HPLC测定不同产地单芽狗脊中 山柰酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定单芽狗脊中山柰酚3,7-O-α-L-二鼠李糖苷含量的方法.方法:HPLC条件为DiamonsilTM C18(4.6 mm×200 mm.5 μm)色谱柱,流动相乙腈-水(30∶70),检测波长265 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温25℃.结果:9个产地单芽狗脊中山柰酚3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的质量分数范围为0.05％ ～0.43％.结论:该法简便、准确、专属性强,可用于单芽狗脊中山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的含量测定.     

加味通腑汤对溃疡性结肠炎大鼠IL-1β和IL-10影响的研究

目的:研究加味通腑汤对溃疡性结肠炎大鼠IL~(-1)β和IL~(-1)0的影响及作用机制。方法:将140只健康SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、补脾益肠丸组、SASP组、加味通腑汤低剂量组、加味通腑汤中剂量组、加味通腑汤高剂量组。采用TNBS/乙醇法建立UC大鼠模型。分组灌胃治疗后,检测UC大鼠模型结肠组织IL~(-1)β和IL~(-1)0含量。结果:加味通腑汤低剂量组与补脾益肠丸组比较,IL~(-1)β含量略升高IL~(-1)0含量略下降(P0.05);加味通腑汤低剂量组与SASP组比较IL~(-1)β含量明显增高IL~(-1)0含量明显下降(P0.05);加味通腑汤中剂量组与补脾益肠丸组比较IL~(-1)β含量明显下降(P0.05),IL~(-1)0含量略升高(P0.05);加味通腑汤中剂量组与SASP组比较IL~(-1)β含量明显升高(P0.05),IL~(-1)0含量略下降(P0.05);加味通腑汤大剂量组与补脾益肠丸组比较IL~(-1)β含量明显下降IL~(-1)0含量明显升高(P0.05);加味通腑汤大剂量组与SASP组比较IL~(-1)β含量明显下降IL~(-1)0含量明显升高(P0.05)。结论:加味通腑汤对溃疡性结肠炎大鼠能够下调致炎细胞因子和上调抗炎细胞因子的反应,控制炎症反应,提高免疫力,减轻结肠组织黏膜损伤。     

小木通的化学成分

目的:系统研究小木通的化学成分.方法:采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和中低压制备色谱等技术分离小木通的化学成分,利用理化性质和波谱法鉴定其结构.结果:从小木通中分离得到11个化合物,分别鉴定为4,7-二甲氧基-5-甲基-香豆素(1),异松脂素(2),松脂素(3),(+)-2-(3,4 -dimethoxyphenyl)-6-(3,4-dihydroxyphenyl)-3,7-dioxabicyclo[3,3,0]octane (4),matairesinol (5),落叶松脂素(6),justieiresinol(7),丁香脂素(8),鹅掌楸苷(9),3-甲氧基-对苯二酚-4-O-β-D-葡萄糖苷(10),3,5-二甲氧基-对苯二酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(11).结论:除了化合物9外,其余10个化合物均为首次从该植物中分离得到.     

培元通脑胶囊质量标准研究

目的:建立培元通脑胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱法对培元通脑胶囊中何首乌、肉桂、赤芍及肉苁蓉进行定性鉴别;HPLC测定何首乌中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷的含量。色谱条件:Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(15∶85),流速1.0 mL.min-1。结果:TLC的斑点清晰、分离度较好,阴性无干扰;2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷在0.064 5～0.805 9μg线性关系良好,平均回收率为99.4%,RSD 2.2%(n=6)。结论:所建标准可用于培元通脑胶囊的质量控制。     

