lncRNA MAGI2-AS3在非小细胞肺癌组织中的表达及生物学作用

目的:评价lncRNA MAGI2-AS3 在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）组织中的表达及生物学作用。方法:收集63例非小细胞肺癌患者癌组织及其癌旁组织,检测lncRNA MAGI2-AS3在癌与癌旁组织中的相对表达量并分析其与患者临床特征的关系;在A549细胞中过表达lncRNA MAGI2-AS3,分析其与NSCLC细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移能力之间的关系。结果:lncRNA MAGI2-AS3 在NSCLC组织中呈现低表达状态,与正常肺组织相比,差异具有统计学意义;lncRNA MAGI2-AS3 在NSCLC组织中低表达,与患者的年龄、病理类型、肿瘤大小、临床分期、吸烟指数有关;lncRNA MAGI2-AS3 能够抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移。结论:检测lncRNA MAGI2-AS3 与NSCLC病理类型、临床分期有一定的相关性,可以作为一种潜在的肺癌标志物指导临床诊断。lncRNA MAGI2-AS3 能够抑制肺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,有可能成为肺癌治疗的潜在靶点用于临床。     

长链非编码 RNA MNX1-AS1 在头颈鳞癌中的生物学功能及临床意义

目的：明确长链非编码 RNA（long non-coding RNA,lncRNA）MNX1-AS1 表达水平与头颈鳞癌患者临床病理参数的关系,阐明 lncRNA MNX1-AS1 在头颈癌细胞中发挥的生物学功能,为头颈鳞癌诊疗及预后评估提供潜在分子标志物。方法：分析 TCGA 数据库头颈鳞癌转录组数据中 lncRNA MNX1-AS1 的表达情况;采用实时荧光定量 PCR 检测人胚肺二倍体细胞 2BS 和人类永生化表皮细胞 HaCaT,头颈鳞癌细胞系 FD-LSC-1、CAL-27 和 Detroit562 中 lncRNA MNX1-AS1 的表达水平,使用 RNAi（RNA interference）技术敲降头颈鳞癌细胞中 lncRNA MNX1-AS1 的表达,利用 CCK-8、平板克隆、流式细胞术、Transwell 迁移和侵袭等实验检测 lncRNA MNX1-AS1 被敲降后肿瘤细胞系恶性表型的变化。结果：头颈鳞癌组织中 lncRNA MNX1-AS1 表达水平高于正常对照组织（头颈鳞癌组织 vs 正常对照组织 = 0.323 vs0.088,P < 0.05）;其表达水平与头颈鳞癌患者病理学分级呈正相关（P < 0.05）。生存分析发现,lncRNA MNX1-AS1 高表达组的患者总生存率显著低于低表达组患者（P < 0.05）;其中位生存时间分别为 42.97 个月、61.27 个月。临床相关性分析发现,有吸烟史患者组中其表达水平高于无吸烟史患者组（P < 0.05）;临床中晚期患者组中其表达水平高于早中期患者组（P < 0.05）。敲降 lncRNA MNX1-AS1 可抑制头颈鳞癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力（均 P < 0.05）。结论：LncRNA MNX1-AS1 高表达与头颈鳞癌恶性进展相关,具有促进头颈鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的重要生物学功能,是头颈鳞癌潜在的重要分子标志物。     

