糖尿病大鼠肾脏PPARγmRNA表达及解毒通络保肾胶囊干预研究

目的：研究糖尿病大鼠肾脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）mRNA表达及中药解毒通络保肾胶囊的调节作用。方法：42只Wistar大鼠用链脲佐菌素诱发糖尿病后，随机分为DM组、罗格列酮治疗组和解毒通络保肾胶囊治疗组，以正常10只大鼠作为对照。连续处理12周后，应用RT-PCR检测肾皮质过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）mRNA的表达水平。结果：DM大鼠肾皮质PPARγmRNA表达降低，解毒通络保肾胶囊治疗组PPARγmRNA高于DM组（P〈0．05）。结论：解毒通络保肾胶囊对DM肾脏病变有保护作用，其机制可能是通过激活PPARγ途径，调控相关基因表达，改善糖脂代谢，减少细胞外基质的积聚。     

糖尿病大鼠肾脏PPARγmRNA表达及解毒通络保肾胶囊干预研究

目的:研究糖尿病大鼠肾脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA表达及中药解毒通络保肾胶囊的调节作用。方法:42只W istar大鼠用链脲佐菌素诱发糖尿病后,随机分为DM组、罗格列酮治疗组和解毒通络保肾胶囊治疗组,以正常10只大鼠作为对照。连续处理12周后,应用RT-PCR检测肾皮质过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA的表达水平。结果:DM大鼠肾皮质PPARγmRNA表达降低,解毒通络保肾胶囊治疗组PPARγmRNA高于DM组(P<0.05)。结论:解毒通络保肾胶囊对DM肾脏病变有保护作用,其机制可能是通过激活PPARγ途径,调控相关基因表达,改善糖脂代谢,减少细胞外基质的积聚。     

解毒通络保肾胶囊对糖尿病大鼠肾脏超微结构的影响

目的观察中药解毒通络保肾胶囊对糖尿病(DM)大鼠肾脏超微结构的保护作用。方法将实验动物分为正常对照组、DM组、罗格列酮治疗组和解毒通络保肾胶囊治疗组。检测各组第12周的血糖、肾功能、尿白蛋白等变化。光镜、电镜下观测肾内纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)和基质金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)蛋白表达水平。结果解毒通络保肾胶囊治疗组较DM组血糖水平显著降低(P<0.01),尿白蛋白明显减少(P<0.05),尿素氮和血肌酐水平下降,肾脏肥大指标改善(P<0.01);明显降低TIMP-2蛋白表达;FN和ColⅣ蛋白表达亦低于DM组(P<0.01)。结论解毒通络保肾胶囊对DM大鼠肾脏超微结构病变有保护作用,其机制可能与改善糖代谢,减少细胞外基质的积聚有关。     

解毒通络法对早期糖尿病肾病炎症发病机制的干预研究

目的:观察解毒通络法对早期糖尿病肾病患者炎症因子NF-κB的影响。方法:选取糖尿病伴微量蛋白尿患者60例,对照组采用厄贝沙坦常规治疗,治疗组在常规治疗基础上加服益肾通络胶囊治疗,对治疗前后相关数据进行比较。结果:治疗组可显著降低早期糖尿病患者血中NF-κB水平及24h尿蛋白定量。结论:解毒通络法通过抑制早期糖尿病肾病炎症因子的表达,减缓肾功能进行性损害。该法丰富了DN中医病机理论,为中医药治疗DN提供了新的思路与途径。     

解毒通络保肾胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的 :研究中药解毒通络保肾胶囊对糖尿病 (DM )大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法 :将实验动物分为正常对照组、DM组、苯那普利治疗组和解毒通络保肾胶囊治疗组。检测各组第 12周的血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率 (UAER)、肾组织肾素活性 (TRA)、血管紧张素转换酶 (ACE)活性、血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )含量和肾脏肥大指标的变化 ,应用RT PCR检测肾皮质转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA ,免疫组化检测肾内纤维连接蛋白 (FN)和Ⅳ型胶原 (ColⅣ )蛋白表达水平。结果 :解毒通络保肾胶囊治疗组较DM组血糖水平显著降低 (P <0 0 1) ,UAER明显减少 (P<0 0 5 ) ,尿素氮和血肌酐水平下降 ,肾脏肥大指标改善 (P <0 .0 .1) ;较显著抑制TRA、ACE活性 ,明显降低AngⅡ含量 ,FN和ColⅣ蛋白表达显著低于DM组 (P <0 0 1)。RT PCR结果表明 ,DM大鼠肾皮质TGF β1mRNA表达升高 ,解毒通络保肾胶囊治疗组TGF β1mRNA低于DM组 (P <0 0 5 )。结论 :解毒通络保肾胶囊对DM肾脏病变有保护作用 ,其机制可能是通过抑制TRA和ACE ,减少肾组织中AngⅡ含量 ,下调DM大鼠TGF β1,减少细胞外基质的积聚。     

