Zmu-1:DHP豚鼠气道对组胺的敏感性与组胺H1受体表达量的相关性研究

目的　研究Zmu-1：DHP豚鼠气道对组胺诱导产生的反应及气道组胺H1受体的表达量,阐明豚鼠气道敏感性与组胺H1受体数量的关系,为哮喘研究提供具有较高敏感性的速发型过敏的动物模型。方法　通过活体气管插管及雾化组胺气体吸入,测定豚鼠气道阻力和肺动态顺应性;采用离体气管片组胺滴定法,通过气管片收缩测定气管平滑肌对组胺的敏感性;采用同位素标记药物配位法,测定豚鼠气道组织组胺H1受体的密度及平衡解离常数。结果　当豚鼠吸入大于0.5mg/ml雾化组胺时,Zmu-1：DHP豚鼠气道阻力上升率和肺动态顺应性下降率与DHP豚鼠相比,其速度有增大趋势,但未达到显著水平 (P >0 0 5 );两个品系豚鼠雄性个体比雌性的敏感性显著增加（P <0.01）。当组胺浓度为10-5M和10-4M时,Zmu-1：DHP豚鼠气管片平滑肌的收缩率显著大于DHP豚鼠 (P <0.01-0.05 )。两个品系豚鼠气道组胺H1受体的密度及其平衡解离常数无显著差异(P >0 0 5 )。 结论　在一定的组胺浓度范围内,Zmu-1：DHP豚鼠气道平滑肌对组胺的敏感性大于DHP豚鼠,雄性豚鼠的敏感性大于雌性豚鼠。豚鼠气道对组胺的敏感性与其组胺H1受体数量未表现出显著的相关性,提示气道反应可能还受到平滑肌膜上其它受体和化学介质的作用。     

两个豚鼠品系速发型哮喘模型中组胺受体的表达及对肺功能的影响

目的 建立Zmu-1:DHP和DHP两个豚鼠品系的速发型哮喘模型,探讨组胺受体1(H1R)和组胺受体2(H2R)在肺组织中的表达及对肺功能的影响.方法 两个豚鼠品系分别设置模型组(MW,MP)和对照组(BW,BP),模型组采用卵清白蛋白(OVA)致敏,对照组使用生理盐水.第1,14日致敏豚鼠,第28日用OVA雾化激发,记录0～8min内动态肺顺应性(Cdyn)和气道阻力(Raw)变化.取肺组织样品,进行H1R和H2R mRNA表达检测和免疫组织化学分析.结果 OVA雾化激发后,Zmu-1:DHP和DHP品系模型组(MW,MP) Cdyn下降,Raw上升,变化幅度先大后小,约3 min达到最大,而两品系对照组(BW,BP)变化较小.其中,MW组反应较MP组更敏感.定量PCR分析,MW模型组的H1R,H2R mRNA表达量高于对照组BW(P＜0.05,P＜0.05),肺组织切片HE染色,模型组(MW,MP)肺泡间可见明显的炎症细胞浸润,而对照组(BW,BP)未见.免疫组织化学可见,H1R和H2R主要分布在气道和血管周围的平滑肌上.结论 速发型哮喘模型,H1R和H2R主要分布在肺部气管周围的平滑肌上,H1R的高表达与哮喘模型的气道敏感性密切相关.     

两个品系豚鼠对化学介质诱导产生气道反应的差异性研究

目的　研究新育成的Zmu 1∶DHP豚鼠气道对外界化学介质诱导产生的反应性。为研究哮喘选择和提供具有较高敏感性的速发型过敏性动物模型。方法　采用雾化气体吸入法 ,按递增浓度 ,让动物吸入组胺及乙酰胆碱气体 ,记录豚鼠到达哮喘发作时的介质浓度和呼吸频率及幅度 ,评定对化学介质的敏感程度 ,同时用DHP品系豚鼠进行对照。结果　当 0 2 %组胺浓度雾化吸入时 ,Zmu 1∶DHP豚鼠哮喘发作的呼吸频率及每分钟通气量 ,显著大于DHP豚鼠 (P <0 0 5 ) ;当 0 4 %浓度时 ,前者的潮气量及每分钟通气量 ,比后者有增高的趋势 (P <0 0 5 ) ;当0 6 %浓度时 ,前者的潮气量及每分钟通气量 ,显著小于后者 (P <0 0 5 )。二个品系豚鼠吸入乙酰胆碱雾化气体后 ,无明显差异 (P >0 0 5 )。结论　在低浓度组胺雾化吸入时 ,Zmu 1∶DHP品系豚鼠产生哮喘的敏感性显著高于DHP豚鼠 ;高浓度时 ,气道可能因失敏而降低反应性     