lncRNA NUP50-AS1 在食管鳞癌组织中的表达及其对Eca109 细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）NUP50-AS1 在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell cancer, ESCC）组织及细胞株中的表达及其对人食管癌Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：选取自2015 年1 月至2016 年12 月河北医科大学第四医院生物标本库的49 例ESCC手术患者的癌组织和相应癌旁组织,qRT-PCR检测ESCC癌组织、癌旁组织及5 种食管癌细胞株（TE1、TE13、Eca109、Kyse150 和Kyse170）中NUP50-AS1 表达水平。shRNA 转染NUP50-AS1 后,选用sh2 -NUP50-AS1 进行后续功能实验。采用MTS法、克隆形成实验检测敲减NUP50-AS1 表达对Eca109 细胞增殖的影响,划痕实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞迁移的影响,Transwell 小室实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞侵袭的影响。结果：NUP50-AS1 在ESCC组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(2.003±0.870 vs 1.000±0.000,P<0.05）;NUP50-AS1 在ESCC组织中的表达水平与淋巴结转移及TNM分期相关（均P<0.01）,NUP50-AS1 在5 株食管癌细胞系中相对表达量均明显上调（P<0.05）,其中Eca109 细胞的NUP50-AS1 表达水平最高。转染后,sh2-NUP50-AS1 转染组干扰效率最高,敲低NUP50-AS1 可明显抑制Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论：ESCC组织中lncRNA NUP50-AS1 表达明显高于癌旁组织,且与癌症分期和淋巴结转移有关,敲减其表达明显抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,NUP50-AS1 的高表达可能与ESCC的发生发展密切相关。     

长链非编码RNA AGAP2-AS1通过YAP通路影响结肠癌细胞的生物学行为

  目的  探究AGAP2-AS1在结肠癌组织中的表达及对结肠癌恶性生物学行为和Yes相关蛋白（Yes-associated protein，YAP）信号通路的影响。  方法  通过TCGA数据库分析457例结肠癌和42例健康样本的AGAP2-AS1表达水平。收集于2018年1月至2019年3月在义乌市中心医院就诊且通过病理科确诊的结肠癌组织和癌旁组织20例，通过实时荧光定量PCR检测其AGAP2-AS1的表达，之后进一步检测SW480、HCT-116和NCM460细胞中的AGAP2-AS1表达。利用CCK-8试剂盒、克隆形成、细胞划痕和流式细胞实验分析其细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的改变。Western blot检测YAP、p-YAP以及基质金属蛋白酶（matrix metallo-peptidase，MMP）2、MMP9的表达。免疫荧光检测YAP在细胞内的定位情况。共转染pcDNA3.1-AGAP2-AS1和si-YAP质粒，然后检测YAP、p-YAP、MMP2、MMP9蛋白的表达。  结果  TCGA数据库显示AGAP2-AS1在结肠癌组织显著高表达，并且AGAP2-AS1在结肠癌组织样本和细胞中表达也显著增加。敲低/过表达AGAP2-AS1后HCT-116细胞迁移，增殖能力显著降低/增加，凋亡显著增加/抑制；同时敲低AGAP2-AS1后会诱导YAP磷酸化，减少YAP入核调控，且MMP2、MMP9的表达也显著降低（P < 0.05）。共转染结果显示AGAP2-AS1通过激活YAP通路上调MMP2、MMP9表达（P < 0.05）。  结论  AGAP2-AS1在结肠癌组织和细胞系中均高表达，且诱导结肠癌细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡。此外，AGAP2-AS1通过激活YAP通路调控MMP2、MMP9的表达影响结肠癌侵袭和转移。      

ABHD11-AS1在肿瘤中表达及调控作用研究

摘 要：长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）是一类长度>200 nt且不具备编码蛋白质能力的非编码RNA。大量研究表明lncRNA在恶性肿瘤发生发展中起着重要作用。ABHD11-AS1作为一种lncRNA在诸多人类肿瘤中呈现异常表达,并能够调控肿瘤增殖和侵袭、迁移等恶性生物学行为。全文对ABHD11-AS1在肿瘤中的表达及调控作用进行综述。     