补肾解毒通络方对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠TLR4/IκBα/NF-κB信号通路相关因子的影响

目的观察补肾解毒通络方对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠TLR4/IκBα/NF-κB信号通路相关因子的影响,探讨其抗炎作用机制。方法 32只SPF级雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、甲氨喋呤组和补肾解毒通络方组,每组8只。除正常组外,其余各组均采用牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂注射制备CIA大鼠模型。模型制备成功后,各给药组分别给予相应药物干预,连续21 d。每隔7 d测量大鼠体质量、关节炎指数和左后足趾厚度,HE染色观察膝关节滑膜组织病理变化,ELISA检测血清白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,Western blot检测滑膜组织Toll样受体4(TLR4)、核因子(NF)-κB p65、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)表达,RT-PCR检测滑膜组织TLR4、NF-κBp65、IκBαm RNA表达。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量减轻,四肢关节明显肿胀,关节炎指数明显升高(P0.01),滑膜组织增生显著,大量炎性细胞浸润;血清IL-6、IL-8和TNF-α含量明显增加,IL-10含量明显减少(P0.01);膝关节滑膜组织TLR4、NF-κBp65蛋白和m RNA表达明显升高,IκBα蛋白和m RNA表达明显降低(P0.01)。与模型组比较,补肾解毒通络方组大鼠体质量明显增加,关节肿胀减轻,关节炎指数降低,滑膜增生改善,炎性细胞浸润减少;血清IL-6、IL-8和TNF-α含量明显减少,IL-10含量明显增加(P0.01);膝关节滑膜组织TLR4、NF-κBp65蛋白和m RNA表达明显降低,IκBα蛋白及m RNA表达明显升高(P0.01,P0.05)。结论补肾解毒通络方可显著减轻CIA大鼠炎症反应,改善滑膜组织损伤,其机制可能与抑制TLR4/IκBα/NF-κB信号通路激活有关。     

益气化湿通络方通过调节NF-κB信号通路改善慢性肾功能衰竭大鼠炎性纤维化的实验研究

目的观察益气化湿通络方对慢性肾功能衰竭(CRF)大鼠炎症及纤维化的改善作用,并探讨其可能的分子机制。方法用Platt法制备CRF大鼠模型,将造模成功的24只SD雄性大鼠分为模型组、益气化湿通络方组和贝那普利组,每组8只,同时设假手术组(8只)。观察大鼠血生化指标血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及通过HE和天狼星红染色观察残肾组织病理改变;通过实时荧光定量PCR检测FN mRNA表达水平;Western blotting技术观察大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)蛋白表达情况;免疫组化法观察FN蛋白表达情况,免疫荧光法观察NF-κB蛋白的表达情况。结果模型组大鼠Scr、BUN水平升高,病理改变呈现明显的炎症浸润及胶原沉积,NF-κB、ICAM-1、TGF-β1、FN蛋白表达水平增高。经益气化湿通络方及贝那普利干预后Scr、BUN值降低,炎症减少,胶原沉积减少,NF-κB、ICAM-1、TGF-β1、FN蛋白表达减少。结论益气化湿通络方改善了CRF模型大鼠的肾功能,通过调节NF-κB通路和TGF-β1蛋白水平减缓残存肾脏炎症及纤维化的病理进程。     

活血解毒方对糖尿病大鼠坐骨神经AGEs-RAGE-NF-κB途径的影响

目的观察活血解毒方对糖尿病大鼠坐骨神经中糖基化终产物(Glycation end products,AGEs)-糖基化终产物受体(Glycation end product receptor,RAGE)-核因子-κB(nuclear factor-B,NF-κB)途径的影响。方法雄性SD大鼠分为正常组、模型组、甲钴胺组、活血解毒方高、低剂量组。链脲佐菌素(streptozocin,STZ)腹腔注射65mg/kg造模,免疫组化法检测坐骨神经中AGEs、RAGE、NF-κB蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经内AGEs、RAGE、NF-κB水平升高;与模型组比较,活血解毒方组大鼠坐骨神经内AGEs、RAGE、NF-κB表达降低。结论活血解毒方可能是通过抑制AGEs-RAGE-NF-κB途径从而防治糖尿病神经病变。     

