激素替代治疗对去卵巢大鼠动脉雌激素受体表达的影响

目的　研究雌、孕激素替代治疗时去卵巢大鼠动脉壁雌激素受体 (ER)的表达。　方法　将 40只成年雌性大鼠随机分为 4组 :假手术对照组、去卵巢组、去卵巢 雌激素治疗组、去卵巢 雌孕激素治疗组。给予正常饮食 ,2个月后处死大鼠。用放免法检测血清中雌二醇和孕酮浓度 ,用放射配体结合分析法检测大鼠主动脉ER的含量。　结果　 (1)正常雌性成年大鼠 (假手术对照组 )主动脉中存在ER ,解离常数 (Kd)为 (3 0± 0 7)× 10 -9,最大结合容量 (Bmax)为 (37 4± 7 9)pmol/g蛋白 ;(2 )去卵巢组大鼠动脉ER的Bmax〔(10 4± 5 9)pmol/g蛋白〕显著低于假手术组 (P <0 0 1) ;(3)去卵巢 雌激素治疗组与去卵巢 雌孕激素治疗组动脉ER的Bmax差别无显著性〔(分别为 (40 7± 7 5 )和(35 1± 4 5 )pmol/g蛋白〕 ,二者都显著高于去卵巢组 ;各组间Kd值差别无显著性。　结论　去卵巢2个月后大鼠主动脉的ER表达显著减少 ,补充雌激素或补充雌、孕激素能使去卵巢大鼠主动脉ER的含量维持在正常水平 ,这可能是雌激素对绝经后妇女心血管保护作用的机制之一。     

雷洛昔芬对血管内皮素-1基因mRNA表达的影响及与雌激素受体的关系

目的　观察选择性雌激素受体调节剂雷洛昔芬 (Raloxifene)对血管内皮细胞内皮素 1基因mRNA表达的影响 ,并探讨Raloxifene的作用是否通过雌激素受体机制介导。　方法　采用Raloxifene处理培养的牛颈动脉内皮细胞 2 4h ,然后提取细胞总RNA ,取 2 0ug进行Northernblotting分析 ,观察Raloxifene对血管内皮细胞内皮素 1基因mRNA表达的影响 ,同时采用雌激素受体阻断剂ICI182 780处理细胞 ,观察内皮素 1基因表达的变化。　结果　与未经Raloxifene处理的细胞相比 ,Raloxifene处理后的血管内皮细胞内皮素 1基因mRNA表达明显降低〔分别为 (0 16± 0 0 5 ) ,(0 39± 0 0 7) ,P <0 0 5〕若同时应用ICI182 780处理 ,内皮素 1mRNA表达增强 (0 6 9± 0 0 8,P <0 0 5 ) ,Raloxifene的作用被阻断。　结论　选择性雌激素受体调节剂Raloxifene通过雌激素受体机制抑制血管内皮细胞内皮素 1基因表达。     

老年人良性前列腺增生中雌激素受体与血清雌激素及催乳素水平的研究

收集良性前列腺增生（BPH）标本22例．正常前列腺标本6例，测定组织中胞浆和胞核雌激素受体（ER）含量，还测定了其中20例BPH病人和16例健康人血清雌二醇（E2）、健乳素（PRL）水平。结果表明，BPH组胞浆ER含量（9．23±1．06fmol／mg蛋白）高于正常组（4．55±1.11fmol／mg蛋白）（P＜0．05）．血清PRL水平，BPH组（11．87±1.28μg／L）高于正常组（6.50±0．75μg/L）（P＜0．01）。两组血清雌激素水平差异无显著意义．BPH组血清PRL与前列腺胞核ER含量是正相关（n=20，r=0．532，P＜0.02）。提示雌激素及其受体与催乳素同BPH的发生、发展有关。     

