通脉宁对AngⅡ及LPC诱导的血管平滑肌细胞内钙超载的影响

目的观察通脉宁全方及拆方药物血清对AngⅡ及LPC诱导的血管平滑肌细胞内钙超载的影响.方法组织贴块法进行血管平滑肌细胞(VSMC)培养,应用血清药理学研究的方法,AngⅡ 10-6mol/L、LPC 10-8mol/L作为刺激因子,制备通脉宁全方、益气拆方、活血拆方药物血清.采用Fluo-3染色荧光探针标记测定钙离子荧光强度.结果通脉宁全方及拆方药物血清对AngⅡ及LPC诱导的VSMC内钙超载具有明显的干预作用,且通脉宁全方组的干预作用明显优于益气拆方组及活血拆方组.结论通脉宁药物血清抑制AngⅡ及LPC诱导的VSMC增殖与部分阻断AngⅡ及LPC细胞内的信号转导途径有关,这可能是通脉宁抑制VSMC增殖的作用途径之一.     

温脉通对血管平滑肌细胞增殖及相关因子表达的影响

目的观察温脉通对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用及其对促VSMC生长因子的影响,以期探讨温脉通防治早期肢体动脉硬化性闭塞症(ASO)的作用机制.方法体外培养兔胸主动脉VSMC,以AngⅡ作为诱导因素,复制VSMC增殖模型,分别用温脉通全方及拆方药物血清进行干预.应用四唑盐(MTT)比色法测定各组VSMC增殖活性,用免疫细胞化学检测方法观察各组对血小板源性生长因子(PDGF-BB)表达的影响.结果细胞经AngⅡ作用后其增殖活性明显增加,与空白组比较有显著性差异(P＜0.01);而分别加入各组药物血清后,细胞增殖活性降低,与AngⅡ组比较有显著性差异(P＜0.01),其中以大剂量组细胞增殖活性降低最为明显.血管平滑肌细胞PDGF-BB免疫组化显色,空白组,呈弱阳性表达( /-);AngⅡ组呈强阳性表达( ),与空白组比较有显著性差异;温脉通全方组PDGF-BB表达明显减弱( ),与空白组接近;温经益气拆方组和活血通脉拆方组PDGF-BB呈中度表达( ),其阳性反应强度高于全方组,低于AngⅡ组.结论温脉通可呈剂量依赖性地抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖、抑制PDGF-BB的蛋白表达,提示温脉通防治ASO可能与抑制VSMC异常增殖及PDGF-BB的蛋白表达有关.     

舒脉胶囊对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞迁移的影响

目的 观察舒脉胶囊及其拆方药物血清对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)迁移的影响.方法 采用组织贴块法进行VSMC培养,AngⅡ 10-7 mol/L作为刺激因子,将药物血清分为舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组和补脾益肾拆方组,测微尺测量细胞迁移的距离,免疫组织化学法测量基质金属蛋白酶-2(metalloproteinase-2,MMP-2)的表达情况.结果 与AngⅡ组比较,舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组细胞迁移距离显著减小(P<0.01),MMP-2表达减少(P<0.01),其中舒脉胶囊全方组细胞迁移距离显著小于活血化瘀拆方组(P<0.01).结论 舒脉胶囊通过抑制MMP-2的表达而抑制VSMC迁移,全方作用优于拆方.     

舒脉胶囊对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞迁移的影响

目的观察舒脉胶囊及其拆方药物血清对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)迁移的影响。方法采用组织贴块法进行VSMC培养,AngⅡ10-7 mol/L作为刺激因子,将药物血清分为舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组和补脾益肾拆方组,测微尺测量细胞迁移的距离,免疫组织化学法测量基质金属蛋白酶-2(metalloproteinase-2,MMP-2)的表达情况。结果与AngⅡ组比较,舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组细胞迁移距离显著减小(P<0.01),MMP-2表达减少(P<0.01),其中舒脉胶囊全方组细胞迁移距离显著小于活血化瘀拆方组(P<0.01)。结论舒脉胶囊通过抑制MMP-2的表达而抑制VSMC迁移,全方作用优于拆方。     

舒脉胶囊对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞迁移的影响

目的　观察舒脉胶囊及其拆方药物血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞迁移的影响。方法　组织贴块法进行血管平滑肌细胞(VSMC)培养,AngⅡ10_-7mol/L作为刺激因子,将药物血清分为舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组和补脾益肾拆方组,测微尺测量细胞迁移的距离,免疫组化测量MMP-2的表达情况。结果　舒脉胶囊全方组和活血化瘀拆方组迁移距离及MMP-2阳性表达率比AngⅡ组和补脾益肾拆方组低,并有统计学差异。结论　舒脉胶囊具有抑制细胞迁移的效应,并且是通过抑制MMP-2的表达而发挥作用,全方作用强于活血化瘀拆方组,而补脾益肾拆方组不但没有抑制细胞迁移的作用,相反还有促进细胞迁移的作用。     