益肾汤对糖尿病大鼠肾脏核转录因子-κB的影响

目的:探讨益肾汤对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾组织NF-κB的影响。方法:将41只大鼠随机分为4组:正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病缬沙坦治疗组、糖尿病益肾汤治疗组。干预8 w后检测空腹血糖、血肌酐、血尿素氮、24 h尿总蛋白、尿白蛋白排泄率,免疫组化测定肾组织NF-κB表达。结果:与模型组比较,益肾汤及缬沙坦治疗组尿白蛋白排泄率均显著降低(P0.05)、肾组织NF-κB的表达受到抑制(P0.05);肾组织NF-κB表达量与空腹血糖、24 h尿总蛋白、尿白蛋白排泄率呈显著正相关(r与P值分别为:r=0.63,P=0.001;r=0.53,P 0.007;r=0.84,P0.001)。结论:益肾汤可减少尿白蛋白排出、减少肾脏NF-κB的表达;益肾汤对糖尿病大鼠肾脏的保护作用与其下调肾脏NF-κB的活化有关。     

不同通络中药对糖尿病大鼠坐骨神经中NF-κB活性的影响

目的:以蛋白印记技术观察糖尿病大鼠坐骨神经中转录因子NF-κB的蛋白表达。方法:148只雄性Wistar大鼠,以STZ诱导糖尿病模型,随机分为正常组、模型组、辛味通络组、藤类通络组、虫类通络组。于治疗后2周、4周、8周处死大鼠取坐骨神经备蛋白印记观察用。结果:造模组NF-κB水平明显高于同期正常组(P<0.01),与同期模型组比较,通络中药组均能降低NF-κB的表达(P<0.01),同期治疗组之间无显著性差异。结论:不同通络中药随着疗程延长均具有延缓神经病变进程的作用,可能与调节NF-κB信号系统有关。     

升降散对系膜增生性肾小球肾炎 大鼠肾组织NF-κB表达的影响

目的:观察升降散对大鼠系膜增生性肾小球肾炎的治疗作用。方法:40只大鼠随机分为对照组、模型组、洛汀新组、升降散组。除对照组外,其余各组动物均制备慢性系膜增生性肾小球肾炎模型,药物干预两组于造模第5周起ig升降散5.4 g·kg-1·d-1,洛汀新1.17 mg·kg-1·d-1,共8周。于实验前、4周末、12周末测定24 h尿蛋白量;12周末分别处死各组大鼠,观察肾脏病理变化,免疫组织化学法检测肾脏组织中NF-κB表达。结果:模型组24 h尿蛋白较对照组升高(P<0.01);药物干预两组较模型组减少(P<0.05)。模型组大鼠肾小球及肾间质NF-κB表达明显增加,且多在细胞核表达,升降散组及洛汀新组NF-κB表达较模型组减少。结论:升降散能减少肾炎大鼠尿蛋白排泄量,降低肾组织NF-κB表达,抑制肾小球系膜细胞与基质增生。     

筋脉通胶囊对糖尿病大鼠坐骨神经形态测量学及核转录因子κB蛋白表达的影响

目的观察中药筋脉通胶囊对糖尿病大鼠坐骨神经形态测量学及核转录因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)蛋白表达的影响。方法采用链脲佐菌素糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和筋脉通组及神经妥乐平组,设立正常对照组。灌胃16周后取坐骨神经进行形态测量学分析,免疫组化法测定其NF-κB蛋白表达。结果与正常对照组相比,模型组大鼠的有髓神经纤维密度、小纤维密度减少,小纤维比率下降,有髓神经纤维平均横截面积、轴索平均横截面积增大,差异显著(P<0.01);筋脉通组、神经妥乐平组的有髓神经纤维密度、小纤维密度、小纤维比率均较模型组显著改善(P<0.05);筋脉通组的有髓神经纤维平均横截面积、轴索平均横截面积较模型组改善显著(P<0.05)。模型组大鼠NF-κB蛋白的表达较正常组显著升高(P<0.01);筋脉通组、神经妥乐平组上值均较模型组降低(P<0.05)。结论筋脉通胶囊可改善糖尿病大鼠坐骨神经的形态测量学异常,减少NF-κB的异常高表达。     

活血解毒方对糖尿病大鼠胰岛β细胞保护作用的研究

目的:观察活血解毒方对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用。方法:雄性SD大鼠分为正常组,模型组,活血解毒方高、低剂量组。链脲佐菌素(STZ)腹腔注射65mg/kg造模,放免法检测血清C肽,HE染色观察胰岛,免疫组化法观察胰岛素的表达,TUNEL法检测胰岛细胞凋亡,免疫组化法检测胰岛中核因子-κB(NF-κB)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血糖升高(P<0.05),血清C肽含量降低(P<0.01),胰岛萎缩,胰岛内胰岛素表达减少(P<0.05),凋亡增加(P<0.05),NF-κB表达增加(P<0.01)。与模型组比较,活血解毒方低剂量组血糖降低(P<0.05),活血解毒方高、低剂量组大鼠C肽含量升高(P<0.01),胰岛内胰岛素表达增加(P<0.01,P<0.05),凋亡减少(P<0.01),NF-κB表达减少(P<0.01)。结论:活血解毒方可能是通过抑制细胞凋亡及胰岛中NF-κB的表达保护β细胞,促进C肽分泌。     