蒲公英萜醇调控ABHD11-AS1介导上皮间质转化对膀胱癌细胞侵袭转移的作用

摘 要：［目的］ 探究蒲公英萜醇通过调控α/β水解酶域11反义RNA1（ABHD11-AS1）对膀胱癌细胞侵袭转移的作用,并分析相关机制。［方法］ 将对数生长期的人膀胱癌细胞系EJ细胞分为空白对照组（细胞不做特殊处理）、蒲公英萜醇组（给予蒲公英萜醇100 μmol/L处理24 h）、蒲公英萜醇-pcDNA组（转染pcDNA 24 h给予细胞蒲公英萜醇100 μmol/L处理24 h）、蒲公英萜醇-pcDNA-ABHD11-AS1组（转染pcDNA-ABHD11-AS1 24 h后细胞给予蒲公英萜醇100 μmol/L药物处理24 h）。实时荧光定量PCR法检测细胞ABHD11-AS1水平;细胞增殖-毒性8检测试剂盒（CCK-8）法检测细胞增殖;划痕实验、Transwell实验分别检测细胞迁移、侵袭能力;蛋白免疫印迹法检测上皮间质转化标志蛋白E-钙黏附蛋白（E-cadherin）、N-钙黏附蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）表达变化。［结果］ 与空白对照组比较,蒲公英萜醇组EJ细胞ABHD11-AS1水平、侵袭细胞数、细胞迁移率、N-Cadherin、Vimentin蛋白水平均降低（P＜0.05）,EJ细胞增殖抑制率、E-cadherin蛋白水平升高（P＜0.05）。与蒲公英萜醇组、蒲公英萜醇-pcDNA组比较,蒲公英萜醇-pcDNA-ABHD11-AS1组EJ细胞ABHD11-AS1水平、侵袭细胞数、细胞迁移率、N-Cadherin、Vimentin蛋白水平均升高（P＜0.05）,EJ细胞增殖抑制率、E-cadherin蛋白水平降低（P＜0.05）。［结论］ 蒲公英萜醇能够抑制膀胱癌细胞侵袭及迁移,可能是通过抑制ABHD11-AS1介导的上皮间质转化发生实现的。     

长链非编码RNA SNHG3在食管鳞状细胞癌中的表达及其对ECA-109细胞迁移和侵袭的影响

  目的  探究长链非编码RNA SNHG3在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）组织中的表达及其对ECA-109细胞迁移和侵袭的影响。  方法  收集安阳市肿瘤医院2011年6月到2014年6月收治的60例ESCC患者癌及对应癌旁组织样本，采用qRT-PCR检测ESCC癌与癌旁组织、ESCC细胞ECA-109和人正常食管上皮细胞HEEC中lncRNA SNHG3的表达水平，分析ESCC患者组织中lncRNA SNHG3的表达与ESCC患者临床特征的关系。采用siRNA-SNHG3质粒转染ECA-109细胞，以敲降lncRNA SNHG3的表达水平。采用Kaplan-Meier法分析lncRNA SNHG3表达与患者预后的关系。采用Transwell实验检测ECA-109细胞的迁移和侵袭能力。采用qRT-PCR和Western blot实验检测ECA-109细胞中SNAIL和TWIST的mRNA及蛋白的表达水平。  结果  ESCC肿瘤组织中lncRNA SNHG3的表达水平显著高于癌旁组织（P < 0.05），ECA-109细胞中lncRNA SNHG3的表达水平显著高于人正常食管上皮细胞HEEC（P < 0.05）。ESCC患者组织中lncRNA SNHG3的表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况显著相关（P < 0.05）。siRNA-SNHG3质粒转染ECA-109细胞后，lncRNA SNHG3的表达水平显著降低（P < 0.05）。lncRNA SNHG3的高表达与ESCC患者预后不良显著相关。敲降lncRNA SNHG3后，ECA-109细胞的迁移和侵袭能力显著降低（P < 0.05），SNAIL和TWIST的mRNA及蛋白的表达水平显著降低（P < 0.05）。  结论  lncRNA SNHG3在ESCC肿瘤组织和细胞中高表达，通过调控SNAIL和TWIST蛋白的表达，促进ECA-109细胞的迁移和侵袭。      