雌激素对兔动脉粥样硬化形成及某些体液因子的影响

目的　建立雌激素抗兔动脉粥样硬化模型 ,阐明雌激素作用的可能机制。　方法　 2 1只纯种新西兰兔随机分入 :A组 (切除卵巢未补充雌激素 )、B组 (切除卵巢补充雌激素 )、C组 (未切除卵巢 ) ,给予 1%胆固醇饮食 ,8周时比较动脉形态学变化 ,测定动脉一氧化氮及一些体液因子。　结果　 (1) A组兔主动脉内膜面积〔(1.35± 0 .44 ) m m2 〕高于 B、C组〔(0 .2 0± 0 .2 9)及 (0 .34± 0 .2 9) mm2 〕(P<0 .0 5 ) ;(2 ) A组兔内皮素 - 1高于 B组及 C组 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1) ,血浆肾素活性、血管紧张素 高于 C组 (P<0 .0 5 ) ;(3) B、C组血浆雌二醇〔(2 12± 78)及 (2 2 9± 10 3) ng/ L〕和主动脉一氧化氮〔(0 .41± 0 .18)及 (0 .44± 0 .16 ) nmol/ m g〕高于 A组〔(10 3± 6 9) ng/ L及 (0 .2 5± 0 .0 6 ) nm ol/ m g〕(P<0 .0 5 )。　结论　雌激素可明显抑制动脉粥样硬化形成 ,可能与促进一氧化氮生成、抑制内皮素生成、抑制肾素血管紧张素系统活性有关。     

雌激素通过受体介导的通路影响大鼠心脏心钠素表达

目的研究雌激素对卵巢切除大鼠心脏雌激素受体(ER)α和β的调控及对血压、心率、心肌细胞心钠素(ANP)基因表达、合成和释放的影响。方法成年雌性Wistar大鼠随机分成5组假手术组,卵巢切除组和卵巢切除不同剂量17β-雌二醇组(80、800、8000ng·g-1·d-1)。测量大鼠收缩期血压(SBP)、心率;采用半定量RT-PCR和Western印迹方法,探讨不同剂量的17β-雌二醇对卵巢切除大鼠心脏ERα和ERβmRNA、ER蛋白质的表达调控及对ANPmRNA表达的影响;放射免疫方法测定血浆和心房组织ANP含量。结果超生理剂量的17β-雌二醇能降低卵巢切除大鼠SBP,减慢心率;成年雌性大鼠心脏ERαmRNA高于ERβmRNA的表达水平,而心房ERαmRNA表达又明显超过心室;卵巢切除减少心房ERαmRNA和蛋白质的表达,下调ANPmRNA,使心房组织和血浆ANP含量明显降低[(121±19)ng/mg组织vs(184±12)ng/mg组织,(196±21)ng/Lvs(288±36)ng/L,P<0.01];生理剂量17β-雌二醇能逆转上述改变。随剂量增加,17β-雌二醇的这种作用在一定程度上呈剂量依赖性关系。但卵巢切除和17β-雌二醇替代并不影响心脏ERβmRNA、心室ERαmRNA表达。结论超生理剂量雌激素可降低卵巢切除大鼠SBP,心率;ERα的高水平表达说明ERα是雌激素对心脏调控的优势受体;雌激素对心脏作用的主要靶部位是心房;雌激素促进心房肌细胞ANPmRNA的表达、合成和释放,通过受体依赖的ANP介导的通路发挥作用。     

性激素水平及平衡对大鼠血管内皮细胞增殖的调节作用及意义

目的　探讨雌、雄及孕激素分别对雌、雄性大鼠肺血管内皮细胞 (VEC)增殖的影响。方法　采用组织贴块法培养大鼠肺血管内皮细胞 ,应用噻唑蓝 (MTT)比色法检测大鼠VEC的增殖情况。结果　 (1) 3× 10 -8mol/L、3×10 -7mol/L 17 β雌二醇 (E2 )可促进雌鼠肺VEC的增殖 (P <0 .0 1) ;3× 10 -9mol/L、3× 10 -8mol/L、3× 10 -7mol/L 17 βE2 均能促进雄鼠VEC的增殖 (P<0 .0 5 ) ,各组间无明显差异。雌激素受体拮抗剂他莫昔芬可阻断 17 βE2 上述促增殖作用。 (2 ) 3× 10 -8mol/L、3× 10 -7mol/L睾酮 (T)均可明显促进雄鼠VEC的增殖(P <0 .0 5 ) ,但对雌鼠VEC增殖无促进作用。 (3)E2 /孕激素 (P) =3/ 10时能促进雌鼠VEC的增殖 (P<0 .0 5 )。(4)E2 /T =1亦可促进雌鼠VEC增殖 (P<0 .0 5 )。结论　雌激素可促进雌、雄性大鼠VEC的增殖 ,其促增殖作用无性别差异 ,且通过雌激素受体 (ER)介导。雄激素仅可促进雄性大鼠VEC增殖 ,单纯孕激素对雌鼠VEC增殖无明显影响。E2 /T、E2 /P比值的平衡对雌鼠VEC的增殖也起重要作用     

