高效液相色谱法测定三子养亲颗粒中木犀草素的含量

目的:用高效液相色谱法测定三子养亲颗粒中木犀草素的含量.方法:采用Shinmdzu ODS柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(55:45),流速1.0mL,min-1,检测波长350nm,柱温35℃,用外标法定量,测定三子养亲颗粒中木犀草素的含量.结果:木犀草素的线性范围10.7～1092μg,r=0.9994,回收率101.10%,RSD2.14%.结论:该方法简便,快速,线性关系良好,可用于三子养亲颗粒中木犀草素的含量测定.     

炮制对三子养亲汤中木犀草素溶出的HPLC分析

目的建立三子养亲汤中木犀草素的含量测定方法,并探讨其炮制意义。方法HPLC法:C18色谱柱;流动相:甲醇-0.2%磷酸(55:45);流速:1mL/min;检测波长:350nm。结果木犀草素线性范围为0.16μg～0.82μg,RSD为2.56%。结论方法可靠,稳定可行,三子养亲汤用炒品配方可促进木犀草素的溶出。     

三子养亲汤治疗乳腺囊性增生症58例

目的:观察三子养亲汤治疗乳腺囊性增生患者的临床疗效。方法:采用随机数字表法将116例乳腺囊性增生患者分为对照组和治疗组,每组均为58例。对照组口服乳核散结片治疗,治疗组给予三子养亲汤治疗。结果:治疗组临床总有效率为93.1%,与对照组的70.7%相比存在较大差异性(P<0.05)。2组患者在治疗过程中均未出现不良反应。实施三子养亲汤治疗患者的催乳激素(PRL)为(10.09±3.32)μg/L,显著性的低于对照组患者的(14.98±6.23)μg/L,且具有统计学意义(P<0.05)。结论:三子养亲汤治疗乳腺囊性增生具有显著的临床疗效,安全性较高。     

星点设计-效应面法优化三子养亲汤的水提取工艺

目的利用星点设计-效应面法优化三子养亲汤水煎剂最佳提取工艺。方法将三子养亲汤按1∶1∶1比例配伍,将溶剂倍数、提取时间及提取次数作用自变量,以水煎剂中芥子碱含量作为评价标准,拟合方程,并绘制三维效应面图,选取其最佳水提取工艺。结果三子养亲汤最佳水提取工艺为:纯水重量为三子总重量的10倍,煎煮提取2次,每次煎煮1.2h。结论星点-效应面法优化三子养亲汤水提取工艺结果可靠,宜于临床推广。     

三子养亲汤对哮喘小鼠EOT-1、EOT-3影响的实验研究

目的:观察三子养亲汤对哮喘模型小鼠嗜酸性粒细胞活化趋化因子-1(Eotaxin-1,EOT-1)、嗜酸性粒细胞活化趋化因子-3(Eotaxin-3,EOT-3)的影响,探索三子养亲汤作用的分子机制。方法:按随机数字表法将小鼠分为三子养亲汤高、中、低剂量组及孟鲁司特组,模型组和空白对照组建立哮喘小鼠模型,测定其肺组织中EOT-1、EOT-3蛋白与基因表达。结果:与模型组比较,孟鲁司特组、三子养亲汤高剂量组肺组织中EOT-1、EOT-3浓度明显降低,差异有统计学意义;三子养亲汤中剂量组肺组织中EOT-1、EOT-3浓度降低,差异有统计学意义。结论:三子养亲汤能改善哮喘小鼠症状,其机制可能与下调EOT-1和EOT-3的表达有关。     

