OA患者关节液uPA和MMP-3,9,13,14的表达水平与关节功能的相关性研究

目的检测OA患者关节液中uPA和MMP-3,9,13,14的含量,探讨其与OA关节功能、疼痛评分之间的相关性。方法收集2007年8月~2010年12月在我院住院行关节镜诊治的膝OA患者关节液标本228份,应用ELISA法检测标本中uPA和MMP-3,9,13,14水平,采用spearman相关分析探讨uPA、MMP-3、MMP-9、MMP-13、MMP-14之间的相关关系,以及它们与关节功能评分(LKSS)、疼痛评分(VAS)之间的相关性。结果膝OA患者关节液中各个降解酶的表达水平分别为uPA(289.16±185.35 ng/mL)、MMP-3(1041.65±657.51 ng/mL)、MMP-9(41.37±28.82 ng/mL)、MMP-13(176.69±90.17 ng/mL)、MMP-14(2.73±1.31 ng/mL);患者住院时Lysholm评分为(50.56±20.28分),VAS评分为(6.51±1.43分)。spearman相关分析显示uPA与MMP-3、uPA与MMP-13、MMP-3与MMP-13表达水平均呈正相关(r=0.695,0.719,0.713,P0.01),uPA、MMP-9、MMP-14表达水平无相关关系(P0.05)。uPA、MMP-3和MMP-13均与关节功能评分呈现正相关关系(r=0.574,0.616,0.691,P0.01),MMP-9和MMP-14与关节功能评分之间无相关关系,uPA、MMP-3,9,13,14与VAS评分均呈现正相关关系(r=0.361,0.417,0.136,0.514,0.156,P0.05)。结论在诸多基质降解酶系中,uPA、MMP-3和MMP-13的表达与膝OA临床症状较为密切,尤其是uPA和MMP-13的作用更加显著,研究uPA和MMP-13在OA病理变化中的分子机制,可望为OA的诊治提供新的思路。     

糖尿病肾病患者外周血单个核细胞中基质金属蛋白酶的表达

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌依赖蛋白酶,它主要参与细胞外基质(ECM)的降解、转运、组织重塑[1].MMP-9是MMPs家族中最大的成员,主要降解Ⅳ型胶原,在一定的病理条件下,对细胞的迁移、侵袭、活化及动脉硬化的形成、血管重塑等均起重要作用[2].我们通过对糖尿病,肾病患者外周血单个核细胞(PBMC)MMP-9 Mrna表达的研究.探讨MMP-9在糖尿病肾病发生、发展过程中的可能作用.     

miR-92a-3p靶向EZH2对IL-1β诱导软骨细胞合成基质降解酶的影响

目的研究miR-92a-3p靶向zeste基因增强子同源物2(EZH2)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞合成基质降解酶的影响。方法分离培养人软骨细胞,分成Normal、IL-1β(IL-1β处理)、miR-NC+IL-1β(mimics control转染后IL-1β处理)、miR-92a-3p+IL-1β(miR-92a-3p mimics转染后IL-1β处理)组,RT-PCR方法测定miR-92a-3p表达变化,Western blot检测MMP-13、MMP-1、COLⅡ蛋白表达。靶基因预测软件发现EZH2可能为miR-92a-3p的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。将p CDNA3.1-EZH2和miR-92a-3p mimics共同转染到软骨细胞中,检测MMP-13、MMP-1、COLⅡ蛋白表达情况。结果与Normal比较,IL-1β组细胞中miR-92a-3p表达减少,MMP-13、MMP-1表达增多,COLⅡ表达减少(P0.05)。与miR-NC+IL-1β比较,miR-92a-3p+IL-1β组细胞中miR-92a-3p表达增多,MMP-13、MMP-1表达减少,COLⅡ表达增多(P0.05)。miR-92a-3p靶向负调控EZH2表达。p CDNA3.1-EZH2可以逆转miR-92a-3p mimics对IL-1β条件下软骨细胞中MMP-13、MMP-1、COLⅡ蛋白表达影响。结论 miR-92a-3p靶向下调EZH2抑制IL-1β诱导的软骨细胞合成基质降解酶。     

