天麻乙酸乙酯提取物对PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的: 探讨天麻乙酸乙酯提取物对氧化损伤神经细胞的保护作用,并初步探讨其保护机制。 方法: 以过氧化氢（50~100 μmol·L^-1）预孵PC12细胞2 h造成的细胞氧化应激损伤模型,通过观察细胞形态,测定细胞存活率（MTT法）、乳酸脱氢酶（LDH）泄漏率、细胞内活性氧（ROS）水平和总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性探讨了天麻乙酸乙酯提取物对PC12细胞氧化损伤的保护作用。 结果: 天麻乙酸乙酯提取物（20 mg·L^-1）能明显改善H₂O₂氧化损伤PC12模型细胞的形态,提高细胞存活率14.7%（P<0.01）;天麻乙酸乙酯提取物（20,40,80 mg·L^-1）降低模型细胞LDH泄漏率分别为22.0%,29.3%,20.2%（P<0.01）,明显提高细胞内T-SOD的活性（P<0.01）;天麻乙酸乙酯提取物（80 mg·L^-1）还降低细胞内ROS水平（P<0.01）。 结论: 天麻乙酸乙酯提取物在体外具有抗氧化损伤的作用。     

黄芪多糖抑制肺腺癌A549/DDP细胞移植瘤裸鼠EMT改善顺铂耐药的机制

目的 探讨黄芪多糖（APS）抑制转化生长因子-β₁（TGF-β₁）诱导的肺腺癌耐顺铂细胞株A549/顺铂细胞移植瘤裸鼠上皮-间质转化（EMT）进程和改善顺铂耐药的分子机制。方法 BALB/c裸鼠随机分为空载组、模型组、顺铂组、联合组（顺铂与黄芪多糖联合应用）。将TGF-β₁基因过表达慢病毒载体及阴性对照组感染A549/顺铂细胞，感染成功的细胞进行裸鼠皮下接种。除TGF-β₁组A549/顺铂细胞接种至空载组外，其他组均接种TGF-β₁基因稳定过表达的A549/顺铂细胞。细胞接种8 d后，开始进行药物干预。联合组灌胃APS（0.3 g·kg^-1·d^-1），腹腔注射顺铂（0.003 5g·kg^-1）；顺铂组腹腔注射顺铂（0.003 5 g·kg^-1）。细胞接种32 d后，处死裸鼠，取肿瘤组织、肺。称量瘤质量，计算抑瘤率；显微镜下计数整张玻片肺肿瘤转移结节数；免疫组化、蛋白免疫印迹法（Western blot）、实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤EMT标志物α-连环蛋白（α-catenin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）和肿瘤耐药标志物人肺耐药蛋白（LRP）、多药耐药相关蛋白（MRP）、P-糖蛋白（P-gp）蛋白和mRNA表达情况。结果 与空载组比较，模型组瘤质量增加，肺肿瘤转移结节增多（P<0.05），α-catenin蛋白和mRNA表达降低（P<0.05），N-cadherin、LRP、MRP、P-gp蛋白和mRNA表达升高（P<0.05）。与模型组、顺铂组比较，联合组瘤质量减轻，肺肿瘤转移结节减少（P<0.05）；α-catenin蛋白和mRNA表达升高（P<0.05），N-cadherin、LRP、MRP、P-gp蛋白和mRNA表达降低（P<0.05）。结论 黄芪多糖可抑制肺腺癌移植瘤生长和转移，改善顺铂耐药，这一作用可能与其抑制肿瘤细胞EMT进程相关。     