两品系豚鼠屈光状态和眼球径的发展和比较

【摘要】 目的 了解断奶后Zmu-1:DHP和DHP两个品系豚鼠屈光状态和眼球径的发展规律。方法 首先进行3周龄两品系豚鼠屈光检测,然后选择Zmu-1:DHP品系豚鼠12只,DHP品系8只,按品系分成两组。在4-12周龄,每隔一周检测屈光度、眼轴长和角膜曲率等参数。结果 3周龄,327只Zmu-1:DHP品系豚鼠,屈光度为-5.19?.92 D,近视率达85.1%;而117只DHP品系豚鼠屈光度为2.13?.40 D,近视率仅为22.6%。4-12周龄,Zmu-1:DHP品系豚鼠近视不断加深,屈光参差>1.5D;DHP品系豚鼠屈光发育稳定。T-检验,Zmu-1:DHP品系豚鼠眼轴长度、玻璃体腔深度显著高于DHP品系,视力低于DHP品系。多因素方差分析,Zmu-1:DHP品系豚鼠散光随时间变化显著（P＜0.01）,而DHP品系不显著（P=0.07）。相关性分析,Zmu-1:DHP品系豚鼠屈光状态与眼轴长相关系数为-0.79（P＜0.01）、与玻璃体腔深度相关系数为-0.75（P＜0.01）;而DHP品系相应相关系数为-0.19（P=0.09）和-0.34（P＜0.01）。结论 Zmu-1:DHP品系豚鼠近视高发,正视化过程难以完成,其近视与眼轴长度和玻璃体腔深度高度相关。     

Zmu-1:DHP近交系豚鼠的培育及其分子遗传结构初步鉴定

目的 培育近交系豚鼠品系,建立检测豚鼠遗传结构的微卫星分子标记。方法 采取近交与回交、单线与优选繁育、选择与淘汰等方法,试图将Zmu-1：DHP远交系豚鼠培育成Zmu-1：DHP近交系豚鼠。用15对已筛选出的豚鼠多态性微卫星引物（另行报道）,对该近交系及参照的Zmu-1：DHP远交系和Zmu-2：DHP近交系豚鼠DNA样本进行PCR,通过产物电泳条带分析相关品系的遗传结构,评价各品系遗传纯合性。同样方法研究Zmu-1：DHP近交系各支系豚鼠的遗传结构,评价各支系的遗传纯合性。结果 经过13年培育,获得8个20代以上的近交豚鼠支系（窝）,每个支系分别有1-3只。经鉴定,Zmu-1：DHP近交2系的基因频率达到86.7%,分别高于Zmu-1：DHP远交系的6.7%及Zmu-2：DHP近交系的66.7%;其位点平均基因数为1.13个,分别低于Zmu-1：DHP远交系的2.47个及Zmu-2：DHP近交系的1.33个;Zmu-1：DHP近交系基因型频率也高于其他品系。Zmu-1：DHP近交系的基因类型均包含在Zmu-1：DHP远交系的基因内,但缺少Zmu-2：DHP近交系所携带的2个特征基因。Zmu-1：DHP近交系8个支系的基因纯合率各不相等,第2、8支系基因纯合率较高。结论 Zmu-1：DHP近交系与Zmu-1：DHP远交系之间既有同源性,又有特异性,Zmu-1：DHP近交系第2支系基本培育成新的近交系豚鼠,多个近交支系的形成有利于筛选具优势性状的支系。Zmu-2：DHP黑色近交系携带白色品系未有的微卫星标记,可能携有与毛色性状关联的优越性状基因。     