MMP-3在乳腺癌演变中的作用

基质金属蛋白酶(MMPs)是基质降解代谢的主要酶类(MMP-3)在乳腺癌的发生、发展及侵袭转移过程中发挥着一定作用。笔者就MMP-3的生物活性及其与乳腺癌的发生、侵袭和转移中的作用作一综述。     

碱性成纤维细胞生长因子缓释微球治疗兔膝骨关节炎

骨关节炎(OA)的主要病理改变为关节软骨的损伤退变.碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是最有效的软骨细胞分裂素,bFGF缓释微球能维持其关节腔内的有效浓度.目前研究表明基质金属蛋白酶(MMP)-13、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1为软骨细胞外基质合成和降解的主要调节因子.本研究旨在观察bFGF缓释微球治疗兔膝OA对MMP-13和TIMP-1 mRNA表达的影响,探讨bFGF治疗OA的作用机制.     

内皮素1对人肾小球基质金属蛋白酶3及其组织抑制剂1表达的影响

内皮素1(ET-1)是一种强烈的缩血管活性肽，能够促进肾小球系膜细胞增殖及多种细胞外基质(ECM)组分的合成，但ET-1对ECM降解代谢的影响还不甚清楚。基质金属蛋白酶3(MMP-3)是一种基质溶解酶，能够降解多种ECM组分，活性受其组织抑制物1(TIMP-1)所抑制。本实验通过研究ET-1与MMP-3／TIMP-1的关系探讨ET-1对肾小球ECM降解代谢的影响。     

基质金属蛋白酶-2与胃癌的侵袭转移

细胞外基质和基底膜重塑是癌细胞侵袭转移过程中的关键环节,需借助于蛋白降解酶的表达和激活。基质蛋白酶主要有以下数种：丝氨酸蚩白酶类,包括血浆酶原激活剂;半胱氨酸蛋白酶类,包括组织蛋白酶D在内的溶酶体酶;金属蛋白酶类(metalloproteioases)。金属蛋白酶类在肿瘤侵袭过程中的作用近年来倍受关注,大量证据表明基质金属蛋白酶,特别是基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2．MMP-2)在肿瘤细胞介导的细胞外基质降解中起关键作用,临床研究表明,MMP-2活性和表达的增加与人类多种恶性肿瘤侵袭转移潜能及预后密切相关。     

基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-13在风湿性心脏病二尖瓣组织中表达的意义

目的探讨基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-13在风湿性心脏病（RHD）二尖瓣组织中的表达和作用。方法实验组为成人RHD患者16例,对照组为无心脏病变的成人意外死亡者7例。经HE染色及电镜观察两组组织学及超微结构变化,采用免疫组织化学染色（SABC法）测定两组二尖瓣组织中MMP-2、MMP-13的表达情况。结果实验组为风湿性病理改变,对照组结构基本正常。两组比较MMP-2、MMP-13的积分光密度（IOD）Z值分别为-2.633,-2.936,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论MMP-2、MMP-13的表达上调可能参与二尖瓣细胞外基质的重构,是其风湿性改变的重要分子机制之一。     

MMP-9、TIMP-1在肾纤维化中的作用

肾脏纤维化，是各种原因所致慢性肾脏疾病进展到终末期肾功能衰竭的共同通路，而肾纤维化的基本特征是细胞外基质（ECM）在肾内过度沉积。细胞外基质的合成与降解受多种因素的影响，基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1的平衡是降解过程中主要调节因素。目前MMP-9／TIMP-1在肾纤维中的作用日益受到重视。本文就MMP-9、TIMP-1与肾脏疾病的关系作一综述。     

