CaMK Ⅱ信号转导通路在病理性疼痛中的研究进展

背景 钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)是一种多功能的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶,广泛分布在周围和中枢神经系统.目的 有研究表明CaMKⅡ在感觉信息特别是伤害性信息的传入与整合中具有重要作用,为此现作一综述.内容 此文阐述了背根神经节(...     

钙/钙调蛋白依赖的钙调蛋白激酶Ⅱ磷酸化目的蛋白对再灌注心律失常的影响

背景 虽然恢复冠状动脉血流是挽救缺血心肌的重要措施,但是再灌注本身可以导致再灌注心律失常的发生,它与细胞内钙超载密切相关,钙/钙调蛋白依赖的钙调蛋白激酶Ⅱ（calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ）是一种重要的丝/苏氨酸蛋白激酶,活化的CaMKⅡ通过多种方式调节胞内Ca2＋的浓度. 目的 探讨CaMKⅡ的结构、功能及CaMKⅡ磷酸化目的蛋白对再灌注心律失常的影响. 内容 CaMKⅡ可能是再灌注早期发生心律失常的重要信号分子,CaMKⅡ功能异常导致钙稳态失衡,是再灌注心律失常的重要原因. 趋向 在缺血/再灌注的过程中选择合适的药物减轻钙超载,进而调节CaMKⅡ磷酸化目的蛋白的过程可能是未来治疗再灌注心律失常的重要靶点.     

鞘内注射KN93对小鼠神经病理性疼痛的镇痛效应

目的 探讨钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在神经病理性疼痛发病机制中的作崩.方法 雄性ICR小鼠32只,随机均分为四组:神经病理性疼痛(SNL)组,制作L5/6脊神经结扎(SNL)模型;SNL/KN92组,制作SNL模型,鞘内注射无药理活性的KN93的结构类似物KN92 45 nmol;SNL/KN93组,制作SNL模型,鞘内注射KN93 45 nmol;假手术(Sham)组,仅显露脊神经而小结扎.分别于SNL术前及术后2～5 d每天测定小鼠的机械痛阈和热痛阈,SNL/KN92组与SNL/KN93组于术后5 d痛阈测定前30 min行鞘内给药.于最后一次痛阈测定毕处死小鼠,取腰段脊髓组织用Western blot检测pCaMK Ⅱα的表达水平.结果 SNL可导致机械痛阈和热痛阈降低(P<0.05),脊髓组织pCaMKⅡα的表达增加(P<0.05);鞘内注射KN93可翻转SNL所致的上述改变(P<0.05),但KN92无此效应.结论 CaMK Ⅱ参与了SNL诱导的神经病理性疼痛的维持,靶向于CaMK Ⅱ信号途径的治疗町为慢性疼痛治疗提供新的策略.     

脊髓Caprin-1介导的CaMKⅡα表达与小鼠痛觉感知的关系

目的评价脊髓胞质活化/增殖相关蛋白1(Caprin-1)介导的钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡα)表达与小鼠痛觉感知的关系。方法通过NestinCreERT2小鼠与Caprin-1flox/flox小鼠多代杂交, 获得NestinCreERT2;Caprin-1flox/flox纯合子小鼠, 采用随机数字表法分为2组(n=5):NestinCreERT2;Caprin-1flox/flox溶剂对照组(SC组)和Caprin-1敲除组(KO组)。KO组连续5 d腹腔注射他莫昔芬100 mg/kg, 以诱导性敲除Caprin-1基因, SC组给予等容量溶剂。于连续给药前1 d和给药结束后5 d时测定机械缩足反应阈(MWT)。随后处死小鼠, 取脊髓L4-6节段, 采用Western blot检测脊髓Caprin-1、CaMKⅡα表达, 采用实时定量PCR法检测脊髓Caprin-1、CaMKⅡα的mRNA表达, 采用免疫荧光双标染色检测Caprin-1与CaMKⅡα共表达情况。结果与SC组比较, KO组他莫昔分给药结束后5 d时MWT升高, 脊髓Caprin-1及其mRNA、CaMKⅡα...     

