DNA甲基转移酶在宫颈癌组织中的表达及其与HPV的相关性分析

目的 探讨5种DNA甲基转移酶(DNMTs)在宫颈癌组织中的表达情况及其与高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系.方法 应用荧光定量PCR、Western blotting、免疫组化检测40例官颈癌组织、对应癌旁组织及20例正常宫颈组织中DNMT1、DNMT2、DNMT3a、DNMT3b和DNMT31的表达情况,应用质谱法检测HPV感染情况.结果 宫颈癌组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b、DNMT3l的阳性表达率分别为90.0％、85.0％、70.0％、80.0％,在癌旁组织内的阳性表达率分别为87.5％、85.0％、72.5％、77.5％,均明显高于正常宫颈组织内的阳性表达率(分别为25.0％、15.0％、20.0％和30.0％),而DNMT2在宫颈癌和癌旁组织中阳性表达率仅为12.5％和17.5％,明显低于正常官颈组织(约85.0％),且DNMT1、DNMT3a、DNMT3b与HPV阳性呈显著正相关(r值分别为0.709、0.538和0.536,P＜0.05).结论 宫颈癌组织中DNMT的表达谱发生明显改变,且HPV高危亚型感染与DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的表达升高密切相关.     

宫颈癌癌变过程中Caspase-3、Fas/FasL的表达及其临床意义

目的:探讨宫颈癌癌变过程中Caspase-3、Fas/FasL蛋白表达的变化。方法:用免疫组织化学SP法检测42例宫颈癌、13例宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraep ithelial neop lasia,C IN)和8例正常宫颈组织中Caspase-3、Fas/FasL蛋白的表达。结果:Caspase-3蛋白在正常宫颈组织、C IN及宫颈癌组织中的阳性表达率依次降低(P<0.05)。而Fas及FasL在C IN及宫颈癌组织中的表达与在正常组织中表达相比均有显著性差异(PFas<0.05;PFasL<0.05)。结论:宫颈癌组织能通过Caspase-3、Fas的表达及FasL高表达逃逸机体免疫监视以促使肿瘤发生发展及转移。     

hrHPV感染与宫颈癌组织Fas、Caspase-3及Caspase-8蛋白表达的关系

目的探讨宫颈癌组织高危型人乳头瘤病毒(hrHPV)感染与凋亡相关因子(Fas)、含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)及Caspase-8蛋白表达的关系。方法选取重庆市大足区人民医院2016年6月-2019年5月收治的宫颈癌行手术治疗患者91例,收集对应的术后病理组织,采用PCR反向杂交法检测宫颈癌组织和癌旁正常组织中hrHPV的感染情况,采用免疫组化法检测Fas、Caspase-3与Caspase-8蛋白表达,分析宫颈癌组织中hrHPV感染与Fas、Caspase-3与Caspase-8蛋白表达的关系。结果 91例宫颈癌组织中有72例发现hrHPV感染,感染阳性率为79.12%;91例癌旁正常组织中仅有3例发现hrHPV感染,感染阳性率为3.30%;宫颈癌组织中hrHPV阳性率高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(χ~2=107.975,P0.05)。宫颈癌组织中Fas、Caspase-3与Caspase-8阳性率低于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(χ~2=30.102、61.088、64.096,P0.05)。hrHPV感染宫颈癌组织中Fas、Caspase-3与Caspase-8蛋白表达量明显低于无hrHPV感染宫颈癌组织,差异有统计学意义(χ~2=26.167、34.232、32.856,P0.05)。单因素方差分析显示,宫颈癌hrHPV感染与年龄、临床分期、病理分型、组织学分级和淋巴结转移均无关(χ~2=2.367、1.281、0.272、1.027、0.274,P均0.05),Fas、Caspase-3及Caspase-8蛋白表达与临床分期、组织学分级有关(Fas:χ~2=5.929、4.540;Caspase-3:χ~2=5.230、5.429;Caspase-8:χ~2=4.355、4.326;P均0.05)。Spearman秩相关检验发现,hrHPV感染与Fas、Caspase-3、Caspase-8蛋白表达量均呈显著负相关(r=-0.503、-0.582、-0.514,P0.05)。结论 hrHPV感染与早期宫颈癌变密切相关,其可能是通过抑制Fas、Caspase-3与Caspase-8蛋白的表达来促使宫颈细胞癌变。     