三子养亲汤含药血清对支气管上皮细胞中CysLTs介导的炎症通路的影响

目的:探究三子养亲汤含药血清对支气管上皮细胞中半胱氨酰白三烯(cysteinyl leukotrienes,CysLTs)介导的炎症通路的影响。方法:采用含药血清药理学的实验方法,以1.25%,2.50%和5.00%的三子养亲汤含药血清和空白血清来干预白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和CysLTs共同诱导刺激的支气管上皮细胞,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测培养基上清液中嗜酸性粒细胞趋化因子-1(eotaxin-1,Eot-1)和Eot-3的浓度,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)法检测支气管上皮细胞中半胱氨酰白三烯受体1(cysteinyl leukotrienes receptor 1,CysLTR1)和CysLTR2表达水平,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测支气管上皮细胞中CysLTR1和CysLTR2 mRNA表达水平。结果:2.50%和5.00%三子养亲汤含药血清组的细胞培养基上清液中的Eot-1和Eot-3含量明显低于同血清含量的空白组(P0.05);1.25%,2.50%和5.00%三子养亲汤含药血清组细胞中CysLTR2蛋白表达水平和CysLTR1 mRNA表达水平与同血清含量的空白组没有显著性的差异;2.50%和5.00%三子养亲汤含药血清组细胞中CysLTR1蛋白表达水平和CysLTR1 mRNA表达水平明显低于同血清含量的空白组(P0.05)。结论:三子养亲汤含药血清通过下调CysLTR1表达以及Eot-1和Eot-3表达和分泌,阻断CysLTs介导的炎症通路来治疗支气管哮喘。     

三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠的作用机制研究

目的:探讨三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠Th1/Th2平衡失调的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分成6组,每组各10只,分别为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松0.75mg组、三子养亲汤1.5、3、6g/kg组。采用卵清白蛋白(OVA)与氢氧化铝致敏,并OVA雾化吸入激发制备大鼠支气管哮喘模型。各组大鼠经末次激发24h后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织标本。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠BALF中的IFN-γ、IL-2和IL-5的含量;免疫组化法检测肺组织中T-bet、GATA-3蛋白的表达。结果:三子养亲汤6 g/kg组和地塞米松组可显著降低哮喘大鼠BALF中IL-5含量;地塞米松组和三子养亲汤3 g/kg、6g/kg组显著升高IL-2含量;三子养亲汤1.5g/kg、3 g/kg、6 g/kg组和地塞米松组显著升高IFN-γ含量。与哮喘模型组比较,三子养亲汤1.5g/kg、3 g/kg、6 g/kg组和地塞米松组可显著降低哮喘大鼠BALF中GATA-3含量;三子养亲汤3 g/kg、6 g/kg组显著升高Tbet含量。结论:三子养亲汤能够发挥抗支气管哮喘的作用,其机制可能与调控Th1/Th2平衡失调有关。     

高效液相色谱法测定蒙成药三子散中川楝素含量

目的:用HPLC-UV法建立蒙成药三子散中川楝素含量测定方法。方法:参照《中国药典》2015年版川楝子中川楝素含量测定方法,采用HPLC-UV法建立三子散中川楝素含量测定方法,测定三子散中川楝素的含量。摸索色谱条件,并开展方法学考察。结果:色谱条件确定为:采用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂(C8柱);以乙腈-水(40∶60)为流动相;柱温为40℃;检测波长为210 nm。方法学考察表明该方法有较好的精密度、准确度、重复性,在本研究条件下,川楝素在0.2~4μg内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.3%,RSD=0.4%(n=6)。结论:本研究建立了HPLC-UV测定蒙成药三子散中川楝素含量的方法,在该色谱条件下,色谱峰分离与色谱表现呈现对温度敏感的结果。建立的方法灵敏、快速、准确,适用于三子散中川楝素的含量测定。     

三子养亲汤治疗支气管哮喘120例

目的:观察三子养亲汤治疗支气管哮喘的临床疗效。方法:120例支气管哮喘患者采用三子养亲汤加减治疗。结果:总有效率83.33%。结论:三子养亲汤治疗支气管哮喘疗效确切效果好。     

