钢铁厂冷却塔水嗜肺军团菌分离株分子流行病学研究

目的调查某钢铁企业冷却塔水嗜肺军团菌的污染状况及分子流行病学特征,为预防控制军团菌病的传播提供科学依据。方法 2011年3月—2012年9月,对石家庄市某钢铁厂车间冷却塔水进行监测,分离培养嗜肺军团菌,对得到的菌株进行血清分型、毒力基因检测(lvh、rtxA)和多位点序列分型研究。结果 182份冷却塔水中有67份检出嗜肺军团菌,检出率为36.8%;共分离培养得到菌株84株,包括7种血清型,其中LP1型占63.1%(53/84)、LP6型占19.0%(16/84)。lvh和rtxA基因检测阳性的分别有79株和83株,二者均为阳性的有78株。多位点序列分型可分为32个型,SBT1型占36.9%(31/84),为主要优势型别,有21个型别为首次发现。结论钢铁企业冷却水存在嗜肺军团菌污染,携带有毒力基因,血清型和SBT型呈多样性分布。     

漳州市2014年部分酒店/宾馆中央空调冷却塔/冷凝水嗜肺军团菌污染调查

目的调查2014年漳州市部分酒店(宾馆)中央空调冷却塔水及冷凝水嗜肺军团菌污染情况,为防控军团菌病提供依据。方法采集2014年漳州市15家三星级及以上酒店(宾馆)中央空调冷却塔水及冷凝水27份,进行军团菌分离培养及鉴定。结果 15家酒店(宾馆)中央空调嗜肺军团菌污染率60.0%,27份样品检出率33.3%,其中冷却塔水检出率66.7%,冷凝水检出率6.7%。共检出嗜肺军团菌12株,血清型多为LP1型(41.6%)。结论漳州市酒店(宾馆)中央空调冷却塔水及冷凝水嗜肺军团菌污染情况较严重,需加强监测,预防军团菌病发生。     

工业循环冷却塔水嗜肺军团菌分离株分子生物学特性研究

目的了解钢铁企业工业循环冷却塔水中的嗜肺军团菌污染状况及菌株分子生物学特性。方法于2011年3月—2012年9月对邯郸某钢铁厂相对固定的车间冷却塔水进行连续监测,进行嗜肺军团菌的定量分离培养,对分离到的菌株进行血清分型、脉冲场凝胶电泳分型、基因序列分型、毒力基因(lvh、rtx A)检测。结果共检测117份水样,其中20份水样检出嗜肺军团菌,检出率为17.1%;菌落总数为100~50 000 CFU/L,中位数为12 000 CFU/L;共分离到嗜肺军团菌23株,血清型包括Lp1、Lp3、Lp5、Lp6、Lp8,并以Lp1为主(占36.1%,9/23)。23株嗜肺军团菌PFGE分型得到19种不同带型,其中15种带型为国内首次发现。23株嗜肺军团菌分成20个SBT型别,有12个型别为本研究新发现。23株菌中,lvh、rtx A基因阳性的分别有20、22株,两种毒力基因全部阳性的有19株。结论钢铁企业的冷却塔水存在嗜肺军团菌污染,菌型呈现基因多态性,同时具有独特的基因组成,并普遍具有毒力。     

天河区公共场所中央空调冷却水嗜肺军团菌污染状况调查

目的:了解天河区公共场所中央空调冷却水嗜肺军团菌污染状况及血清型分布,为预防和控制军团菌病提供科学依据。方法:从2008年4月至2009年12月,采集天河区公共场所中央空调冷却水99份,应用GVPC、BCYE、BCY培养基进行嗜肺军团菌分离培养,进行血清分型及鉴定。结果:冷却塔冷却水中嗜肺军团菌检出率达14.1%,检出率在不同年度、季度及不同类型公共场所间无明显差异。分离嗜肺军团菌共14株,血清型以LP6、LP1为主,分别达总检出的43.0%(6/14)、35.7%(5/14)。结论:天河区公共场所中央空调冷却水中存在嗜肺军团菌污染,对人群构成潜在健康危害,应加强预防与控制工作。     