扶正抗癌汤免疫调节及抑制大鼠卵巢癌移植瘤生长的作用

目的 探讨扶正抗癌汤（FZKAD）的免疫调节及抑制大鼠卵巢癌移植瘤生长的作用。方法 昆明种小鼠随机分为正常组，香菇多糖（0.05 g·kg^-1）组及扶正抗癌汤高、中、低剂量（27.3，13.65，6.825 g·kg^-1）组，每组10只；测定血清半数溶血值（HC₅₀），抗体生成细胞水平及单核巨噬细胞吞噬功能等指标。Fischer 344大鼠右腋窝皮下接种卵巢癌NUTU-19细胞悬液，建立移植瘤模型，并随机分为模型组，顺铂组（0.002 g·kg^-1）及扶正抗癌汤高、中、低剂量（18.9，9.45，4.725 g·kg^-1）组，每组10只；另随机选择10只健康大鼠作为正常组。给药14 d后检测瘤质量，抑瘤率，T淋巴细胞亚群，血清细胞因子表达及肿瘤组织X盒结合蛋白1（XBP1），增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）表达。结果 与正常组比较，扶正抗癌汤高、中、低剂量组小鼠HC₅₀，抗体生成细胞水平，吞噬指数和吞噬活性均明显增加（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，扶正抗癌汤高、中、低剂量组大鼠瘤质量及XBP1蛋白表达显著降低（P<0.01），而抑瘤率，CD4⁺，CD8⁺ T细胞比例，CD4⁺/CD8⁺，肿瘤坏死因子-α（TNF-α），白细胞介素-2（IL-2），γ-干扰素（IFN-γ）表达及CHOP蛋白表达均明显增加（P<0.05，P<0.01）。结论 扶正抗癌汤具有提高正常小鼠免疫功能的作用，同时，也具有较好抑制大鼠卵巢癌移植瘤生长作用；免疫调节作用是扶正抗癌汤发挥抗卵巢癌作用的主要机制。     

加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对Lewis肺癌小鼠耐药相关基因及IL-7介导的Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 通过建立气阴两虚型Lewis肺癌小鼠模型,观察加味龟鹿二仙胶汤联合顺铂对Lewis肺癌小鼠免疫功能、耐药相关基因及白细胞介素-7（IL-7）介导的Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的影响,阐明加味龟鹿二仙胶汤的抗癌机制,为其临床应用提供依据。方法 建立气阴两虚型Lewis肺癌小鼠模型,分为正常组（不造模）,模型组（等体积生理盐水）,顺铂组（顺铂,2 mg·kg^-1）,中药组（加味龟鹿二仙胶汤,19.63 g·kg^-1·d^-1）,联合组（加味龟鹿二仙胶汤,19.63 g·kg^-1·d^-1+顺铂,2 mg·kg^-1）,每组10只,分别给药,干预21 d。观察小鼠一般情况、脏器指数,计算抑瘤率,流式细胞仪检测CD4⁺CD25⁺调节性T细胞（CD4⁺ CD25⁺Treg）,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中细胞因子水平IL-7,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中耐药相关基因P-糖蛋白（P-gp）,多药耐药相关蛋白1（MRP1）mRNA的表达水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。结果 与模型组比较,中药组及联合组摄食量增加,精神状态较好,反应灵敏,体质量增加。与顺铂组比较,联合组胸腺指数、脾脏指数显著升高（P<0.01）,联合组抑瘤率明显升高（P<0.01）。与顺铂组比较,中药组、联合组CD4⁺ CD25⁺Treg /CD4⁺明显降低（P<0.05,P<0.01）,中药组、联合组IL-7水平显著升高（P<0.01）。与顺铂组比较,中药组、联合组P-gp,MRP1 mRNA表达明显降低（P<0.05,P<0.01）,中药组、联合组Wnt1,β-catenin蛋白表达显著降低（P<0.01）。结论 加味龟鹿二仙胶汤与顺铂联用可明显抑制Lewis肺癌小鼠体内肿瘤的生长,其作用机制可能与其能够解除机体免疫抑制状态,促进机体产生IL-7,调节IL-7介导的Wnt/β-catenin信号通路,减少肺癌组织中耐药相关基因的表达有关。     