一氧化氮增加人软骨肉瘤细胞表达基质金属蛋白酶-13的机制研究

目的研究一氧化氮(NO)是否通过MAPK和NF-κB通路增加基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达,探讨骨关节炎(OA)发病机制中NO的作用。方法购买并传代人软骨肉瘤细胞(SW1353),用不同浓度的NO供体MAHMA-NONOate刺激后检测MMP-13以及MAPK和NF-κB通路中的蛋白激酶的表达水平。用不同浓度的MAPK和NF-κB通路中的蛋白激酶的抑制剂预先处理细胞后,再用MAHMA-NONOate刺激细胞,再次检测MMP-13以及MAPK和NF-κB通路中的蛋白激酶的表达水平。结果 MAHMA-NONOate增加了细胞MMP-13的表达水平,同时也增加了MAPK和NF-κB通路中的蛋白激酶的活性水平,MAPK家族中的JNK的抑制剂SP600125可以抑制MMP-13的表达水平,NF-κB的抑制剂SN5O也可以抑制MMP-13的表达水平。结论 NO可以通过MAPK家族中的JNK和NF-κB通路增加MMP-13的表达。     

黄芪对肾间质纤维化模型大鼠肾组织MMP-9／TIMP-1表达的影响

目的探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）在肾间质纤维化中的表达及黄芪抗纤维化的分子作用机制。方法采用单侧输尿管结扎（UUO组）造模。将24只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、模型组（UUO组）、厄贝沙坦治疗组（Irbesartan组）和黄芪治疗组（AM组）4组,每组6只。造模14d后抽血检测肾功能,取结扎侧肾组织观察肾间质病变,免疫组织化学染色法检测肾组织MMP-9和TIMP-1表达。结果①AM组血肌酐和尿素氮水平较UUO组低（P〈0．05）,肾纤维化程度较UUO组有明显改善（P〈0．01）。②肾组织TIMP-1表达,UUO组较Sham组显著升高（P〈0．01）,AM组较UUO组明显降低（P〈0．01）;肾组织MMP-9表达,UUO组与Sham组差异无统计学意义（P〉0．05）,AM组较UUO组显著升高（P〈0．01）。结论黄芪可改善UUO大鼠肾功能,并可通过抑制TIMP-1表达,调节MMP-9／TIMP-1平衡来发挥其抗纤维化的作用。     

阿仑膦酸钠对长期应用糖皮质激素大鼠股骨头骨组织MMP/TIMP系统的影响

目的观察阿仑膦酸钠对长期应用皮质激素大鼠骨组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9及其特异性抑制因子基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）和TIMP-2mRNA表达的影响,探讨阿仑膦酸钠预防激素性股骨头坏死的效果及其作用机制。方法健康SD大鼠30只,雌雄各半,随机分为激素组、阿仑膦酸钠组和空白对照组,每组10只。激素组和阿仑膦酸钠组肌内注射醋酸泼尼松龙12.5mg/kg,每周2次,阿仑膦酸钠组同时给予阿仑膦酸钠5mg/kg灌胃,每周1次;对照组只给予相同体积生理盐水肌注。4周后取左侧股骨头骨组织石蜡包埋,HE染色,鉴定骨质疏松和股骨头坏死情况;取右侧股骨头骨组织提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的mRNA表达水平。结果 MMP-2在激素组、阿仑膦酸钠组、对照组中的表达分别为0.15±0.04、0.13±0.07、0.09±0.03,MMP-9在三组中的表达分别为0.13±0.03,0.09±0.02和0.08±0.02;TIMP-1在三组中的表达分别为0.07±0.02,0.13±0.4和0.18±0.04;TIMP-2在三组中的表达分别为0.45±0.15,0.63±0.10和0.69±0.19。激素组与对照组比较,MMP-2、MMP-9mRNA表达增高,TIMP-1、TIMP-2mRNA表达降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。阿仑膦酸钠组与对照组比较,仅MMP-2显著性差异。阿仑膦酸钠组与激素组比较,MMP-2、MMP-9mRNA表达降低,TIMP-1、TIMP-2mRNA表达增加,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论醋酸泼尼松龙上调大鼠骨组织中MMP-2、MMP-9mRNA的表达,下调TIMP-1、TIMP-2水平,使MMPs/TIMPs比值升高。阿仑膦酸钠可以拮抗皮质激素对MMPs/TIMPs系统的调控。     