一氧化氮对脊髓背角疼痛的调制作用

NO对脊髓背角疼痛调节的机制.一氧化氮（NO）作为信息传递物质,在周围及中枢伤害性感受传递中发挥着重要作用.研究表明,伤害性刺激引起脊髓背角神经元释放NO;NO在脊髓水平主要参与痛觉过敏的形成和发展,在一些伤害性刺激条件下,NO可作为第二信使诱导c-fos表达.NO是一种广泛存在的信息传递分子,是细胞内重要的第二信使.其作用的具体过程是：神经元突触前膜去极化使谷氨酸（Glu）等释放到突触间隙与N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）等受体结合,受体通道开放,Ca2＋内流与钙调蛋白（CaM）偶联,在还原型辅酶Ⅱ（NADPH）的协助下激活一氧化氮合酶（NOS）,催化L-精氨酸（LArg）,生成NO,激活可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）,促进环鸟苷酸（cGMP）合成,作用于cGMP门控离子通道,cGMP调节的磷酸二酯酶（PDE）,cGMP依赖性蛋白激酶（PKG）等效应靶分子,参与中枢神经系统（CNS）伤害性刺激信息传递,神经元兴奋性维持等生理过程.     

吗啡预处理对小鼠海马脑片氧-糖缺失/恢复时CaMKⅡ和NMDA受体的影响

目的 评价吗啡预处理对小鼠海马脑片氧-糖缺失，恢复时钙，钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）膜转位及N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体磷酸化的影响。方法成年BALB／C小鼠，体重18-22g，雌雄不拘。每次将5只小鼠同批断头取脑，制备海马脑片，随机分为5组：正常对照组（Ⅰ组）、氧．糖缺失，恢复组（Ⅱ组）、吗啡预处理组（Ⅲ组）、纳络酮＋吗啡预处理组（Ⅳ组）及纳络酮预处理组（Ⅴ组）。Ⅰ组脑片正常体外培养，假操作换液。Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组小鼠海马脑片分别作相应预处理30min，间隔30min。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组建立小鼠海马脑片体外缺血再灌注损伤模型，分别氧-糖缺失20min，氧-糖恢复2h。各组于氧．糖缺失前即刻（T0）、氧-糖缺失20min（T1）、氧-糖恢复1h（T2）和2h（T3）取若干脑片匀浆、超声粉碎、离心，分离胞浆蛋白和膜相关蛋白；部分脑片分离总蛋白，Western blot检测CaMKⅡα蛋白表达量以及NMDA受体NR1亚单位的磷酸化。结果 海马脑片在T1、T2．T3时，CaMKⅡα膜相关蛋白含量增多。同时胞浆蛋白含量减少（P〈0．05）；T2、T3时，NMDA受体NR1亚单位磷酸化水平增高（P〈0．05）；而吗啡预处理明显地抑制上述CaMKⅡα膜转位及NMDA受体NR1亚单位磷酸化（P〈0．05）。纳络酮完全阻断吗啡预处理对CaMKⅡα膜转位及NR1磷酸化的抑制作用（P〈0．05）。CaMKⅡα总蛋白表达水平未见明显变化。结论 CaMKⅡ膜转位的抑制及NMDA受体磷酸化的抑制在吗啡预处理对小鼠海马脑片缺血再灌注的脑保护作用机制中起重要作用。     

在大鼠切口疼痛模型中鞘内新斯的明对脊髓NO/cGMP信号转导系统的影响

目的 了解大鼠切口疼痛模型中鞘内（IT）新斯的明（NEO）对脊髓一氧化合酶（NOS）活性、一氧化氮（NO）产量和环鸟苷酸（cGMP）含量的影响。方法 雄性64只,随机分为四组,每组16只：假手术组（组I0、术前30minIT0．9％氯化钠20μl组（组Ⅱ）、术后30minITNEO10μg组（组Ⅲ）和术前30minITNEO10μg组（组Ⅳ）。按Brennan法制成切口疼痛模型,以累积疼痛评分确定疼痛行为。在术后2h断头取腰段脊髓,以分光光度法测定NOS活性、NO产量;放射免疫法测定cGMP含量／结果 组Ⅲ和组Ⅳ大鼠的累积评分均明显低于组Ⅱ（P＜0．01）。组Ⅱ的脊髓NOS活性、NO产量和cGMP含量均较组Ⅰ明显升高（P＜0．01）。组Ⅳ的脊髓NOS活性、NO产量和cGMP含量均较组Ⅰ明显升高（P＜0．01）。组Ⅳ的脊髓NOS活性、NO产量和cGMP含量均较组Ⅱ明显降低（P＜0．05或0．01）。而两用药组上述指标比较以及用药组与组I比较均无明显差别（P＞0．05）。结论 在大鼠切口疼痛模型中,术前IT NEO的抗伤害作用可能与NO／cGMP信号转导系统有关。     

