Rspo1与EMT相关蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

摘 要：［目的］ 探讨特异性顶部盘状底板反应蛋白1（Rspo1）与上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白波形蛋白（Vimentin）和E-钙黏蛋白（E-cadherin）在胃癌中的表达水平及其临床意义。［方法］ 通过免疫组化SP法测定115例胃癌组织及20例癌旁正常组织标本中Rspo1和Vimentin、E-cadherin的表达,分析其与临床病理特征的关系,Rspo1和EMT相关蛋白之间的相关性以及与胃癌患者预后的关系。［结果］胃癌组织中Rspo1和Vimentin阳性表达率（54.8%和34.8%）明显高于癌旁正常组织（25.0%和0）（P均<0.05）,而胃癌组织中E-cadherin阳性表达率（53.9%）明显低于癌旁正常组织（100%）（P<0.05）。胃癌组织中Rspo1表达与肿瘤大小、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移及远处转移相关（P均<0.05）,与患者性别、年龄、分化程度无关。Rspo1与Vimentin的表达呈正相关（r=0.333,P<0.05）,与E-cadherin的表达呈负相关（r=-0.349,P<0.05）。Rspo1和Vimentin高表达患者生存率更低（P<0.05）,E-cadherin阴性组患者较阳性组患者生存率更低（P<0.05）。多因素Cox回归分析显示：TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、远处转移、Rspo1表达阳性及E-cadherin表达阴性是影响胃癌患者预后的独立危险因素（P<0.05）。［结论］ Rspo1在胃癌组织中高表达,且与EMT相关蛋白的表达密切相关,Rspo1可能通过诱导EMT的发生促进胃癌的侵袭和转移,进而影响患者预后。     

BTBD7和E-cadherin在126例宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

摘 要：［目的］ 探讨BTB/POZ结构域蛋白7(BTB/POZ domain containing protein 7，BTBD7)和E-钙黏附蛋白(epithelia cadherin，E-cadherin)在宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义。［方法］ 用免疫组化SP法检测126例宫颈鳞状细胞癌和42例正常宫颈组织中BTBD7和E-cadherin的表达，并分析宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。［结果］ BTBD7和E-cadherin在126例宫颈鳞状细胞癌组织中的阳性率分别为70.6%(89/126)和27.8%(35/126)，在正常组织中的阳性表达率分别为16.7%(7/42)和100.0%(42/42)，差异均有统计学意义(P<0.001)。BTBD7、E-cadherin在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达与肿瘤的局部浸润、分化程度、FIGO分期和淋巴结转移显著性相关(P<0.05)。宫颈鳞状细胞癌组织中BTBD7和E-cadherin表达呈负相关（r=-0.223，χ2=6.245，P=0.012）。多因素Cox回归分析显示FIGO分期、淋巴结转移和BTBD7表达水平是宫颈鳞状细胞癌预后的独立因素（P<0.05）。［结论］ BTBD7在宫颈鳞状细胞癌的进展中起一定作用，同时对于预测宫颈癌的预后具有一定的意义。     

SOX1对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

摘 要：［目的］ 探究性别决定区Y框蛋白1（sex determining region Y-box，SOX1）对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。［方法］ 选择稳定表达SOX1基因的HeLa细胞株为实验组，同时选择稳定表达空白质粒的HeLa细胞株和HeLa细胞为对照组。采用二甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测SOX1对HeLa细胞增殖的影响；通过细胞基质黏附实验、体外细胞迁移实验、体外细胞侵袭实验分别研究SOX1对HeLa细胞粘附、迁移、侵袭能力的影响；采用明胶酶谱法检测细胞内相关蛋白的水平。［结果］ 在研究第1天，两组的增殖能力比较差异无统计学意义（P>0.05），实验组在研究第3天（0.526±0.067）、第5天（1.169±0.148）、第7天（1.160±0.134）的增殖能力均显著性低于对照组（P<0.05）。实验组黏附率（0.754±0.041）显著性低于对照组（0.931±0.135）（P<0.05）；实验组在24h（5.84±1.20）、48h（10.28±3.01）、72h（14.51±2.31）迁移距离均显著性小于对照组（P<0.05）；实验组侵袭细胞的数量（120.09±10.04个）明显较对照组（215.67±6.98个）少（P<0.05）。实验组基质金属蛋白酶2（0.981±0.199）、基质金属蛋白酶9（0.536±0.033）、波形纤维蛋白（0.429±0.029）表达水平显著性低于对照组，SOX1、E钙黏附蛋白水平明显高于对照组（P<0.05）。［结论］ SOX1表达水平升高,会使宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭抑制，MMP2、MMP9、Vimentin蛋白表达水平降低，E-cadherin表达水平升高。     

