微透析技术在药物-蛋白结合研究中的应用

目的 介绍微透析技术在药物-蛋白结合研究中的应用。方法 通过查阅近年来国内外相关文献,概述微透析技术的基本原理、特点、探针及影响探针相对回收率的主要因素,并重点介绍其在药物-蛋白结合研究中的应用。结果与结论 与平衡透析法、超滤法相比,微透析技术是一项新兴的在体或离体取样技术,在药物-蛋白结合研究中具有显著的优越性和广阔的应用前景。     

微透析技术在药物靶组织分布和代谢研究中的应用

微透析技术是一项新兴的在体研究技术，近年来已广泛应用于药物在靶组织分布和代谢研究，对于阐明药物体内过程、疗效和安全性有重要意义，为新药研发与临床合理用药提供科学依据。现通过检索分析相关文献，就微透析技术的概况、微透析探针、透析液的分析及微透析技术在药物靶组织分布和代谢研究中的应用作一综述。     

微透析取样技术及其在药代动力学中的应用

本文综述了近年来国外有关微透析取样技术在药代动力学中的应用，介绍了微透析取样技术的原理、组成以及微透析探针的类型，重点介绍了在体微透析取样技术在动物和人药代动力学中的应用。表明微透析取样技术在药代动力学中的应用具有广阔的前景。     

微透析技术在靶组织局部药物浓度检测中的应用

微透析技术是一项越来越被广泛使用的在体研究技术,其遵循透析原理,以探针为基础取样,可连续检测局部组织细胞外液的药物浓度,能满足常规的药代动力学/药效学(PK-PD)研究。本文就其在靶组织局部药物浓度检测中的应用作一简要介绍。     

微透析技术在药物代谢和药代动力学研究中的应用

本文介绍了近年来有关微透析技术在药物代谢和药动学研究领域中应用的现状入已取得重大进展。微透析技术除应用于动物模型中的研究外,在人体中的研究特别是临床应用方面亦在发展中,该项技术在药物代谢和药代动力学研究领域中有广阔应用前景,但微透析探针校正和对微透析取样获得的少量样品的分析方法是仍需要深入研究的问题。     

提高微透析探针回收率方法的研究进展

微透析是将灌流取样和透析技术结合起来的研究物质动态变化的一种新型采样技术,适合于深部组织和重要器官的活体研究。微透析探针的回收率是影响微透析结果准确性的重要因素之一。微透析探针对物质的回收率通常较低,需结合灵敏的检测方法才能实现物质的定量分析,因此限制了微透析技术在科研中的应用及发展。如何提高微透析探针的回收率是亟待解决的问题,本文综述了国内外研究中提高微透析探针对物质回收率的方法,为探针回收率的提高提供一些参考。     

基于微透析技术的苦参碱凝胶经皮给药的药动学研究

目的 建立同步测定经皮给药制剂在皮肤、血液中药动学的方法,研究苦参碱凝胶在体内的药动学行为。方法 应用经体外和体内回收率校正建立的基于微透析探针的皮肤血液双位点同步微透析系统,通过在皮肤和颈静脉植入探针,在大鼠腹部脱毛部位给予苦参碱凝胶,连续收集探针中12 h的透析液,并采用LC-MS微量检测技术测定探针透析液中的药物浓度。结果 本研究成功构建了双位点同步微透析药动学评价系统,大鼠皮肤给予苦参碱凝胶后,皮肤中的药物浓度、AUC值、半衰期均显著高于血液中药物浓度。结论 本研究建立的微透析结合LC-MS的取样及检测技术为经皮给药制剂的药动学研究提供了新的技术平台。     

微透析取样技术在中药体内分析中的应用研究进展

本文综述了微透析取样技术在中药体内分析中的应用,介绍微透析取样技术的原理、组成、探针类型、特点,重点阐述了微透析取样技术在测定脑、血液、皮肤等组织器官中中药有效成分浓度的应用实例。表明微透析取样技术在中药药效研究中具有广阔的前景。     

微透析技术在体内药物分析中的应用

论述微透析技术在体内药物分析中的应用研究，着重介绍微透析系统的基本结构与操作步骤、微透析技术用于定量分析及影响回收率的因素以及微透析技术与其他技术的联用。     

脑微透析技术在脑内研究中的应用

脑微透析技术可用于采样脑内神经递质、神经蛋白和激素,并结合高灵敏度的微量化学分析技术对其进行定量分析,从而研究与中枢神经递质相关的疾病、病理及治疗方法等。本文介绍了脑微透析技术的基本原理和过程,并对其在中枢神经递质如兴奋性氨基酸、乙酰胆碱、多巴胺、五羟色胺等及相关药物如选择性五羟色胺再摄取抑制剂、自由基清除剂研究中的应用进行综述。     

一株来源于海洋的具有免疫抑制活性的放线菌的分离鉴定

从福建福鼎海滩土壤样品中分离到一株海洋放线菌FIM02．635,该菌株的发酵产物具有免疫抑制活性。菌株FIM02．635在多数培养基上生长良好．灰黑．黑．无气生菌丝。系统发育、化学分类特征、形态特征、生理生化特性等分析表明菌株FIM02．635属于小单抱菌属（Micromonospora）。     

