食管鳞癌组织MTSS1表达及其与转移潜能相关性研究

目的:探讨食管鳞癌组织中转移抑制基因1(MTSS1)表达与临床病理因素的关系,以及与食管鳞癌细胞迁移和侵袭的关系。方法:蛋白质印迹法和免疫组化检测106例食管鳞癌及癌旁正常组织以及食管鳞癌细胞系中MTSS1的表达;Transwell法检测MTSS1高表达细胞系的迁移和侵袭,观察用小分子干扰RNA(siRNA)敲降MTSS1后对迁移和侵袭的影响。结果:MTSS1在食管组织中表达为0.756±0.101,明显高于食管鳞癌组织的表达(0.596±0.110),差异有统计学意义,t=3.011,P=0.009。MTSS1在食管癌组织中表达与有无淋巴结转移相关,χ2=10.9,P<0.01;MTSS1高表达食管鳞细胞系KYSE180转染MTSS1-siRNA后48h,在mRNA水平的抑制率为(91.96±1.72)%,在蛋白水平的抑制率为(90.40±0.70)%,均能显著降低MTSS1的表达。体外实验发现,MTSS1能够抑制食管鳞癌细胞的迁移和侵袭,降低MTSS1表达后,KYSE180细胞的迁移数从(1 521±122)个升高至(2 122±111)个,P=0.003;侵袭细胞数从(1 297±137)个升高至(1 983±81)个,P=0.002。结论:MTSS1与食管癌的淋巴结转移呈负相关,并且能抑制食管鳞癌细胞的迁移和侵袭。MTSS1可能是食管鳞癌的转移抑制基因。     

长链非编码RNA HAGLROS在食管鳞癌组织中的表达及其对食管鳞癌细胞生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA HAGLROS在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌患者临床病理参数之间的关系,分析HAGLROS对食管鳞癌细胞增殖及转移的影响。方法运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HAGLROS在42对食管鳞癌组织与癌旁食管正常组织及食管上皮细胞Het1A及食管鳞癌细胞EC109和KYSE30中的表达。运用小干扰RNA(siRNA)技术在食管鳞癌细胞系中抑制HAGLROS的内源性表达,RT-PCR检测沉默效率。采用CCK-8及Transwell法分析敲减HAGLROS后对食管鳞癌细胞体外增殖及迁移能力的影响。结果食管鳞癌组织中HAGLROS的表达明显高于癌旁正常食管组织,差异有统计学意义(t=2.913,P=0.006)。HAGLROS的表达与食管鳞癌患者的淋巴结转移及TNM分期呈现明显的正相关(t=2.866,P=0.007;t=3.882,P=0.001);HAGLROS的表达与食管鳞癌患者的组织学分化程度无明显相关性(t=1.156,P=0.254)。HAGLROS在KYSE30与EC109细胞中表达明显高于在食管上皮细胞系Het-1A的表达(t=8.384,P=0.001;t=6.767,P=0.003)。在EC109与KYSE30细胞中瞬时转染针对HAGLROS的siRNA,能够有效抑制HAGLROS的表达。CCK-8细胞活性实验的结果表明,2种食管鳞癌细胞在转染siHAGLROS的96 h后的增殖速率与对照组相比明显降低。Transwell实验结果显示,敲减HAGLROS后,2种食管鳞癌细胞的迁移能力与对照组相比明显下降。结论HAGLROS在食管鳞癌组织中表达明显增加,与食管鳞癌患者的淋巴结转移及TNM分期具有较强的相关性。HAGLROS在食管鳞癌细胞系中表达较高,敲减HAGLROS后,食管鳞癌细胞的增殖及迁移能力均受到明显的抑制,提示HAGLROS在食管鳞癌的发生、发展中起到促癌的作用,有望成为食管鳞癌靶向治疗的新靶点。     

