心功能的研究

目的探讨雷公藤多苷(TPT)改善佐剂性关节炎(AA)大鼠心功能的机制。方法皮内注射弗氏完全佐剂(FCA)复制AA大鼠模型,以TPT0.9%氯化钠注射溶液混悬液(每毫升含TPT1 mg),按1 m L/100 g的剂量灌胃治疗,自制容积测定仪测量各组大鼠右后足容积并计算关节炎指数(AI);有创血流动力学检查AA大鼠心功能,免疫组织化学检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白表达情况;ELISA法测定血清细胞炎性因子白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)等变化;透射电镜观察大鼠心肌细胞超微结构改变。结果 TPT治疗后,AA大鼠的足趾肿胀度、关节炎指数水平下降,体质量升高(P<0.05);心脏指数(CI)、左室收缩期压(LVSP)、左室舒张期末压(LVEDP)水平下降,左室内压上升下降最大速率(±dp/dtmax)水平提高(P<0.01);IL-10显著升高(P<0.01),TNF-α、IL-1β、MMP-9显著降低(P<0.01)。结论雷公藤多苷通过抑制炎性因子及调整细胞基质改善AA大鼠心功能。     

基于抗风湿作用的淫羊藿拆分组分筛选研究

目的:探讨淫羊藿及其拆分组分提取物对佐剂诱导的风湿模型大鼠的影响,从而筛选出抗风湿最有效部位,为开发抗风湿中药新制剂奠定基础。方法:足跖皮内注射完全弗氏佐剂(CFA)建立大鼠佐剂型风湿模型,测量足趾容积,计算足肿胀度。造模后第15d开始灌胃给予淫羊藿全成分及各拆分组分,连续两周,末次给药24h后,测定血清中的IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、TLR2、TLR4、NF-κB含量,并对大鼠膝关节滑膜进行HE染色,观察其病理变化。结果:从足肿胀结果看出模型组和95醇段给药组在4-28d肿胀体积递增,全成分组在给药1d后肿胀情况开始回调;从血清检测结果看出,全成分组可使血清中IL-1β、IL-8、TNF-α、TLR4含量明显下降(P0.05),使IL-6含量极为显著性下降(P0.01);30醇组可显著降低血清中IL-6、IL-1β含量(P0.01),并对TNF-α、TLR2、NF-κB含量也显著降低(P0.05);病理切片结果显示,全成分组、30醇组和95醇组均不同程度改善滑膜组织的病理变化。结论:淫羊藿全成分组、30醇组和95醇组对佐剂诱导的风湿模型大鼠有明显的治疗作用。淫羊藿各组分抗风湿作用大小依次为:全成分30醇段95醇段水层段多糖段,其作用机制可能与改善血液中炎性因子的表达和抑制组织病理变化有关。     

攻下清热活血中药对重症胰腺炎大鼠胰腺肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β基因表达的影响

目的:观察攻下清热活血中药影响重症胰腺炎大鼠胰腺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的mRNA表达。方法:采用牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制备大鼠重症胰腺炎模型。将110只大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药大、小剂量组、奥曲肽组。制模后,分别以16.66g/kg和8.33g/kg剂量的攻下清热活血中药灌胃,以奥曲肽16μg/kg皮下注射,正常对照组和模型组予等量生理盐水灌胃,均每8h1次,共3次。随后处死动物取血测淀粉酶含量;取胰腺组织观察病理学改变并进行病理评分;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺组织中TNF-α和IL-β的mRNA表达。结果:模型组大鼠胰腺组织病理评分和血清淀粉酶含量明显增高(P均<0.01);各治疗组治疗后大鼠胰腺组织病理评分和血清淀粉酶均较模型组明显下降(P<0.05或P<0.01)。而3个治疗组间胰腺组织病理评分差异无显著性;中药大剂量组与奥曲肽组血清淀粉酶含量均较中药小剂量组显著降低(P均<0.05)。模型组大鼠胰腺组织TNF-α、IL-1β的mRNA表达明显高于正常对照组(P均<0.01);3个治疗组大鼠胰腺组织TNF-α、IL-1β的mRNA表达均较模型组明显下降(P均<0.01),且3组间差异无显著性。结论:攻下清热活血中药能明显改善重症胰腺炎大鼠胰腺组织病理改变,抑制胰腺组织TNF-α、IL-1β的mRNA表达可能是防治重症胰腺炎的作用机制之一。     