结缔组织生长因子通过ERK1/2和PI3K信号通路促进大鼠肝星状细胞迁移和基质金属蛋白酶2表达

目的：研究结缔组织生长因子（CTGF）对大鼠肝星状细胞（HSC）迁移及基质金属蛋白酶2（MMP-2）表达及活化的影响。方法分别应用RT-PCR和Western blotting法检测MMP-2表达,明胶酶谱法检测MMP-2的活性;运用Western blotting法检测ERK1/2和Akt的磷酸化水平。运用Transwell小室检测肝星状细胞迁移能力。结果 CTGF呈剂量依赖性促进大鼠HSC中MMP-2 mRNA和蛋白表达;同时CTGF能够促进HSC迁移,MMP-2特异性抑制剂能够抑制CTGF的促迁移作用。ERK1/2和PI3K抑制剂能够显著抑制CTGF诱导的MMP-2表达以及CTGF促进HSC的迁移作用。结论 MMP-2表达和活性的增强在CTGF促进HSC迁移过程中发挥着重要作用,ERK1/2和PI3K信号通路在CTGF促进MMP-2表达发挥关键作用。     

The inhibition of subchondral bone resorption in the early phase of experimental dog osteoarthritis by licofelone is associated with a reduction in the synthesis of MMP-13 and cathepsin K

OBJECTIVE: To evaluate the morphological changes that take place in the subchondral bone and calcified cartilage zone in the experimental anterior cruciate ligament (ACL) dog model of osteoarthritis (OA) and analyze concomitant changes in the level of MMP-13 and cathepsin K, as well as examine the therapeutic effects of licofelone, a lipoxygenase (LO)/cyclooxygenase (COX) inhibitor, on these morphological and biochemical changes. METHODS: Experimental group 1 underwent sectioning of the ACL of the right knee with no active treatment (placebo group). Experimental groups 2 and 3 underwent sectioning of the ACL of the right knee and were administered therapeutic concentrations of licofelone (2.5 or 5.0 mg/kg/day p.o., respectively) for 8 weeks, beginning the day following surgery. Group 4 consisted of untreated dogs used as normal control. Specimens of subchondral bone including the calcified cartilage were selected from lesional and non-lesional areas of OA tibial plateaus. Specimens were processed for static morphometric analysis and immunohistochemical analysis for MMP-13 and cathepsin K. RESULTS: As indicated by a reduction in bone surface and trabecular thickness, a significant loss of subchondral bone occurred in OA dogs. These changes were associated with an increased level of MMP-13 synthesis by bone cells and an increase in the osteoclast population that stained strongly positive for cathepsin K and MMP-13. Changes were much more pronounced in the specimens taken from the lesional areas. Treatment with licofelone decreased, in a dose-dependent manner, the OA bone morphological changes at the same time it reduced the level of MMP-13 in bone cells and the number of cathepsin K and MMP-13 positive osteoclasts. CONCLUSIONS: Increased bone loss and bone resorption is associated with the development of OA cartilage lesions. Licofelone treatment was found to prevent the morphological and biochemical changes seen in early experimental OA effectively. These findings may help explain the mechanisms by which this drug could exert its possible effect on the development of OA.     