草乌类蒙药的红外光谱分析与鉴定

目的：对蒙药草乌根、草乌叶、草乌花、草乌芽的原药材及其总生物碱提取物进行分析。方法：采用红外光谱的三级鉴定方法（红外光谱、二阶导数谱以及二维相关谱）进行样品的全成分分析。结果：草乌根的谱图与淀粉的标准谱图相似,出现淀粉特征峰1 155、1070、1019cm^-1,故草乌根含有大量淀粉;叶、花、芽含芳香类物质较多（1600cm^-1）,糖苷类物质（1050-1070cm^-1）、酯类物质不明显;草乌花、草乌叶、草乌芽的红外谱图中能够观察到芳香环（1595cm^-1附近）和=C-O（1262cm^-1附近）有特征吸收,证明三者共有成分为二萜类生物碱。二阶导数谱图显示,根在1712cm^-1（C=O）附近的特征峰明显强于花、叶和芽,说明根中二萜类生物碱类成分含量高于花、叶和芽;二维谱图在800-1300cm^-1处根有6个自动峰1745、1650、1560 （最强）、1465、1400、1300cm^-1;叶、芽、花相似其自动峰有1680、1560（最强）、1465cm^-1。结论：红外光谱宏观指纹技术可提供大量整体信息,能够较准确的把握草乌类药材的整体质量。红外光谱法和二维相关光谱提供了大量草乌、草乌花、草乌叶、草乌芽的整体结构信息,验证了4种药材所含物质结构和含量的差异,为今后草乌的系统研究工作奠定基础。     

药用植物短蕊万寿竹的组织培养研究

目的:更好的开发利用短蕊万寿竹。方法:以短蕊万寿竹的幼嫩茎段为外植体,MS为基本培养基,采用正交设计研究外源激素的种类和配比对诱导丛生芽和生根的影响。结果:最适的启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.5 mg·L~(-1),诱导丛生芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1),丛生芽的增殖系数达到6.88,最佳的生根培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 2.0 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1),生根率达到96%以上。结论:建立短蕊万寿竹的组织培养繁殖体系,为人工种植提供大量种苗。     

卷丹百合鳞茎高效离体再生体系的研究

目的:以湖南主栽卷丹百合的鳞茎为起始外植体,建立卷丹百合鳞茎高效离体再生体系。方法:比较消毒方法、不同6-BA浓度、培养基组合和环境条件等对鳞茎污染率、不定芽的诱导、伸长和生根的影响。结果:用8%NaClO消毒15 min配合0.1%HgCl_2消毒15~20 min后,消毒效果较好,鳞片成活率高;温度为26±2℃,光照强度为2000 Lx条件下,6-BA浓度为2.5~3.5 mg·L~(-1),鳞片萌芽最快,不定芽生长最健壮;0.5 mg·L~(-1)6-BA+0.2 mg·L~(-1)NAA+1.0 mg·L~(-1)2,4-D培养基组合有利于不定芽的生长;0.5 mg·L~(-1)NAA培养基组合最有利于不定芽的生根,移栽成活率高达100%。结论:建立此体系为卷丹的脱毒苗培育和品种改良提供一定技术支持。     

不同发芽阶段对黄芩种苗生物量及活性成分含量变化的研究

该文主要研究从萌发到移栽5个不同发芽阶段对黄芩种苗生物量及活性成分含量的影响。采集不同发芽阶段的黄芩种苗,测定其根长、芽长、根径及根重,利用HPLC测定根中的黄芩苷、野黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量。结果表明,随着黄芩种苗的萌发,黄芩的各个生物学指标均升高,但根部折干率从32.90%下降至27.96%。野黄芩苷和黄芩素的含量均呈现先增加后减少的趋势,在芽/根值为0.35时达到最大,质量分数分别为3.22,3.89 mg·g~(-1),黄芩苷含量在芽/根值为0.23时最高,质量分数为107.39 mg·g~(-1),汉黄芩苷在芽/根值为0.06时含量最高,质量分数为16.11 mg·g~(-1),汉黄芩素则呈现逐渐增加的趋势,在芽/根值为0.50时达到最大值,质量分数为0.88 mg·g~(-1)。当芽/根值为0.35时,黄芩种苗中的野黄芩苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量达到或接近发芽阶段的最大值,可用芽/根值作为黄芩种苗活性成分的判定指标。     