桑枝多糖的提取与含量测定

目的建立一种测定桑枝中多糖含量的方法。方法采用水提醇沉法对桑枝中的多糖进行提取,用Sevag法等进行纯化,蒽酮-浓硫酸法测定多糖的含量。结果回归方程:A=0.02494C 0.0571,r=0.9995,线性范围为0.08~0.4μg.L-1。桑枝多糖的含量为18.74%(RSD=2.1%),平均回收率为98.6%,RSD=1.4%。结论该法简便、快速、重现性好,为桑枝的质量控制提供了方法。     

松茸多糖的提取及含量测定

目的:建立松茸多糖的含量测定方法。方法:采用苯酚-硫酸法。结果:测定波长为490nm,线性范围在20.0～100.0μg.ml-1,r=0.9992;平均回收率为101.63%,RSD=2.29%。松茸多糖的含量为7.91%,RSD=3.42%。结论:该方法操作简便、快速、准确,重现性好,可用于松茸多糖含量的测定。     

三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠Th17/Treg比例失衡的影响

目的:探讨三子养亲汤对支气管哮喘模型大鼠Th17/Treg比例失衡的影响。方法:大鼠分为正常对照组、模型组、地塞米松0.075 mg/kg组、三子养亲汤1.5 g/kg、3 g/kg和6 g/kg剂量组,采用卵清白蛋白(OVA)致敏,并雾化吸入卵清白蛋白激发复制大鼠支气管哮喘模型,给予不同剂量三子养亲汤进行干预,各组大鼠经末次激发24 h后,取肺组织进行HE染色观察病理变化,酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠BALF中的IL-10、TGF-β和IL-17、IL-6的含量;采用免疫组化法检测肺组织中IL-10和IL-17蛋白的表达。结果:与模型组相比,三子养亲汤各组和地塞米松组明显减少大鼠BALF中IL-17含量、下调肺组织中IL-17蛋白表达,三子养亲汤3 g/kg、6 g/kg组和地塞米松组可降低哮喘大鼠BALF中IL-6含量,升高IL-10、TGF-β含量,上调肝组织IL-10蛋白的表达。结论:三子养亲汤能够抑制哮喘大鼠的气道炎症,其作用机制可能与调节Th17/Treg平衡失调有关。     

SPME-GC-MS法测定生、炒饮片三子养亲汤挥发性成分

目的:通过固相微萃取气质联用分析(SPME-GC-MS)探讨三子养亲汤方中分别以生、炒饮片组方后挥发性成分的差异。方法:通过顶空固相微萃取提取生、炒饮片组方的三子养亲汤挥发性成分和方中单味药生、炒饮片的挥发性成分,运用GC-MS技术,对挥发性成分进行分析,比较其差异。结果:从三子养亲汤生、炒饮片组方挥发性成分中分别鉴定出化合物29、46种。芥子、炒芥子、莱菔子、炒莱菔子、苏子、炒苏子挥发性成分中分别鉴定出化合物39、54、36、52、48、45种。三子养亲汤分别以生、制饮片组方的挥发性成分差异较大,尤其是异硫氰酸酯类成分变化明显,三子养亲汤分别以生、炒饮片组方的异硫氰酸烯丙酯含量为80.1%和10.6%,生、炒芥子异硫氰酸烯丙酯含量分别为88.9%和36.9%。莱菔子、紫苏子炮制前后的异硫氰酸酯类物质也存在同样的变化趋势。炒制饮片组方中的β-律草烯、2-丁基-2-辛烯醛、2,5-二甲基-3-乙基吡嗪、反-2-辛烯醛、2-庚烯醛等成分在单味药炒制品中未检测到,而炒芥子中的薄荷酮等成分在炒品饮片组方的三子养亲汤中也未检测到,推测三药合煎与分煎的挥发性成分存在差异。结论:三子养亲汤方中分别以生、炒饮片组方后挥发性成分的差异,在临床使用时,应以炒制饮片组方后合煎使用。     