重组人内抑素对佐剂关节炎大鼠血清中肿瘤坏死因子-a、白细胞介素-6和瘦素表达水平的影响

目的研究重组人内抑素(endostatin,ES)对大鼠佐剂关节炎(AA)血清中TNF-a(肿瘤坏死因子-a)IL-6(白细胞介素-6)以及Leptin(瘦素)表达水平的影响,以探讨ES对AA的治疗作用。方法给大鼠右后足跖部皮内注射完全弗氏佐剂(CFA)建立AA模型。在致炎后第10天,大鼠继发性关节炎出现,开始在治疗组AA大鼠皮下注射内抑素2.5 mg/kg,连续7 d。直至第24天大鼠足爪肿胀度的抑制有显著性时,用放免法(RIA)测定大鼠血清中TNF-aI、L-6及Leptin的表达水平。结果治疗组AA大鼠血清中TNF-aI、L-6、Leptin水平低于造模组,血清中Leptin的表达水平与TNF-aI、L-6呈显著正相关。结论重组人内抑素对大鼠佐剂关节炎的继发炎症有明显抑制作用。治疗组血清中Leptin的表达水平与TNF-aI、L-6呈显著正相关。     

白细胞介素-10对内毒素诱导急性肺损伤大鼠炎症因子的影响

目的研究白细胞介素-10(IL-10)对内毒素诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织炎症因子mRNA表达的影响,探讨IL-10对急性肺损伤的保护作用。方法24只SD大鼠随机分为3组:对照组,实验组,治疗组。实验组于尾静脉注射内毒素,治疗组注射内毒素和IL10,对照组注射生理盐水。测定各组肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)mRNA表达和血浆TNF-α、IL-1β和IL-6水平,观察各组大鼠肺组织的病理改变。结果TNF-α、IL-1β和IL6mRNA的表达:实验组、治疗组高于对照组,P<0.01;实验组高于治疗组,P<0.05。血浆TNF-α、IL1-β、IL-6:实验组高于治疗组对照组,P<0.05。肺组织病理改变:治疗组明显轻于实验组。结论IL10能抑制内毒素诱导ALI大鼠肺组织中TNF-α、IL-1β和IL6mRNA的表达,降低血浆炎症因子水平,减轻肺组织的病理损害,能起到治疗ALI的作用。     

佐剂性关节炎大鼠肺功能、肺部HRCT及细胞因子的变化

目的观察佐剂性关节炎(ad juvant arthritis,AA)大鼠的肺功能、肺部HRCT改变及细胞因子(TNF-α、IL-10)的变化。方法将24只大鼠随机分为正常组、模型组,每组12只,向模型组动物右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 m l致炎。致炎48 d后行肺功能测定、肺部HRCT扫描并留取血液标本以备测定细胞因子,同时观察两组大鼠足跖肿胀度及关节炎指数。结果与正常组比较,模型组用力肺活量(FVC)、第一秒用力呼气容积(FEV1)、25%肺活量的最大呼气流量(FEF25)、50%肺活量的最大呼气流量(FEF50)、最大呼气中段流量(MMEF)、最大呼气流量(PEF)显著降低(P<0.05或P<0.01)。模型组大鼠HRCT表现为肺轮廓欠清晰,肺部血管影扩张,边缘模糊且不规则,两肺有索条状密度增高影,邻近胸膜轻度肥厚。模型组TNF-α显著升高(P<0.05),IL-10显著降低(P<0.01)。相关分析发现,大鼠肺功能参数FVC、FEV1、FEF25、FEF50、MMEF、PEF与足跖肿胀度呈负相关;FEV1、FEF25、FEF50、MMEF、PEF与TNF-α呈负相关;PEF与IL-10呈正相关、与TNF-α呈正相关,足跖肿胀度与IL-10呈负相关。结论AA大鼠存在肺功能减退,肺部影像学改变,其机制可能与细胞因子网络失衡有关。     