EEN-B1及其启动子甲基化在外阴鳞状细胞癌中的表达及意义

目的：检测EEN—B1在外阴鳞癌组织及外阴鳞癌细胞株中的启动子甲基化及蛋白表达情况,探讨其启动子异常甲基化在外阴鳞癌发病过程中的作用。方法：采用重亚硫酸盐测序PCR（bisulfite genomic se—quencing PCR,BSP）联合TA克隆测序法,以正常外阴组织作对照,检测外阴鳞癌组织中EEN—B1启动子区CpG岛的甲基化状态,以甲基化酶抑制剂5-aza-2-deoxycitydine（5-aza—dC）作用于外阴鳞癌细胞A-431,检测作用前后甲基化率变化情况;Westernblot方法检测外阴鳞癌及对照组织中EEN—B1蛋白表达情况,检测5-aza—dC处理前后A-431中该蛋白表达情况。结果：在癌组织中EEN—B1启动子的甲基化率为54．66％,与对照组织的12．16％相比,差异具有统计学意义;而在外阴鳞癌组织中EEN—B1蛋白明显下调;经1×10 -7mol／L5-aza—dC处理72小时后,A-431细胞系中EEN—B1启动子的甲基化率由67．05％下降至26．82％（P〈0．05）,而该蛋白表达明显上调。结论：外阴鳞癌细胞株A-431及癌组织中EEN—B1基因表达与启动子区甲基化状态有关,启动子区的高甲基化可能导致了外阴鳞癌组织及细胞系中EEN—B1基因的表达沉默。     

长链非编码RNA DLGAP1-AS2在胃癌中的表达及作用研究

目的 探讨长链非编码RNA DLGAP1反义RNA 2(DLGAP1-AS2)在胃癌中的表达及其作用。方法 收集淮安市淮安医院2019年1月至2022年8月40例行胃癌根治术患者的癌组织和癌旁组织，采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测DLGAP1-AS2在所收集胃癌组织和胃癌细胞中的表达水平。采用慢病毒敲低DLGAP1-AS2在胃癌细胞MKN45和BGC-823中的表达后，利用CCK-8、Transwell小室和细胞划痕实验评估胃癌细胞的增殖和侵袭迁移能力。通过裸鼠成瘤实验再次验证DLGAP1-AS2与胃癌细胞MKN45成瘤能力的关系。结果 与癌旁组织相比，胃癌组织的DLGAP1-AS2表达水平明显增加，且其水平与胃癌患者的淋巴结转移和远处转移有关。在细胞水平，qPCR提示DLGAP1-AS2在胃癌细胞中表达明显升高，其中在MKN45细胞表达最高。CCK-8、Transwell、细胞划痕实验提示敲低DLGAP1-AS2可明显抑制胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。此外，裸鼠成瘤实验说明敲低DLGAP1-AS2可以抵抗胃癌细胞的裸鼠成瘤能力。结论 DLGAP1-AS2在胃癌组织和细胞中的表...     

lncRNA NUP50-AS1 在食管鳞癌组织中的表达及其对Eca109 细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）NUP50-AS1 在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell cancer, ESCC）组织及细胞株中的表达及其对人食管癌Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：选取自2015 年1 月至2016 年12 月河北医科大学第四医院生物标本库的49 例ESCC手术患者的癌组织和相应癌旁组织,qRT-PCR检测ESCC癌组织、癌旁组织及5 种食管癌细胞株（TE1、TE13、Eca109、Kyse150 和Kyse170）中NUP50-AS1 表达水平。shRNA 转染NUP50-AS1 后,选用sh2 -NUP50-AS1 进行后续功能实验。采用MTS法、克隆形成实验检测敲减NUP50-AS1 表达对Eca109 细胞增殖的影响,划痕实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞迁移的影响,Transwell 小室实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞侵袭的影响。结果：NUP50-AS1 在ESCC组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(2.003±0.870 vs 1.000±0.000,P<0.05）;NUP50-AS1 在ESCC组织中的表达水平与淋巴结转移及TNM分期相关（均P<0.01）,NUP50-AS1 在5 株食管癌细胞系中相对表达量均明显上调（P<0.05）,其中Eca109 细胞的NUP50-AS1 表达水平最高。转染后,sh2-NUP50-AS1 转染组干扰效率最高,敲低NUP50-AS1 可明显抑制Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论：ESCC组织中lncRNA NUP50-AS1 表达明显高于癌旁组织,且与癌症分期和淋巴结转移有关,敲减其表达明显抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,NUP50-AS1 的高表达可能与ESCC的发生发展密切相关。     