长链非编码RNA FOXD2-AS1对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

  目的  观察长链非编码RNA（lncRNA）FOXD2-AS1对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响。  方法  收集2017年2月至2017年9月华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院（武汉市妇幼保健院）手术切除的16例卵巢癌患者的组织标本,采用荧光实时定量聚合酶链式反应（quantitative PCR,qPCR）检测组织标本、人卵巢癌细胞系及人正常卵巢上皮细胞系中的FOXD2-AS1表达水平。将HO-8910细胞分为实验组和对照组,分别转染siRNA-FOXD2-AS1和阴性对照RNA。细胞计数CCK-8法、Transwell迁移实验分别检测沉默FOXD2-AS1表达对卵巢癌HO-8910细胞增殖活性和迁移能力的影响。生物信息学方法预测FOXD2-AS1的下游靶基因,qPCR检测下游靶基因表达,Western blot法检测葡萄糖调节蛋白94（glucose regulated protein94,GRP94）和信号通路Wnt/β-catenin的蛋白表达。  结果  卵巢癌组织中的FOXD2-AS1相对表达量8.56±0.51明显高于正常癌旁组织的2.38±0.21（P < 0.01）,FOXD2-AS1在卵巢癌细胞系OC3、HO-8910、A2780、SKOV-3中表达明显增加（P < 0.05）。下调FOXD2-AS1表达明显抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖活性和迁移能力（均P < 0.01）。生物信息学方法显示,FOXD2-AS1靶向结合miR-150-5p后,可靶向结合GRP94基因。实验组和对照组miR-150-5p相对表达量分别为5.45±0.91和1.01±0.08（P < 0.01）,GRP94 mRNA相对表达量分别为0.32±0.05和1.02±0.11（P < 0.01）。GRP94和Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达减少。  结论  FOXD2-AS1在卵巢癌组织和细胞系呈高表达,下调FOXD2-AS1可调控miR-150-5p表达,抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖和迁移,可发挥抑癌基因的功能。      

长链非编码RNA BDNF-AS在乳腺癌中的表达及作用

  目的  探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）-AS在乳腺癌组织和细胞系中的表达及其对乳腺癌癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。  方法  收集2016年1月至2018年12月88例于兰州大学第一医院行乳腺癌手术切除患者的组织样本。RT-qPCR检测癌组织、癌旁组织、乳腺癌细胞系（MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468和SK-BR-3）及正常乳腺细胞HBL-100中lncRNA BDNF-AS的表达并分析其与临床特征的相关性。MDA-MB-231细胞经pcDNA3.1质粒过表达lncRNA BDNF-AS,使用MTT法检测细胞活性,EdU实验检测细胞增殖能力,比色法检测Caspase-3活性;Western blot检测凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2）、侵袭转移相关蛋白（MMP-9、E-cadherin）和BDNF蛋白表达,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。  结果  lncRNA BDNF-AS在乳腺癌组织（P < 0.05）和乳腺癌细胞中表达显著降低（P < 0.01）。乳腺癌组织中的lncRNA BDNF-AS表达与患者TNM分期（P < 0.05）和淋巴结转移（P < 0.05）呈负相关。lncRNABDNF-AS过表达可降低MDA-MB-231细胞活性（P < 0.01）、EdU检测的阳性细胞数（P < 0.01）、Caspase-3活性（P < 0.01）,下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白表达（P < 0.01）。lncRNA BDNF-AS过表达可抑制划痕愈合和细胞侵袭（P < 0.01）,下调MMP-9蛋白和上调Ecadherin蛋白表达（P < 0.01）及下调BDNF mRNA和蛋白的表达。  结论  在乳腺癌中lncRNA BDNF-AS表达下调,BDNF-AS抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进凋亡。      