脊髓钙-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ在小鼠慢性炎性痛中的作用

目的 探讨脊髓钙-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在小鼠慢性炎性痛中的作用.方法 雄性ICR小鼠40只,体重20～25 g,随机分为5组(n=8),正常对照组(A组)、慢性炎性痛组(B组)、KN92组(C组)、KN93 30 nmol组(D组)和KN93 45 nmol组(E组).B组～E组均采用小鼠左足背皮下注射完全Freund佐剂(CFA)20 μl的方法 制备慢性炎性痛模型.A组皮下注射生理盐水20μl.于CFA注射后1 d和3 d时D组、E组和C组分别鞘内注射CaMKⅡ特异性抑制剂KN93 30 nmol、45 nmol 和KN92(KN93无药理活性结构类似物)45 nmol,容量均为5μl.于CFA注射前30 min(基础状态)、注射后1 d且鞘内给药前(T1)及给药后30 min(T2)、注射后3 d且鞘内给药后30 min(T3)时测定痛阈.于最后1次痛阈测定结束后处死小鼠,取腰段脊髓组织采用Western blot法测定脊髓p-CaMKⅡα的表达水平.结果 与基础值和A组比较,B组、C组和D组T1～3时机械痛阈和热痛阈降低,脊髓p-CaMKⅡα表达上调;E组T1时机械痛阈和热痛阈降低,T2,3时机械痛阈、热痛阈和脊髓p-CaMKⅡα表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).与B组比较,E组T2,3时机械痛阈、热痛阈升高,脊髓p-CaMKⅡα表达下调(P＜0.05).结论 脊髓CaMKⅡ参与了小鼠慢性炎性痛的形成.     

乳化异氟醚后处理对糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的 观察乳化异氟醚后处理对糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注（IR）损伤的影响，并探讨可能的分子机制。
方法 选择SPF级雄性SD大鼠45只，2月龄，体重240～260 g。采用随机数字表法分成五组：假手术组（S组，n=5）、心肌IR损伤组（IR组，n=10）、糖尿病+心肌IR损伤组（DM组，n=10）、糖尿病+心肌IR损伤+乳化异氟醚后处理组（EI组，n=10）和糖尿病+心肌IR损伤+钙/钙调蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）抑制剂(KN93)组（KN93组，n=10）。S组仅开胸穿线但不结扎左冠状动脉前降支（LAD）；IR组穿线稳定后30 min阻断LAD，缺血45 min，再灌注2 h建立IR损伤模型；DM组接受腹腔注射2%链脲佐菌素溶液建立糖尿病模型，4周后建立心肌IR损伤模型；EI组建立糖尿病心肌IR损伤模型时，于再灌注前3 min微量输液泵给药8%乳化异氟醚2 mg/kg，持续8 min；KN93组建立糖尿病心肌IR损伤模型时，于缺血前30 min左心室心内局部注射KN93 5 μg并平衡30 min。于再灌注2 h后，采用TTC染色法测定心肌梗死面积百分比，ELISA法测定血清CK-MB浓度，比色法测定血清LDH、MDA和SOD浓度，Western bolt法检测CaMKⅡ、p-CaMKⅡ、信号转导和转录催化因子-3（STAT3）及p-STAT3蛋白含量，并计算p-CaMKⅡ/CaMKⅡ及p-STAT3/STAT3。
结果 与S组比较，IR组、DM组、EI组和KN93组血清CK-MB、MDA浓度明显升高（P＜0.05），IR组和DM组血清SOD浓度明显降低（P＜0.05），IR组、DM组和EI组血清LDH浓度和p-CaMKⅡ/CaMKⅡ明显升高（P＜0.05），IR组、EI组和KN93组p-STAT3/STAT3明显升高（P＜0.05）。与IR组比较，DM组心肌梗死面积百分比、血清CK-MB、LDH、MDA浓度和p-CaMKⅡ/CaMKⅡ明显升高（P＜0.05），血清SOD浓度和p-STAT3/STAT3明显降低（P＜0.05）；EI组和KN93组心肌梗死面积百分比和血清CK-MB、LDH、MDA浓度明显降低（P＜0.05），p-STAT3/STAT3明显升高（P＜0.05）；KN93组血清SOD浓度明显升高（P＜0.05），p-CaMKⅡ/CaMKⅡ明显降低（P＜0.05）。与DM组比较，EI组和KN93组心肌梗死面积百分比、血清CK-MB、LDH、MDA浓度和p-CaMKⅡ/CaMKⅡ明显降低（P＜0.05），SOD浓度和p-STAT3/STAT3明显升高（P＜0.05）。
结论 乳化异氟醚后处理可减轻糖尿病大鼠心肌缺血-再灌注损伤，其机制与抑制CaMKⅡ蛋白的磷酸化有关。     