工业循环冷却塔水嗜肺军团菌分离株分子生学特性研究

目的 了解钢铁企业工业循环冷却塔水中的嗜肺军团菌污染状况及菌株分子生物学特性.方法 于2011年3月-2012年9月对邯郸某钢铁厂相对固定的车间冷却塔水进行连续监测,进行嗜肺军团菌的定量分离培养,对分离到的菌株进行血清分型、脉冲场凝胶电泳分型、基因序列分型、毒力基因(lvh、rtxA)检测.结果 共检测117份水样,其中20份水样检出嗜肺军团菌,检出率为17.1％;菌落总数为100～50000 CFU/L,中位数为12000 CFU/L;共分离到嗜肺军团菌23株,血清型包括Lp1、Lp3、Lp5、Lp6、Lp8,并以Lp1为主(占36.1％,9/23).23株嗜肺军团菌PFGE分型得到19种不同带型,其中15种带型为国内首次发现.23株嗜肺军团菌分成20个SBT型别,有12个型别为本研究新发现.23株菌中,lvh、rtxA基因阳性的分别有20、22株,两种毒力基因全部阳性的有19株.结论 钢铁企业的冷却塔水存在嗜肺军团菌污染,菌型呈现基因多态性,同时具有独特的基因组成,并普遍具有毒力.     

军团菌rcp毒力基因的聚合酶链反应检测方法研究

目的 建立军团菌rcp毒力基因聚合酶链反应(PCR)检测方法.方法 根据GenBanK公布的嗜肺军团菌核苷酸序列合成军团菌rcp毒力基因的特异引物,采用PCR方法对2005年-2007年天津市中央空调冷却塔分离的16株嗜肺军团菌、杜氏军团菌(Legionella dumoffii,L.dum)、博氏军团菌(Legionella bozemanii,L.boz)、长滩军团菌(Legionellafeeleii,L.fee)等菌株进行了军团菌毒力基因rcp的检测.结果 3株嗜肺军团菌扩增出了900 bp的rcp基因片段,其余菌株未扩增出该基因片段.结论 本研究建立的军团菌毒力基因rcp的PCR检测方法具有较高的特异性和敏感性,适于军团菌毒力基因的深入研究.

Abstract：

Objective To establish a polymerase chain reaction method for the detection of the rcp virulence gene of L. pneumophila. Methods Sixteen strains of Legionella pneumophila, L. dumiffii, L. bozemanii and L. Longbeachae isolated from the cooling towers of the centralized air-conditioning systems in Tianjin form 2005 to 2007 were detected by polymerase chain reaction method using L. pneumophila rcp virulence gene-specific primer according to GenBank published nucleotide sequence. Results The 900 bp rcp genetic fragment was amplified in three strains of L. pneumophila, while others not. Conclusion The rcp virulence gene-based polymerase chain reaction method for the detection of L. pneumophila has been successfully established and is the foundation for the studies of Legionella virulence.     

福建省嗜肺军团菌KatB基因分布研究

目的 了解福建省公共场所中央空调冷却塔水及冷凝水分离的嗜肺军团菌KatB基因携带状况.为该病防控提供基础研究资料.方法 采用PCR法对2008-2010年从其水中分离的84株菌株进行KatB基因检测.结果 从冷却塔水分离的78株中有25株扩增出了2.7 kb的KatB毒力基因片段.阳性率为32.1％;在25株阳性菌株中...     

山东省济南市公共场所集中空调冷却塔水军团菌污染状况调查

目的 了解2013-2022年山东省济南市公共场所集中空调冷却塔水的军团菌污染状况,分析菌株毒力基因携带情况,为军团菌污染防控提供科学数据。方法 参照《公共场所集中空调通风系统卫生规范》,2013-2022年对山东省济南市113家公共场所集中空调冷却塔水进行军团菌分离,通过生化培养及飞行时间质谱对疑似菌株进行鉴定。使用诊断血清对嗜肺军团菌进行分型。采用PCR方法扩增菌株的毒力基因lvh和rtxA,产物通过毛细管电泳判读。结果 2013-2022年采集山东省济南市113家公共场所集中空调冷却塔水样216份,47份分离到军团菌,检出率为21.8%(47/216)。获得军团菌81株,其中嗜肺军团菌占90.1%(73/81)。73株嗜肺军团菌中,有84.9%(62/73)同时携带lvh和rtxA两种毒力基因,1.1%(8/73)仅携带一种毒力基因。其余3株嗜肺军团菌及8株非嗜肺军团菌均未检出lvh和rtxA。结论 济南市公共场所集中空调冷却塔水军团菌污染较为严重,存在公共卫生危害。分离的嗜肺军团菌大多数均携带lvh和rtxA两种毒力基因,可能导致军团菌病。     