冠通方及其拆方含药血清对大鼠血管平滑肌细胞C-myc癌基因表达的影响

[目的]观察冠通方及其拆方含药血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC) C-myc癌基因表达的影响.[方法]选用大鼠VSMC,采用AngⅡ诱导其增殖,以冠通方及其拆方含药血清分别作用于大鼠VSMC,采用逆转录-聚合酶链反应(R.T-PCR)方法,测定冠通方及拆方含药血清对AngⅡ诱导的VSMC C-myc癌基因表达的情况.[结果]AngⅡ组VSMC的C-myc/β-actin比值显著增加,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);冠通方组及其拆方各组均可使C-myc比值显著下降,与AngⅡ组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);冠通方组与其拆方各组比较差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01);各拆方组组间比较差异均无统计学意义(P＞0.05).[结论]冠通方抑制VSMC增殖的作用与其可下调VSMC的调控基因C-myc表达有关,且冠通方组作用优于其拆方组.     

舒脉胶囊对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖及细胞周期的影响

目的 观察舒脉胶囊及其拆方药物血清对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ) 诱导的血管平滑肌细胞增生及其对细胞周期的影响.方法 组织贴块法进行血管平滑肌细胞(VSMC)培养, AngⅡ10-7 mol/L 作为刺激因子,将药物血清分为舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组和补脾益肾拆方组,MTT比色法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期.结果 舒脉胶囊全方组和活血化瘀拆方组的OD值比AngⅡ组和补脾益肾拆方组低,并有统计学差异.在细胞周期方面G0/G1期所占百分比补脾益肾拆方组比空白组和AngⅡ组低,有统计学差异;S期所占百分比空白组、舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组比AngⅡ组和补脾益肾拆方组低,有统计学差异,且舒脉胶囊全方组S期百分比大于空白组,小于活血化瘀拆方组;G2/M期所占百分比活血化瘀拆方组、补脾益肾拆方组比空白组和Ang Ⅱ组高,有统计学差异.结论 舒脉胶囊具有抑制细胞增殖的效应,并且是通过抑制细胞周期从G0/G1期向S期转化而发挥,全方作用强于活血化瘀拆方组,而补脾益肾拆方组不但没有抑制细胞增殖的作用,而且还有促进细胞增生的作用.     

冠通方及其拆方含药血清对Ang Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：探讨冠通方及其拆方对含药血清对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响,阐析防治冠心病支架术后再狭窄的作用机理以寻找药物作用的靶点。方法：建立AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖模型;采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察冠通方及其拆方对VSMC增殖的影响;并用免疫组化法观察冠通方及其拆方对大鼠VSMC表达的影响。结果：冠通方组及其拆方含药血清均可抑制大鼠VSMC的增殖（P〈0.05）;其中冠通方组作用结果最好（P〈0.01）;冠通方组、拆方3组与阴性组比较均有显著性差异（P〈0.01）;其中冠通方组的抑制VSMC的增殖最强（P〈0.01）;拆方3组其次（P〈0.05）;拆方1、2组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：冠通方能抑制血管平滑肌细胞（VSMC）的增殖,其机制可能与降低VSMC中含量表达有关。     

温脉通对VSMC增殖和迁移相关因子MMP-2、TIMP-1表达的影响

目的 观察温脉通对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖、迁移及其相关因子基质金属蛋白酶_2(MMP-2)和其抑制因子(TIMP-1)的影响.方法 体外培养兔胸主动脉VSMC,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为诱导因素,复制VSMC增殖、迁移模型,用温脉通药物血清进行干预.应用四唑盐(MTT)比色法测定VSMC增殖活性,用免疫细胞化学检测方法 观察MMP-2、TIMP-1的表达.结果 细胞经AngⅡ作用后其增殖活性和迁移距离明显增加,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01);而加入药物血清后,细胞增殖活性降低、迁移距离变短,与AngⅡ组比较有显著性差异(P<0.01),其中以高剂量组最为明显.正常对照组MMP-2呈弱表达、TIMP-1呈中度表达;AngⅡ组MMP-2表达明显增强、TIMP-1表达减弱;温脉通组MMP-2表达明显受到抑制而TIMP-1表达增强.结论 温脉通可抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖和迁移,抑制MMP-2蛋白表达、诱导TIMP-1蛋白表达,提示该方抑制VSMC迁移可能与影响细胞因子表达从而调节细胞外基质(ECM)代谢有关.     