碱性成纤维细胞生长因子诱导老年大鼠心肌细胞保护及其机制研究

目的　探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对老年大鼠心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤的影响及其保护机制。　方法　在分离的老年大鼠心肌细胞H/R模型上,观察bFGF预孵育对H/R后心肌细胞乳酸脱氢酶（LDH）漏出、ATP含量和细胞存活率的影响,并采用滤纸法测定心肌细胞外信号调节激酶(ERKs)活性的变化。　结果　bFGF激活ERKs,并呈剂量依赖性减轻H/R所致心肌细胞损伤,表现为细胞存活率〔bFGF10ng组(70.0±4.6)%,H/R组(53.0±4.5)%,P＜0.01〕和细胞内ATP含量〔bFGF10ng组(23.1±2.3)nmol/106细胞,H/R组(12.3±2.1)nmol/106细胞,P＜0.01〕升高,细胞浆酶LDH漏出〔bFGF10ng组（257.3±51.0）U/L,H/R组（372.5±69.2）U/L,P＜0.05〕减少;ERKs上游激酶抑制剂PD098059完全消除上述保护作用〔PD098059组细胞存活率（57.0±5.8）%,ATP含量（15.1±2.6）nmol/106细胞,培养液中LDH活性（325.5±59.0）U/L,与bFGF10ng组比较均为P＜0.01〕。　结论　bFGF可以提高老年大鼠心肌细胞对于缺氧的耐受性,其保护机制涉及ERKs的活化。     

腺病毒相关病毒载体介导人β2肾上腺素能受体、增强型绿色荧光蛋白基因导入心肌细胞的表达

目的探讨充血性心力衰竭(心衰)及其他心脏疾病的基因治疗途径.方法构建携带人β2肾上腺素能受体(β2-AR)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双基因的腺病毒相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)载体,感染大鼠的心肌细胞,检测心肌细胞β2-AR、EGFP的表达及环腺苷酸(cAMP)的含量.结果Northern印迹杂交显示感染的心肌细胞表达人β2-ARmRNA;Western免疫印迹杂交分析表明感染的心肌细胞有人β2-AR;在荧光显微镜下可观察到心肌细胞表达EGFP;放射性配基检测显示感染的心肌细胞β-AR密度[(204.0±6.4)fmol/mg蛋白]明显高于未感染的心肌细胞[(76.0±2.8)fmol/mg蛋白,P＜0.01];经10μmol/L异丙肾上腺素作用,感染的心肌细胞的cAMP含量[(116.2±5.8)pmol/106cells]明显高于对照组[(58.4±4.6)pmol/106cells,P＜0.01].结论人β2-AR、EGFP基因经AAV载体导入心肌细胞后能有效地表达,且表达的人β2-AR具有激活肾上腺素信号的作用.     

雌激素替代治疗时大鼠动脉雌激素受体及一氧化氮合酶活性的变化

目的观察激素替代治疗时大鼠动脉雌激素受体(ER)的表达及一氧化氮合酶(NOS)的活性。方法建立大鼠雌激素替代治疗模型,用放射配体结合分析法检测主动脉ER的含量,血红蛋白还原酶法检测主动脉中NOS的活性：结果卵巢切除去势组大鼠动脉ER的结合容量及NOS活性显低于假手术组;切除卵巢后补充雌激素鼠动脉ER的结合容量及NOS活性都显高于单纯卵巢切除去势组。结论雌性大鼠去势2个月后,主动脉表达ER显减少,NOS活性显减低,补充适量雌激素能使去势大鼠动脉NOS的活性显增强,ER的含量维持在正常水平。这可能是雌激素对绝经后妇女心血管保护作用的重要机制。     

天香丹减轻心肌缺血损伤的作用机制研究

目的 研究天香丹胶囊激活雌激素受体α(ERα)抑制铁死亡减轻心肌缺血损伤的机制。方法 将70只SD雌性大鼠（210±40）g随机分组,建立去势模型,灌胃60 d,可逆性结扎冠状动脉（冠脉）左前降支30 min,进行心功能数据实时监测;检测血清中雌激素和cTnI含量;检测心肌组织中丙二醛（MDA）、氧化型谷胱甘肽（GSH-PX）、超氧化物歧化酶（SOD）、Fe2+含量;苏木精-伊红（HE）染色观察心肌组织形态;Western blot检测心肌中的蛋白ERα、长链脂酰CoA合成酶4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)。结果 去势后,各组比空白组雌激素水平显著降低;在给药60 d后,给药组比模型组雌激素水平升高,而肌钙蛋白（cTnI）含量降低;给药组比模型组Fe2+、MDA含量降低,GSH-PX、SOD含量增加;HE染色显示给药组对心脏表现出不同程度的保护作用;Western blot结果显示给药组比模型组中ERα、GPX4、FTH1的蛋白表达增强,而ACSL4蛋白的表达显著减小,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 通过上述试验推测天香丹胶囊激...     