2006年-2010年广州市公共场所军团菌污染状况分析

目的:掌握广州市公共场所中嗜肺军团菌的污染情况和菌型分布,为预防空气传播疾病提供科学依据。方法:于2006年-2010年对广州市部分公共场所进行连续性监测调查,检测集中空调冷却塔水、冷凝水、洗浴用水等样品中嗜肺军团菌,对结果进行分析。结果:连续5年监测的1193件样品,在185份阳性中分离出202株嗜肺军团菌,检出率为15.51%。其中以血清型LP1型为主(45.05%),共检出LP7(20.29%)和LP14(17.32%)等10个血清型。同一份水样同时检出两种不同血清型嗜肺军团菌的占样品量的9.18%。公共交通的集中空调冷却塔水检出率(21.38%)和夏季的检出率(20.43%)最高。结论:广州存在多菌型嗜肺军团菌污染,需加强卫生监督和采取综合措施以保障公共卫生安全。     

温州市部分公共场所集中空调冷却水军团菌污染状况

[目的]了解温州市公共场所集中空调冷却水中军团菌污染状况. [方法]分别于2010年、2011年共抽取温州市区30家公共场所[包括医院、宾馆(酒店)、超市(商场)]集中空调系统的冷却水126份.采用分离病原培养法及荧光定量聚合酶链反应(PCR)法进行军团菌检测. [结果]公共场所冷却塔水的军团菌检出率,2010年为62.50％,2011年为33.93％.共分离56株军团菌菌株,33株为嗜肺军团菌Lp1～15型,以Lp6、Lp1型为优势血清型,其中Lp6型占19.64％(11/56),Lp1型占17.86％(10/56),而且主要分布于医院检出的菌株中.荧光定量PCR法检测结果显示,56株军团菌16S rRNA均为阳性;且有35株mip基因检测阳性,阳性率为62.50％. [结论]温州市公共场所集中空调冷却水存在军团菌污染,以嗜肺军团菌LP6、LP1型为优势菌型.     

泉州市中央空调冷却/冷凝水军团菌污染调查

目的 调查泉州地区公共场所中央空调系统嗜肺军团菌污染状况,为防控策略提供依据。方法 2008—2014年6~9月,采集泉州地区87家公共场所中央空调系统的冷却水、冷凝水水样,用分离培养、生化反应和微量凝集试验鉴定,荧光定量PCR验证。结果 共采集水样341份,嗜肺军团菌检出率31.4%(107/341)。其中冷却塔水检出率38.1%(104/273),冷凝水检出率4.4%(3/68);医院检出率48.1%(25/52),商场、超市、大型写字楼检出率38.8%(40/103),宾馆、酒店检出率22.6%(42/186);对107株嗜肺军团菌进行菌型鉴定,有6个血清型,以LP1型(37.4%)和LP8型(25.3%)为主,二者占62.6%。结论 泉州市中央空调系统冷却塔水检出率较高,医院和超市商场检出率较高,菌型呈多样性。应加强监测,加强空调系统的清洗、保洁,冷却塔是清洗消毒的重点。     

公共场所人群嗜肺军团菌血清抗体水平的调查研究

目的:了解温州市部分人群血清嗜肺军团菌的抗体阳性率以及嗜肺军团菌抗体(LP1～10)的分布特点。方法:采用微量凝集试验(MAT)测定就业人员血清中嗜肺军团菌1至10型抗体滴度。结果:1000例人群血清抗嗜肺军团菌抗体阳性89例,总阳性率为8.9%,其中暴露人群血清中嗜肺军团菌感染的阳性率11.6%(58/500),对照人群血清中嗜肺军团菌感染的阳性率6.2%(31/500),阳性率有显著性差异,暴露人群高于对照人群(χ2=8.991,P<0.05)。在阳性结果中,2种及以上血清型同时阳性为17份,占19.10%(17/89)。结论:我市健康人群普遍存在不同程度和不同血清型的嗜肺军团菌隐性感染,使用中央空调的场所是嗜肺军团菌感染的高危场所,应加强监测。     