脊髓G蛋白耦联受体激酶2在神经病理性疼痛中作用的研究进展

背景 近年研究发现脊髓G蛋白耦联受体激酶2（Gprotein-coupled receptor kinase 2,GRK2）在神经病理性疼痛（neuropathic pain,NP）形成和维持中起到至关重要的作用.目的 对脊髓GRK2在NP中作用的研究有助于人们更清楚地理解NP产生和维持的相关分子机制,为NP的治疗提供新思路.内容 分别描述GRK2、脊髓GRK2与NP以及GRK2参与NP的可能机制.趋势 鉴于脊髓GRK2在NP中的重要作用,GRK2将有可能为针对NP发病机制的治疗提供新的靶点.     

异丙酚对抑郁大鼠电休克处理后海马CaMKⅡα活性的影响

目的 探讨异丙酚对抑郁大鼠电休克处理后海马钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα(CaMKⅡα)活性的影响.方法 健康成年雄性SPF级SD大鼠,体重180～220 g,2～3月龄,采用慢性轻度不可预见性应激法建立抑郁模型.取模型制备成功的大鼠40只,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=10):抑郁组(D组)腹腔注射生理盐水8 ml/kg;单纯异丙酚组(P组)腹腔注射异丙酚80mg/kg;单纯电休克组(E组)腹腔注射生理盐水8ml/kg后实施电休克处理;异丙酚联合电休克(DPE)组腹腔注射异丙酚80 mg/kg,待翻正反射消失后行电休克处理.以上处理每天1次,连续7d.于处理前1d和处理后1d采用糖水偏好实验评价抑郁状态.于处理前1d和处理后3d采用Morris水迷宫实验检测学习记忆能力.于Morris水迷宫实验完成后1d,采用免疫组织化学法检测大鼠海马磷酸化CaMKⅡα(pCaMKⅡα)及CaMKⅡα的表达,计算pCaMKⅡα/CaMKⅡα比.结果 与D组比较,E组、DPE组糖水偏好比升高,E组逃避潜伏期延长,空间探索时间缩短,海马CaMKⅡα和pCaMKⅡα表达下调,pCaMKⅡα/CaMKⅡα比降低,DPE组逃避潜伏期缩短,空间探索时间延长,pCaMKⅡα表达上调(P＜0.05);与E组比较,DPE组逃避潜伏期缩短,空间探索时间延长,CaMKⅡα和pCaMKⅡα表达上调,pCaMKⅡα/CaMKⅡα比升高(P＜0.05).结论 异丙酚减轻抑郁大鼠电休克处理后认知功能损害的机制可能与增强海马CaMKⅡα的活性有关.     

Anti-hyperalgesic effect of CaMKII inhibitor is associated with downregulation of phosphorylated CREB in rat spinal cord

Purpose  

Calcium/calmodulin-dependent protein kinase (CaMK) II and its downstream effector cyclic adenosine monophosphate (cAMP) responsive element binding protein (CREB) may be involved in the development of neuropathic pain. The aim of this study was to examine the effect of the CaMKII inhibitor AIP on the association of CaMKII and CREB in a partial sciatic nerve ligation neuropathic pain model in rats.     