RNA干扰PLCE1基因表达对食管鳞癌细胞周期和凋亡的影响

目的：通过siRNA干扰PLCE1基因表达,检测PLCE1对食管鳞癌细胞增殖周期和凋亡的影响,以探讨PLCE1的致癌机制。方法：采用免疫组织化学方法检测食管鳞癌组织和癌旁正常组织中PLCE1蛋白的表达水平;PLCE1特异性siRNA转染食管鳞癌细胞,荧光显微镜观察转染效率;半定量RT-PCR法检测转染后PLCE1沉默效果;流式细胞术检测干扰后细胞周期变化及凋亡情况。结果：PLCE1在食管鳞癌组织的表达高于正常组织（P=0.000）;siRNA转染后PLCE1表达明显减少（P=0.000）;与对照组相比,PLCE1干扰后可致G0/G1期细胞阻滞（P=0.001）,细胞凋亡增多（P=0.000）。结论：PLCE1在食管鳞癌组织中有较高表达;沉默PLCE1后可抑制癌细胞的增殖,促进其凋亡。     

lncRNA TOB1-AS1在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨 ERBB2.1 转导蛋白反义 RNA1（transducer of ERBB2.1 antisense RNA 1,TOB1-AS1）在上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer,EOC）组织中的表达情况及其临床意义,初步探讨TOB1-AS1对EOC细胞体外增殖、迁移和侵袭的影响。方法：使用TCGA数据库对EOC组织中TOB1-AS1表达情况进行分析;收集2017年7月至2018年1月在河北医科大学第四医院妇科行肿瘤切除并经病理检查证实为EOC的67例患者的肿瘤组织,收集同期因其他妇科疾病接受手术的30例患者的非肿瘤卵巢组织作为对照。采用qPCR法检测EOC组织和非肿瘤卵巢组织中TOB1-AS1的表达水平,χ2检验分析TOB1-AS1的表达与不同临床病理特征之间的相关性,Kaplan-Meier和Cox比例风险回归模型分析患者生存及预后的潜在影响因素。CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验分别检测敲低TOB1-AS1表达对EOC细胞SKOV3和A2780增殖、迁移和侵袭的影响。结果：TCGA数据库中资料和qPCR检测结果均显示,在EOC组织中TOB1-AS1的表达水平显著高于非肿瘤卵巢组织（均P<0. 01）。TOB1-AS1的高表达与EOC患者较晚的FIGO分期、较差的组织分级、淋巴结转移及腹膜转移有关（均P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析结果显示,TOB1-AS1 高表达组患者术后 DFS 和 OS 均短于 TOB1-AS1 低表达组（均 P<0.05）。Cox 比例风险回归模型分析结果显示,FIGO分期、淋巴结转移、腹膜转移及TOB1-AS1表达是EOC患者预后的独立影响因素（均P<0.05）。TOB1-AS1在EOC细胞系SKOV3、A2780中的表达水平也显著高于正常卵巢上皮细胞系IOSE80（均P<0.01）。细胞功能实验结果显示,敲低TOB1-AS1可抑制SKOV3和A2780细胞的增殖、迁移和侵袭（均P<0.05）。结论：TOB1-AS1在EOC组织中高表达,与患者的不良预后显著相关。TOB1-AS1可能通过促进EOC细胞SKOV3、A2780的增殖、迁移和侵袭来影响EOC的恶性进展。     

敲降Ras相关结合蛋白23表达对食管鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移的影响及机制

目的探讨Ras相关结合蛋白23(RAB23)在食管鳞状细胞癌(简称食管鳞癌)细胞侵袭和迁移中的作用和机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测16例配对食管鳞癌及癌旁正常组织中RAB23 mRNA的表达。比较基因表达综合(GEO)数据库的GSE20347数据集中食管鳞癌和配对癌旁正常组织RAB23 mRNA的表达水平。免疫组织化学检测106例配对食管鳞癌和癌旁正常组织、33例淋巴结阳性与10例淋巴结阴性患者原发灶与淋巴结组织中RAB23蛋白含量。在食管鳞癌KYSE30和KYSE150细胞中瞬时敲降RAB23表达(转染si-RAB23-1和si-RAB23-9)或者稳定敲降RAB23表达(转染sh-RAB23), 采用Western blot法验证RAB23敲降效率, 采用细胞计数试剂盒8法和裸鼠皮下成瘤实验检测食管鳞癌细胞的增殖能力, 采用Transwell实验和裸鼠尾静脉-肺转移实验检测食管鳞癌细胞的侵袭和迁移能力, 采用细胞黏附实验检测食管鳞癌细胞的黏附能力, 采用转录组测序技术分析RAB23敲降后对细胞转录谱的影响, 并通过Western blot检测验证相关信号通路。结果 16...     