黄花倒水莲对辐射损伤小鼠防护作用的研究

目的: 初步探讨黄花倒水莲提取物对小鼠辐射损伤的防护作用。方法: 以辐射损伤小鼠作为研究对象,分别以黄花倒水莲提取物2,4,8 g·kg^-1·d^-1灌胃,阴性对照组、辐射模型组给予等量生理盐水。灌胃5 d后,除阴性对照组外各组小鼠接受6 Gy的⁶⁰Co γ射线一次性全身均匀照射,然后再继续灌胃10 d,最后1次灌胃24 h后,检测各组小鼠外周血中红细胞数(RBC)、白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)、淋巴细胞数(Lymph),计算脾指数和胸腺指数,用单细胞凝胶电泳技术检测小鼠脾细胞、骨髓细胞的DNA损伤。结果: 与阴性对照组比,辐射模型组、黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显减少(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的尾部DNA百分率(Tail DNA%)和尾矩(Tail Moment)明显增大(P<0.01或P<0.05);但与辐射模型组比, 黄花倒水莲各剂量组小鼠的RBC数、WBC数、PLT数、Lymph数、胸腺指数、脾指数明显增加(P<0.01或P<0.05),脾细胞、骨髓细胞的Tail DNA%和Tail Moment明显减少(P<0.01),存在剂量-反应关系。结论: 黄花倒水莲提取物对辐射所致小鼠造血系统和免疫器官损伤有一定的防护作用。     

黄芪-白花蛇舌草抑制肺癌A549细胞增殖机制

目的 从细胞水平观察黄芪-白花蛇舌草对人肺腺癌A549细胞增殖及白细胞介素-6（IL-6）,磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）,蛋白激酶B（Akt）,磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）,雷帕霉素靶蛋白（mTOR）,缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）,细胞周期蛋白D₁（Cyclin D₁）表达量的影响,并探讨其作用的分子机制。方法 设立空白组（完全培养基）,黄芪-白花蛇舌草低、中、高质量浓度组（20,40,60 mg·L^-1）,顺铂低、中、高质量浓度组（5,10,20 mg·L^-1）,采用噻唑蓝（MTT）比色法检测黄芪-白花蛇舌草（0,20,40,60 mg·L^-1）和顺铂（0,5,10,20 mg·L^-1）干预A549细胞24,48,72 h后的细胞活性,计算各组细胞增殖能力,筛选出各药物组最佳浓度;分别用完全培养基,黄芪-白花蛇舌草（40 mg·L^-1）,顺铂（10 mg·L^-1）,联合药物（40 mg·L^-1+10 mg·L^-1）干预肺腺癌A549细胞,设置为空白组、黄芪-白花蛇舌草组、顺铂组、联合组,计算各组在24,48,72 h后对A549细胞增殖抑制影响;采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测各组72 h后细胞培养上清中IL-6的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测HIF-1α,Cyclin D₁ mRNA水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组蛋白PI3K,Akt,p-Akt,mTOR,HIF-1α,Cyclin D₁表达的变化情况。结果 在作用细胞24 h后,各黄芪-白花蛇舌草组对细胞增殖未表现出明显抑制,作用48 h,与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草组对肿瘤细胞有明显增殖抑制作用（P<0.05）,表现出时间依赖性,在作用细胞72 h,黄芪-白花蛇舌草各浓度组未表现出明显差异,故选用40 mg·L^-1为中药最佳浓度组,用于后续实验。与空白组比较,经过不同浓度顺铂干预后,细胞增殖均受到不同程度抑制（P<0.05）,表现出明显的时间依赖性,基于细胞存活率考虑,选用顺铂10 mg·L^-1为最佳浓度。与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草与顺铂联合应用明显抑制肺腺癌A549细胞增殖,增殖抑制率表现出明显的时间依赖性（P<0.05）,且药物作用72 h,联合组与其他两组比较差异更加显著（P<0.01）;与空白组比较,各用药组细胞培养液IL-6分泌显著降低（P<0.01）,以联合组下降更加突出。与空白组比较,黄芪-白花蛇舌草、顺铂均能降低HIF-1α,Cyclin D₁ mRNA水平（P<0.05,P<0.01）,且联合用药降低幅度更加明显;各用药组PI3K,p-Akt,mTOR,HIF-1α,Cyclin D₁蛋白均明显降低（P<0.05,P<0.01）,且联合组各蛋白表达量明显低于顺铂组（P<0.01）。结论 黄芪-白花蛇舌草对肺癌A549细胞增殖具有抑制作用,潜在机制可能与其抑制IL-6/PI3K/Akt/mTOR-HIF-1α轴的表达与分泌有关。     