河蚌提取物葡聚糖对软骨细胞Wnt通路的调控作用研究

目的 ：探讨河蚌肉提取物葡聚糖HBP-A（anodonta glucan HBP-A）对体外软骨细胞Wnt通路的调控作用。方法：体外培养大鼠软骨细胞,添加IL-1β（10 ng/ml）诱导分化,分为空白组,IL-1β组,IL-1β＋IWP-2（5μM,Wnt通路抑制剂）组,IL-1β＋HBP-A（0.3 mg/ml）组,IL-1β＋IWP-2＋HBP-A共5组培养,提取各组细胞RNA和蛋白,采用Rt-PCR检测各组细胞Wnt-3a、β-catenin（24、48、72 h）及MMP-13（72 h）的基因表达;采用Western-blot检测β-catenin、MMP-13、Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白的表达水平（48 h）。结果：细胞经IL-1β诱导分化,Wnt-3a基因表达升高,β-catenin以及MMP-13基因和蛋白表达升高,Sox-9和Coll-Ⅱ蛋白表达下调。添加HBP-A干预可以抑制IL-1β诱导下软骨细胞Wnt-3a基因的高表达、β-catenin以及MMP-13基因和蛋白的高表达,上调Sox-9和Ⅱ型胶原蛋白的表达。IWP-2和HBP-A合用时,Wnt-3a、β-catenin基因以及β-catenin蛋白表达最低,Sox-9蛋白表达最高。结论：HBP-A可通过降低Wnt/β-catenin信号通路表达,延缓软骨细胞分化,并且可与Wnt抑制剂协同调节Wnt-3a、β-catenin和Sox-9因子的表达。     

Synovectomy reduces stromal-cell-derived factor-1 (SDF-1) which is involved in the destruction of cartilage in osteoarthritis and rheumatoid arthritis

We have compared the concentrations of stromal-cell-derived factor-1 (SDF-1), matrix metalloproteinase-1 (MMP-1), MMP-9 and MMP-13 in serum before and after synovectomy or total knee replacement (TKR). We confirmed the presence of SDF-1 and its receptor CXCR4 in the synovium and articular cartilage by immunohistochemistry. We established chondrocytes by using mutant CXCR4 to block the release of MMPs. The level of SDF-1 was decreased 5.1- and 6.7-fold in the serum of patients with OA and RA respectively, after synovectomy compared with that before surgery. MMP-9 and MMP-13 were decreased in patients with OA and RA after synovectomy. We detected SDF-1 in the synovium and the bone marrow but not in cartilage. CXCR4 was detected in articular cartilage. SDF-1 increased the release of MMP-9 and MMP-13 from chondrocytes in a dose-dependent manner. The mutant CXCR4 blocked the release of MMP-9 and MMP-13 from chondrocytes by retrovirus vector. Synovectomy is effective in patients with OA or RA because SDF-1, which can regulate the release of MMP-9 and MMP-13 from articular chondrocytes for breakdown of cartilage, is removed by the operation.     

慢性肾衰竭患者血清MMP-9和TIMP-1表达及意义

目的检测慢性肾衰竭（CRF）患者血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达状况，拟在探讨其与肾脏纤维化的关系。方法采用ELISA法测定60例CRF患者（氮质血症期15例，肾衰竭期24例，尿毒症终末期21例）和20例正常对照组血清MMP-9、TIMP-1水平，同时收集患者临床资料，分析血清MMP-9、TIMP-1水平和MMP-9／TIMP-1比值与肾功能损害等临床指标之间的相关性。结果CRF患者各期血清MMP-9、TIMP-1水平明显升高，MMP-9／TIMP-1比值显著降低，随着肾小球滤过率（GFR）下降，MMP-9、TIMP-1呈降低趋势，而MMP-9／TIMP-1比值却逐渐上升。血清TIMP-1水平和MMP-9／TIMP-1比值与血肌酐、GFR及血红蛋白呈高度相关性。结论血清MMP-9、TIMP-1参与了CRF的进展，血清TIMP-1水平或MMP-9／TIMP-1比值能较好地反映肾脏纤维化的程度。