豚鼠气管平滑肌化学介质敏感性与体征表型相关性研究

【【摘要】目的 研究豚鼠体征表型与气管平滑肌化学介质敏感性的相关性。方法 根据体征表型眼睛颜色、毛色、性别差异选取36只豚鼠,将动物按体征表型分为白色黑眼雌性组（WBEF）,白色黑眼雄性组(WBEM),白色红眼雌性组(WREF),白色红眼雄性组(WREM),杂色黑眼雌性组(VBEF),杂色黑眼雄性组(VBEM),每组动物各6只。用旋割法制备离体豚鼠气管螺旋条,以组胺histamine (浴槽浓度2.0×10-3 g/L)和乙酰胆碱acetylcholine (浴槽浓度2.0×10-4 g/L)诱导气管螺旋条收缩,用BL420生物信号采集系统与张力传感器测定标本张力变化值,分析豚鼠眼睛颜色、毛色、性别与组胺、乙酰胆碱诱导的气管螺旋条收缩效应强弱的关系。数据采用SPSS11.5软件在α = 0.05的信度下进行单因素方差检验。结果 豚鼠毛色与眼睛颜色表型其气管平滑肌化学介质敏感性差异显著,P＜0.05,有统计学意义,白色体征表型豚鼠的气管平滑肌化学介质敏感性较杂色表型高,红色眼睛表型较黑色眼睛表型高。性别表型对其介质敏感性差异不显著。结论 毛色、眼睛颜色表型不同其豚鼠气管平滑肌化学介质敏感性差异显著,性别表型不同其介质敏感性差异不显著,平喘动物模型宜优先选择白色红眼表型豚鼠。     

Zmu─1:DHP豚鼠生化基因位点多态性研究

为了研究Zmu－1：DHP育成品系豚鼠的遗传特征，以该品系亲本DHP（暂定名Zmu－2：DHP）豚鼠作对照，采用生化电泳法测定了14个同工酶的遗传标记。结果显示了二个品系的部分生化遗传概貌。Zmu－1：DHP品系10个基因位点无多态性，而Zmu－2：DHP品系有9个。二个品系的G－3－PD，G－6－PD、ES－6和ES－8位点呈多态性，DPH品系还有GOT-1位点呈多态性。上述5个多态性位点均有a、b二个等位基因，除此之外，Zmu—2：DHP品系在Es－8位点还存在c等位基因。从结果还看出，G－6－PD位点的等位基因类型与豚鼠的性别有关，多数雄性豚鼠呈b基因，多数雌性豚鼠则呈a基因。此外，还计算了5个多态性位点各种等位基因的频率。     

氯胺酮雾化吸入对致敏豚鼠气道平滑肌蛋白激酶C活性的影响

目的:研究氯胺酮雾化吸入对致敏豚鼠气管平滑肌PKC活性的影响。方法:①10只雄性豚鼠用整体引喘法分别测定雾化吸入1%~5%氯胺酮10min后豚鼠气道反应性的变化。②40只雄性豚鼠随机分为正常组(N组)、哮喘组(A组)、3%和5%氯胺酮雾化吸入组(K1组和K2组,n=10)。A组、K1组和K2组均在激发哮喘发作后,分别给予0.9%NaCl、3%或5%氯胺酮雾化吸入10min。1周后,取所有豚鼠的气管测定PKC活性。结果:①2%~5%氯胺酮雾化吸入10min后有明显的气道舒张作用(P>0.05)。②气道平滑肌内PKC活性A组较N组明显升高(P<0.05)。K1和K2组气道平滑肌内PKC活性均比N组高,但较A组低(P<0.05),而K1组和K2组之间无明显区别。结论:①2%~5%氯胺酮雾化吸入5min以上有良好的平喘作用。②致敏豚鼠气管平滑肌的PKC活性较正常豚鼠明显增加。3%和5%氯胺酮雾化吸入对致敏豚鼠气道平滑肌的PKC活化有抑制作用。     

丙泊酚对组胺所致豚鼠气道高反应影响的实验研究

目的：本文旨在探讨丙泊酚对组胺所致气道高反应豚鼠的影响,为丙泊酚能否安全合理的应用气道高反应于患者提供理论依据。方法：将豚鼠离体气管平滑肌条置于装有Krebs-Henseleit液的灌流肌槽中温育,并通入95%O2和5%CO2的混合气体,用Medlab生物采集系统记录肌条的等长张力变化。结果：丙泊酚450mmol/L对组胺诱发的收缩均有明显的舒张作用。结论：丙泊酚可使组胺所致的气管平滑肌的收缩有明显抑制作用,并且随着用丙泊酚剂量的增加舒张气管平滑肌的作用更明显。     