微毛诃子对家兔胸主动脉环的作用及其机制

目的： 研究微毛诃子甲醇提取物和乙醇提取物对家兔离体胸主动脉环的作用并探讨其可能的作用机制。 方法： 采用累积加药法,观察0.01~0.08 g·mL^-1微毛诃子对家兔离体胸主动脉环血管张力的影响;观察乙酰胆碱、酚妥拉明预处理对0.01 g·mL^-1微毛诃子缩血管作用的影响;采用Ca²⁺剥夺和复加法,观察0.01 g·mL^-1微毛诃子对细胞内钙释放和外钙内流动脉收缩作用的影响。 结果： 微毛诃子甲醇提取物浓度依赖性对内皮完整的家兔胸主动脉环收缩幅度低于内皮不完整的收缩幅度（P<0.05）,乙醇提取物对内皮完整的家兔胸主动脉环收缩幅度高于内皮不完整的收缩幅度（P<0.05）,且具有浓度依赖性;0.01 g·mL^-1的微毛诃子的甲醇提取物或乙醇提取物均可使乙酰胆碱（Ach,1×10^-5mol·L^-1）、酚妥拉明（10 mg·L^-1）预舒张的血管条收缩;维拉帕米（1×10^-7 mol·L^-1）预处理可消除0.01 g·mL^-1微毛诃子甲醇提取物的缩血管作用;在无Ca²⁺液中,0.01 g·mL^-1的微毛诃子甲醇提取物对去内皮主动脉环的收缩幅度显著低于有Ca²⁺液中的收缩幅度（P<0.05）。 结论： 微毛诃子甲醇提取物和乙醇提取物对家兔离体胸主动脉均有收缩作用;其缩血管作用可能与M受体及α受体有关;微毛诃子甲醇提取物的收缩作用具有内皮依赖性,可能与其促使血管平滑肌细胞外Ca²⁺内流进入细胞有关。     

肺岩宁方调控EMT逆转非小细胞肺癌顺铂耐药

目的 观察肺岩宁方（肺岩宁）对非小细胞肺癌顺铂耐药的影响，并探究其可能存在的机制。方法 细胞增殖与活性检测（CCK-8）法观察顺铂（0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mg?L^-1）对A549和A549/DDP（顺铂耐药）细胞细胞增殖能力的影响，肺岩宁（0、100、200、300、400、500、600 mg?L^-1）对A549/DDP细胞增殖能力影响；免疫荧光染色、蛋白免疫印迹法（WB）观察A549和A549/DDP组上皮间质转化（EMT）相关蛋白表达；将A549/DDP细胞分为空白组、肺岩宁组（200 mg?L^-1）、顺铂组（6.0 mg?L^-1）和联合用药组［肺岩宁（200 mg?L^-1）+顺铂（6.0 mg?L^-1）］，并进行相应处理，侵袭小室（transwell）实验比较各组侵袭能力；WB检测各组EMT相关蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和免疫荧光染色分别检测各组耐药因子mRNA和蛋白表达。结果 与A549组比较，A549/DDP组对顺铂耐药性显著增高（P<0.01）；E-钙黏蛋白（E-cadherin）蛋白表达降低，波形蛋白（Vimentin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、锌指转录因子（Snail）蛋白表达升高（P<0.05，P<0.01）。经肺岩宁、顺铂处理后，与空白组比较，肺岩宁可浓度依赖性抑制A549/DDP细胞增殖（P<0.01）；肺岩宁组、顺铂组、联合用药组侵袭能力降低（P<0.01）；与顺铂组比较，联合用药组侵袭能力显著降低（P<0.01）。与空白组比较，肺岩宁组E-cadherin蛋白表达升高，N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达降低（P<0.01），顺铂组E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低，Snail蛋白表达升高（P<0.05，P<0.01）；联合用药组E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达降低（P<0.01）；与顺铂组比较，联合用药组E-cadherin蛋白表达升高，N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达降低（P<0.01）。与空白组比较，肺岩宁组肺耐药相关蛋白（LRP）、多药耐药因子1（MDR1）蛋白和mRNA表达降低，拓扑异构酶Ⅱα （TOPO Ⅱα）蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）；顺铂组LRP、MDR1、TOPO Ⅱα蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）；联合用药组LRP蛋白和mRNA表达无明显改变，MDR1、TOPO Ⅱα蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）；与顺铂组比较，肺岩宁组、联合用药组LRP、MDR1蛋白和mRNA表达降低，TOPO Ⅱα蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）；与肺岩宁组比较，联合用药组LRP、MDR1、TOPO Ⅱα蛋白和mRNA表达升高（P<0.01）。结论 肺岩宁方能够逆转非小细胞肺癌顺铂耐药，其机制可能与调控EMT进程相关。     