罗格列酮对鼠血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA表达的影响

目的探讨罗格列酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导鼠血管平滑肌细胞(VSMC)血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)mRNA表达的影响。方法选6~10代处于对数生长期的鼠血管平滑肌细胞,用终浓度为1μmol.L-1AngⅡ预先培养2 h后分成A、B和C组,分别加入终浓度为20、30、50μmol.L-1罗格列酮培养12 h;另外,取预先用终浓度为1μmol.L-1AngⅡ培养6 h的鼠血管平滑肌细胞,加入终浓度为30μmol.L-1的罗格列酮分别再培养0、6、12、24 h。提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测平滑肌细胞AT1RmRNA的表达。结果与空白对照组(23.82±4.68)相比,AngⅡ组AT1RmRNA的表达显著升高(P<0.01);与AngⅡ组(61.04±12.20)比较,罗格列酮干预组(A、B和C组)AT1RmRNA的表达(45.22±7.17、39.82±6.34、34.70±6.69)呈浓度依赖性降低,差异均有显著性(P<0.01)。30μmol.L-1的罗格列酮干预组呈时间依赖性抑制AngⅡ诱导的VSMC AT1RmRNA的高表达(57.37±8.04、46.99±4.81、39.82±6.34、35.71±6.13),差异均有显著性(P<0.01)。结论一定浓度范围内,罗格列酮可呈浓度和时间依赖性地下调AngⅡ诱导的鼠VSMC AT1RmRNA的表达,这可能是其抗炎、抗动脉粥样硬化(AS)作用的重要机制之一。     

益气活血方药对衰老大鼠肝脏细胞增殖和凋亡的影响

目的:了解益气活血方药对自然衰老大鼠肝脏组织细胞增殖和凋亡的影响.方法:利用自然衰老大鼠模型,连续给药4个月,观察益气和活血方药对模型动物肝脏组织细胞增殖和凋亡衰老性变化的改善作用.结果:(1)与年轻大鼠比较,老年大鼠肝脏组织的G0-G1期细胞比例增加(P<0.01),而S期细胞及G2-M期细胞比例减少(P<0.01);同时凋亡细胞的比例增加(P<0.01).(2)与老年大鼠空白组比较,益气组和活血组动物肝脏组织的G0-G1期细胞比例减少(P<0.01),活血组比益气组减少更明显(P<0.01);S期和G2-M期细胞比例增加(P<0.01),益气组和活血组比较差异不显著(P>0.05).(3)益气和活血方药皆能减少老年大鼠肝脏组织细胞的凋亡(P<0.01),但益气方药的作用明显优于活血方药(P<0.01).结论:(1)自然衰老大鼠肝组织细胞增殖减少而细胞凋亡增加;(2)益气和活血方药均能促进衰老大鼠肝脏组织的细胞增殖,活血方药作用稍强;(3)益气和活血方药均能抑制自然衰老大鼠肝组织细胞凋亡,益气方药作用略优.     

活血化瘀法对慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠早期细胞凋亡的影响

目的研究活血化瘀法、理气活血法和益气活血法对慢性萎缩性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis,CAG)癌前病变大鼠早期细胞凋亡的影响。方法采用幽门弹簧插入配合高盐热糊灌胃法复制CAG癌前病变模型,用双标记流式细胞术检测癌前病变大鼠早期细胞凋亡。结果益气活血法、活血化瘀法和理气活血法干预12周后,自然恢复组大鼠早期凋亡率明显高于空白对照组(P<0.01),各干预组早期细胞凋亡率均有降低,其中活血化瘀组、理气活血组与自然恢复组比较有显著性差异(P<0.01或P<0.05),益气活血组显示出降低早期细胞凋亡的趋势,但与自然恢复组比较未见明显差异(P=0.057)。结论益气活血法、活血化瘀法和理气活血法对CAG癌前病变大鼠早期细胞凋亡均有抑制作用,这可能是益气活血法、活血化瘀法和理气活血法改善或逆转大鼠CAG癌前病变的作用机理之一。     

益气活血药对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞能量与脂质过氧化反应变化的影响

目的观察心肌细胞在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用后反映能量的酶与脂质过氧化反应的变化及不同类中药对其的影响.方法用AngⅡ作用于培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞,观察作用24、48、72、96 h细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化及益气、活血、益气活血中药的作用.结果在AngⅡ作用48 h后,细胞上清液中LDH、SDH明显增加(P＜0.01),MDA含量明显升高,SOD活性明显降低(P＜0.01),各中药组LDH、SDH明显降低,且可明显减少MDA含量、升高SOD活性(P＜0.05或P＜0.01).结论AngⅡ作用一定时间后,伴随着能量的变化和引发的脂质过氧化反应,使心肌细胞的功能受到影响,益气、活血、益气活血中药均有保护作用,尤以益气活血药作用明显.     