HPV感染对宫颈鳞癌组织Fas/FasL表达的影响

[目的]探讨人乳头状瘤病毒（HPV）感染对宫颈癌组织Fas/FasL（Fas配体）表达的影响。[方法]用免疫组化链霉菌抗生物素过氧化物酶（SP）法检测55例宫颈鳞癌和27例宫颈炎组织HPV及Fas、FasL蛋白的表达。[结果]在宫颈鳞癌和宫颈炎组,HPV感染率分别为76.4%和85.2%（P〉0.05）,Fas表达阳性率分别为50.9%和75.0%（P〈0.05）,FasL分别为72.7%和83.3%（P〉0.05）。在宫颈癌HPV感染和未感染组,Fas表达阳性率分别为40.6%和61.9%（P〈0.05）;FasL分别为76.2%和21.4%（P〈0.05）。在宫颈炎HPV感染和未感染组,Fas表达阳性率分别为67.2%和96.7%（P〈0.05）;FasL分别为75.0%和45.2%（P〈0.05）。[结论]HPV感染可能会使宫颈癌细胞Fas基因表达下调,FasL表达上调,使癌细胞发生免疫逃避,从而促进宫颈癌的发生。     

高危型HPV感染与宫颈上皮病变组织中MEKK3、NF-κB基因表达的关系

目的:研究宫颈上皮病变组织中高危型HPV感染与MEKK3、NF-κB表达的关系。方法:收集2013年5月~2016年3月期间125例宫颈活检标本进行研究,宫颈炎症标本、宫颈上皮内瘤变标本、宫颈癌标本分别纳入炎症组、CIN组、恶性组,采用HPV-DNA分型检测试剂盒测定HPV分型,采用免疫组化试剂盒测定MEKK3、NF-κB的蛋白表达量,采用荧光定量PCR试剂盒测定MEKK3、NF-κB以及下游分子的mRNA表达量。结果:高危型HPV阳性宫颈组织中MEKK3、NF-κB的蛋白阳性表达率均显著高于高危型HPV阴性宫颈组织,高危型HPV阳性宫颈组织中MEKK3、NF-κB、Bcl-2、XIAP、Bmi-1、TGF-β、Vimentin的mRNA表达量均显著高于高危型HPV阴性宫颈组织;MEKK3和NF-κB阳性表达组织中Bcl-2、XIAP、Bmi-1、TGF-β、Vimentin的mRNA表达量均显著高于MEKK3和NF-κB阴性表达组织。结论:高危型HPV感染会通过MEKK3/NF-κB通路来增加宫颈上皮病变组织中增殖基因Bcl-2、XIAP、Bmi-1以及侵袭基因TGF-β、Vimentin的表达量。     

bFGF预处理对Iso致大鼠心肌损伤及Fas/FasL系统的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对异丙基肾上腺素(Isoprenaline，Iso)致大鼠心肌损伤心肌细胞凋亡及Fas／FasL系统的影响。方法：将Wistar雄性大白鼠随机分成三组：对照组、Iso损伤纽、bFGF预处理组，光镜观察心肌组织的病理变化，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，免疫组化和原位杂交方法检测Fas、FasL、Caspase-3蛋白及mRNA的表达水平。结果：Iso损伤组心肌坏死较重，有显著心肌细胞凋亡，且Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显上调，bFGF预处理组心肌坏死明显减轻，凋亡细胞数减少，Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显下调。结论：bFGF可通过抑制Fas、FasL、Caspase-3的蛋白及mRNA表达，减少心肌细胞凋亡而减轻保护大鼠的心肌损伤。     