基于调节性T细胞研究雷公藤多苷片对佐剂性关节炎大鼠肺功能的影响

目的:观察雷公藤多苷片对佐剂性关节炎(AA)大鼠足跖肿胀度(E)、关节炎指数(AI)、肺系数(LI)、肺功能、细胞因子、调节性T细胞(Treg)及肺组织Foxp3表达的影响.方法:将48只大鼠随机分为正常对照(NC)组、模型对照(MC)组、甲氨喋呤(MTX)组、雷公藤多苷片(TPT)组,每组12只,除NC组外的其余大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(FCA)0.1ml致炎,致炎后第19d开始给药.NC组及MC组均给予生理盐水,其余5组分别给予MTX、TPT.观察各组大鼠各指标的变化.结果:①与NC组相比,MC组大鼠E、AI、LI、1秒内平均呼气流量(FEV1/FVC%)、肺泡炎积分、TNF-α、ET-1表达明显升高(P<0.01);用力肺活量(FVC)、25%肺活量的最大呼气流量(FEF25)、50%肺活量的最大呼气流量(FEF50)、75%肺活量的最大呼气流量(FEF75)、最大呼气中期流量(MMF)、用力最大呼气流量(PEF)、IL-10、CD4+Treg、CD4+CD25+Treg、Foxp3的表达显著降低(P<0.01);②与MC组相比,各治疗组大鼠体质量、FVC、FEF25、FEF50、FEF75、MMF、PEF及IL-10、Treg、Foxp3的表达升高(P<0.05或P<0.01);E、AI、LI、FEV1/FVC%及TNF-α、ET-1降低(P<0.05或P<0.01);③与MTX组相比,TPT组LI、肺泡炎积分及ET-1降低;体质量、FVC、FEF25、FEF50、FEF75、MMF、PEF及血清IL-10、CD4+CD25+Treg、Foxp3表达升高(P<0.05或P<0.01).结论:AA大鼠存在肺组织形态变化和肺功能的降低,肺功能表现为通气功能及小气道功能障碍;TPT不但能抑制AA大鼠足跖肿胀度,降低关节炎指数,改善关节症状,也能显著降低肺组织炎症反应,其机制是通过上调血清IL-10、Treg及Foxp3的表达,下调血清TNF-α、ET-1及肺组织ET-1的表达,降低免疫复合物的沉积,减少炎症反应对肺组织的损伤,从而改善肺功能.     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠心功能及血清细胞因子、调节T细胞的影响

目的观察新风胶囊对佐剂性关节炎(AA)大鼠心功能及血清细胞因子、调节T细胞的影响。方法将60只大鼠随机分为健康对照组(NC)、模型对照组(MC)、甲氨喋呤(MTX)组、雷公藤多苷片(TGT)组和新风胶囊(XFC)组,每组12只,分别向除健康对照组以外的其余动物右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 ml致炎,致炎后第19天开始给药。健康对照组及模型对照组均给予0.9%氯化钠注射溶液,其余三组分别给予MTX、TGT、XFC。观察各组大鼠足跖肿胀度(E)、关节炎指数(AI)、心功能、血清细胞因子(TNF-α、IL-17、BNP、IL-10)、调节T细胞(CD4+Treg,CD4+CD25+Treg)的变化。结果与MC组比较,XFC组HI、LVSP和LVEDP显著降低(P<0.05),+dp/dtmax显著升高(P<0.05);与XFC组比较,MTX组体质量显著降低(P<0.01),E、AI、LVSP显著升高(P<0.05),+dp/dtmax显著降低(P<0.05)。与MC组比较,XFC组TNF-α、IL-17、BNP显著降低(P<0.05或P<0.01),IL-10、CD4+Treg、CD4+CD25+Treg显著升高(P<0.01);XFC组与其余两治疗组无显著差异(P>0.05)。结论 AA大鼠存在不同程度的心功能变化。新风胶囊在改善AA大鼠足跖肿胀度、关节炎指数的同时,也能改善其心功能,其机制可能与新风胶囊抑制异常炎症免疫反应有关。     

来氟米特对糖尿病肾病大鼠炎性因子的影响研究

目的研究免疫抑制剂来氟米特对糖尿病肾病(DN)模型大鼠血清及肾组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法成年健康清洁级SD雄性大鼠45只,随机分为假手术组(15只)、模型组(15只)和来氟米特组(15只)。制作DN大鼠模型成功后,采用ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平,并采用RT-PCR方法检测3组大鼠肾组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达。结果 ELISA法检测结果显示,模型组与来氟米特组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α均显著高于假手术组,差异有统计学意义(P0.05);来氟米特组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平较模型组降低,差异有统计学意义(P0.05)。RT-PCR检测结果表明,与假手术组大鼠比较,模型组和来氟米特组肾组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达量均显著升高,差异有统计学意义(P0.05),而来氟米特组肾组织IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达则明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论来氟米特可以抑制DN大鼠肾组织炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达,从而延缓DN进展。     