槲皮素对糖尿病大鼠肾脏p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的:观察槲皮素对糖尿病大鼠肾组织中磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38MAPK)、核因子-κB P65(NF-κB P65)表达的影响。方法:采用一次性腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、阳性对照组(骁悉11 mg/kg)、槲皮素25 mg/kg、槲皮素50mg/kg,8周后测定各组大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、24h尿蛋白并处死取双肾,计算各组大鼠肾脏肥大指数。光镜下观察肾小球病理形态学变化,免疫组织化学法测定肾组织p-p38MAPK的含量,Western blot测定肾组织NF-κB P65的含量。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清白细胞介素8(IL-8)、转化生长因子-β(TGF-β)、纤维连接蛋白(FN)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)。结果:与正常对照组比较,糖尿病模型组大鼠血清BUN、Scr含量,24 h尿蛋白,肾脏肥大指数均显著升高,糖尿病模型组血清IL-8、TGF-β、FN、PAI-1水平、肾组织p-p38MAPK及NF-κBP65表达显著升高。与模型组比较,槲皮素25、50mg/kg组大鼠血清BUN、Scr含量,24 h尿蛋白、肾脏肥大指数均显著降低,槲皮素25、50mg/kg组血清IL-8、TGF-β、FN、PAI-1水平、肾组织p-p38MAPK及NF-κBP65表达量显著降低,且明显改善肾小球病理变化。结论:槲皮素对糖尿病大鼠的肾脏保护作用可能通过调控肾脏p38MAPK/NF-κB信号通路,减轻炎症有关。     

黄连对糖尿病肾病大鼠肾脏NF-κB及PPAR-γ表达的影响

目的:观察黄连对糖尿病肾病大鼠肾脏病理、肾小球NF-κB及PPAR-γmRNA的影响。方法:采用高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素方法建立糖尿病SD大鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组[31.25 mg/(kg·d)]、黄连低、中、高剂量组[相当于人黄连饮片用量的83 mg/(kg·d)、500 mg/(kg·d)、1000 mg/(kg·d)],每组8只,另取8只正常大鼠作为对照,给药12周后,检测各组大鼠肾小球NF-κB及PPAR-γmRNA表达水平及肾脏病理变化。结果:黄连各剂量组可显著降低大鼠肾脏NF-κB表达(P0.05),黄连高剂量组及厄贝沙坦组可显著增强大鼠肾脏PPAR-γmRNA表达(P0.05),各用药组均有一定改善大鼠肾脏病变的作用。结论:黄连具有降低糖尿病肾病大鼠肾脏NF-κB表达及增强PPAR-γmRNA表达的作用,可缓解肾脏病变。     

水陆地黄胶囊对糖尿病肾病大鼠的药效学及作用机制研究

目的考察水陆地黄胶囊对高脂高糖饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)致糖尿病肾病大鼠的药效学指标的影响,并初步探讨其机制。方法通过高脂高糖饮食联合小剂量STZ进行2型糖尿病肾病动物造模。通过测定空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿微量白蛋白(UMA)、肾质量、肾脏指数等指标观察其药效,考察其对肾脏病理改变的影响。通过免疫组化法测定肾脏组织Angptl4、Desmin及NF-κB表达,Western blotting法检测肾组织Angptl4、Desmin表达水平;ELISA法测定血清脂联素(APN)、瘦素(LEP)的水平及尿Angptl4水平。结果与模型组比较,水陆地黄胶囊(9、6 g/kg)各组大鼠肾质量、肾脏指数、血糖、LEP及肾脏组织Angptl4、Desmin及NF-κB表达明显降低,体质量、血清APN水平明显升高,具有统计学意义(P0.05、0.01)。结论水陆地黄胶囊可以调节糖尿病肾病大鼠的糖脂代谢,减轻炎症反应,降低肾组织Angptl4、Desmin及NF-κB蛋白表达水平,改善肾足细胞损伤,降低尿蛋白,达到延缓肾脏纤维化、硬化作用。其作用机制可能与Angptl4、Desmin及NF-κB等通路有关。     