复发性流产蜕膜组织中细胞凋亡与侵袭、血管新生的相关性研究

目的:研究复发性流产(RSA)蜕膜组织中细胞凋亡与侵袭、血管新生的相关性。方法:选择在自贡市妇幼保健院就诊的复发性流产患者作为研究的RSA组,同期在自贡市妇幼保健院自然分娩且无流产病史的孕妇作为研究的对照组。采集蜕膜组织并检测凋亡基因、侵袭基因的mRNA表达量及促血管新生分子的蛋白含量,采集血清并测定抗血管新生分子的蛋白含量。结果:RSA组蜕膜组织中Bcl-2的mRNA表达量显著低于对照组,Bax、Caspase-3、Caspase-9、TRAIL的mRNA表达量显著高于对照组;RSA组蜕膜组织中MMP2、MMP9的mRNA表达量以及VEGF、Ang-1、Ang-2、Tie-2的蛋白含量显著低于对照组且与Bcl-2的mRNA表达量呈正相关,与Bax、Caspase-3、Caspase-9、TRAIL的mRNA表达量呈负相关;蜕膜组织中TIMP1、TIMP2的mRNA表达量及血清中sFlt-1的蛋白含量显著高于对照组且与Bcl-2的mRNA表达量呈负相关,与Bax、Caspase-3、Caspase-9、TRAIL的mRNA表达量呈正相关。结论:RSA蜕膜组织中促凋亡基因表达增多、抗凋亡基因表达增多且细胞过度凋亡与侵袭不足、血管新生减少有关。     

金水清对IgA肾病大鼠细胞凋亡Fas/FasL系统的影响

目的观察金水清对IgA肾病大鼠细胞凋亡Fas/FasL系统的影响。方法采用口服BSA+皮下注射四氯化碳、蓖麻油+尾静脉注射脂多糖+加高温高湿环境+高糖高脂饮食的复合法,复制大鼠IgA肾病模型,并给予金水清治疗,Western-blot检测肾组织Caspase-9、P53、Fas、FasL蛋白表达,RT-PCR检测肾组织Fas、FasL mRNA的表达。结果与正常组比较,模型组Caspase-9、P53、Fas、FasL蛋白表达明显升高(0.05);与模型组比较,治疗组Caspase-9、P53、Fas、FasL蛋白表达明显降低(0.05)。与正常组比较,模型组Fas、FasL mRNA表达明显升高(0.05);与模型组比较,治疗组Fas、FasL mRNA表达明显降低(0.05)。结论金水清能够明显抑制IgA肾病大鼠肾组织细胞的凋亡和增殖,其可能通过下调P5、Caspase-9及Fas、FasL蛋白和mRNA水平而发挥作用。     

创伤弧菌脓毒症大鼠肝组织凋亡相关基因的动态表达及抗菌药物干预效应

目的 探讨创伤弧菌（W）脓毒症大鼠肝组织凋亡相关基因Fas mRNA、细胞色素C（CytC）mRNA、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspases）-9 mRNA、Caspase-3 mRNA、Bax mRNA和Bcl-2 mRNA的动态表达及头孢哌酮钠联用乳酸左氧氟沙星的干预效应.方法 制作大鼠W脓毒症模型（W组）和W脓毒症抗菌药物干预模型（AA组）,并设正常对照组（NC组）,同时采用RT-PCR法检测各组各时点肝组织Fas mRNA、CytC mRNA、Caspase-9 mRNA、Caspase-3 mRNA、Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达量的动态变化.结果 W组各时点肝组织Fas mRNA、CytC mRNA、Caspase-9 mRNA、Caspase-3 mRNA和Bax mRNA的表达量均较NC组增高.而各时点Bcl-2 mRNA表达量均较NC组下降（均P〈0.05）;AA组染菌后9、12h时肝组织Bcl-2 mRNA表达量及9h时的Caspase-3 mRNA表达量仍高于NC组（均P〈0.05）;AA组染菌后9、12、16h时的肝组织Fas mRNA、CytC mRNA、Caspase-9 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量均较同时点W组降低（均P〈0.05）,染菌后12、16h时的Bax mRNA表达量均较同时点W组降低（均P〈0.05）,而染菌后9、12、16h时的Bcl-2 mRNA表达量则较同时点W组增高（均P〈0.05）.结论 外源性、内源性凋亡途径均参与了W脓毒症肝细胞损伤过程;促/抗凋亡调节基因（Bax/Bcl-2）表达失衡可促进肝细胞凋亡;而抗菌药物则可有效抑制肝细胞凋亡,从而维持促/抗凋亡调节基因表达的平衡.     