三子养亲汤镇咳、祛痰、平喘作用的药理研究

分别用浓氨水喷雾法、毛细玻管法和氯化乙酰胆碱喷雾致喘法研究了三子养亲汤不同溶媒提取物的镇咳、祛痰和平喘作用。结果显示三子养亲汤醚提取物有明显的镇咳作用；三子养亲汤水提取物的祛痰作用显；三子养亲汤醇、醚提取物的平喘作用明显。     

三子养亲汤对哮喘小鼠气管平滑肌细胞IP3、DAG影响的实验研究

目的通过研究三子养亲汤对哮喘模型小鼠平滑肌细胞中三磷酸肌醇(Inositol triphosphate IP3)和二酰基甘油(Diacyl glycerol DAG)的影响研究,探研其作用机制。方法采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏及OVA雾化激发造成哮喘小鼠模型,并给予三子养亲汤治疗,用酶联免疫法(ELISA法)检测各组小鼠气道平滑肌细胞中三磷酸肌醇(Inositol triphosphate IP3)和二酰基甘油(Diacyl glycerol DAG)的含量。结果三子养亲汤可降低小鼠平滑肌细胞上清液中IP3的表达。结论抑制IP3介导的炎症通路是三子养亲汤改善哮喘症状的可能机制。     

三子养亲汤的镇咳、祛痰作用研究

目的:通过动物试验观察三子养亲汤的镇痰、祛痰作用.方法:以浓氨水喷雾法、酚红排泌法对三子养亲汤生、炒品配方的镇咳作用、祛痰作用进行了比较分析.结果:三子养亲汤炒品配方有一定的镇咳作用,其他各组间无显著性差异;祛痰试验炒品配方组显著优于生品配方组(P＜0.05).结论:三子养亲汤中的饮片炮制后入药,其药效明显优于生品直接入药,炮制品在复方中,能更好地显示出综合调节作用的优势.     

全蝎药材不同商品中总多糖含量测定

目的:建立全蝎种药材中总多糖含量测定方法,以评价其不同商品药材的质量。方法:采用乙醚脱脂,水提取后,苯酚-硫酸显色剂显色,分光光度法测定10批全蝎不同商品中总多糖含量。结果:10批药材样品中总多糖含量以葡萄糖计的回归方程为Y=0.0045X+0.0012(r=0.9998),线性范围在18.54⁹2.68μg,平均回收率为100.19%,RSD=1.23%。结论:采用苯酚-硫酸法,测定全蝎药材中总多糖含量的方法简便,方法学考察结果理想,可作为该药材质量控制的方法。     

二陈汤合三子养亲汤治疗慢阻肺急性加重期疗效观察

目的:探讨采用二陈汤合三子养亲汤治疗慢阻肺急性加重期的疗效。方法:以收治的慢阻肺急性加重期患者84例开展研究,患者分别纳入观察组、对照组,每组42例,均予西药治疗,观察组增加二陈汤合三子养亲汤治疗,观察两组疗效。结果:观察组总有效率为95.24%,对照组为80.95%,观察组明显优于对照组,P0.05。结论:采用二陈汤合三子养亲汤可提升慢阻肺急性加重期的治疗效果。     

中西药合用治疗哮喘疗效观察

目的:观察三子养亲汤合二陈汤联合西药治疗哮喘的临床疗效。方法:120例随机分为对照组和实验组各60例,两组均用三子养亲汤合二陈汤治疗,实验组加用西药治疗,疗程1周。结果:总有效率对照组86.7%、实验组98.3%,实验组疗效优于对照组(P0.05)。结论:三子养亲汤合二陈汤联合西药治疗哮喘疗效显著。     

黄芪中黄芪多糖含量的测定

目的:建立黄芪中黄芪多糖的含量测定方法。方法:采用比色法测定黄芪多糖的含量。结果:测定波长为489nm,葡萄糖在2.0～14.0μg·mL-1线性关系良好,平均加样回收率为99.84%,RSD=3.71%(n=6)。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于黄芪中黄芪多糖的含量测定。