CCK-B受体拮抗剂对吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断时海马神经元[Ca~(2+)]i、CaM活性和CaMKⅡα表达的影响

目的 探讨胆囊收缩素-B(CCK-B)受体拮抗剂--CR-2945对吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断时海马神经元内游离Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]i)、钙凋蛋白(CaM)活性和钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα(CaMKⅡα)表达的影响.方法 健康成年雄性Wistar大鼠45只,体重180～240 g,随机分为9组(n=5):吗啡依赖组(MD组)采用剂量递增法建立吗啡依赖大鼠模型;生理盐水组(Ns组)以等容量生理盐水替代吗啡;纳洛酮催促戒断组(NPW组)于末次皮下注射吗啡后1 h,腹腔注射纳洛酮5 mg/kg;伏核给药组(NA组)、杏仁核给药组(A组)和侧脑室给药组(LCV组)于末次皮下注射吗啡后1 h,相应靶核团注射10μg CR-2945,30 min后腹腔注射纳洛酮5 mg/kg;急性腹腔给药组(ACA组)于末次皮下注射吗啡后1 h,腹腔注射1 mg/kg CR-2945,30 min后腹腔注射纳洛酮5 mg/kg;慢性腹腔给药组(ACC组)给予吗啡的同时,腹腔注射1 mg/kg CR-2945,连续6 d,末次给药后30 min腹腔注射纳洛酮5 mg/kg;安慰剂组(P组)以生理盐水替代CR-2945,其余处理同LCV组.处理完毕后冰浴下分离海马,采用流式细胞技术检测海马神经元内[Ca~(2+)]i和CaM活性,采用Western blot法测定CaMKⅡα表达.结果 与NS组比较,MD组[Ca~(2+)]i和CaM活性升高,CaMKⅡα表达上调(P<0.01);与MD组比较,NPW组[Ca~(2+)]i和CaM活性降低,CaMKⅡα表达下调(P<0.01);与NPW组比较,ACA组、ACC组和LCV组[Ca~(2+)]i和CaM活性升高,CaMKⅡα表达上调(P<0.01),NA组、A组和P组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).结论 CCK-B受体拮抗剂通过升高海马神经元内[Ca~(2+)]i、CaM活性,上调CaMKⅡα表达,从而抑制吗啡依赖大鼠纳洛酮催促戒断反应.     

异丙酚重复麻醉对新生大鼠海马CaMKⅡα表达的影响

目的 探讨异丙酚重复麻醉对新生大鼠海马钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱα(CaMKⅡα)表达的影响.方法 新生7d健康SD大鼠42只,体重12～16 g,雌雄各半,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=21):对照组(C组)和异丙酚重复麻醉组(P组).C组腹腔注射生理盐水7.5 ml/kg,连续7 d;P组腹腔注射异丙酚75 ml/kg,连续7d.出生后28 d时采用Morris水迷宫实验检测认知功能.水迷宫实验结束24h时断头处死大鼠,取脑组织,分别采用免疫组织化学法和Westernbolt法检测海马CAI区CaMKⅡα及磷酸化CaMKIⅡα(pCaMKⅡα)的表达.结果 与C组比较,P组逃逸潜伏期延长,空间探索时间缩短,海马CA1区CaMKⅡα和pCaMKIIα表达下调(P＜0.01).结论 异丙酚重复麻醉降低新生大鼠认知功能的机制可能与下调海马CaMKⅡα的表达和抑制其活性有关.     

p38MAPK信号转导通路在大鼠骨癌痛中的作用

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路在大鼠骨癌痛中的作用.方法 雌性sD大鼠56只,体重150～170 g,随机分为4组(n=14):生理盐水对照组(NS组)、骨癌痛组(BC组)、二甲基亚砜组(DMSO组)和p38MAPK抑制剂组(SB203580组).骨髓腔内注射Walker256细胞悬液制备大鼠骨癌痛模型,注射后10 d,DMSO组和SB203580组分别鞘内注射5%二甲基亚砜和SB203580(10 μg)10 μl.各组随机取8只大鼠,于注射Walker256细胞悬液前、注射后1、3、5、7、10 d,鞘内给药后1、3、6、12、24 h时采用von Frey纤维丝测定术侧后爪机械缩足反射阈值(MWT);各组余6只大鼠鞘内给药后6 h时取L_(4,5)脊髓,采用免疫组化法检测脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pCREB)的表达水平.结果 骨髓腔内注射Walker256细胞悬液后7 d大鼠术侧后爪MWT开始降低,鞘内注射SB203580提高了MWT;骨髓腔内注射Walker256细胞悬液后脊髓背角pCREB表达上调,鞘内注射SB203580后脊髓背角pCREB表达下调.结论 鞘内注射SB203580可通过抑制脊髓背角pCREB的表达减轻骨癌痛;p38MAPK信号转导通路在骨癌痛中起重要作用.     