青藤碱对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞核因子κB信号转导的影响及其机制

背景青藤碱是从中药青风藤中提取的生物碱单体,在治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)方面,具有较明确的疗效,但其治疗机制尚不清楚.目的观察不同剂量的青藤碱体外作用对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠滑膜细胞核因子-κB(NF-κB)活性及肿瘤坏死因子(TNF-αmRNA、白细胞介素1β(IL-1β)mRNA、白细胞介素10(IL-10)mRNA的影响,以阐明该药治疗RA的可能机制.设计以细胞为研究对象,分组对照的重复测量设计.单位一所军医大学医院的中医科和烧伤研究所.材料实验于2002-03/2002-10在全军烧伤研究所实验室完成.实验动物为健康清洁级雄性Wistar大鼠25只.以AA大鼠为模型,收集滑膜细胞,依次作如下分组正常对照组,AA组,AA+青藤碱30 mg/L组,AA+青藤碱60 mg/L组,AA+青藤碱120 mg/L组.电泳迁移率改变分析法测NF-κB的活性,反转录PCR检测TNF-α mRNA,IL-1β mRNA,IL-10 mRNA的表达.主要观察指标不同剂量的青藤碱体外作用对后佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞NF-κB活性,TNF-1β mRNA,IL-1β mRNA及IL-10 mRNA的对比结果.结果与正常对照组相比,AA后滑膜细胞内NF-κB活性与TNF-α mR-NA,IL-1β mRNA,IL-10 mRNA的表达均显著升高,分别为17±6,0.570±0.047,0.730±0.093,0.683±0.081(t=2.71～4.07,P<0.05).经青藤碱作用后,NF-κB活性的变化趋势与TNF-α mRNA,IL-1 mRNA的相关性较好(r=0.810,P<0.001;r=0.562,P<0.05),与IL-10 mRNA无统计学上的相关性,青藤碱在一定的浓度范围(30～120 mg/L)内呈浓度依赖性抑制NF-κB活性与TNF-α mR-NA,IL-1β mRNA的表达,而对IL-10 mRNA的抑制效应与浓度无关.结论青藤碱可能通过抑制NF-κB活性而降低滑膜细胞内TNF-α mR-NA及IL-1β mRNA的表达.     

新风胶囊对佐剂性关节炎大鼠滑膜和胸腺Fas、FasL、Bcl-2的影响

目的:观察新风胶囊(XFC)治疗佐剂性关节炎(AA)模型大鼠的疗效及对滑膜和胸腺Fas、FasL、Bcl-2的影响.方法:采用弗氏完全佐剂制备AA模型,设立正常对照组、模型对照组、甲氨喋呤(MTX)对照组、雷公藤(TPT)对照组和XFC治疗组;记录各组大鼠的足跖肿胀度、关节炎指数(AI);以免疫组织化学(组化)法检测各组大鼠滑膜和胸腺的Fas、FasL、Bcl-2的表达情况.结果:XFC可抑制模型大鼠的足跖肿胀程度,降低AI(P均<0.01).模型对照组大鼠滑膜及胸腺组织中Fas、Bcl-2表达均增加,FasL均无明显表达;与模型对照组比较,XFC治疗组滑膜及胸腺组织中FasL表达增加,Bcl-2表达减少.结论:XFC可以抑制模型大鼠足跖肿胀度,降低AI,促进滑膜和胸腺细胞凋亡,抑制滑膜组织增生及抑制自身免疫反应可能是XFC治疗类风湿性关节炎的部分作用机制.     