膜联蛋白A7对肿瘤细胞黏附分子表达及生物学行为的影响

摘 要：［目的］ 研究Annexin A7基因对肿瘤细胞黏附分子表达及其生物学行为的影响。［方法］ 采用shRNA干扰技术稳定转染小鼠Hca-P细胞,获得Annexin A7下调表达及Hca-P无关序列细胞株,采用Western Blot、qRT-PCR分别检测Annexin A7对黏附相关分子FAK、Src、E-cadherin等基因及蛋白表达水平的影响,应用淋巴结粘附及Transwell侵袭实验检测Annexin A7下调对Hca-P细胞淋巴结粘附及侵袭能力的干扰。［结果］ Annexin A7基因表达下调组细胞的FAK和Src基因及蛋白表达水平较A7无关序列组分别上升1.81倍、1.80倍及1.58倍、1.59倍（P<0.05）,E-cadherin基因及蛋白表达水平则分别下降54.11%和54.27%,而上述分子基因与蛋白表达水平在未处理Hca-P组与A7无关序列组间无统计学差异（P>0.05）,且在Annexin A7下调后Hca-P细胞的淋巴结粘附及侵袭能力上升,ShRNA-AnnexinA7组淋巴结黏附细胞数(1074±162.8)显著性多于A7无关序列组（234.7±40.08）及Hca-P组（220.3±39.53）（P<0.05）,ShRNA- A7细胞组穿过小室的细胞数目（294.8±64.40）明显多于A7无关序列细胞组（79±28.04）及Hca-P细胞组（57.60±25.62）（P<0.05）,而Hca-P与无关序列细胞组之间则无统计学差异（P>0.05）。［结论］ Annexin A7可通过影响黏附相关分子FAK、Src、E-cadherin等基因与蛋白表达水平从而改变Hca-P细胞生物学行为。     

HIP1影响食管鳞癌Akt/GSK3β信号通路及EMT相关蛋白表达分析

摘 要：［目的］ 探讨亨廷顿蛋白相互作用蛋白1（huntingtin interacting protein 1，HIP1）促进食管鳞癌转移的作用及机制。［方法］采用qRT-PCR及Western blot检测Akt抑制剂处理HIP1高或低表达食管鳞癌细胞系中HIP1、GSK3β及EMT标志性分子E-cadherin和Vimentin的表达。采用IHC检测食管鳞癌组织样本中目的分子的表达，并分析其表达相关性。［结果］ qRT-PCR和Western blot结果显示：与对照组、shRNA-对照组相比，shRNA-HIP1组细胞中Akt、GSK3β及Vimentin基因和蛋白表达显著降低（P<0.001），E-cadherin基因和蛋白表达显著升高（P<0.001）；与对照组、OE-对照组相比，OE-HIP1组细胞中Akt、GSK3β及Vimentin基因和蛋白表达显著升高（P<0.001），E-cadherin基因和蛋白表达显著降低（P<0.001）。IHC及相关性分析结果显示，HIP1与GSK3β、Vimentin表达呈正相关（r=0.336，P<0.001；r=0.561，P<0.001），与E-Cadherin表达呈负相关（r=-0.169，P=0.027）；GSK3β与Vimentin表达呈正相关（r=0.317，P<0.001），与E-Cadherin表达呈负相关（r=-0.171，P=0.025）。Akt抑制剂处理HIP1高或低表达食管鳞癌细胞系结果显示，Akt抑制剂处理后E-cadherin表达升高，GSK3β及Vimentin表达降低。［结论］HIP1 可能通过激活Akt/GSK3β信号通路促进食管鳞癌EMT的发生。     