TBL1XR1介导上皮-间质转化和干细胞特性调控头颈部鳞状细胞癌细胞迁移和侵袭

摘 要：［目的］ 阐明转导素β1X连锁受体蛋白1（transducin β-like 1 X-linked receptor 1,TBL1XR1）可介导上皮-间质转化和干细胞特性,从而调控头颈鳞癌细胞的迁移、侵袭。［方法］ 利用UALCAN数据库网站搜索TBL1XR1在头颈鳞癌组织及癌旁组织中的表达情况,应用Cbioprotal 在线分析平台分析癌症基因组图集（The Cancer Genome Atlas,TCGA）数据库中523例头颈鳞癌RNA-SEQ 数据。将慢病毒介导的TBL1XR1过表达载体、沉默载体和对应空白载体分别转染头颈鳞癌细胞Tu686。划痕愈合实验、Transwell迁移和侵袭实验评价Tu686细胞的迁移、侵袭能力;Western blot、qRT-PCR检测上皮-间质转化标志物表达;肿瘤球形成实验、qRT-PCR检测干细胞特性;抑制Wnt/β-catenin信号通路后检测TBL1XR1过表达引起的细胞迁移、侵袭、上皮-间质转化和干细胞特性。［结果］ TBL1XR1 mRNA 在头颈鳞癌组织中的表达明显高于相应癌旁组织（P<0.001）。过表达TBL1XR1的Tu686细胞划痕愈合能力（90%±4% vs 53%±6%）、Transwell迁移（0.68±0.04 vs 0.32±0.03）、侵袭能力（0.59±0.04 vs 0.26±0.04）较对照组显著性增强（P 均<0.05）。TBL1XR1表达被抑制时,细胞划痕愈合能力（70%±4% vs 96%±5%）、Transwell迁移（0.32±0.06 vs 0.63±0.08）、侵袭能力（0.24±0.04 vs 0.52±0.05）较对照组显著性降低（P均<0.05）。TBL1XR1过表达后,Tu686细胞的间质细胞标志物Vimentin、N-cadherin表达升高,上皮细胞标志物E-cadherin表达降低;肿瘤球形成数较对照组明显增多（41±9 vs 13±4,P<0.05）,肿瘤干细胞标志物ALDH1、CD44、CD133表达上调。抑制Wnt/β-catenin信号通路可部分逆转TBL1XR1过表达引起的迁移、侵袭、上皮-间质转化及干细胞特性改变。［结论］ TBL1XR1可在体外介导上皮-间质转化和干细胞特性,进而促进头颈鳞癌细胞迁移、侵袭,其调控机制可能与Wnt/β-catenin信号通路相关。     

长链非编码RNA AFAP1-AS1 在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白-1反义RNA1(actin filament-associated protein 1-antisense RNA1,AFAP1-AS1 RNA1)在胃癌组织中的表达情况及其临床意义.方法:采用Real-time PCR方法检测2010年1月至2014年12月宜昌市第二人民医院及三峡大学仁和医院手术切除的274例胃癌组织及相应癌旁正常胃组织中AFAP1-AS1的表达,并分析AFAP1-AS1表达量与临床及病理特征的关系.结果:AFAP1-AS1在胃癌组织比癌旁正常组织显著高表达(P＜0.01).AFAP1-AS1在早期胃癌组织中平均表达量明显低于进展期胃癌(P＜0.01).在不同病理类型胃癌中,AFAP1-AS1的表达量没有差异(P＞0.05).AFAP1-AS1表达量和胃癌淋巴侵袭或远处转移密切相关,在伴有淋巴结侵袭或远处转移的胃癌组织中,AFAP1-AS1明显高表达(P＜0.01).结论:AFAP1-AS1可能是胃癌发生发展的一个重要因素;有望成为新的胃癌预后标志物,用于胃癌的临床诊断和预后判断.     