LncRNA ZEB1⁃AS1对B细胞非霍奇金淋巴瘤增殖和凋亡的影响及其下游调控网络的分析

目的 探讨长链非编码 RNA（lncRNA） ZEB1-AS1对B 细胞非霍奇金淋巴瘤（B-cell non-Hodgkin's lymphoma,B-NHL）细胞增殖和凋亡的影响,构建lncRNA、miRNA、mRNA相关竞争性内源RNA（ceRNAs）网络。方法 采用Cox回归模型筛选GEO数据集（GSE31312）中与弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)预后相关的lncRNAs。采用慢病毒转染技术建立ZEB1-AS1敲低的B-NHL细胞模型,采用CCK-8法和流式细胞术分别检测敲低ZEB1-AS1及不同浓度（50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、400 ng/mL）多柔比星（doxorubicin,Dox）处理后的细胞增殖与凋亡情况。构建以ZEB1-AS1为节点的 lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA调控网络,利用GO、KEGG和PPI分析该调控网络下游相关的核心mRNA及其功能。结果 共筛选了20个高风险lncRNAs。预测与ZEB1-AS1有相互结合的miRNA 4个,与ZEB1-AS1呈共表达关系又与miRNA相结合的潜在下游mRNA 1 208个,以此构建lncRNA-miRNA-mRNA调控网络及PPI调控网络。在体外实验中,与空载组相比,敲低ZEB1-AS1可显著抑制细胞增殖和促进细胞凋亡（均P<0.05）,敲低ZEB1-AS1+Dox作用对抑制淋巴瘤细胞增殖和促进细胞凋亡有协同作用。结论  ZEB1-AS1敲低可抑制B-NHL细胞增殖和促进细胞凋亡,且可能增强Dox的药物敏感性;以ZEB1-AS1为节点构建的ceRNA调控网络,可能是DLBCL重要的调控机制和诊疗靶点。     

Silencing of lncRNA AFAP1-AS1 Inhibits Cell Growth and Metastasis in Clear Cell Renal Cell Carcinoma

The lncRNA AFAP1-AS1, oriented from an antisense direction to the protein-coding gene AFAP1 in the opposite strand, was upregulated in a variety of tumors and associated with poor prognosis, including lung cancer, breast cancer, ovarian cancer, and so on. However, the biological role of AFAP1-AS1 in clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) is still unknown. We observed that AFAP1-AS1 expression was significantly upregulated in ccRCC tissues and that patients with high-level expression of AFAP1-AS1 had a shorter overall survival. Knockdown of AFAP1-AS1 markedly suppressed the progression of proliferation, invasion, migration, and EMT in ccRCC cells. Downregulation of AFAP1-AS1 resulted in an increase in E-cadherin and a decrease in vimentin. Noticeably, we found that PTEN has a negative correlation with the lncRNA AFAP1-AS1 expression. Further studies verified that PTEN deficiency effectively attenuated the ability of AFAP1-AS1 in promoting ccRCC cell proliferation, invasion, migration, and EMT. Moreover, the similar biological response of silencing AFAP1-AS1 was observed in our ccRCC mice model. Knockdown of AFAP1-AS1 evidently suppressed tumor growth. Taken together, our results provide the evidences that silencing of AFAP1-AS1 inhibits cell proliferation, EMT, and metastasis through PTEN-dependent signaling, and our findings elucidate a novel potential therapeutic target or biomarker for the treatment of ccRCC.     

碳酸酐酶1在非小细胞肺癌早期发病中作用机制的研究

  目的  探讨碳酸酐酶1(carbonic anhydrase 1, CA1)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)早期诊断的价值及其在肺癌早期发病中的作用机制。  方法  应用酶联免疫吸附实验检测临床NSCLC患者血清中CA1的含量; 应用RNA干扰及质粒扩增的方法分别对A549、H520、H1299细胞进行处理, 构建敲低和过表达CA1的细胞模型, 并应用CCK-8法检测不同处理组中细胞的增殖情况; 应用实时定量多聚酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)和Western blot方法检测WNT/β-catenin信号通路中关键信号分子Wnt3a和β-catenin mRNA和蛋白质的表达水平。  结果  CA1在早期NSCLC患者的血清中表达水平显著高于健康人群。通过sh-RNA抑制CA1表达后, A549、H520和H1299细胞系的增殖速率显著降低, 而过表达CA1后, 细胞增殖速率明显提高。同时, CA1能够有效调节WNT/β-catenin信号通路中Wnt3a及β-catenin的表达水平。  结论  CA1通过Wnt/β-catenin信号通路影响NSCLC的增殖过程; CA1有望成为NSCLC早期诊断的新型生物分子标记物。      

Single-nucleotide polymorphism rs4142441 and MYC co-modulated long non-coding RNA OSER1-AS1 suppresses non-small cell lung cancer by sequestering ELAVL1

