血标本的不同处理对ELISA法HBsAg检测结果的影响

乙型病毒性肝炎(下称乙肝)在我国的发病率很高,乙肝表面抗原(HBsAg)是乙肝感染的重要监测指标,HBsAg检测常采用酶联免疫吸附试验(ELISA),而在ELISA检测HBsAg中,有时出现一块检测板上血液标本孔的A值均较高的现象(大多数A值≥0.060),即出现ELISA检测的“花板”现象,标本的阳性率很高(每板89份标本中有10~20份阳性结果),且大多数阳性标本都出现弱阳性结果(0.080≤A值≥0.200),导致结果难以判断。笔者对此作了如下探讨。1材料与方法1.1标本附属医院留取的HBsAg金标法检测HBsAg为阴性的血标本89份。1.2试剂与仪器HBsAg的ELISA…     

乙肝／梅毒联合金标试纸在160例无偿献血者中的应用评价

目的探讨乙型肝炎病毒表面抗原／梅毒螺旋体（HBsAg／TP）联合全血金标试纸条的性能和应用价值。方法采用HBsAg／TP联合金标试纸条法、TP—ELIsA和HBsAg-ELISA法对40份HBsAg和TP阳性混合血样和160份无偿献血者血标本进行平行检测分析。结果HBsAg／TP金标试纸条检测40份HBsAg和TP阳性混合血样,结果试纸条上均出现2条阳性反应检测线;从160份无偿献血者的初筛血标本中检测出HBsAg阳性13例,TP抗体阳性6例;后经TP—ELISA和HBsAg-ELISA法确认,检测结果完全一致。结论HBsAg／TP联合检测金标试纸法具有操作简单、标本量少、特异性和敏感性均高、反应速度快等特点,可同时检测HBsAg和抗一TP两项,用于无偿献血者的血清HBsAg和TP的筛查,可明显提高无偿献血的合格率,对于确保临床输血安全具有重要作用。     

RPHA法与ELISA法测定HBsAg敏感性比较

本文报道了应用 RPHA 法及 ELISA 法测定 HBsAg 及两种方法敏感性的比较。共测定2627份血清,ELISA 法 HBsAg 阳性率6.3%,RPHA 法 HBsAg 阳性率3.5%;对 HBsAg 阳性标本再用 ELISA 法测定抗-HBs,HBeAg,抗-HBe,抗-HBc,结果为:两法均阳性的92份标本,其四项指标检测有81份有阳性反应;ELISA 法阳性,RPHA 法阴性的74份标本,有61份呈阳性反应。经比较,作者认为 ELISA 法比 RPHA 法敏感性强。     

HBsAg阴性血清的其它乙肝标志物检测

目前的研究表明,在HBsAg阴性血清标本中,部分有一定的传染性,因而检测其它乙肝标志物具有相当重要的价值。本文对HBsAg阴性血清标本1407份进行其他乙肝标电物检查,结果如下。 1407份HBsAg阴性血清标本中,抗-HBs阳性236例,阳性率为16.77%(其中注射乙肝疫苗者阳性有54例,占抗-HBs阳性总数的22.88%);抗-HBc阳性274     

实时荧光PCR检测HBsAg阴性、抗HBc阳性献血者血液中HBV DNA研究

目的对乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阴性、乙型肝炎核心抗体（抗HBc）阳性的献血者血液进行经输血传播乙型肝炎病毒（HBV）的风险评估,为完善HBV血液筛查模式及确保临床用血安全提供依据。方法对献血者血液常规检测阴性的标本进行8×45 μL汇集,应用实时荧光聚合酶链反应(PCR)进行混样核酸检测HBV DNA。对血液常规筛查和混样核酸检测合格的标本,进行随机乙型肝炎血清学5项标志物的酶联免疫吸附试验(ELISA)。对获得的HBsAg阴性、混样HBV DNA阴性、抗HBc阳性的标本,进一步采用单份样本（720 μL）实时荧光PCR法检测并定量分析。结果混样标本共检测12 552份,检出HBsAg阴性、HBV DNA阳性标本2份,阳性率为0.02%。随机筛查混样核酸检测阴性标本614份,检出抗HBc阳性标本320份,对此320份标本进行单份核酸检测,检出阳性标本1份,阳性率为0.31%。结论HBsAg阴性、抗HBc阳性献血者血液存在输血传播HBV的风险,应用核酸扩增技术检测血液HBV DNA能大大提高血液安全性。     