头颈鳞癌Notch1的表达与顺铂敏感性的关系

背景与目的：Notch1属于Notch跨膜受体家族,在肿瘤细胞增殖和凋丁。过程中发挥着重要作用。已有研究表明Notch1影响化疗药物敏感性。而Notch1与头颈鳞癌顺铂敏感性的关系仍未被阐明。本研究旨在明确Notch1在头颈鳞癌中的表达状况,探讨Notch1表达水平对头颈鳞癌顺铂敏感性的影响。方法：收集25例头颈鳞癌新鲜手术标本进行原代细胞培养,肿瘤原代细胞胶原凝胶体包埋化疗药物敏感性检测（collagengeldropletembeddedculture—drugsensitivitytest,CD—DST）技术检测顺铂敏感性,．免疫化学染色检洲头颈鳞癌、正常鳞状上皮和舌鳞癌细胞株（Tb3．1）Notch1的表达水平．将经二甲基亚砜（dimethylsulfoxide,DMSO）、DAPT处理后的Tb3．1细胞分4组（DMSO、DAPT、DMS0＋Cisplatin、DAPT＋Cisplatin）,顺铂作用后CD—DST检测各组吸光度值。结果：头颈鳞癌组织Notch1阳性表达,表达水平明显高于正常鳞状上皮（P〈0．001）,且与顺铂敏感性呈负相关（r=-0．705,P〈0．01）,Tb3．1细胞Notch1阳性表达,DMSO组（A值155．4±2.3）与DAPT组（A值154．7±1．2）吸光度值差异无统计学意义（P〉0．05）,而DMSO＋Cisplatin组（A值33．9±1.3）与DAPT＋Cisplatin组（A值26．6±1．1）吸光度值差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：Notch1在头颈鳞癌中表达,且表达水平与顺铂的敏感性呈负相关。Notchl可用于预测头颈鳞癌顺铂的敏感性：DAPT阻断Notch1信号通路可提高Tb3．1细胞顺铂的敏感性。     

LncRNA NR2F1-AS1在结肠癌组织中的表达及其与预后的相关性

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)核受体亚家族2F组成员1-反义RNA 1(NR2F1-AS1)在结肠癌患者中的表达水平及其与预后的相关性。方法:选取本院2015年07月至2017年02月诊治的93例结肠癌患者的癌组织及对应癌旁正常组织进行研究。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测结肠癌组织及对应癌旁正常组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平;分析癌组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平与结肠癌患者临床病理特征的相关性;采用Kaplan-Meier曲线法分析结肠癌患者癌组织中LncRNA NR2F1-AS1表达水平与结肠癌患者预后的相关性;采用COX回归分析结肠癌预后的影响因素。结果:结肠癌组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平明显低于癌旁正常组织（P＜0.05）;结肠癌患者癌组织LncRNA NR2F1-AS1表达水平与结肠癌患者TNM分期、淋巴结转移、浸润深度、分化程度相关（P＜0.05）,而与结肠癌患者性别、年龄、肿瘤大小、位置无关（P＞0.05）;结肠癌患者LncRNA NR2F1-AS1低表达组术后36个月总生存率(OS)、无病生存率(DFS)明显低于LncRNA NR2F1-AS1高表达组OS、DFS（P＜0.05）;COX回归分析显示,TNM分期、淋巴结转移是影响结肠癌患者预后的独立危险因素（P＜0.05）,LncRNA NR2F1-AS1是影响结肠癌患者预后的独立保护因素（P＜0.05）。结论:LncRNA NR2F1-AS1在结肠癌患者癌组织中表达水平明显降低,且低水平LncRNA NR2F1-AS1与结肠癌患者不良预后密切相关,有利于判定结肠癌患者预后情况。     