利福霉素B产生菌的推理选育

利福霉素B由地中海拟分枝酸菌产生，本文对工业生产菌株A.mediterraneiX1－02进行进一步筛选。采用推理选育的方法使产生菌减轻由芳香族氨基酸（色氨酸（tup）、苯丙氨酸、酪氨酸)和对羟基苯甲酸（PHBA，pbh）引起的对利福霉素B生成合成的反馈抑 制作用，并提高对前体丙酸（prp）的耐受量。通过UV诱变提高诱变株的耐受性，获得了高产菌株A.mediterraneiXC9－25（trp′，phb′，prp′），其生产能力达到10000u/ml，较原始出发菌株A.mediterraneiX1－02提高了1．385倍。动力学试验结果利用福霉素B的生物合成与菌体生长不同步，属于非生长偶联型。     

高产量非达霉素工程菌的构建及其发酵优化

本试验将橙色指包囊菌(Dactylosporangium aurantiacum)NRRL 18085中的非达霉素生物合成基因簇与本实验室保存的德干高原游动放线菌(Actinoplanes deccanensis) SIPI-XR01的测序结果进行对比,找到SIPI-XR01中含有与已报道的合成基因簇中编码LuxR家族调节因子的转录激活因子tiaR1基因类似的基因片段,并将其命名为xrr1,根据该基因设计引物,并通过PCR扩增和质粒构建的方法将其整合到菌株基因组上,成功构建了过量表达xrr1工程菌,命名为SIPIXR02。结果表明SIPI-XR02相比SIPI-XR01产量有明显提高,经过培养基碳氮源优化后摇瓶产量最高可达4592μg/ml,并随后在10 L发酵罐上进行验证,发酵后产量达到3 930μg/ml,具有工业应用价值。     

丝裂霉素C聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米球对肝细胞L-02的生长抑制作用

目的　研究丝裂霉素C聚氰基丙烯酸正丁酯磁性纳米球 (MMC PBCA MNPS)、PBCA MNPS和MF(磁流体 )以及MMC对正常人肝细胞株 (L 0 2细胞 )生长抑制作用的影响。方法　用乳化聚合法分别制备了PBCA MNPS与MMC PBCA MNPS;采用MTT比色法研究了不同浓度的MMC PBCA MNPS、PBCA MNPS、MF与MMC对L 0 2细胞生长抑制作用的影响 ;用自动生化仪测定了乳酸脱氢酶 (LDH)活性。结果收稿日期 :2 0 0 4-0 2 -0 3 ,修回日期 :2 0 0 4-0 3 -19基金项目 :国家“863”资助项目 ( 2 0 0 2AA2 14 12 1) ;广东省攻关资助项目 ( 2 0 0 2C3 0 10 3 )作者简介 :任　非 ( 1974-) ,女 ,博士 ,研究方向 :生物药剂学 ,Tel:0 2 0 6164 1888 872 3 6,E mail:renfeisky @tom .com ;陈建海 ( 1947-) ,男 ,教授 ,博士生导师 ,研究方向 :生物高分子材料 ,生物药剂学不同浓度的MMC PBCA MNPS对L 0 2细胞的相对抑制率(RIR % )为 :10 0 %、15 1%、2 5 1%、32 1%、39 9%与 4 5 0 % ;不同浓度的PBCA MNPS的RIR %依次为 :1 8%、5 2 %、10 0 %、12 9%、15 1%与 2 9 9% ;不同MMC浓度的RIR %依次为 :2 2 1%、35 1%、4 6 1%、6 2 0 %、80 1%与 88 9%。MF不仅不抑制L 0 2细胞的生长 ,还有利于细胞的生长。按照相对生长率 (RGR % ) ,MMC PBCA M     

海洋碳样小单孢菌产生的大豆黄素和染料木素

目的研究海洋微生物FIM02—635产生的活性次级代谢产物。方法对产生菌进行分类鉴定。发酵液用有机溶媒提取具有免疫抑制活性的化合物，采用硅胶柱层析及高速逆流色谱的分离方法，提取纯化到2个化合物FW63511和FW63512，通过理化性质测定和光谱学测定分析2个化合物的结构并对这两个化合物进行体外生物活性测定。结果与结论产生菌定名为碳样小单孢菌FIM02—635。FW63511和FW63512分别与异黄酮大豆黄素和染料木素同质，它们具有免疫抑制和抗肿瘤活性，但没有抗菌活性。     

应用DiversiLab系统对肺炎克雷伯菌进行同源性分析

【摘要】目的应用DiversiLab系统对肺炎克雷伯菌进行同源性分析,为医院感染控制工作提供依据。方法对2010年天津一家甲级医院外科同一病房临床分离的8株肺炎克雷伯菌,应用以细菌基因组重复序列PCR技术（rep-PCR）为原理的DiversiLab系统分型技术进行分型,并与脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型结果进行比较。结果药敏试验结果显示,除K8-02号菌株外,其余7株肺炎克雷伯菌对11种抗菌药物具有相同的药敏谱,且为多重耐药菌;PFGE分析显示此7株菌为同一型;DiversiLab系统同时也显示该7株菌为同一组,K8-02菌为单独一组。结论DiversiLab系统的操作简单、快速、可重复性好、结果准确,是一种标准化和自动化系统,并且DiversiLab系统与PFGE方法可获得一致结论     