新风胶囊对AA大鼠心功能及血清细胞因子、调节T细胞的影响

目的:观察新风胶囊对佐剂性关节炎(AA)大鼠心功能及血清细胞因子、调节T细胞的影响.方法:将60只大鼠随机分为正常对照(NC)组、模型对照(MC)组、甲氨喋呤(MTX)组、雷公藤多苷片(TGT)组和新风胶囊(XFC)组,每组12只,分别向除正常对照组以外的其余动物右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1ml致炎,致炎后第19天开始给药.正常对照组及模型对照组均给予生理盐水,其余3组分别给予MTX、TGT、XFC.观察各组大鼠足跖肿胀度(E)、关节炎指数(AI)、心功能、血清细胞因子(TNF-α、IL-17、BNP、IL-10)、调节T细胞(CD4+Treg,CD4+CD25+Treg)的变化.结果:①与NC组比较,MC组的E、AI、心脏质量指数(HI)、左室收缩末压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)显著升高(P<0.05),左室内压上升/下降最大速率(±dp/dtmax)显著降低(P<0.05);与MC组比较,XFC组HI、LVSP和LVEDP显著降低(P<0.05),+dp/dtmax显著升高(P<0.05);与XFC组比较,MTX组体重显著降低(P<0.01),E、AI、LVSP显著升高(P<0.05),+dp/dtmax显著降低(P<0.05).②与NC组比较,MC组TNF-α、IL-17、脑利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)显著升高(P<0.05),IL-10、CD4+Treg、CD4+CD25+Treg显著降低(P<0.01);与MC组比较,XFC组TNF-α、IL-17、BNP显著降低(P<0.05或P<0.01),IL-10、CD4+Treg、CD4+CD25+Treg显著升高(P<0.01);XFC组与其余2个治疗组无显著差异(P>0.05).结论:AA大鼠存在不同程度的心功能下降,新风胶囊在改善AA大鼠足跖肿胀度、关节炎指数的同时,也能改善其心功能,其机制可能是新风胶囊调节免疫反应,抑制异常炎症免疫反应对心肌细胞损害,从而改善心功能.     

脑出血大鼠模型血清内毒素和肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β表达与多器官功能障碍综合征的关系探讨

目的:探讨急性脑出血致多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠模型血清内毒素和肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β的基因表达变化规律.方法:将54只Wistar大鼠按随机化原则分为9组:正常对照组6只;假手术组6只;脑出血组42只,分为4、8、12、24、36、48和72小时时相点的7个亚组,每亚组6只.尾状核内注射Ⅶ型胶原酶0.8 U建立脑出血致MODS模型.采用偶氮显色法鲎试验定量测定血清内毒素含量,采用原位杂交技术测定肺脏、肝脏、小肠和肾脏组织TNF-αmRNA、IL-1βmRNA水平;使用CMIA真彩色医学图像分析系统,检测TNF-αmRNA、、IL-1βmRNA的相对含量.结果:脑出血组血清内毒素含量较正常对照组、假手术组明显升高(P＜0.01,P＜0.001),于术后8小时开始升高, 24～36小时达高峰,72小时仍维持较高水平.脑出血组肺脏、肝脏、小肠和肾脏组织TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达自8小时开始升高,24～36小时达高峰,12～48小时各器官组织与正常组和假手术组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);肺脏、肝脏、小肠和肾脏组织中TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达与血清内毒素均存在显著相关性.结论:脑出血致MODS大鼠模型存在内毒素血症,TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的异常表达与血清内毒素显著相关,提示内毒素血症刺激炎症因子TNF-α、IL-1β的异常释放,诱发全身炎症反应,导致MODS的发生.     

丹参酮IIa对佐剂性关节炎大鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α水平及滑膜MMP3/TIMP1表达的影响

目的:观察丹参酮IIa对佐剂性关节炎大鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α水平及滑膜MMP3/TIMP1表达的影响。方法:用Freund's完全佐剂复制AA大鼠模型,并设正常组、模型组、丹参酮IIa组、来氟米特组、配伍组。用放射免疫法测定IL-1、IL-6、TNF-α水平,应用免疫组化检测滑膜组织中的MMP3及TIMP1的表达。结果:模型组的IL-1、IL-6、TNF-α水平明显高于正常对照组(P<0.01),用药后各组的细胞因子水平较模型组降低(P<0.05),配伍组的降低更明显(P<0.01)。模型组大鼠滑膜组织MMP3表达阳性密度显著高于正常对照组(P<0.01);与模型组比较,各用药组的MMP3表达阳性密度均降低(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠滑膜组织TIMP1的表达阳性密度明显降低(P<0.05);各用药组的TIMP1表达阳性密度均高于模型组。结论:丹参酮IIa能够明显降低血清IL-1、IL-6、TNF-α水平;减少滑膜组织中MMP3的表达,增加TIMP1的表达,所以可以有效治疗RA。