微波-ELISA二步法检测乙肝标志物在工厂体检中的应用

目的：探讨微波-ELISA二步法用于工厂体检中的要求及其准确性。方法：对1128份做HBsAg和HBeAg检查的工厂体检标本，对照常规ELJSA法．做微波-ELISA二步法检测；并对HBsAg阳性结果复查。结果：ELISA有119份HBsAg阳性，32份HBeAg阳性；微波法有122份HBsAg阳性，34份HBeAg阳性；HBsAg阳性结果经胶体金HBsAg快速检测纸条检测均为阳性。结论：微波-ELISA二步法检测乙肝标志物具有时间短、操作简便，灵敏度高等特点，用二步法进行检测，可减少HOOK现象，可用于检测HBsAg和HBeAg的大量工厂体检中，能加快出报告时间，大大提高工作效率。     

G145R变异HBsAg免疫检测方法的建立及其应用特征的实验研究

目的 建立G145R变异HBsAg检测ELISA,并探讨其应用特征.方法 采用SPA亲和层析纯化抗体;以抗G145R变异HBsAg McAb包被,羊抗HBs-HRP示踪,建立双抗体夹心ELISA;将该法初步应用于临床标本的检测,并将阳性标本以PCR、DNA直接测序、雅培Abbott试剂等方法做对比分析,探讨其临床检测特征.结果 该法能特异检测G145R变异HBsAg,而与野生型HBsAg无交叉反应,灵敏度约为2.0μg/L;平均批内及批间CV分别为(8.87±3.04)%和(8.3±2.95)%.该法从206例特定HBV感染相关标本中检出阳性18份,阳性率为8.7%;18份阳性标本中HBV DNA阳性6例,直接测序检出I126A及M133T各一例;雅培Abbott试剂检测该6份标本HBsAg含量在(4.62～211)IU/ml间.结论 建立了一种快速、简便的G145R变异HBsAg检测ELISA,该法也能检测部分具有类似抗原性漂移的其它逃逸变异HBsAg.     

时间分辨荧光免疫分析法检测HBsAg的假阳性和解决方法

目的避免时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测HBsAg假阳性的发生。方法对TRFIA法检测HBsAg结果为弱阳性的30份标本,全部用ELISA复核检测,复查ELISA为阳性的发阳性报告;ELISA法检测结果阴性者,用PCR法再次复查,阴性者发阴性报告。结果TRFIA法检测HBsAg的假阳性占总检测标本的百分比为0.191%(16/8372),而用PCR法再次复查后假阳性占总检测标本百分比降至0.179%(15/8372)。结论TRFIA法检测HBsAg假阳性偶有发生,绝大多数可以通过用ELISA法复检加以纠正。     

确认试验在乙型肝炎表面抗原弱阳性标本中的临床应用

目的探讨确认试验在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱阳性标本中的临床应用。方法对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测的HBsAg结果在0.875~2.857的血清标本进行抗体中和确认试验,并进行微粒子酶免疫发光(MEIA)试验,对比各试验结果间的差异。结果 ELISA检测阳性75份阳性率83.3%,抗体中和试验确认试验阳性76份阳性率84.4%,两项试验检测结果间差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ELISA试验检测HBsAg结果为弱阳性的标本,应进行确认试验,排除假阳性,保证样本结果的真实性,对减少医疗纠纷、防止医源性感染具有重要意义。     

济南市无偿献血者HBV感染情况分析

目的分析济南市无偿献血者HBV感染情况,为隐匿性乙型肝炎(乙肝)的检测提供依据。方法选择2010年6月—2012年12月采集的无偿献血者血液标本207 705份,均经酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)筛查,经筛查后HBsAg、抗-HCV和抗-HIV-1/2无反应性及仅1种试剂为反应性的标本共203 606份,进行核酸扩增技术(nucleic acid amplification techniques,NAT)检测。结果 ELISA检测HBsAg阳性1 059份,阳性率0.510%;NAT检测NAT阳性130份,阳性率0.064%。检出HBV DNA阳性标本74份,阳性率64.910%。结论 HBV感染仍是导致血液淘汰的重要原因之一,通过NAT检测,可以极大地增加隐匿性乙肝的检出率,降低血液残余风险。要加强采血前征询及HBsAg快检工作,提高实验室检测水平,确保血液安全。     