单核趋化蛋白-2中和抗体对骨癌痛大鼠脊髓背角磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶表达的影响

目的 观察鞘内注射单核趋化蛋白-2(monocyte chemoattractant protein-2,CCL2)中和抗体后骨癌痛大鼠行为学的变化,并探讨其可能的镇痛机制. 方法 雄性SD大鼠32只,体重180～220 g,采用随机数字表法分为4组(每组8只):假手术+正常IgG组(I组),于大鼠左侧胫骨干骺端骨髓腔内注射10μl Hank's液;假手术+CCL2中和抗体组(Ⅱ组),于大鼠左侧胫骨干骺端骨髓腔内注射10μl Hank's液,在注射Hank's液后第7～9天鞘内注射CCL2中和抗体,每天1次,每次10μl,浓度为103 mg/L;骨癌痛+正常IgG组(Ⅲ组),于左侧胫骨干骺端骨髓腔内注射10 μl(1×107/ml)Walker 256肿瘤细胞;骨癌痛+CCL2中和抗体组(Ⅳ组),在注射肿瘤细胞后第7～9天鞘内注射CCL2中和抗体,每天1次,每次10μl,浓度为103 mg/L.观察造模前及术后1、3、6、7、8、9d大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdraw threshold,PMWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdraw latency,TWL)及脊髓背角磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(phosphorylate extracellular signal-regulated kinases 1/2,p-ERK1/2)的表达. 结果 与Ⅰ组比较,Ⅲ组大鼠的PMWT和TWL在第6～9天明显下降,脊髓背角p-ERK1/2蛋白表达明显增加(P＜0.01);与Ⅲ组比较,Ⅳ组大鼠的PMWT和TWL在第6～9天明显上升(P＜0.01),脊髓背角p-ERK1/2蛋白表达明显下降(P＜0.01);Ⅰ组和Ⅱ组上述指标比较,差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 鞘内注射CCL2中和抗体可以部分缓解骨癌痛大鼠的机械性和热痛觉超敏,这种效应可能与抑制p-ERK1/2的表达有关.     

脊髓背角P2Y1受体在大鼠骨癌痛形成中的作用

目的 评价脊髓背角P2Y1受体在大鼠骨癌痛形成中的作用.方法 鞘内置管成功的雌性SD大鼠90只,体重150～180 g,随机分为5组(n=18):假手术组(Ⅰ组)、骨癌痛组(Ⅱ组)、假手术+P2Y1受体特异性拮抗剂MRS 2179组(Ⅲ组)、骨癌痛+生理盐水组(Ⅳ组)和骨癌痛+MRS2179组(Ⅴ组).采用胫骨骨髓腔内接种Walker256乳腺癌细胞的方法制备骨癌痛模型.Ⅲ组和Ⅴ组术后第7～9天鞘内注射MRS2179 100 pmol/10μl,1次/d,Ⅳ组注射等体积生理盐水.于术前及术后第3、7、9、12、15、18天给药后测定机械痛阈,于术后第9天测定机械痛阈后处死6只大鼠,取L4～6脊髓背角,测定P2Y1受体和磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)的表达.结果 与Ⅰ组和Ⅲ组比较,Ⅱ组、Ⅳ组和Ⅴ组术后第7～18天机械痛阈降低,P2Y1受体和p-ERK1/2表达上调(P＜0.01);与Ⅱ组和Ⅳ组比较,Ⅴ组术后第9～18天机械痛阈升高,P2Y1受体和p-ERK1/2表达下调(P＜0.01).结论 脊髓背角P2Y1受体参与了大鼠骨癌痛的形成,可能与ERK1/2的激活有关.