塞络通胶囊治疗急性脑缺血模型大鼠的代谢组学分析

目的:从代谢组学角度研究塞络通胶囊治疗急性多发性脑梗死大鼠模型的作用机制。方法:24只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和塞络通组(33 mg·kg~(-1)),通过大鼠颈内动脉注射荧光微球的方法建立急性多发性脑梗死大鼠模型。手术成功后,塞络通组大鼠通过十二指肠注射给药,给药体积2 m L·kg~(-1)。基于UPLC-Q-TOF-MS分析各组大鼠脑组织中内源性代谢物,应用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)进行模式识别及生物标志物的鉴定。结果:通过模式识别发现假手术组与模型组的代谢轮廓有明显差异,并鉴定了10个与急性脑缺血相关的生物标志物。与假手术组相比,模型组中N-乙酰天门冬氨酸(NAA),延胡索酸,谷胱甘肽,脱氢抗坏血酸,天门冬氨酸以及S-腺苷同型半胱氨酸含量下降,精氨酸、瓜氨酸、酵母氨酸、乙内酰脲-5-丙酸含量升高;而塞络通胶囊则可使上述10个异常变化的生物标志物水平显著回调。结论:塞络通胶囊主要调节的代谢途径有NAA代谢、精氨酸代谢、能量代谢及氧化应激等。     

温肺通痹颗粒对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响

目的:研究温肺通痹颗粒对小鼠网状内皮系统吞噬功能的影响,探讨温肺通痹颗粒治疗间质性肺疾病的作用靶点。方法:将试验小鼠50只随机分为5组,每组10只,分别为对照组,醋酸泼尼松组,温肺通痹颗粒高剂量组(18.8g·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量组(9.4g·kg~(-1)·d~(-1))和低剂量组(4.7g·kg~(-1)·d~(-1)),小鼠灌胃给药,每天上午灌胃给药1次,连续7d。于末次给药后1h静脉注入印度墨汁,用印度墨汁法测出2min和10min的吸光度(OD值),并按公式计算出吞噬指数K及吞噬系数α。结果:温肺通痹颗粒高剂量组的吞噬指数K和吞噬系数α与对照组比较明显增加(P0.05),温肺通痹颗粒中剂量组、温肺通痹颗粒低剂量组的吞噬指数K和吞噬系数α与对照组比较虽无显著性差异,但有增加趋势,说明温肺通痹颗粒可在一定程度上提高机体单核巨噬细胞的吞噬能力,进而增加机体免疫力。结论:温肺通痹颗粒可在一定程度上增加机体的免疫力,初步验证温肺通痹颗粒通过对网状内皮系统吞噬功能产生影响以提高机体免疫力,从而达到治疗间质性肺疾病的作用。     

三七总皂苷对白细胞黏附效应与黏附分子表达调控的研究

目的:通过观察注射用血栓通(主要成分为三七总皂苷)对各种刺激处理因素下白细胞黏附能力和黏附分子表达的影响,探讨血栓通对缺血-再灌注损伤的保护机制.方法:分离纯化大鼠白细胞与肺部血管内皮细胞,建立体外白细胞与血管内皮细胞黏附试验体系,在施加内毒素、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)与缺氧等刺激处理因素之前,采用血栓通(三七总皂苷剂量分别为5,50,100 mg·L~(-1))进行分组干预,并检测白细胞对血管内皮细胞的黏附率,同时采用流式细胞术检测白细胞黏附分子LFA-1,VLA-4与血管内皮细胞黏附分子ICAM-1,VCAM-1表达的变化.结果:在内毒素作用条件下,血栓通对大鼠白细胞黏附率无显著改变,而在TNF-α与IL-8活化因素以及缺氧条件下,50,100 mg·L~(-1)血栓通可明显减少大鼠白细胞对内皮细胞的黏附率;在缺氧、TNF-α等刺激因素的作用下,大鼠肺血管内皮细胞VCAM-1与ICAM-1的表达水平显著升高,在100 mg·L~(-1)血栓通的干预作用下,VCAM-1与ICAM-1的表达水平显著降低.结论:血栓通可抑制大鼠肺血管内皮细胞VCAM-1与:ICAM-1的表达而降低白细胞的黏附能力,从而减轻血管内皮细胞的损伤,可能是血栓通对缺血-再灌注损伤具有保护作用的机制之一.     

