CHROMager显色培养基分离沙门菌的初步应用和评估

目的初步评估CHROMagar显色培养基(CAS)检测肛拭中沙门菌的效果。方法以实验室保存沙门菌和非沙门菌作为测试菌共190株，测试CAS、武汉SS平板(WS)上细菌生长的敏感性、特异性；并应用CAS与WS对1717份餐饮业人员肛拭作沙门菌的现场分离效果比较。结果CAS对测试菌和现场检测的敏感性均为100％，明显优于WS的57．14％和31．58％；两者在肛拭样品中沙门菌检出率分别为1．11％(19／1717)和0．35％(6／1717)。结论CAS平板具有敏感性高、检出率高、易于掌握等特点，建议作为粪便常规分离或鉴别沙门菌的首选培养基。     

CHROMager(R)显色培养基分离沙门菌的初步应用和评估

目的初步评估CHROMagar@显色培养基(CAS)检测肛拭中沙门菌的效果.方法以实验室保存沙门菌和非沙门菌作为测试菌共190株,测试CAS、武汉SS平板(WS)上细菌生长的敏感性、特异性;并应用CAS与WS对1 717份餐饮业人员肛拭作沙门菌的现场分离效果比较.结果 CAS对测试菌和现场检测的敏感性均为100%,明显优于WS的57.14%和31.58%;两者在肛拭样品中沙门菌检出率分别为1.11%(19/1 717)和0.35%(6/1 717).结论 CAS平板具有敏感性高、检出率高、易于掌握等特点,建议作为粪便常规分离或鉴别沙门菌的首选培养基.     

沙门菌监测基于细菌学技术的关键点研究和控制

目的研究和控制沙门菌分离方法的技术关键点,评价监测效果。方法用库存菌株和粪便肛拭、食品增菌标本比较5种沙门菌选择性平板分别与3种选择性增菌液配伍检测沙门菌的敏感性;将亚硒酸煌绿增菌液(SBG)与木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂平板(XLD)和CHROMagarTM沙门菌显色琼脂平板(CAS)配伍作为方法1在上海市4个疾病预防控制中心(CDC)实验室用于沙门菌监测(GSS);8个临床医院实验室使用SBG-XLD组合的方法2和CDC实验室进行平行检测。结果 CAS和XLD菌株测试的敏感性为100.0%和85.7%,肛拭标本经SBG增菌后使用CAS和XLD分离的敏感性为94.4%和89.7%。2006-2009年GSS监测阳性率在2.6%～3.8%;阳性峰值在5%～7%。临床实验室检测敏感性达到CDC的78.7%,最高为88.9%。结论有效增菌是沙门菌分离技术的关键点,强化实验室人员培训和使用统一的分离材料是控制沙门菌监测实施的关键点。方法1适用所有沙门菌的检测;方法2适用非伤寒沙门菌的检测,模块化、可选择的分离组合能兼顾效率和成本。     

沙门菌检测方法的优化

目的建立有效增菌的优化检测方法强化腹泻患者的沙门菌型监测。方法评估CHROM agar沙门菌琼脂(CAS)、木糖赖氨酸胆酸盐琼脂(XLD)和与改良亚硒酸磺绿(MSBG)、罗伯特(RVS)2种增菌液配伍应用在流行季节检测腹泻患者质控盲样并与亚硒酸盐(SF)增菌液-沙门-志贺菌琼脂(SS)常规分离法比较。结果870份肛拭经MSBG、RVS增菌后用CAS、XLD分离菌株和敏感性分别为39株、100%和28株、71.79%,显著高于用CAS、XLD直接分离的9株和SF-SS分离的14株(P<0.005);总阳性分离率4.48%,高峰值为10月份的6.11%;阿伯丁、肠炎、鼠伤寒沙门菌是主要的致泻血清型。结论MSBG增菌液和双平板联用的优化方法显著增加常规平板分离的敏感性,筛选特异性好,技术操作简便,在以临床实验室为基础的症状监测中尤为适用。     