Single-nucleotide polymorphisms (SNP) and long non-coding RNAs (lncRNAs) have been involved in the process of lung cancer. Following clues given by lung cancer risk-associated SNP, we aimed to find novel functional lncRNAs as candidate targets in lung cancer. We identified a lncRNA Oxidative Stress Responsive Serine Rich 1 Antisense RNA 1 (OSER1-AS1) through a lung cancer risk-associated SNP rs4142441. OSER1-AS1 was down-regulated in tumor tissue and its low expression was significantly associated with poor overall survival among non-smokers in non-small cell lung cancer (NSCLC) patients. Gain- and loss-of-function studies showed that OSER1-AS1 acted as a tumor suppressor by inhibiting lung cancer cell growth, migration and invasion in vitro. Xenograft tumor assays and a metastasis mouse model confirmed that OSER1-AS1 suppressed tumor growth and metastasis in vivo. The promoter of OSER1-AS1 was repressed by MYC, and the 3′-end of OSER1-AS1 was competitively targeted by microRNA hsa-miR-17-5p and RNA-binding protein ELAVL1. Our results indicated that OSER1-AS1 exerted tumor-suppressive functions by acting as an ELAVL1 decoy to keep it away from its target mRNAs. Our findings characterized OSER1-AS1 as a new tumor-suppressive lncRNA in NSCLC, suggesting that OSER1-AS1 may be suitable as a potential biomarker for prognosis, and a potential target for treatment.     

肺腺癌组织中lncRNA CADM1-AS1表达及其临床意义

目的 探讨长链非编码lncRNA CADM1-AS1在肺腺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法 收集于本院行手术切除的72例肺腺癌组织及对应癌旁组织，采用实时定量PCR（qPCR）法检测以上组织标本中的CADM1-AS1水平，分析CADM1-AS1水平与临床病理参数（性别、年龄、肿瘤大小、分化类型、临床分期、T分期、吸烟史和淋巴结转移）的关系，同时根据远期生存资料比较不同CADM1-AS1表达水平的中位总生存期（OS）。进一步采用qPCR法检测常见非小细胞肺癌株A549、SPC-A、NCI-H1650和NCI-H1299中的CADM1-AS1水平。采用受试者工作特征曲线（ROC）评价组织CADM1-AS1水平在肺腺癌早期诊断中的效能。结果 肺腺癌组织中的CADM1-AS1水平低于癌旁组织，且与正常支气管上皮细胞株16HBE相比，非小细胞肺癌株的CADM1-AS1均为低表达，差异有统计学意义（P均＜0.05），且按照由高至低依次为NCI-H1299＞SPC-A＞NCI-H1650＞A549；CADM1-AS1表达与肺腺癌的TNM分期、分化类型、肿瘤大小、T分期及淋巴结转移有关，其中TNM Ⅱ、Ⅲ期、低未分化、肿瘤最大径＞3 cm、T分期T3、T4期及有淋巴结转移组织的CADM1-AS1水平均低于对应项（P均＜0.05）；CADM1-AS1高水平者的中位OS为32.5个月，高于低水平者的16.0个月，差异有统计学意义（P均＜0.05）。组织CADM1-AS1水平在肺腺癌早期诊断中的价值较好，其曲线下面积为0.874，灵敏度和特异度分别为87.8％和85.2％。结论 CADM1-AS1 在肺腺癌组织及非小细胞肺癌细胞株中低表达，且与TNM分期、分化类型等临床病理参数及预后有关，可能在肺腺癌的发生发展中有一定作用，同时对于肺腺癌的早期诊断有较好价值。     

lncRNA ZFPM2-AS1在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌T24细胞生物学特性的影响