酵母菌的计数

<正> 部颁药品卫生标准规定,口服液体制剂霉菌和酵母菌总数:每毫升不超过100个。其法取1:10供试品稀释液1毫升,加于灭菌平皿内,以倾注法浇成虎红平板,待凝后,于25°-28℃培养72小时后计数。酵母菌在该板上的典型菌落为边缘整齐、表面光滑湿润的奶油色(极少数呈粉色或红色)圆形菌落(极少数呈多角形)。但有的腐生性细菌(革兰氏阳性杆菌)在此板上生长的菌落与酵母菌菌落酷似,肉眼难以鉴别,因此必须作显微检查才可判别。其法:以白金耳挑取该菌落少许于洁净的载玻片上,滴加蒸馏水一滴,研匀,加盖玻片,先在低倍镜后在高倍镜下检查有否酵母细胞。是芽殖还是裂殖。如果是芽殖那就看它是一端芽殖、二端芽殖、三端芽殖或是多边芽殖。根据我们六年来的检查,发     

TDZ和NAA对老鸦瓣不定芽诱导和丛生芽增殖的影响

以老鸦瓣鳞茎芯芽和子茎（芽茎顶端膨大形成的子鳞茎）为外植体,探索噻苯隆（TDZ）和α-萘乙酸（NAA）诱导老鸦瓣外植体直接成芽的方法,建立老鸦瓣器官途径丛生芽组培体系。研究结果表明,芯芽和子茎在MS+ TDZ 2.0 mg·L^-1+NAA 2.0 mg·L^-1和MS+TDZ 2.0 mg·L^-1+NAA 4.0 mg·L^-1培养基中可直接诱导不定芽,芽诱导率分别为72.92%,79.22%;利用子茎不定芽在MS+TDZ 0.2 mg·L^-1+ NAA 0.2 mg·L^-1培养基中可进行丛生芽增殖,增殖系数2.23,形成的芽体健壮,叶色嫩绿;增殖后的丛生芽在含有IBA 1.0 mg·L^-1的MS培养基中即可生根,生根率52.6%,平均3~5条根。利用老鸦瓣芯芽和子茎,筛选出了老鸦瓣芯芽和子茎直接诱导不定芽及丛生芽增殖和生根的最适培养基,建立了器官途径丛生芽组培体系。     

玄参组织培养及炼苗技术

目的:以玄参茎段、叶柄、带腋茎段和叶片为外植体,筛选出适宜的植株再生体系以及最佳的炼苗条件。方法:通过L_(16)(4~5)正交试验研究玄参不同外植体、不同激素和不同浓度对丛生芽的诱导和增殖;采用单因素方差分析不同浓度激素对不定芽生根的诱导;同时选择不同基质、不同浇水周期和不同过渡方式对玄参生根苗炼苗关键技术的优选。结果:带腋茎段为最佳外植体,其次依次为茎段,叶片和叶柄;其在MS+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA) 0. 5 mg·L~(-1)+萘乙酸(NAA) 0. 2 mg·L~(-1)中不定芽诱导率和芽增殖倍数分别为100%和9. 84;适宜不定芽生根的培养基为1/2 MS+吲哚-3-丁酸(IBA) 0. 2 mg·L~(-1),生根率100%,根数为39. 45条;就基质而言,以营养土-蛭石-珍珠岩(5∶2∶1)为移栽基质,可保持基质中肥力、透气性与保水性适当搭配;浇水周期选择每2 d浇1次水,过渡方式为室内炼苗20 d,室外遮阴大棚炼苗10 d后移栽大田,成活率可达到95%以上。结论:建立玄参无性快速繁殖体系,为提供玄参高效、快速、稳定的植株再生,优质的种苗繁育以及适宜的炼苗条件提供了有效途径。     