基于方法学评估与检测基线预测广西玉林市从业人员沙门菌带菌水平

目的基于沙门菌筛检流程的方法评价和检测基线,预测广西壮族自治区(广西)玉林市从业人员沙门菌的带菌水平。方法以沙门菌选择性增菌液(SBG)和3种选择性平板(CAS、XLD、DHL)构建沙门菌筛选和检定流程,通过测试菌株和408份从业者粪便样品实测获得统计参数,据此评估不同组合流程(SBG-CAS/XLD/DHL)筛检沙门菌的敏感性、特异性和阳性预测值;基于SBG-DHL分离沙门菌的敏感性校准和预测2014-2017年玉林市从业人员的带菌水平。结果CAS、XLD、DHL对测试菌株的敏感性和特异性分别为100.00%和96.67%、100.00%和83.33%、83.33%和50.00%;应用组合流程筛检408份从业人员粪便,共分离沙门菌22株,带菌率为5.39%;敏感性和阳性预测值分别为95.45%和89.23%(CAS)、86.36%和27.72%(XLD)、68.18%和16.15%(DHL)、100.00%和29.27%(CAS+XLD);CAS+XLD组合发现1例兼有硫化氢阴性和阳性的罗森沙门菌的无症状带菌者;校准和预测2014-2017年玉林市从业人员的平均年度带菌率为3.35%,以实测人数评估地区从业人员的带菌水平约为3350/10万。结论沙门菌检测敏感性和阳性预测值可作为检测质量和方法学的评价指标,大数据证实华南地区从业人员中沙门菌的高比例持留,公共卫生机构应加强沙门菌带菌者的防控,降低食源性病原菌的隐性扩散风险。     

沙门菌检测方法的优化

目的建立有效增菌的优化检测方法强化腹泻患者的沙门菌型监测。方法评估CHROM agar沙门菌琼脂（CAS）、木糖赖氨酸胆酸盐琼脂（XLD）和与改良亚硒酸磺绿（MSBG）、罗伯特（RVS）2种增菌液配伍应用在流行季节检测腹泻患者质控盲样并与亚硒酸盐（SF）增菌液-沙门-志贺菌琼脂（SS）常规分离法比较。结果870份肛拭经MSBG、RVS增菌后用CAS、XLD分离菌株和敏感性分别为39株、100%和28株、71.79%,显著高于用CAS、XLD直接分离的9株和SF-SS分离的14株（P〈0.005）;总阳性分离率4.48%,高峰值为10月份的6.11%;阿伯丁、肠炎、鼠伤寒沙门菌是主要的致泻血清型。结论MSBG增菌液和双平板联用的优化方法显著增加常规平板分离的敏感性,筛选特异性好,技术操作简便,在以临床实验室为基础的症状监测中尤为适用。     

沙门菌分离、筛检和确认流程技术关键点分析

目的基于标准方法构建多维组合流程,分析和评价沙门菌常规检测的技术关键点。方法构建沙门菌选择性增菌液和平板构成的检测流程,使用标准菌株检测4种选择性增菌液的回收率,验证3类5种沙门菌选择性平板的典型特征。通过实样比较不同选择性增菌液和平板组合在沙门菌检测过程中疑似菌落甄别、筛检效率和敏感性差异。结果罗伯特增菌液(RV)、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)和亚硒酸盐煌绿增菌液(SBG)回收效能与亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)相差1个稀释度,前3种增菌液适合非伤寒沙门菌的增殖,SC适合伤寒和副伤寒沙门菌的增殖。双糖管筛选法符合预期参比菌株表型。除沙门菌显色平板(CAS)外,其他选择性平板的菌株验证均可能产生菌落小和硫化氢(H_2S)阴性不典型菌落;84件肉制品和水产品样品中确认阳性25件(29.76%),检出42株沙门菌。RV、TTB、SBG、SC联合CAS和木糖赖氨酸脱氧胆酸盐平板(XLD)筛检沙门菌的敏感性分别为88%、84%、72%和0;RV和TTB、RV和SBG、TTB和SBG的组合敏感性分别为100%、92%和88%。3种增菌液与任一选择性平板组合的分离敏感性为48%～68%。双糖管筛检疑似菌落的特异性和阳性预测值较高。42株沙门菌经系统生化、质谱和血清学鉴定确认。结论经验证的双增菌液和双平板的组合能有效提高食品沙门菌检测的敏感性。梯度增菌、菌落识别和初筛效率是沙门菌检测技术的关键点。     