UCN-01 and UCN-02, new selective inhibitors of protein kinase C. II. Purification, physico-chemical properties, structural determination and biological activities

A new inhibitor of protein kinase C (PKC), UCN-01, was isolated from the culture broth of Streptomyces sp. N-126. We have found that this strain also produces UCN-02 which is a stereoisomer of UCN-01. The inhibitors have the molecular formula C28H26N4O4 and have an indolo[2,3-alpha]carbazole chromophore. Their structures have been elucidated by mass and NMR spectra. UCN-01 has been shown to inhibit PKC and protein kinase A (PKA) with IC50 values of 0.0041 and 0.042 microM, respectively, and UCN-02 has been shown to inhibit PKC and PKA with IC50 values of 0.062 and 0.25 microM, respectively. UCN-01 and UCN-02 also showed the cytotoxic effect on the growth of HeLa S3 cells.     

Safety evaluation of 1,4-α-glucan branching enzymes from Bacillus stearothermophilus and Aquifex aeolicus expressed in Bacillus subtilis

1,4-α-Glucan branching enzyme (BE; EC 2.4.1.18) is a key biocatalyst in the synthesis of polysaccharides, and is therefore useful in the production of food ingredients. The BEs evaluated in this study (BE-01 and BE-02) are obtained by fermentation of Bacillus subtilis expressing the BE gene from either Bacillus stearothermophilus strain TRBE14 or Aquifex aeolicus strain VF5. The safety of BE-01 and BE-02 have not been previously evaluated, and therefore, both were subjected to standard toxicological testing. In a battery of standard Salmonella typhimurium strains (TA98, TA100, TA1535, and TA1537) and in Escherichia coli WP2uvrA, both with and without metabolic activation, neither BE-01 nor BE-02 exhibited mutagenic activity. Similarly, neither was associated with clastogenic properties in Chinese hamster ovary cells in an in vitro chromosomal aberration assay. In rats, oral administration of BE-01 or BE-02 at doses of up to 15 mL/kg body weight/day (approximately 870 and 900 mg/kg body weight/day, respectively) for 13 weeks did not produce compound-related clinical signs or toxicity, changes in body weight gain, food consumption, hematology, clinical chemistry, urinalysis, organ weights, or in any gross and microscopic findings. The results of this study support the safety of BE-01 and BE-02 in food production.     

Isolation of actinomycetes from the root of the plant, Ophiopogon japonicus, and proposal of two new species, Actinoallomurus liliacearum sp. nov. and Actinoallomurus vinaceus sp. nov

Actinomycete strains K10-0485(T) and K10-0528(T) were isolated from the roots of Ophiopogon japonicus collected in Yokohama, Kanagawa Prefecture, Japan. The 16S ribosomal RNA (rRNA) gene sequences, morphological characteristics and chemotaxonomic data indicated that these strains belonged to the genus Actinoallomurus. Strain K10-0485(T) showed high similarity of the 16S rRNA gene sequence with A. luridus TT02-15(T) (99.1%), but the DNA-DNA hybridization relatedness values between strain K10-0485(T) and A. luridus TT02-15(T) were below 70%. Three species showed similarities of 16S rRNA gene sequences with K10-0528(T), namely A. spadix JCM 3146(T) (98.0%), A. purpureus TTN02-30(T) (98.0%) and A. luridus TT02-15(T) (97.9%), but all similarity values of the 16S rRNA gene sequences were lower than the boundary value (98.7%) for distinguishing as different species. Based on phylogenetic analyses, DNA-DNA hybridization relatedness and physiological characteristics, the two isolated strains should be classified as two new species in the genus Actinoallomurus, and we propose the names Actinoallomurus liliacearum sp. nov. and Actinoallomurus vinaceus sp. nov. The type strain of Actinoallomurus liliacearum is K10-0485(T) (=JCM 17938(T), BCC 49424(T), NBRC 108672(T)) and that of Actinoallomurus vinaceus is K10-0528(T) (=JCM 17939(T), BCC 49425(T), NBRC 108763(T)).     

UCN-01 and UCN-02, new selective inhibitors of protein kinase C. I. Screening, producing organism and fermentation

In the course of continued screening program for new selective inhibitors of protein kinase C (PKC), fermentation broths from over 5,000 soil isolates were screened for their inhibitory activity of PKC. HPLC analysis of active cultures revealed that five different strains (N-71, N-115, N-126, N-128 and N-139) of Streptomyces isolated from various local soil samples were found to produce staurosporine and related compounds. Of these strains, N-126, a high producing strain, was found to produce new selective inhibitors of PKC, UCN-01 and its stereoisomer, UCN-02. The pH control of fermentation resulted in an increase of the production of UCN-01 and UCN-02.