基于分子模拟技术的豨莶通栓制剂调脂作用机制及剂型选择研究

动脉粥样硬化是脑卒中发生的主要原因,而血脂异常是动脉粥样硬化最重要的危险因素。该文利用8个关键降脂靶点有效成分辨识模型NPC1L1,HMG-CoA还原酶,SQS,MTP,CETP抑制剂及PPARα,LXRα,LXRβ激动剂药效团和分子对接模型,对豨莶通栓制剂13味中药化学成分构成的中药小分子数据库进行虚拟筛选。筛选结果提示,该制剂通过桃仁中的prupersin A与天麻中的牡丹苷A、川芎中的柠檬黄素-β-D-葡萄糖苷、半夏中的2′-(2,3-二羟基苯甲酰)-獐牙菜苷与三七中的槲皮苷、天麻中的4-叔丁基-2-[(5-叔丁基-2-羟基-苯基)甲氧基甲基]-6(羟甲基)苯酚4组潜在活性化合物分别作用于靶点NPC1L1,HMG-CoA还原酶,LXRβ及SQS发挥调脂作用,且大部分潜在活性化合物的性质及提取工艺与豨莶通栓胶囊的制备工艺相吻合,表明在豨莶通栓制剂现有的2种剂型中,胶囊剂较丸剂更具优势。该研究分析了豨莶通栓胶囊调脂治疗脑卒中的药效物质基础及作用机制,为其进一步研发与临床应用提供了依据。     

五鹤续断快繁体系的建立和优化

目的 研究五鹤续断快繁体系关键技术的建立和优化.方法以五鹤续断(Wu-He Dipsacus asper)初春萌发的幼嫩茎、茎尖和叶作为外植体,对五鹤续断愈伤组织的诱导及根和芽分化的培养基进行优化筛选.结果诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA1.5 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1),在光照下培养长势好;诱导丛生芽的最优培养基为MS+6-BA2.0 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1);诱导生根的最佳培养基为1/2MS+NAA1.0 mg·L~(-1)+ PP3 330.4 mg·L~(-1).结论 建立了一套五鹤续断快速繁殖技术体系.     

壮通饮抑制NADPH氧化酶2对糖氧剥夺诱导星形胶质细胞损伤的保护作用

目的：探讨壮通饮对星形胶质细胞糖氧剥夺（OGD）损伤的保护作用，并从NADPH氧化酶2(NOX2）抑制途径探讨其保护作用发挥的机制。方法：原代培养星形胶质细胞，制成糖氧剥夺损伤模型，分为对照组、糖氧剥夺组、糖氧剥夺+壮通饮组（浓度20mg·L-~1,40mg·L-~1,80mg·L-~1），糖氧剥夺+夹竹桃麻素组（浓度0.05mg·L~(-1)、0.25mg·L~(-1)、0.5mg·mL~(-1)）。免疫荧光观察细胞纯度，CCK-8试剂盒测定细胞活力，Western Blot检测NOX2蛋白表达。结果：糖氧剥夺诱导星形胶质细胞损伤后复氧8h和24h，壮通饮（40mg·L~(-1)、80mg·L~(-1)和80mg·L~(-1)）分别能提高星形胶质细胞活力。Western Blot显示壮通饮（20mg·L~(-1)、40mg·L~(-1)、80mg·L~(-1)）和夹竹桃麻素（0.25mg·L~(-1)、0.5mg·mL~(-1)）均能抑制糖氧剥夺/再灌注后NOX2活性。结论：壮通饮可以抑制NOX2的活性，保护糖氧剥夺诱导的星形胶质细胞损伤。     