下丘脑室旁核组胺H3受体对哮喘大鼠呼吸运动的调节

目的:探讨下丘脑室旁核(PVN)组胺H3 受体对哮喘大鼠呼吸运动的影响及其作用机制。方法:将大鼠随机分为对照组、模型组、假手术组、生理盐水组、PVN内微量注射特异性组胺H3 受体激动剂R- (α) - 甲基组胺[(R -(α) - methylhistamine ,R- (α) -MeHA]的R- (α) - MeHA组以及PVN内微量注射组胺H3 受体拮抗剂thioperamide(Thio)的Thio组,采用中枢立体定位技术,在PVN植入带芯的不锈钢外套管,通过内管恒速注射不同药物。用电生理方法记录膈肌肌电活动;用胸内压法测定气道阻力、肺顺应性。结果:与对照组比较,模型组膈肌放电频率增加,膈肌肌电积分幅值下降,气道阻力增加,肺顺应性降低(均为P <0 .0 1)。与生理盐水组比较,R- (α)- MeHA组膈肌放电频率下降(P <0 .0 1) ,膈肌肌电积分幅值增加(P <0 .0 5 ) ,气道阻力降低(P <0 .0 1) ,肺顺应性改善(P <0 .0 1) ;Thio可阻断上述效应,差异均有统计学意义。结论:PVN内组胺H3 受体参与呼吸运动的调节,特异性激动组胺H3 受体能改善哮喘大鼠的肺功能。     

Zmu-1:DHP豚鼠的随机扩增多态性DNA分析

目的：研究Zmu-1：DHP豚鼠基因组DNA的遗传多态性及其遗传概貌，探讨随机引物PCR(RAPD—PCR)在豚鼠遗传质量检测中运用的可行性。方法：用RAPD—PCR法，对新培育的Zmu—1：DHP豚鼠和对照品系DHP豚鼠的基因组DNA进行PCR扩增。结果：从40条随机引物中，筛选出2条呈多态性的引物，分别是第S1202号和第S1219号引物。Zmu—1：DHP品系的扩增产物无多态性变化，而且其条带与多数DHP品系的个体相同。少数DHP品系的个体呈多态性变化，并找到该品系增加和缺失的特征性条带各一种。结论：Zmu—1：DHP品系的基因纯合性及个体一致性较DHP品系高。二个品系的DNA序列存在较少差异，说明豚鼠品系间遗传结构比较接近。一旦选定具有多态性的引物，RAPD—PCR法可以区分豚鼠品系，适用于豚鼠遗传质量检定。     

Zmu-1:DHP豚鼠染色体G带、C带及银染核仁组织者的观察

对本中心培育的Zmu－1：DHP豚鼠染色体的G带、C带及银染核仁组织者作了观察。结果表明大部分细胞有较恒定的8个银染点，G带与其他豚鼠有差异，C带则与其他哺乳动物相似，说明Zmu－1：DHP豚鼠在染色体核型上已发生变异。     

Zmu-1:DHP豚鼠乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶同工酶的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法，分析了Ｚｍｕ１：ＤＨＰ豚鼠心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、红细胞和血清的ＬＤＨ及ＳＯＤ同工酶，对ＬＤＨ同工酶谱作了光密度扫描，计算出各同工酶组分的相对活力及不同组织和血清ＬＤＨ中Ａ、Ｂ亚基的含量。Ｚｍｕ１：ＤＨＰ豚鼠肝中缺乏ＤＨＰ豚鼠和其他实验动物肝中普遍存在的ＬＤＨ５组分，多数组织中ＬＤＨＢ亚基含量呈不同程度提高。Ｚｍｕ１：ＤＨＰ豚鼠各组织和血清的ＳＯＤ同工酶呈多带分布。ＳＯＤ１和ＳＯＤ２为共有酶带。     

三个品种豚鼠血液蛋白多态性的比较分析

新生隐球菌是一种具荚膜的酵母样真菌,主要侵犯中枢神经系统和肺脏,好发于免疫功能低下的成人。近年来隐球菌病的发病率越来越高,因而引起国内外真菌学家的高度重视。系统研究新生隐球菌感染导致疾病的关键是动物实验。该菌感染最常用的动物模型主要是小鼠、大鼠和豚鼠,其他动物如兔、猪和一些非哺乳动物也已被用于制作新生隐球菌动物模型。这些动物模型的构建对进一步研究新生隐球菌发病机制、免疫学变化、疫苗的开发和有效的药物的筛选等有极其重要的作用,现就近几年新生隐球菌感染动物模型的进展作一综述。     