NEDD4在食管鳞癌中的表达及作用研究

目的：检测神经前体细胞表达发育下调蛋白4（neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4,NEDD4）在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义,并探讨其过表达对食管鳞癌细胞恶性表型的影响。方法：应用组织芯片-免疫组织化学染色技术,检测131例食管鳞癌及配对癌旁正常食管上皮组织中NEDD4蛋白的表达情况,并分析其表达水平与临床病理指标的相关性;同时,使用TCGA和GTEx数据库中的mRNA表达数据,分析食管鳞癌组织中NEDD4 mRNA的表达变化。然后,在NEDD4表达水平较高的食管鳞癌细胞系中用特异性siRNA敲降NEDD4的表达,采用CCK8法检测细胞增殖活力的变化。结果：免疫组化染色结果显示,NEDD4在40%（53/131）的食管鳞癌组织中高水平表达,而在癌旁正常食管上皮组织中不表达或低水平表达。NEDD4蛋白的表达水平与食管鳞癌的浸润深度、病理学分期呈正相关（均为P < 0.05）。同时,TCGA及GTEx数据库分析结果显示,NEDD4 mRNA表达水平在食管鳞癌组织中明显升高（P < 0.01）。细胞增殖活力检测结果显示,在KYSE30和KYSE150细胞中,转染NEDD4 siRNA的实验组细胞的增殖活力均显著低于对照组细胞（均为P < 0.01）。结论：NEDD4在食管鳞癌组织中表达上调,其高表达可增强食管鳞癌细胞的增殖活力,提示NEDD4过表达可能在食管鳞癌的发生发展过程中发挥促癌作用。     

lncRNA GTSE1-AS1在前列腺癌组织中的表达及其对LNCaP细胞增殖与侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)GTSE1-AS1在前列腺癌组织中的表达及其影响LNCaP细胞增殖和侵袭的机制。方法:收集2017年11月至2018年12月郑州大学附属洛阳中心医院泌尿外科手术切除的68例前列腺癌患者的癌和癌旁组织标本,以及前列腺癌细胞系LNCaP、PC-3、C4-2B、22Rv1、DU-145和正常前列腺滤泡上皮细胞RWPE-1,用qPCR法检测癌组织及细胞系中GTSE1-AS1的表达水平。将GTSE1-AS1过表达质粒(实验组)或阴性对照质粒(对照组)转染至LNCaP细胞,用MTT法、Transwell小室法分别检测过表达GTSE1-AS1对LNCaP细胞增殖和侵袭能力的影响。通过生物信息学方法预测和双荧光素报告基因实验验证GTSE1-AS1与miR-324-3p、F框/WD重复域蛋白7(FBXW7)三者的靶向关系,用qPCR法和WB法检测过表达GTSE1-AS1对下游基因及蛋白表达的影响。结果:GTSE1-AS1在前列腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01),GTSE1-AS1在前列腺癌细胞系中的表达显著低于RWPE-1细胞(P<0.05或P<0.01)。过表达GTSE1-AS1可显著抑制LNCaP细胞的增殖和侵袭能力(P<0.05或P<0.01)。双荧光素报告基因实验证实GTSE1-AS1互补结合miR-324-3p,miR-324-3p互补结合FBXW7。过表达GTSE1-AS1可显著降低LNCaP细胞中miR-324-3p的表达水平(P<0.01),促进FBXW7mRNA和蛋白的表达(均P<0.01)。结论:GTSE1-AS1在前列腺癌组织及细胞系中均低表达,过表达GTSE1-AS1可抑制LNCaP细胞的增殖和侵袭,其作用机制可能是通过抑制miR-324-3p表达从而促进FBXW7基因的表达。     