妊娠时间与肺结核复发的相关性研究及诊治对策

目的 分析肺结核史患者妊娠时间和肺结核复发间相关性.方法 选取我院收治的有肺结核史的妊娠妇女576例作为研究对象,对其妊娠前肺结核治疗、治愈后妊娠时间、妊娠后复发肺结核等进行分析,总结有肺结核史育龄女性的妊娠时间和肺结核复发之间的关系.结果 肺结核治愈后不同时间段妊娠者的结核复发率比较,差异具有显著性（P＜0.05）,停药后间隔时间越久妊娠,肺结核复发的几率越小.结论 加强孕期痰菌检查,及早发现复发肺结核,提高母婴安全.     

我国骨关节结核诊治的回顾与展望

骨关节结核是危害人们健康的严重感染性疾病,近95％由他处结核病继发而来.罹患骨关节结核疾病后几乎均将致残,严重影响人们的健康、工作和生活.建国以来在党和国家的关心和支持下,骨关节结核的诊治水平取得了长足进步.时至今日,由于多种原因,学科发展和被重视程度受到一定的制约,同整个医疗行业的发展不相适应.回顾过去,展望未来,我们需要重新审视骨关节结核的诊治方法,努力推进骨关节结核诊疗技术的科学发展.     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fos and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44~(MAPK), p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44~(MAPK), p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44~(MAPK) and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between P42/44~(MAPK) and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Raf/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44~(MAPK), c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

Replication and Inhibitors of Enteroviruses and Parechoviruses

The Enterovirus (EV) and Parechovirus genera of the picornavirus family include many important human pathogens, including poliovirus, rhinovirus, EV-A71, EV-D68, and human parechoviruses (HPeV). They cause a wide variety of diseases, ranging from a simple common cold to life-threatening diseases such as encephalitis and myocarditis. At the moment, no antiviral therapy is available against these viruses and it is not feasible to develop vaccines against all EVs and HPeVs due to the great number of serotypes. Therefore, a lot of effort is being invested in the development of antiviral drugs. Both viral proteins and host proteins essential for virus replication can be used as targets for virus inhibitors. As such, a good understanding of the complex process of virus replication is pivotal in the design of antiviral strategies goes hand in hand with a good understanding of the complex process of virus replication. In this review, we will give an overview of the current state of knowledge of EV and HPeV replication and how this can be inhibited by small-molecule inhibitors.     

Effect of phosphorylation of MAPK and Stat3 and expression of c-fas and c-jun proteins on hepatocarcinogenesis and their clinical significance

AIM To study the effect of phosphorylation ofMAPK and Stat3 and the expression of c-fos andc-jun proteins on hepatocellular carcinogenesisand their clinical significance.METHODS SP immunohistochemistry was usedto detect the expression of p42/44MAPK, p-Stat3,c-fos and c-jun proteins in 55 hepatocellularcarcinomas (HCC) and their surrounding livertissues.RESULTS The positive rates and expressionlevels of p42/44MAPK, p-Stat3, c-fos and c-junproteins in HCCs were significantly higher thanthose in pericarcinomatous liver tissues (PCLT).A positive correlation was observed between theexpression of p42/44MAPK and c-fos proteins, andbetween p-Stat3 and c-jun, but there was nosignificant correlation between p42/44MAPK and p-Stat3 in HCCs and their surrounding livertissues.CONCLUSION The abnormalities of Ras/Rat/MAPK and JAKs/ Stat3 cascade reaction maycontribute to malignant transformation ofhepatocytes. Hepatocytes which are positive forp42/ 44MAPK, c-fos or c-jun proteins may bepotential malignant pre-cancerous cells.Activation of MAPK and Stat3 proteins may be anearly event in hepatocellular carcinogenesis.     