参莲提取物对PM2.5染毒RAW264.7细胞损伤的保护作用

观察中药参莲(SL)提取物对PM_2.5染毒RAW264.7细胞损伤的保护作用。建立PM_2.5染毒致RAW264.7细胞损伤模型。以细胞生长、细胞损伤标记物、氧化应激相关因子及炎性细胞因子为观察指标,评价SL提取物对PM_2.5染毒RAW264.7细胞损伤的保护作用。结果表明,PM_2.5 50 mg·L^-1作用4,24 h时可致细胞颗粒沉积,抑制细胞生长,可显著增加细胞上清中LDH,NO释放量及细胞内活性氧(ROS)水平。在SL提取物50,25,10 mg·L^-1干预作用下,RAW264.7细胞颗粒沉积减轻,细胞上清中LDH,NO,IL-1β,MCP-1释放量显著下降,SOD活性显著有所增加。表明SL提取物对PM_2.5染毒RAW264.7细胞损伤有明显保护作用,其作用可能与对细胞的直接保护作用、减少氧化应激及炎症损伤有关。     

加味当归贝母苦参丸对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤及T细胞免疫调节作用

目的 探讨加味当归贝母苦参丸对H22肝癌荷瘤小鼠抑瘤及T细胞免疫调节作用,为加味当归贝母苦参丸联合免疫检查点抗体治疗肝癌提供依据。方法 建立H22肝癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂组、加味当归贝母苦参丸低、中、高剂量组（4、8、16 g·kg^-1·d^-1）,连续给药14 d,第15天处死小鼠。给药第0、4、8、12、15天测量肿瘤体积;称取瘤重、计算胸腺指数和脾指数;将脾脏淋巴细胞与H22肝癌细胞共培养,细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测肿瘤细胞增殖抑制率;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测脾脏和肿瘤组织中程序性细胞死亡蛋白-1（PD-1）、淋巴细胞活化基因-3（LAG-3） mRNA的表达情况;免疫组织化学法（IHC）检测脾脏和肿瘤组织中CD4⁺、CD8⁺ T细胞数量及PD-1、LAG-3蛋白的表达情况。结果 给药后第8天,各给药组肿瘤体积较模型组均有不同程度下降,第15天肿瘤体积和瘤重均较模型组显著降低（P<0.01）,其中顺铂组下降最为明显。与模型组、顺铂组比较,加味当归贝母苦参丸中、高剂量组胸腺指数显著升高（P<0.01）;与模型组比较,各用药组脾脏指数均明显升高（P<0.05,P<0.01）,其中顺铂组升高最为显著;与模型组、顺铂组比较,加味当归贝母苦参丸各组脾脏、肿瘤组织中CD4⁺、CD8⁺ T细胞数量和肿瘤细胞杀伤率均显著增高（P<0.01）,LAG-3 mRNA和蛋白表达均明显降低（P<0.05,P<0.01）;加味当归贝母苦参丸高剂量组肿瘤组织中PD-1 mRNA表达较模型组、顺铂组显著降低（P<0.01）。结论 加味当归贝母苦参丸可能通过下调LAG-3表达,促进H22肝癌荷瘤小鼠CD4⁺、CD8⁺ T细胞的增殖并向肿瘤微环境浸润,从而改善T细胞免疫活性、抑制肿瘤生长,为加味当归贝母苦参丸与免疫检查点抗体联用治疗肝癌提供实验依据。     

树舌灵芝粗提物体外抗肿瘤作用的研究

目的探讨树舌灵芝各溶剂提取物的抗癌作用。方法采用系统溶剂法从树舌灵芝得到一系列提取物,运用MTT法研究了各提取物对体外培养的人乳癌MCF-7细胞增殖的影响。结果氯仿提取物对肿瘤细胞的增殖有明显的抑制作用,其余各层样品抑制作用不明显。结论树舌灵芝抗肿瘤成分可能在氯仿部分。     

Evaluation of the hepatic and renal-protective effects of Ganoderma lucidum in mice.