空气中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的初步检测

本文报导了空气中 HBsAg 的初步检测结果。在肝炎实验室等易受 HBsAg 阳性物污染处测出部份标本阳性;实验性制备的 HBsAg 空气标本为阳性;不易受 HBsAg 阳性物污染处所取标本均为阴性。结果经中和试验验证。本文结果提示,经空气感染有可能是乙型肝炎传播的一种途径。     

容奇港小型货轮生活用品污染HBsAg调查

作者于1989年春,对船员携带HBsAg阳性率较高的小型货轮上的生活用品进行了HBsAg污染情况调查。用透析浓缩法处理标本,ELISA法检测HBsAg,检出两份阳性,说明这些生活用品部分受到了HBsAg污染,应予消毒处理。     

医院外环境乙型肝炎表面抗原(HBsAg)污染状况检测

本文通过对三省七所医院外环境医疗器械、物品、消毒液HBsAg污染状况检测,证实我局七所医院中存在着HBV的污染,从1494份标本中检出HBsAg阳性率为4.49％(67/1494),其中物品受HBsAg污染较器械和消毒液高。在所检测的12个科室中有10个科室检出HBsAg阳性标本,占所检测科室的83.3％。三省医院HBsAg污染状况分布,以广东地区检出率为最高(6.61％),     

全自动酶免分析仪检测HBsAg呈假阳性352例原因分析

目的分析全自动酶免分析仪检测血清中HBsAg时出现假阳性的原因,以便加以控制。方法用全自动酶免分析仪检测血清中HBsAg(ELISA法),对2次检测结果阴阳性不同的352份标本进行原因分析。结果各种原因所占比例分别为:试剂盒质量占1.42%,标本处理占3.69%,溶血占0.28%,加样针堵塞和清洗不全占84.94%,洗板不当占9.38%,显色剂放置时间过久等因素都影响HBsAg的检测结果。结论用全自动酶免分析仪ELISA法检测HBsAg时,出现假阳性原因占比例最高的为加样针堵塞和钢针清洗不干净。应针对各种因素,做好检测过程中的质量控制。     

HBsAg阴性安全性初步评价

目的 探讨HBsAg阴性血清中是否有HBV-DNA的存在以及其传染性强弱,使用PCR仪对我国目前献血员的乙肝筛查安全性进行初步评价.方法 利用酶联免疫吸附实验对HBsAg阴性的1430例非献血员和1608例献血员血清进行乙肝标志物检测,剔除单独Anti-HBs阳性和全阴性血清,其余血清采用聚合酶链反应定量检测HBV-DNA拷贝数.结果 剔除单独Anti-HBs阳性和全阴性血清标本后,非献血员标本中其他阳性组合模式有52份（3.64% ）,HBV-DNA呈阳性1份（0.07% ）;献血员标本有182份（11.32% ）,HBV-DNA呈阳性4份（0.25% ）;所有HBV-DNA阳性血清均为Anti-HBc阳性.结论 HBsAg阴性血清中仍有HBV-DNA存在的可能,仅检测HBsAg筛查献血员是不够的,应对献血员进行更严格的HBV标志物检查,例如增加Anti-HBc的检测.如有条件,可检测HBV-DNA.     

湖南省衡东县某高中部入学新生乙肝病毒感染状况调查

目的了解近年来高中生乙肝病毒感染状况,为该人群的今后预防对策提供依据。方法选择某高中部2006-2009年入学新生2 756名,用酶联免疫吸附（ELISA）法检测乙肝HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc。结果 2 756份血清标本中HBsAg阳性率为4.46%;2006-2009年阳性率为5.67%-2.73%;男女性别间阳性率为3.08%、2.3%。检测出HBsAg阳性123份血清标本中5种感染模式,以HBsAg、抗-HBe、抗-HBc三项阳性最高为47.15%,其次HBsAg、抗-HBc二项阳性为28.46%,HBsAg、HBeAg、抗-HBc三项阳性为16.26%,HBsAg、HBeAg二项阳性4.88%和HBsAg阳性为3.25%。结论近年来高中新生HBsAg感染率呈逐年下降趋势;HBsAg阳性者中HBeAg阳性率为21.14%,是可能导致乙肝病毒传播的危险因素,加强对HBV携带者的管理和采取乙肝疫苗预防接种等措施,对高中新生乙型肝炎防治具有重要意义。     