干扰素调节因子-5在鼻咽癌组织中的表达及对鼻咽癌细胞侵袭和迁移的影响

摘 要：［目的］ 检测鼻咽癌组织中干扰素调节因子-5（IRF-5）的表达,探讨其在鼻咽癌细胞CNE-1增殖、迁移与侵袭中的作用。［方法］ 采用定量聚合酶链反应（qPCR）测定鼻咽癌旁组织与鼻咽癌组织中IRF-5的表达水平。随机将CNE-1细胞分为正常对照组、空白病毒组和病毒转染组,分别采用MTT法测定各组细胞的增殖情况,采用划痕实验测定各组细胞的迁移能力,采用Transwell小室法测定各组细胞的侵袭能力,采用qPCR和Western blot法测定各组细胞IRF-5、金属蛋白酶-2（MMP-2）、E-cadherin、趋化因子-12（CXCL-12）和趋化因子受体-4（CXCR-4）mRNA和蛋白的表达水平。［结果］（1）鼻咽癌组织中IRF-5 mRNA水平较癌旁组织显著降低（P<0.05）;（2）病毒转染组细胞在培养24h、48h和72h时OD值均较正常对照组和空白病毒对照组显著降低（P<0.05）;（3）病毒转染组细胞的划痕宽度较正常对照组和空白病毒对照组显著增大（P<0.05）;（4）病毒转染组穿膜细胞数量较正常对照组和空白病毒对照组显著降低（P<0.05）;（5）病毒转染组细胞的IRF-5和E-cadherin mRNA表达水平较正常对照组和空白病毒对照组显著升高,而MMP-2、CXCL-12和CXCR-4 mRNA表达水平较正常对照组和空白病毒对照组显著降低（P<0.05）。［结论］ IRF-5的低表达可能与鼻咽癌的发生发展有关,过表达IRF-5能够抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭,IRF-5可能通过增加E-cadherin表达而抑制MMP-2、CXCL-12和CXCR-4表达而发挥作用。     

敲低性别决定区Y-box蛋白5对胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的影响

摘 要：［目的］ 探讨敲低性别决定区Y-box蛋白5（Sox-5）的表达水平及对胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化（EMT）的影响。［方法］ 实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测胃癌细胞和正常人胃黏膜上皮细胞中Sox-5 mRNA的相对表达水平；sh-NC和sh-Sox-5质粒转染BGC823细胞，蛋白免疫印迹实验检测Sox-5蛋白表达水平；MTT实验、划痕实验和Transwell实验分别检测BGC823细胞增殖活性、迁移能力和侵袭能力；蛋白免疫印迹实验检测扭曲蛋白（Twist）、波形蛋白（Vimentin）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达。［结果］ 胃癌细胞中Sox-5 mRNA的相对表达水平高于正常人胃黏膜上皮细胞（P<0.01）；与转染sh-NC组相比，转染sh-Sox5质粒组中Sox-5蛋白的相对表达水平降低（1.120±0.142 vs 0.124±0.010，t=9.032，P<0.001）；与转染sh-NC组相比，转染sh-Sox-5组细胞增殖活性显著降低（1.32±0.10 vs 0.74±0.06，t=3.514，P=0.005），迁移率能力减弱（46.2%±4.7% vs 17.6%±2.5%，t=9.625，P<0.001），侵袭能力减弱（93.7±9.1 vs 113.7±6.5，t=3.103，P=0.036）；敲低Sox-5蛋白表达后Twist和Vimentin蛋白表达减弱，E-cadherin蛋白表达增强（P均<0.001）。［结论］ 敲低胃癌细胞中Sox-5的表达，可抑制胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT。     

Vimentin和E-cadherin蛋白在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的: 研究波形蛋白（Vimentin）和E-钙黏蛋白（E-cadherin）在人乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法: 回顾性分析2014 年1 月至2016 年1 月在安徽医科大学附属巢湖医院接受乳腺癌根治术的56 例乳腺癌组织和相应癌旁组织标本以及病历资料,用免疫组织化学染色法和qPCR 分别检测癌组织中Vimentin、E-cadherin 蛋白和mRNA的表达,分析Vimentin 和E-cadherin蛋白在乳腺癌组织中的表达与临床病理特征的关系。用Logistic 多因素回归分析影响Vimentin 和E-cadherin 蛋白表达的独立因素,用Spearman 分析Vimentin 与E-cadherin 蛋白表达的相关性,用Kaplan-Meier 分析Vimentin 和E-cadherin 蛋白表达与预后的关系,用ROC曲线分析Vimentin 和E-cadherin 蛋白表达对预后的诊断。结果: 56 例乳腺癌组织中Vimentin 和E-cadherin 蛋白高表达率分别为76.79%和19.64%;其中47 例（47/56,83.93%）乳腺癌组织中Vimentin mRNA 的表达量显著高于癌旁组织（P<0.05）,46 例（46/56,82.14%）乳腺癌组织中E-cadherin mRNA的表达量显著低于癌旁组织（P<0.05）。Vimentin 蛋白表达与肿瘤大小、淋巴结转移、脉管侵袭、组织学分级、临床分期、分子分型、Ki67 阳性、ER阴性、PR阴性及HER2 阴性表达均有关（均P<0.05）;E-cadherin 蛋白表达与淋巴结转移、脉管侵袭、组织学分级、临床分期、分子分型、Ki67 阳性、ER阴性、PR阴性及HER2 阴性表达均有关（均P<0.05）。肿瘤大小、淋巴结转移、脉管侵袭、组织学分级、临床分期、分子分型、Ki67 阳性、ER阴性、PR阴性及HER2 阴性表达均是促进Vimentin 和E-cadherin 表达的独立影响因素（P<0.05）,且Vimentin 与E-cadherin 蛋白表达呈负相关关系（P<0.05）。Vimentin 蛋白高表达的患者3 年生存率为67.44%,E-cadherin 蛋白低表达的患者3 年生存率为68.89%。结论: 在乳腺癌组织中Vimentin高表达和E-cadherin低表达与乳腺癌发生发展、侵袭转移及患者预后有关,可作为临床诊断与预后的评价指标。     