The antioxidative effect of hot water extract of the mushroom Ganoderma lucidum on ethanol-induced free radical generation had been studied. In order to further investigate the hepatic and renal protective mechanism of Ganoderma lucidum, rates of lipid peroxidation were determined. The hot water extract of Ganoderma lucidum dose-dependently exhibited antioxidative effect on mouse liver and kidney lipid peroxidation; our results indicated that hepatic and renal homogenates have a higher malonic dialdehyde level in an ethanol administered group than in the Ganoderma lucidum treated group. It was concluded that the hepatic and renal protective mechanism of Ganoderma lucidum, might be due at least in part to its prominent superoxide scavenging effect. Ganoderma extract could protect the liver and kidney from superoxide induced hepatic and renal damages.     

Anti-androgenic activities of Ganoderma lucidum

The inhibitory effects of methanol extracts of 19 edible and medicinal mushrooms on 5alpha-reductase activity were examined. The extract of Ganoderma lucidum Fr. Krast (Ganodermataceae) showed the strongest 5alpha-reductase inhibitory activity. The treatment of the fruit body of Ganoderma lucidum or the extract prepared from it significantly inhibited the testosterone-induced growth of the ventral prostate in castrated rats. These results showed that Ganoderma lucidum might be a useful ingredient for the treatment of benign prostatic hyperplasia (BPH).     

灵芝孢子中抗肿瘤成分的提取与分离

目的 :检测不同破壁率的灵芝孢子的醇提效果并用色谱技术对醇提物中的抗肿瘤成分进行分析。方法 :乙醇为溶剂对灵芝孢子粉进行振荡浸提 ,醇提物依次用硅胶柱和高效液相色谱分析 ,以各部分对Hela细胞的毒性作为其抗肿瘤活性的指标。结果 :未破壁孢子 ,60%～80%及 99%破壁率孢子的醇提率分别为5% ,25% ,33%。99%破壁率灵芝孢子的醇提物经硅胶柱分离 ,氯仿洗脱部分对Hela细胞无毒害作用 ;甲醇洗脱部分的抗肿瘤活性约为乙酸乙酯洗脱部分的 34倍 ;甲醇洗脱部分经高效液相色谱分析 ,得到 2种活性较强且组成较为简单的混合物(Ⅱ1和Ⅱ3 )。结论 :灵芝孢子破壁后醇提物含量远高于未破壁孢子 ;甲醇 水洗脱系统可用于灵芝孢子醇提物中抗肿瘤活性成分的RP HPLC分析。     

海南龙血树抗肿瘤新用途研究

目的:筛选海南龙血树的抗肿瘤活性部位.方法:分别用溶剂萃取法和大孔吸附树脂柱层析法对海南龙血树的95%乙醇提取物进行分段处理,利用MTT法测定各提取部位体外抗肿瘤活性.结果:氯仿提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对体外肿瘤细胞表现出较强的抑制活性,甲醇洗脱物显示了弱活性,水提取、水洗脱物和50%甲醇-水洗脱物则没有活性.在各提取物中氯仿提取物活性最强.结论:氯仿提取部位是海南龙血树主要的体外抗肿瘤活性部位.     

瑞香狼毒系统溶剂法分离提取部位的体外抗肿瘤活性

目的:分离筛选瑞香狼毒中抗肿瘤活性部位.方法:用系统溶剂法对瑞香狼毒95%乙醇提取物进行分离,MTT比色法对分离得到的部位进行体外抗肿瘤活性的测定.结果:石油醚提取物和氯仿提取物对体外培养肿瘤细胞表现出较强的抑制作用,在测定浓度范围内呈现出良好剂量依赖性抑制作用,而正丁醇和甲醇提取部位在测定浓度范围内则显示出很弱的抑制作用;在各提取部位中石油醚提取物的体外抗肿瘤作用最强.结论:石油醚提取部位是瑞香狼毒中的体外抗肿瘤活性部位.     