Value of D-Dimers in patients with acute aortic dissection

Objective: To evaluatel the value of D-dimers in patients with acute aortic dissection (AAD). Methods: This study consisted of 16 patients with AAD and 27 non-AAD patients. Serum D-dimets were measured by Sta-Liatest D-DI immunoturbidimetric assay. Results: D-dimer level was higher (P ＜ 0.001) in patients with AAD(7.91 ± 5.52 μg/ml) than that in non- AAD group(1.57±1.24 μg/ml). D-dimer was positive (＞0.4 μg/ml) in all patients with AAD and in 10 control group patients (37%). Among patients with acute AAD, D-dimers tended to be higher in Stanford A than in Stanford B (8.67 ± 4.31 μg/ml vs. 3.24±1.27 μg/ml, P ＜0.01). D-dimer values tended to be higher in more extended disease(3.84 ± 1.65 μg/ml, 8.57 ± 3.58 μg/ml and 11.87 ± 5.69 μg/ml in thoracic aorta, thoracic and abdominal aorta, thoracic and abdominal aorta and iliacal arteries, respectively, P ＜ 0.05 for both 8.57 ± 3.58 and 11.87 ± 5.69 vs. 3.84 ± 1.65 ). Including the control group into the analysis, we found a sensitivity of 100%, a negative predictive value of 100%, and a specificity of 66% and a positive predictive value of 64% for D-dimer in diagnosis of AAD in our patients with suspected AAD. Conclusion: D-dimer was elevated in patients with AAD. A negative D-dimer test result could be useful in excluding AAD.     

Research of combined liver-kidney transplantation model in rats

Objective： To set up a simple and reliable rat model of combined liver-kidney transplantation. Methods： SD rats served as both donors and recipients. 4℃ sodium lactate Ringer＇s was infused from portal veins to donated livers,and from abdominal aorta to donated kidneys, respectively. Anastomosis of the portal vein and the inferior vena cava （IVC） inferior to the right kidney between the graft and the recipient was performed by a double cuff method, then the superior hepatic vena cava with suture. A patch of donated renal artery was anastomosed to the recipient abdominal aorta. The urethra and bile duct were reconstructed with a simple inside bracket. Results： Among 65 cases of combined liver-kidney transplantation, the success rate in the late 40 cases was 77.5%. The function of the grafted liver and kidney remained normal. Conclusion： This rat model of combined liver-kidney transplantation can be established in common laboratory conditions with high success rate and meet the needs of renal transplantation experiment.     

BLOOD PRESSURE CHANGE WITH AGE IN SALT-SENSITIVE TEENAGERS

Objective To observe blood pressure change with age in salt-sensitive teenagers whose salt sensitivity were determined by repeated testing.Methods Salt sensitivity was determined through intravenous infusion of normal saline combined with volume-depletion by oral diuretic furosemide in 55 teenagers. After five years, salt sensitivity was re-examined and subject blood pressure was followed up. Blood pressure changes in salt-sensitive teenagers were compared to that of non-salt sensitive teenagers over five years.Results After 5 years, the repetition rate of salt sensitivity determined by intravenous saline loading is 92.7%. In teenagers with salt sensitivity on the baseline, both the systolic blood pressure increments and increment rates were much higher than non-salt sensitive teenagers (12.7±12.1 mmHg vs. 2.8±5.2 mmHg, P＜ 0.01; 12.2%± 12.0% vs. 2.5% ±4.4%, P＜ 0.001,respectively). There was a similar trend for diastolic blood pressure (8.4 ± 6.4 mmHg vs. 3.7 ± 6.4 mmHg, P = 0.052; 13.2% ±10.6 % vs. 6.8%± 10.1%, P = 0.053, respectively).Conclusions Salt sensitivity determined by intravenous saline loading showed good reproducibility. Blood pressure increments with age were much higher in salt-sensitive teenagers than non-salt sensitive teenagers, especially in terms of systolic blood pressure.