免疫结合胶体金层析法和ELISA检测HBsAg用于口岸卫生检疫的风险评估

目的评估免疫结合胶体金层析法(dot immunochromatography gold assay,DICGA)和ELISA检测HBsAg在口岸卫生检疫中的风险.方法用ELISA对血清标本进行HBsAg检测,对阳性标本用DICGA复检,对复检阴性标本再用ELISA检测.比较两种方法的一致性.分析DICGA阴性,而ELISA阳性的标本数在各个吸光度区间的构成比.结果对10 566份出入境人员血清标本用ELISA进行两对半检测,对1 189份HBsAg阳性血清用DICGA进行复核检验,对其中328份DICGA阴性标本再次用ELISA检验,检出39份阳性,289份阴性.DICGA的敏感性为95.67%,准确性为96.72%,特异性为100%,两种方法的一致性(Kappa值)达91.48%.DICGA阴性但是ELISA阳性的标本数在各个吸光度区间的构成比分别是(1.5,1.0)17%,(1.0,0.5)50%,(0.5,0.105)100%.DICGA在(1.5,0.105)区间有一半以上HBsAg不能检出(56.52%),在(1.0,0.105)有77.78%的假阴性,对(0.5,0.105)则基本不能检出.对ELISA两种试剂的假阳性率分别为:34.66%(269/776)和4.84%(20/413).结论在口岸卫生检疫中,不宜单独用DICGA检测HBsAg.对ELISA需要选择质量高的试剂,每个实验室最好在使用前亲自傲试剂评估.     

天津口岸出入境人员乙型肝炎病毒基因分型研究

[目的]探讨天津口岸出人境人员乙型肝炎病毒（HBV）的基因类型分布特征。[方法]调查天津口岸出入境人员HBV血清学指标，采用实时荧光定量PCR结合Taqman探针技术对180份乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性血清标本中的HBVDNA进行定量检测和基因分型；对非B非C型HBsAg阳性血清标本采用通用引物PCR方法结合序列分析进行基因分型。[结果]180份HBsAg阳性血清标本中，B型23份（40．35％）；C型30份（52．63％）；D型4份（7．02％），其余123份血清HBVDNA浓度均低于定量检测试剂盒的下限（500IU／ml）。[结论]天津口岸出入境人员中HBV基因型以C型为主，B型次之，D型极少。     

胶体金试纸法与酶联免疫吸附试验检测乙型肝炎病毒表面抗原的比较

目的对胶体金试纸法与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)做比较,了解胶体金试纸法的灵敏度和特异度。方法采用两种方法检测0~65岁人群血清标本3 578份。结果胶体金试纸法检测出HBsAg阳性标本189份,阳性率5.28%;ELISA法检测出阳性标本200份,阳性率5.59%;两种方法阳性检出率差异无显著统计学意义。胶体金试纸法与ELISA法检测标本符合率为97.74%。胶体金试纸法的灵敏度为77.00%,特异度为98.96%。结论胶体金试纸法操作简便、快速,检测的特异度较好,但其灵敏度有待提高。     

献血员乙型肝炎病毒感染筛查安全性初步评价

[目的]探讨HBsAg阴性血清中是否有HBV-DNA的存在,以对我国目前献血员的乙型肝炎筛查安全性进行初步评价.[方法]利用酶联免疫吸附试验对HBsAg阴性的1430例非献血员和1608例献血员血清进行乙肝标志物检测,剔除单独anti-HBs阳性和全阴性血清,其余血清采用聚合酶链反应定量检测HBV-DNA拷贝数.[结果]剔除单独anti-HBs阳性和全阴性血清后,非献血员标本中其他阳性组合模式有52份(3.64%),HBV-DNA呈阳性1份(0.07%);献血员标本有182份(11.32%),HBV-DNA呈阳性4份(0.25%);所有HBV-DNA阳性血清均为anti-HBc阳性.[结论]HBsAg阴性血清中仍有HBV-DNA存在的可能,仅检测HBsAg筛查献血员是不够的,应对献血员进行更严格的HBV标志物检查,例如增加anti-HBc的检测.如有条件,可检测HBV-DNA.