Comparative studies on the immunomodulatory and antitumor activities of the different parts of fruiting body of Ganoderma lucidum and Ganoderma spores

Ganoderma lucidum (GL, Lingzhi) has been suggested as a candidate for immunomodulation and cancer treatment. The present study aimed at comparing the different parts of the fruiting body (whole fruiting body, pileus and stipe) of GL as well as Ganoderma spores (sporoderm-broken and -unbroken), with regard to their antitumor and immunomodulatory activities in S-180 sarcoma-bearing mice. The hot water extracts of different parts of GL or the Ganoderma spores were orally administered to the sarcoma-bearing mice. The results showed that GL whole fruiting body, stipe and sporoderm-broken spore possessed stronger inhibitory activities on sarcoma growth when compared with the pileus extract. Higher immunomodulatory activities in terms of enhancing the proliferative responses and the cytokines (IFN-gamma, IL-4 and IL-6) production of spleen lymphocytes were also found in GL stipe and sporoderm-broken spore treatment groups. The sporoderm-broken spores had higher stimulatory effects on mitogen-activated spleen lymphocytes of healthy mice than those of sarcoma-bearing mice. In addition, the immunostimulatory activities of GL hot water extracts and Ganoderma spores were shown to be comparable; hence the latter did not show superiority in efficacy. This is the first comparative study on the immunomodulatory activities of Ganoderma spores and the fruiting body extracts.     

Ganoderma lucidum mycelia enhance innate immunity by activating NF-kappaB

Ganoderma lucidum is a popular medicinal mushroom in China and Japan for its immunomodulatory and antitumor effects. The goal of this research is to investigate the effect of dried mycelia of Ganoderma lucidum produced by submerged cultivation on the enhancement of innate immune response. We found that Ganoderma lucidum mycelia (0.2-1.6 mg/ml) stimulated TNF-alpha and IL-6 production after 8h treatment in human whole blood. IFN-gamma release from human whole blood was also enhanced after 3 day-culture with Ganoderma lucidum mycelia (0.2-1.0mg/ml). However, Ganoderma lucidum mycelia did not potentiate nitric oxide production in RAW264.7 cells. To better understand the possible immuno-enhancement mechanisms involved, we focused on nuclear factor (NF)-kappaB activation. Electrophoretic mobility shift assay revealed that the Ganoderma lucidum mycelia (1.6 mg/ml) activated kappaB DNA binding activity in RAW264.7 cells. These results provide supporting evidences for the immunomodulatory effect of Ganoderma lucidum mycelia.     

Antimicrobial activity of some Ganoderma species from Nigeria

The crude n-hexane:diethyl ether, chloroform:acetone and methanol extracts of four species of Ganoderma (Ganoderma colossum (Fr.) C. F. Baker, G. resinaceum Boud., G. lucidum (cf.) (Curtis) P. Karst. and G. boninense (cf.) Pat.), from Nigeria, were tested for antimicrobial activity. The three solvent extracts of all the species of Ganoderma were active against Pseudomonas syringae and Bacillus subtilis, whereas none of the extracts were active against Cladosporium herbarum. Preliminary thin layer chromatography chemical tests on these extracts of Ganoderma showed that they contained compounds that stained blue-violet and blue or green when sprayed with anisaldehyde-sulphuric acid or Dragendorff, respectively. The profile of compounds in the extracts showed some variation among the four species.     

指纹图谱和体外细胞活性跟踪相结合考察温度对灵芝中三萜类成分的影响

目的:探讨温度对灵芝中主要抗肿瘤活性三萜类成分含量的影响.方法:采用HPLC灵芝醇提取物中三萜类成分在不同温度处理后的指纹图谱的变化,并结合体外人肺癌SPC-A-1细胞株,通过MTT法评价不同温度影响下的灵芝提取物对肿瘤细胞增殖的抑制作用.结果:灵芝中三萜类成分显著受到温度的影响.在选定的20个特征峰中,第4,14,15,16号峰的峰面积变化经100℃加热处理后最为显著,与未加热处理的灵芝提取物的色谱峰相比,这4个峰的峰面积下降幅度分别高达42.601％,35.909％,49.359％,64.061％.体外细胞活性实验表明经不同温度处理下的灵芝提取物的抗肿瘤活性不同,灵芝提取物的IC50由1.44 g·L-1(醇提取物)升高到2.77 g·L-1(100℃下处理的样品).结论:温度可显著影响灵芝抗肿瘤活性三萜类成分的含量变化,高温易造成其活性成分的损失,进而引起灵芝抗肿瘤活性的降低.