长链非编码RNA ARHGAP5-AS1抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的：检测长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）ARHGAP5-AS1在乳腺癌组织及细胞中的表达，分析其表达与患者临床病理参数及预后的相关性，并初步探讨其对乳腺癌细胞体外增殖、迁移和侵袭的影响。方法：通过对TCGA数据库中乳腺癌相关数据集的生物信息学分析，筛选出在乳腺癌中低表达且与患者不良预后相关的lncRNA ARHGAP5-AS1，采用qPCR 方法在江南大学附属医院肿瘤科从 2010 年 4 月至 2016 年 10 月收集的乳腺癌组织中验证其表达。采用 χ2检验分析ARHGAP5-AS1表达与乳腺癌患者临床病理参数之间的关系，Kaplan-Meier生存分析构建生存曲线，比较高、低表达组的总生存期和无复发生存期。CCK-8 实验、划痕实验和 Transwell 实验分别检测 ARHGAP5-AS1 敲低对乳腺癌细胞MDA-MB-231和BT-549的增殖、迁移和侵袭的影响。结果：TCGA 数据库分析结果显示，ARHGAP5-AS1 在乳腺癌组织中的表达水平显著低于正常乳腺组织（P<0.01），其低表达与较大肿瘤直径（T3）、远处转移（M1）、ER 和 PR 阴性以及较短的总生存期显著相关（均P<0.05）。乳腺癌组织中ARHGAP5-AS1表达水平显著低于癌旁组织（P<0.05），其低表达与较大的肿瘤直径和淋巴结转移相关（均 P<0.05）。同样，ARHGAP5-AS1 在 6 株人乳腺癌细胞系（MDA-MB-231、BT-549、MDA-MB-468、MCF-7、HCC1937、Hs578T）中的表达水平也显著低于正常乳腺上皮细胞系（MCF-10A）（均P<0.05）。细胞功能实验显示，ARHGAP5-AS1敲低促进MDA-MB-231和BT-549细胞的增殖、迁移和侵袭（均P<0.05）。结论：ARHGAP5-AS1异常低表达可能通过促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭影响乳腺癌的发生发展。     

LncRNA ITGA9-AS1在卵巢癌中的表达及与顺铂化疗敏感性的关系

目的:观察长链非编码RNA（LncRNA） ITGA9-AS1在卵巢癌中的表达水平,探究其与顺铂化疗敏感性的关系。方法:选取2017年01月至2019年01月本院收治的64例卵巢癌患者,卵巢摘除手术中采集卵巢癌组织,另收集因卵巢囊肿需作手术切除但已证实无瘤细胞的正常卵巢组织标本,采用实时定量PCR（RT-qPCR）检测卵巢癌及正常卵巢组织、顺铂（DDP）耐药卵巢癌细胞SKOV3/DDP、卵巢癌细胞（OVCAR5、OVCAR8、SKOV3）及永生化卵巢上皮细胞（IOSE29、IOSE80）中LncRNA ITGA9-AS1表达水平。采用慢病毒介导LncRNA ITGA9-AS1转染并筛选稳定细胞株,MTT法检测过表达LncRNA ITGA9-AS1对SKOV3、SKOV3/DDP增殖的影响及对不同浓度（0、1、2、4、8、16 mg/L）DDP的敏感性。结果:与正常卵巢组织比较,卵巢癌组织中LncRNA ITGA9-AS1表达水平降低（P＜0.05）。与IOSE29、IOSE80细胞比较,OVCAR5、OVCAR8、SKOV3及SKOV3/DDP细胞中LncRNA ITGA9-AS1表达水平显著降低（P＜0.05）;与SKOV3细胞比较,SKOV3/DDP细胞中LncRNA ITGA9-AS1表达水平显著降低（P＜0.05）。与空白对照组及慢病毒对照组比较,慢病毒过表达组SKOV3、SKOV3/DDP细胞中LncRNA ITGA9-AS1表达水平升高（P＜0.05）,增殖率降低（P＜0.05）,细胞存活率呈DDP浓度依赖降低（P＜0.05）。结论:LncRNA ITGA9-AS1在卵巢癌组织及癌细胞中低表达,过表达LncRNA ITGA9-AS1可增加卵巢癌SKOV3及卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3/DDP的顺铂化疗敏感性。     