芪术胶囊对糖尿病肾病大鼠的影响研究

目的通过研究芪术胶囊干预后糖尿病肾病大鼠的体液和肾组织的改变,观察其对核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法选取60只成年健康雄性大鼠,设正常组大鼠10只,50只大鼠剔除死亡1只和造模未成功大鼠19只,将造模成功后大鼠30只随机分为3组:模型组、芪术胶囊组、科素亚组。自成模第9周起,正常组、模型组给予蒸馏水、芪术胶囊组给予芪术胶囊(1 g/kg),科素亚组给予科素亚(1.67 mg/kg),每日1次,连续灌胃8周。检测各组大鼠NF-κB表达水平及果糖胺,肾功能尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、血清胱抑素(Cys-c),超敏C反应蛋白(CRP),糖化血红蛋白(Hb A1c)。结果芪术胶囊组可显著降低DN大鼠的Hb A1C、24 h尿蛋白、肾功能指标和NF-κB水平,并且优于科素亚组(P0.05或P0.01);能有效延缓DN肾组织的纤维化进展。结论芪术胶囊对糖尿病肾病大鼠的NF-кB表达具有一定积极的影响。     

益气解毒活络中药组分配伍对高糖高脂环境下人肾小球细系膜细胞NF-κB蛋白表达影响

目的:观察益气解毒活络中药组分配伍对高糖高脂环境下人肾小球细系膜细胞NF-κB蛋白表达影响,探究益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的机制。方法:体外培养人肾小球系膜细胞株,分为正常对照组,高糖高脂模型组、中药组(第1组、第2组、第3组);Western Blot法检测0、15、30、60、90 min高糖高脂模型组NF-κB蛋白表达;Western Blot法检测60、90 min 5组NF-κB蛋白表达;免疫荧光染色检测NF-κB核转运。结果:(1)模型组第90 min NF-κB蛋白表达达到峰值。(2)各中药配伍组中第3组下调60 min NF-κB蛋白表达效果最佳;第1组下调90 min NF-κB蛋白表达效果最佳。(3)各组60、90 min NF-κB核转运比较发现:细胞免疫荧光显示,正常对照组p65主要分布在细胞质部分,模型对照组p65主要分布在细胞核部分,各中药配伍组p65明显分布在细胞质内,提示各中药配伍组60、90 min的NF-κB核转运作用被抑制。结论:益气解毒活络中药组分配伍可能是通过抑制NF-κB信号途径来保护受损的肾小球系膜细胞,从而起到减缓DN病程进展,保护受损肾脏的作用。     

通脉降糖保肾胶囊对糖尿病大鼠降糖保肾作用研究

目的:研究通脉降糖保肾胶囊对实验性糖尿病大鼠的作用。方法:采用链脲佐菌素和四氧嘧啶制备糖尿病大鼠模型,观察通脉降糖保肾胶囊对其血糖、尿素氮、肌酐、肾小球形态以及对血小板聚集的影响。结果:通脉降糖保肾胶囊能明显降低糖尿病大鼠的血糖,亦降低链脲佐菌素所致糖尿病大鼠胆固醇、尿素氮、肌酐,对ADP诱导的大鼠血小板聚集有明显的抑制作用。结论:通脉降糖保肾胶囊通过降低血糖、调节脂质代谢紊乱、改善肾小球结构和功能等多方面发挥降糖保肾、治疗糖尿病的作用。     

芪玄益心胶囊对大鼠心肌NF-κBp50mRNA IκBαamRNA的影响

目的:评价芪玄益心胶囊对冠脉结扎大鼠心肌梗塞的治疗作用,并探讨其机理.方法:建立大鼠冠脉结扎心肌梗塞模型,将模型大鼠随机分为麝香保心丸组、芪玄益心胶囊高、中、低剂量组、模型组,并设空白对照组.观察各组心肌梗塞率和心肌组织核转录因子-κBp50(NF-κBp50)其抑制蛋白α(IκBα)的表达.结果:模型组及各治疗组与空白组比较心肌梗塞率、NF-κBp50mRNA、IκBαmRNA表达均显著增高(P＜0.05).芪玄益心胶囊各剂量组与模型组比较心肌梗塞率、NF-κBp50mRNA、IκBαmRNA均明显降低(P＜0.05),以高剂量组变化最显著,高剂量组在降低心肌梗塞率、NF-κBp50mRNA、IκBαmRNA表达方面均优于麝香保心丸组(P＜0.05).结论:芪玄益心胶囊能够降低心肌梗塞率,并推测芪玄益心胶囊抗心肌梗塞的作用与其抑制NF-κBp50mRNA、IκBαmRNA表达相关.