小细胞肺癌患者化疗前后NSE、ProGRP含量与化疗所致癌细胞凋亡的相关性

目的:研究小细胞肺癌(SCLC)患者化疗前后NSE、ProGRP含量与化疗所致癌细胞凋亡的相关性。方法:选择在我院接受EP方案化疗的SCLC患者,化疗前和化疗后3个周期时,分别采集血清并测定NSE、ProGRP含量,按照化疗后血清中NSE、ProGRP含量的四分位数由低到高将患者分为NSE和ProGRP-1组、-2组、-3组、-4组;采集肿瘤病灶并测定凋亡分子的mRNA表达量。结果:化疗后,SCLC患者血清中NSE、ProGRP的含量显著低于化疗前,肿瘤病灶中Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3、pULK、PI3KC3的mRNA表达量显著高于化疗前;NSE和ProGRP-1组、-2组、-3组病灶中Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3、pULK、PI3KC3的mRNA表达量显著高于NSE和ProGRP-4组,NSE和ProGRP-1组、-2组病灶中Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3、pULK、PI3KC3的mRNA表达量显著高于NSE和ProGRP-3组,NSE和ProGRP-1组病灶中Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3、pULK、PI3KC3的mRNA表达量显著高于NSE和ProGRP-2组。结论:小细胞肺癌患者化疗后血清中NSE、ProGRP的含量显著降低且与化疗所致癌细胞凋亡密切相关。     

抗精子抗体和抗子宫内膜抗体与不孕及流产的关系

目的　探讨抗精子抗体（ＡｓＡｂ）与抗子宫内膜抗体（ＥＭＡｂ）在不孕、流产中的作用及二者关系,进一步 揭示不孕、流产的病因。方法　采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）同时检测３４５例不孕、流产妇女血清中的ＡｓＡｂ与 ＥＭＡｂ,按ＡｓＡｂ检测结果分阳性组和阴性组,比较两组ＥＭＡｂ阳性率的差异。结果　原发不孕及自然流产妇女中, ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率高达１６．６７％和１９．５１％,而ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率高达４３．６４％和４２．８６％,显著高于 ＡｓＡｂ（－）组（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）。继发不孕妇女中ＡｓＡｂ（－）组ＥＭＡｂ阳性率为１８．１８％,ＡｓＡｂ（＋）组ＥＭＡｂ阳性率 为３２．２％,二者无显著性差异（０．０１＞Ｐ＞０．０５）。结论原发不孕及自然流产妇女中因个体免疫反应差异使某些 人易对体内、外物质发生免疫反应而产生抗体,从而导致不孕或流产。     

亚硝基脲类和亚硝基硫脲类的理化性质及致突变能力

本题选择N,N′-二甲基亚硝基脲(DMNU),N,N′-二乙基亚硝基脲(DENU),及其类似物N,N′-二甲基亚硝基硫脲(DMNTU)、N,N′-二乙基亚硝基硫脲(DENTU)为代表,测定了这些化合物的水解反应速度、脂溶性(HPLC的logk′值)、水解产物和致突变能力。证明了硫脲的脂溶性大于脲的脂溶性。DMNTU对TA100菌株的致突变能力最强,其它较弱。     

水疗联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响

目的探讨新生儿游泳联合抚触对新生儿的生长发育、黄疸及睡眠的影响。方法将经阴道顺产分娩的正常新生儿100例随机分为两组，观察组（水疗联合抚触组）50例，对照组（单纯沫浴组）50例。①测定两组10日、28日的体重、身长、上臂围；②观察记录胎便转黄时间，测定皿清胆红素；③记录24h睡眠时间。结果两组新生儿10日、28日体重、身长、上臂同增长有显著差异（P〈0．05），两组新生儿5日时，胎便转黄时间及黄疸指数比较均有显著性差异（P〈0．01），两组睡眠时间比较有统计学意义（P〈0．05），两组并发症比较无统计学意义（P〉0．05）。结论新生儿水疗联合抚触可促进新生儿的生长发育，能加速胎粪的早排出，减轻生理性黄疸程度，有效地降低新生儿高胆红素血症的发病率，提高睡眠质量。     

气血与足月妊娠分娩关系的探讨

论述足月妊娠分娩的发动和维持依靠气的推动、温煦、气化、固摄功能和血的营养、濡润功能。顺利分娩既要气血充足，还要气顺血和。临床研究结果表明调补气血，是促进产程，预防难产的重要手段。实验研究结果阐明调补气血中药加强产力、促进产程主要是从改善产妇全身情况，提高机体抗应激、抗疲劳、耐缺氧能力，即所谓使产妇气血充足调和，充分发挥气血在分娩过程中的生理作用。