心电图、心电向量图与冠状动脉造影结果对比分析

目的:通过分析心电图(Electrocardiogram,ECG)和心电向量图(Vectorcardiogram,VCG)的改变与冠脉造影（CAG）结果进行对比,探讨ECG、VCG在冠状动脉病变中的诊断价值。方法: 选择2008年1月~2009年12月临床拟诊断为冠心病患者108例,行常规ECG、VCG检查,并于1周内进行CAG,对检查结果依据各自的诊断标准进行判定,以CAG为标准诊断法,利用四格表法,计算相关评价真实性的指标并进行比较。结果: ①VCG检测的灵敏度、特异度、准确度显著高于ECG(P<0.05,P<0．01)。②ECG、VCG阳性率与冠脉病变支数组间比较:在单支病变、双支病变中,VCG阳性率明显高于ECG(P<0.05),左主干或三支病变无统计学意义;组内比较:ECG组左主干或三支病变组较单支病变、双支病变阳性率高(P<0.05,P<0.01);VCG组左主干或三支病变组较单支病变阳性率高(P<0.05);与双支病变阳性率比较无统计学意义;③ECG、VCG阳性率与冠脉病变程度组间比较:冠脉病变狭窄50%～69%的VCG阳性率明显高于ECG (P<0.05),其他两组阳性率比较无统计学意义;组内比较:ECG组冠脉病变狭窄≥90%较50%～69%、70%～89%的阳性率高(P<0.05,P<0.01); VCG组狭窄≥90%较50%～69%阳性率高（P<0.01),其他无统计学意义。结论: VCG对冠心病检测价值显著高于ECG。     

Detection and characterization of the product of hydroethidine and intracellular superoxide by HPLC and limitations of fluorescence

Here we report the structural characterization of the product formed from the reaction between hydroethidine (HE) and superoxide (O(2)(.-)). By using mass spectral and NMR techniques, the chemical structure of this product was determined as 2-hydroxyethidium (2-OH-E(+)). By using an authentic standard, we developed an HPLC approach to detect and quantitate the reaction product of HE and O(2)(.-) formed in bovine aortic endothelial cells after treatment with menadione or antimycin A to induce intracellular reactive oxygen species. Concomitantly, we used a spin trap, 5-tert-butoxycarbonyl-5-methyl-1-pyrroline N-oxide (BMPO), to detect and identify the structure of reactive oxygen species formed. BMPO trapped the O(2)(.-) that formed extracellularly and was detected as the BMPO-OH adduct during use of the EPR technique. BMPO, being cell-permeable, inhibited the intracellular formation of 2-OH-E(+). However, the intracellular BMPO spin adduct was not detected. The definitive characterization of the reaction product of O(2)(.-) with HE described here forms the basis of an unambiguous assay for intracellular detection and quantitation of O(2)(.-). Analysis of the fluorescence characteristics of ethidium (E(+)) and 2-OH-E(+) strongly suggests that the currently available fluorescence methodology is not suitable for quantitating intracellular O(2)(.-). We conclude that the HPLC/fluorescence assay using HE as a probe is more suitable [corrected] for detecting intracellular O(2)(.-).     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养和外源基因的导入

目的探讨绿色荧光蛋白基因转染骨髓间质干细胞的可行性。方法采用F icoll-PaqueTMP lus淋巴细胞分离液,根据细胞密度梯度原理,分离大鼠骨髓间充质干细胞(rM SC s)并进行体外原代培养和传代扩增,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,免疫细胞化学法对其初步鉴定。流式细胞仪分析转染效率。结果原代和传代培养的细胞呈现梭形外观,具有较强的生长增殖能力;细胞均一表达CD44、CD54、CD106、CD29抗原。电穿孔法转染rM SC s转染率为32.8%±3%。结论采用比重为1.077 g/L的F icoll-PaqueTMP lus能分离获得大鼠骨髓间充质干细胞,经原代培养和传代培养能够迅速扩增。电穿孔法具有较高的介导外源基因表达于rM SC s的效率。     

Overweight and Obesity and Progression of ADPKD

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医源性消化道出血常见病因及其防治

目的分析医源性消化道出血的常见病因,并探讨防治措施。方法就临床所见的69例医源性消化道出血进行分析。结果医源性消化道出血分布于临床各科室,病因各不相同,但以外科手术、外伤、脑血管意外、。肾功能衰竭、呼吸功能衰竭、激素治疗、阿司匹林治疗等为主,临床上多以黑便为主要症状;对于已发生的医源性消化道出血,及时予制酸剂和胃黏膜保护剂治疗,能及时止血,大出血时经积极止血及抗休克治疗,甚至内镜治疗效果良好。结论医源性消化道出血各个临床科室均常见,病因各异,经积极、合理的治疗多预后良好。