益气活血利水法治疗肺心病急性发作期36例临床观察

目的观察益气活血利水法治疗慢性肺源性心脏病(简称肺心病)急性发作期的疗效.方法将70例肺心病患者随机分为治疗组(36例)和对照组(34例).治疗组在西医治疗(抗感染、平喘、化痰、吸氧)的基础上加用益气活血利水中药加减治疗,对照组单纯运用西药治疗.结果治疗组总有效率为91.7%,对照组总有效率为67.6%,两组比较,差异有非常显著性意义(P＜0.01).治疗后治疗组肺活量、1秒钟用力呼气量、氧分压、二氧化碳分压的改善优于对照组(P＜0.05).结论西药加用益气活血利水法治疗肺心病急性发作期比单纯用西药治疗疗效显著提高,两者有协同作用.     

祛风益气养阴治疗小儿咳嗽变异性哮喘

目的 观察祛风益气养阴治疗小儿咳嗽变异性哮喘的临床疗效,探究小儿咳嗽变异性哮喘的中医病因病机实质.方法 将90例患儿随机分为3组各30例.治疗组口服祛风止咳汤剂加养阴益气合剂;对照1组口服祛风止咳汤剂;对照2组口服西药美普清加养阴益气合剂.服药2个月后观察疗效.结果 3组疗效有显著性差异(P＜0.05),治疗组疗效明显优于对照1组(P＜0.05)、2组(P＜0.01).结论 祛风益气养阴治疗小儿咳嗽变异性哮喘具有良好的临床疗效.     

益气养阴活血法综合方案对糖尿病肾病患者尿微量蛋白排泄率及中远期疗效的影响

目的观察益气养阴活血法综合治疗方案改善糖尿病肾病(DN)患者尿微量蛋白排泄率(UAER)及中远期临床疗效。方法将入选的DN患者120例随机分为治疗组60例和对照组60例。对照组给予现有综合治疗方案,治疗组加用益气养阴活血中药汤剂,疗程2个月,第6个月随访。分别于治疗前后及第6个月随访时检测患者UAER、并于治疗2个月后及第6个月随访时评价UAER疗效及疾病综合疗效(UAER+症状改善),比较2组患者中远期疗效差异。结果治疗2个月后,治疗组UAER显著减少(P<0.01),总有效率为68.42%,第6个月随访结束时,治疗组UAER总有效率为52.63%,与对照组比较均具显著性差异(P<0.01);综合疗效评定,治疗2个月后,治疗组总有效率为54.39%,6月随访结束时,总有效率为52.63%,与对照组比较均具显著性差异(P<0.01)。结论益气养阴活血法综合治疗方案可以显著降低患者UAER、综合临床疗效优于现有综合治疗方案,且中远期疗效稳定。     

益气活血清热法对儿童哮喘发作期嗜酸性粒细胞的影响

目的观察益气活血清热法对儿童哮喘发作期嗜酸性粒细胞(EOS)绝对计数的影响.方法采用随机方法将160例患儿分为治疗组、西药组和中成药组.治疗组内服泻白定喘颗粒,外用中药穴位贴敷;西药组采用西医常规治疗;中成药组口服小儿咳喘灵颗粒.结果治疗组治疗后EOS绝对计数较治疗前显著降低(P＜0.01),与中成药组、西药组治疗后比较差异显著(P＜0.05,P＜0.01).在改善肺功能方面治疗组优于中成药组(P＜0.05).在消除哮鸣音、缓解咳嗽、出汗等症状方面,治疗组明显优于西药组、中成药组(P＜0.05,P＜0.01).治疗组显效率优于西药组、中成药组.结论内外并用、益气活血清热法治疗发作期儿童哮喘,可以显著降低EOS,临床疗效良好.     

DDPH对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用氚－胸腺嘧啶核苷（3H－TdR）参入、电镜、原位杂交及Northern blot杂交方法，观察了 1－ （2，6－二甲基苯氧基）－2－（3，4－二甲氧基苯乙胺基）丙烷盐酸盐（DDPH）对自发性高血压大鼠（SHR）血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。结果发现：DDPH在降低SHR血压 的同时，能减少VSMC的线粒体、粗面内质网及3H－TdR参入量（P＜0．01），并能逆转c－fos、c－myc、c－sis 原癌基因mRNA表达增强（P＜0．05或＜0．01）以及P53抑癌基因mRNA表达减弱（P＜0．05）。表明： DDPH能抑制SHR的VSMC增殖，与癌基因调控的分子生物学机制有关。