多花黄精组织培养体系的研究

为加快多花黄精优良种苗的繁育,通过叶片叶龄及部位、基本培养基和植物生长调节剂等关键因子的综合调控,建立多花黄精的组培快繁体系并通过细胞学观察解析愈伤组织形成与分化。结果表明:30 d龄多花黄精试管苗叶基部在MS+6-BA 1. 50 mg·L~(-1)+2,4-D 0. 20 mg·L~(-1)培养基上愈伤组织诱导率最高,为80. 00%,愈伤组织脱分化启动及愈伤组织的形成是多起源的;不定芽分化最佳培养基为MS+6-BA 4. 00 mg·L~(-1)+2,4-D 0. 20 mg·L~(-1),分化率达90. 33%,每块愈伤组织平均分化芽数5. 16个,不定芽有外起源和内起源2种发生方式,分别由愈伤组织近表层细胞和愈伤组织内部拟分生组织形成;采用正交试验设计筛选出不定芽最佳增殖培养基为MS+6-BA 2. 00 mg·L~(-1)+NAA 0. 10 mg·L~(-1)和MS+6-BA 2. 00 mg·L~(-1)+NAA0. 20 mg·L~(-1);切分三叶无菌苗接入培养基1/2 MS+IBA 2. 00 mg·L~(-1)中,生根率最高,为94. 00%;移栽于泥炭-蛭石1∶1的基质中生长良好,存活率达85. 00%以上。该研究为多花黄精工厂化育苗提供了关键解决途径。     

薄层色谱法鉴别清热通淋片

目的建立鉴别清热通淋片的薄层色谱(TLC)法,优化清热通淋片的检测和质量控制方法。方法采用TLC法分别对清热通淋片中的爵床、苦参、白茅根进行定性鉴别,展开剂分别为环己烷-乙酸乙酯-甲酸(20161)、环己烷-三氯甲烷-甲醇(841)、环己烷-乙酸乙酯(50.06),薄层板为硅胶G薄层板(10 cm×10cm,0.20~0.25 mm)。结果爵床、苦参和白茅根的TLC斑点清晰,分离良好,阴性无干扰。结论方法简便易行、分离好、无干扰,所建爵床、苦参的TLC鉴别法可以用于清热通淋片的质量控制。     

通塞脉方取舍怀牛膝对大鼠缺血性脑损伤的影响

目的 探讨通塞脉方取舍怀牛膝对缺血性脑损伤模型大鼠的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平(32.4 mg/kg)组、通塞脉全方(生药31.74 g/kg)组、去牛膝通塞脉方(生药27.77g/kg)组.除假手术组与模型组外,其他给药组大鼠连续ig给药3d,每天1次.给药后除假手术组外,其他组大鼠制备缺血性脑卒中模型,造模后24 h取血及大脑组织,脑组织以TTC染色,观察梗死率;HE染色观察病理学变化;测定血清中高迁移率组蛋白1(HMGBl)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的量;免疫组化法观察缺血组织中核因子-κB (NF-κB)的表达.结果 模型组大鼠HMGB1、TNF-α、IL-1β的量及NF-κB的表达均明显升高(P＜0.05),通塞脉全方及通塞脉去牛膝方均可降低脑缺血大鼠HMGB1、TNF-α、IL-1β的量,抑制NF-κB的表达(P＜0.05),其中去牛膝通塞脉方降低IL-1β的作用最强.结论 通塞脉全方及去牛膝通塞脉方均可通过抑制HMGB1相关的NF-κβ信号通路的激活,发挥抑制炎症反应、减轻脑水肿、保护神经细胞的作用;去除牛膝的通塞脉方不会降低对脑缺血疗效,在抑制炎症因子IL-1β的分泌方面优于通塞脉方全方.