长链非编码RNA ZEB1-AS1促进食管鳞癌侵袭转移

背景与目的：长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）锌指E-盒结合同源异形盒1-反义链1（Zinc finger E-box binding homeobox 1 antisense 1,ZEB1-AS1）在多种肿瘤中高表达,与肿瘤患者临床病理学特征及预后相关,但其在食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）中的作用及其机制尚不清楚。从细胞与分子生物学水平探讨lncRNA ZEB1-AS1在ESCC细胞侵袭转移中的作用。方法：通过实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）方法检测9株ESCC细胞株中lncRNA ZEB1-AS1的表达水平,筛选出一株高表达细胞株。采用小干扰RNA（small interference RNA,siRNA）转染Eca-109细胞,分成干扰组（siZEB1-AS1）、干扰对照组（siNC）和空白组（Eca-109）。采用RTFQ-PCR方法检测lncRNA ZEB1-AS1的表达水平,采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）实验检测细胞增殖能力情况,采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力情况,采用RTFQ-PCR方法和蛋白质印迹法（Western blot）检测ZEB1的表达水平。结果：9株ESCC细胞株中,Eca-109细胞中lncRNA ZEB1-AS1表达水平最高。siRNA 抑制lncRNA ZEB1-AS1表达,降至对照组的57%。与对照组细胞相比,lncRNA ZEB1-AS1不影响Eca-109细胞增殖,但是能显著促进Eca-109细胞迁移和侵袭。lncRNA ZEB1-AS1上调ZEB1 mRNA和蛋白的表达。结论：lncRNA ZEB1-AS1通过上调ZEB1促进ESCC迁移、侵袭,lncRNA ZEB1-AS1/ZEB1或许可以作为ESCC治疗的潜在靶点。     

lncRNA ABHD11-AS1通过调控STAT1/STAT3表达促进非小细胞肺癌细胞增殖与迁移

  目的   探讨lncRNA ABHD11-AS1在非小细胞肺癌中的生物学功能和作用机制。  方法   选取2016年7月至2018年12月在广东医科大学附属医院行非小细胞肺癌手术的248例患者，采用χ2检验分析lncRNA ABHD11-AS1的表达与患者年龄、性别、临床病理分期、病理类型及吸烟状态的关系；采用Kaplan-Meier法分析ABHD11-AS1对非小细胞肺癌患者的预后意义；应用qRTPCR方法检测ABHD11-AS1在非小细胞肺癌组织和细胞系中的表达；通过体外功能测定评估敲低ABHD11-AS1对细胞增殖和转移的影响；通过Western blot实验探讨ABHD11-AS1在非小细胞肺癌中致癌作用的分子机制。  结果   lncRNA ABHD11-AS1高表达组较低表达组吸烟患者较少（P=0.02），分期更晚（P < 0.01）；ABHD11-AS1高表达预示非小细胞肺癌患者预后不良；ABHD11-AS1在非小细胞肺癌组织和癌细胞株中高表达；敲低ABHD11-AS1的表达可抑制体外细胞增殖和迁移；敲低ABHD11-AS1表达抑制STAT1和STAT3癌蛋白的表达。  结论   ABHD11-AS1可能通过促进STAT1和STAT3癌蛋白的表达，从而增加非小细胞肺癌细胞的增殖、集落形成以及迁移和侵袭能力。      

叉头框蛋白Q1在宫颈鳞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨叉头框蛋白Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)在宫颈鳞癌细胞系及组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:采用RT-PCR和Western blot检测宫颈鳞癌细胞系SiHa和CaSki及人宫颈永生化鳞状细胞系Ect1/E6E7中FOXQ1 mRNA和蛋白的表达情况;分别应用RT-PCR及免疫组化法检测60例宫颈鳞癌组织中FOXQ1 mRNA和蛋白的表达情况;进一步采用Log-rank检验和Cox回归模型对宫颈鳞癌患者的预后因素进行分析,并用Kaplan-Meier计算不同FOXQ1表达情况下患者的生存率曲线。结果:与Ect1/E6E7相比,SiHa和CaSki中FOXQ1 mRNA和蛋白的表达水平均显著上调（P<0.05）;宫颈鳞癌组织中FOXQ1 mRNA的表达水平显著高于配对癌旁组织（3.096±0.109 vs 0.902±0.040,P<0.01）;免疫组化结果显示,FOXQ1蛋白在宫颈鳞癌组织中高表达,阳性率为68.33%,且FOXQ1蛋白的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、淋巴脉管浸润及FIGO分期有关（P<0.05）,而与患者的年龄、肿瘤分化程度和肿瘤大小无关（P<0.05）;Kaplan-Meier 单因素分析显示,FOXQ1蛋白是宫颈鳞癌患者的重要预后因素（P<0.05）,进一步Cox多因素回归分析显示FOXQ1蛋白是影响宫颈鳞癌患者的独立预后因素（HR=2.703,95%CI:1.081~6.758,P<0.05）。结论:FOXQ1的高表达可能与宫颈鳞癌的发生、发展及预后关系密切,有望成为评估宫颈鳞癌预后的有效指标。