杭州市下城区公共场所中央空调冷却水冷凝水军团菌污染调查分析

目的:初步了解杭州市下城区公共场所大型中央空调冷却塔水、冷凝水中军团菌的污染情况及主要血清型别,为制定控制措施提供依据.方法:于2007年6月～7月,采集下城区辖区内15家宾馆中央空调冷却塔水和冷凝水各15件,参照<公共场所集中空调通风系统卫生规范>卫生部(2006)方法对水样进行分离检测,同时对水样直接进行军团菌属特异性5SrRNA基因(104 bp)和嗜肺军团菌种特异性mip基因(440 bp)检测.结果:30件水样中分离培养检出军团菌的有12件,污染率达到40.00%(12/30),共分离出军团菌19株,其中嗜肺军团菌15株占78.95%、3株博杰曼军团菌(Boze-man)占15.79%及1株血清型待定株,水样直接经PCR检测,检出军团菌的水样有16件,污染率达到53.5%(16/30).结论:杭州市下城区公共场所大型中央空调冷却水和冷凝水中军团菌污染严重,血清型别多样,对人民健康构成潜在威胁.     

南京市土壤中嗜肺军团菌污染状况调查

目的了解南京市土壤被嗜肺军团菌污染情况。方法分别从南京市冷却塔水嗜肺军团菌培养法阳性的12个公共场所中,采集冷却塔2m范围内及距离冷却塔>2km居民区土壤样品,用PCR方法检测军团菌的5srRNA和Mip基因。结果冷却塔旁土壤样品中军团菌阳性率为75.0%(36/48),居民区土壤样品军团菌阳性率为70.8%(34/48),差异无统计学意义。冷却塔旁军团菌阳性土壤样品中嗜肺军团菌阳性率为50.0%(18/36),居民区军团菌阳性土壤样品中未检出。结论冷却塔旁土壤中嗜肺军团菌阳性率较高,存在导致军团病散发流行或暴发的潜在危险。     

军团菌KatB毒力基因聚合酶链反应检测技术的建立及应用

为建立军团菌KatB毒力基因聚合酶链反应(PCR)检测方法 ,根据GenBanK公布的嗜肺军团菌核苷酸序列合成军团菌毒力基因KatB的特异引物,采用PCR方法 对2005-2007年天津市中央空调冷却塔分离的嗜肺军团菌、杜氏军团菌、博氏军团菌、长滩军团菌等菌株进行了军团菌毒力基因KaLB的检测.结果 显示,本室分离的16株致病军团菌中有9株嗜肺军团菌和1株杜氏军团菌扩增出了2.7 kb的KatB基因片段,其余菌株未扩增出该基因片段.本研究成功建立了军团菌毒力基因KatB的PCR检测方法 ,为军团菌的毒力研究奠定了基础.     

上海市闵行区公共场所集中式空调军团菌污染状况及其血清型分布

目的掌握上海市闵行区公共场所集中空调冷却水、冷凝水中军团菌污染状况及其血清型的分布情况。方法按《公共场所集中空调通风系统卫生规范》(2006)和DB 31/405-2008《公共场所空调通风系统运行卫生要求》于2011—2013年对该区40家单位的集中空调冷却水、冷凝水进行采样检测。结果抽检40家公共场所集中式空调水,军团菌检出率为43.92%(47/107),其中办公大楼检出率为52.94%,超市商场为43.18%,宾馆酒店为34.48%,三者之间的差异无统计学意义;共分离到嗜肺军团菌77株,其中同1份水样分离出2个以上血清型的比例为总检出的48.94%(23/47),以嗜肺军团菌血清型1型为主(51.95%),其次是嗜肺军团菌血清型7型(19.48%)。结论闵行区公共场所集中空调冷却塔存在较严重军团菌污染,菌型呈现多样性,但以嗜肺军团菌血清型1型为主。应加强集中空调通风系统清洗消毒和卫生监督。     