蒲公英萜醇调控ABHD11-AS1介导上皮间质转化对膀胱癌细胞侵袭转移的作用

摘 要：［目的］ 探究蒲公英萜醇通过调控α/β水解酶域11反义RNA1（ABHD11-AS1）对膀胱癌细胞侵袭转移的作用,并分析相关机制。［方法］ 将对数生长期的人膀胱癌细胞系EJ细胞分为空白对照组（细胞不做特殊处理）、蒲公英萜醇组（给予蒲公英萜醇100 μmol/L处理24 h）、蒲公英萜醇-pcDNA组（转染pcDNA 24 h给予细胞蒲公英萜醇100 μmol/L处理24 h）、蒲公英萜醇-pcDNA-ABHD11-AS1组（转染pcDNA-ABHD11-AS1 24 h后细胞给予蒲公英萜醇100 μmol/L药物处理24 h）。实时荧光定量PCR法检测细胞ABHD11-AS1水平;细胞增殖-毒性8检测试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖;划痕实验、Transwell实验分别检测细胞迁移、侵袭能力;蛋白免疫印迹法检测上皮间质转化标志蛋白E-钙黏附蛋白（E-cadherin）、N-钙黏附蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达变化。［结果］ 与空白对照组比较,蒲公英萜醇组EJ细胞ABHD11-AS1水平、侵袭细胞数、细胞迁移率、N-Cadherin、Vimentin蛋白水平均降低（P＜0.05）,EJ细胞增殖抑制率、E-cadherin蛋白水平升高（P＜0.05）。与蒲公英萜醇组、蒲公英萜醇-pcDNA组比较,蒲公英萜醇-pcDNA-ABHD11-AS1组EJ细胞ABHD11-AS1水平、侵袭细胞数、细胞迁移率、N-Cadherin、Vimentin蛋白水平均升高（P＜0.05）,EJ细胞增殖抑制率、E-cadherin蛋白水平降低（P＜0.05）。［结论］ 蒲公英萜醇能够抑制膀胱癌细胞侵袭及迁移,可能是通过抑制ABHD11-AS1介导的上皮间质转化发生实现的。     

盐酸川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌细胞黏附能力的影响

摘 要：［目的］ 探讨盐酸川芎嗪联合顺铂对小鼠Lewis肺癌细胞侵袭黏附能力的影响及其作用机制。［方法］ 小鼠Lewis肺癌细胞体外培养,细胞黏附侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变,Western Blot检测各组细胞Twist、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达的变化。［结果］ 经DDP与TMP干预36h后,与对照组相比,用药组细胞的侵袭能力呈剂量依赖性下降,且DDP联合TMP组与单独使用DDP组相比,抑制细胞侵袭的能力更为显著（P＜0.05,P＜0.01）。细胞黏附实验显示,与对照组（23.76±1.64）相比,单独应用顺铂（47.40±0.85）可显著性增高细胞黏附抑制率（P＜0.01）,而单独应用TMP需药物浓度达到2000μg/ml时才可显著性增高黏附抑制率（P＜0.01）,两药联合组黏附抑制率均高于单独使用DDP组,尤以高剂量组抑制率最为显著（P＜0.01）。与单独用药相比,DDP+TMP可降低Twist、N-cadherin蛋白,并上调E-cadherin蛋白的表达（P<0.01）。［结论］ 盐酸川芎嗪联合顺铂能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的侵袭和转移,其机制可能与直接抑制肿瘤细胞侵袭,抑制相关基因蛋白Twist及N-cadherin,促进黏附分子E-cadherin蛋白表达有关。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

胰头癌手术切除可能性的术前评价

目的通过总结胰头癌病人的临床表现和影象学检查结果来评价手术切除的可能性。方法总结32例胰头癌病人的临床表现和CT、磁共振（MRI）检查结果,判断肿瘤是否已发生邻近浸润或远处转移,以此来评价其手术切除的可能性。结果在22例作CT检查的病例中,判断正确的为17例,准确率为77．3%。作MR检查9例,全部判断正确,准确率为100%。结论某些特殊的临床表现和CT、MR检查对判断肿瘤是否发生邻近浸润或转移有较大价值,为术前评价手术切除的可能性提供依据。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。