目的探究lncRNA ZFPM2-AS1在膀胱癌组织中的表达和对膀胱癌T24细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响。方法QPCR检测膀胱癌组织和细胞系中lncRNA ZFPM2-AS1的表达;将阴性对照siRNA和lncRNA ZFPM2-AS1 siRNA转染至膀胱癌T24细胞中,qPCR检测转染后细胞中lncRNA ZFPM2-AS1表达,MTT检测细胞增殖,克隆形成检测细胞克隆形成能力,细胞划痕检测细胞迁移,Transwell检测细胞侵袭,Western blot检测细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。结果膀胱癌组织中lncRNA ZFPM2-AS1的水平高于癌旁组织;与正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1相比,T24、J82、56373种膀胱癌细胞株中lncRNA ZFPM2-AS1表达水平均高于正常膀胱上皮细胞,且差异有统计学意义(P<0.01)。与沉默对照组相比,沉默ZFPM2-AS1组T24细胞中lncRNA ZFPM2-AS1表达显著降低(P<0.01),细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力显著降低(P<0.01),细胞中Wnt/β-catenin信号通路蛋白β-catenin及其下游蛋白c-Myc和Cyclin D1表达显著降低,p-β-catenin蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。结论LncRNA ZFPM2-AS1在膀胱癌中高表达,沉默LncRNA ZFPM2-AS1能够抑制膀胱癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

GCNT3表达在非小细胞肺癌中的临床意义

  目的  研究葡萄糖胺基转移酶3(glycosyltransferase enzyme 3, GCNT3)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)组织及对应正常组织中的表达情况, 探讨其表达水平与NSCLC患者临床病理特征、总生存期(overall survival, OS)和无进展生存期(progression-free survival, PFS)的关系。  方法  分别应用实时定量反转录链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印记技术(Western blot, WB)检测GCNT3在2017年3月至2017年7月天津医科大学肿瘤医院20例NSCLC患者癌组织及对应的正常组织中的表达情况; 此外, 收集2010年1月至2014年12月本院164例NSCLC患者的石蜡组织标本, 通过免疫组织化学技术(immunohistochemistry, IHC)评估样本中GCNT3表达, 分析GCNT3表达水平与临床病理学特征之间的关系, 探究GCNT3表达与NSCLC患者OS及PFS的关系, 通过细胞功能实验研究GCNT3对NSCLC细胞增殖能力、侵袭能力和迁移能力的影响。  结果  qRT-PCR与WB结果均显示GCNT3在NSCLC癌组织中的表达水平明显高于正常组织。IHC结果显示GCNT3表达水平与NSCLC患者的性别、吸烟史、组织学类型、病理分期和淋巴结转移相关; Kaplan-Meier分析显示GCNT3高表达NSCLC患者OS和PFS均差于GCNT3低表达患者(P < 0.05)。多因素Cox比例风险回归模型分析显示, GCNT3表达是NSCLC患者预后的独立因素(P < 0.05)。抑制GCNT3表达后, NSCLC细胞的增殖能力、侵袭能力和迁移能力明显减弱(P < 0.05)。  结论  GCNT3在NSCLC癌组织中高表达, GCNT3高表达的NSCLC患者OS和PFS较差, GCNT3有望成为评估NSCLC患者预后的标志物。      

非小细胞肺癌组织中低表达microRNA表达谱

  目的  检测非小细胞肺癌患者手术标本组织中低表达microRNA的表达谱,为进一步阐述肿瘤的发生发展机制和提供诊断或治疗的新策略提供基础,积累以国内患者为数据来源的microRNA资料。  方法  利用芯片技术初步筛选在非小细胞肺癌组织中低表达microRNA,进而利用实时荧光定量PCR验证癌组织和正常肺组织表达水平的差异。  结果  芯片结果发现有20种microRNA在非小细胞肺癌组织中发生明显下调。实时荧光定量PCR验证发现其中的13种microRNA表达量显著降低,分别是hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-143、hsa-miR-519a、hsa-miR-223-5p、hsa-miR-1、hsa-miR-520c-3p、hsa-miR-489、hsa-miR-27a、hsa-miR-373、hsa-miR-125b、hsa-miR-27b、hsa-miR-142-5p、hsa-miR-206。  结论  在非小细胞肺癌组织中发现一些表达水平显著下调的mciroRNA,这些microRNA可能与肿瘤的发生发展或某些功能相关。