公共场所水环境军团菌污染及其从业人员军团菌感染状况分析

目的分析公共场所水环境中军团菌污染及其从业人员军团菌感染状况方法以公共场所为研究对象,采集集中空调冷却塔水、淋浴水和自来水进行军团菌分离培养,同时对从业人员进行军团菌血清抗体和尿抗原检测。结果公共场所中空调冷却塔水、淋浴水和自来水军团菌阳性率分别为75%(111/148)、27%(27/100)和44%(22/50),以嗜肺军团菌污染为主,其中LP1为优势菌性,其他LP2-8、LP10、L.micdadei、L.bozemanii均有检出。公共场所从业人员军团菌血清抗体阳性率66.0%(369/559),抗LP1-14有检出,以抗LP12(45.9%)、抗LP4(43.4%)为优势血清型,抗LP1阳性率8.8%。公共场所从业人员LP1尿抗原阳性率0.0%(0/202)。结论公共场所冷却塔水、淋浴水和自来水军团菌尤其是嗜肺军团菌污染严重,从业人员普遍存在军团菌既往感染,公共场所存在发生社区获得性军团菌病暴发的安全隐患。     

无锡市2009年部分冷却塔水军团菌污染状况调查

目的了解无锡市不同类型场所冷却塔水中军团菌污染状况和血清型别。方法 2009年按照无锡市地理分布抽取32家公共场所和8家工厂作为监测点,共抽取冷却塔水89份,按照卫生部《集中空调通风系统卫生规范》附录B＂空调系统军团菌的检验分析方法＂进行检测。结果 89份冷却塔水军团菌检出率达26.97%（24/89）,阳性率以宾馆和医院为高,分别为33.33%（8/24）和33.36%（4/11）。军团菌血清型以LP1和LP6为主,分别占54.2%（13/24）和29.2%（7/24）。冷却塔水消毒与不消毒、有无藻类生长军团菌检出差异有统计学意义。结论无锡市不同场所冷却塔水中存在军团菌的污染,军团菌生长可能与冷却塔水不消毒、有藻类生长有关,可作为控制冷却水军团菌的依据。     

2012年漳州市部分公共场所中央空调冷却水军团菌污染情况调查

目的了解漳州市公共场所中央空调冷却水军团菌污染情况,为防制提供依据。方法于2012年对漳州市12家公共场所中央空调系统冷却塔水48份样品进行军团菌培养及鉴定。结果采集12家空调冷却塔水48份标本中,检出军团菌5株,阳性率占10.42%。其中,嗜肺军团菌1株,阳性率占2.08%;非嗜肺军团菌4株,阳性率占8.33%。结论漳州市公共场所中央空调系统军团菌污染情况值得关注,需加强监测,督促定期消毒和清洗,以预防军团菌病发生。     

2006—2013年广州地铁集中空调系统嗜肺军团菌的污染状况

目的调查广州地铁集中空调系统冷却水和冷凝水中嗜肺军团菌的污染状况。方法对2006—2011年和2013年采集的广州地铁集中空调冷却水和冷凝水的水样,进行嗜肺军团菌的检测和血清分型,并对其中19株嗜肺军团菌分离株做PFGE分型鉴定,用BioNumerics软件进行聚类分析。结果共计采集水样609份,嗜肺军团菌的平均检出率为17.73%（108/609）,其中冷却水的检出率为23.01%（101/439）,冷凝水检出率为4.12%（7/170）。有采集检测样品的年份均检出嗜肺军团菌,检出率在11.83%～22.73%,其中2013年检出率为最高,达22.73%（10/44）。在108份阳性水样中,共计分离到120株嗜肺军团菌,有12份水样在同一份样品中同时分离出2种不同血清型的嗜肺军团菌;从血清型分布来看,以LP1为主占55.00%（66/120）,其次为LP14占29.17%（35/120）。19株嗜肺军团菌分离株PFGE分型相似性在79.9%～100.0%,可分为3个聚类群10个PFGE型。结论广州地铁集中空调系统存在一定程度嗜肺军团菌污染。应加强广州地区地铁集中空调系统的监测力度,制定定期清洗和消毒计划,防止人群感染。