一种新的肠道沙门菌选择性琼脂(ES)培养基的应用研究

沙门菌是人、畜、禽共患的一种重要致病菌,检测沙门菌已成为食品、水源、环境污染的一项重要指标。加强沙门菌的检查对预防该疾病的传播和食物中毒十分重要。为提高沙门菌的检出率,不断有新的沙门菌选择性分离培养基的报道,我们以WS琼脂和HE选择性琼脂为基础,建立了一种新的鉴别能力较强的沙门菌选择性琼脂培养基,提高了沙门菌的检出率,现将该法报道如下:1　材料和方法1.1　肠道沙门菌选择性琼脂(ES)培养基成分及制备　多价胨(日本)12g、氯化钠5g、酵母浸膏3g、甘露醇5g、乳糖12g、十二烷基硫酸钠2g、柠檬酸铁铵1g、硫代硫酸钠2.3g、麝香…     

改良TT增菌液在分离肠道致病菌沙门菌和志贺菌的应用评价

目的分析改良TT增菌液在分离肠道致病中沙门菌和志贺菌的效果评价。方法采用常规接种麦康凯平板及SS平板,同时另外加种改良TT增菌液(硫代硫酸钠碳酸钙增菌液)两种不同方法筛查沙门志贺菌,并参考该院历年菌株分离情况进行血清凝聚。采用SPSS18.0统计软件包处理数据,比较两种不同粪便培养方法对沙门菌和志贺菌的分离率之间差异。结果 2013~2015年纳入统计分析粪便培养标本790例,采用常规方法分离出沙门菌属30例,阳性率3.80%;志贺菌属5例,阳性率0.63%;而采用改良TT增菌培养方法分离出沙门菌属77例,阳性率9.75%,志贺菌属7例,阳性率0.89%;采用改良TT增菌液培养方法沙门菌检出率是常规培养方法2.57倍,志贺菌属是1.41倍,两种方法对沙门志贺菌属的分离差异均有统计学意义(P0.05)。结论改良TT增菌液能够显著地提高粪便培养沙门菌和志贺菌的阳性分离率,为临床医生正确诊治患者提供较大帮助。     

上海市检出一株B群eh单相变种沙门菌

20 0 0年 5月中旬 ,在对服务性行业从业人员预防性健康体检中 ,我们从一份肛拭标本检出 1株Ｂ群ｅｈ单相变种沙门菌 (血清型 ) ,该菌经形态观察、生化和血清学反应及ＯＩ噬菌体裂解试验确证为沙门菌 ,现将检定结果报道如下。一、材料和方法1.标本来源　健康体检者以无菌棉签肛拭采集标本 ,置ＳＦ增菌液中作选择培养及Ｓ .Ｓ平板分离培养。2 .方法　按沙门菌检验常规进行菌种鉴定[1] ;Ｈ抗原诱导采用软琼脂平板法[2 ] 。3.诊断血清　沙门菌属诊断血清 (15 9种 )为卫生部成都生物物品研究所生产 ,在有效期内使用。4.肠杆菌科分属诊断噬菌体　…     

不同培养基及B族链球菌增菌肉汤检测B族链球菌效果评价

目的通过分析B族链球菌(GBS)检测的阳性检出率和平板选择性能来评价GBS筛查培养基、哥伦比亚血琼脂培养基和GBS增菌肉汤检测结果的可靠性和临床应用的可行性。方法收集妊娠晚期35~37周孕妇阴道下端及肛周样本242例、中段尿样本15例,同时直接接种及经GBS增菌肉汤增菌后接种哥伦比亚血平板和GBS筛查平板,观察各培养基上GBS的生长情况。结果直接接种后分别培养24 h和48 h,哥伦比亚血琼脂培养基GBS的检出率均为7.39%(19/257);而GBS筛查培养基的检出率为24 h 5.45%(14/257)、48 h 7.39%(19/257)。经GBS增菌肉汤增菌后,无论培养时间是24 h还是48 h,哥伦比亚血琼脂培养基GBS的检出率均为9.73%(25/257);GBS筛查培养基的检出率均为8.95%(23/257)。与直接接种相比,选择性增菌后GBS的检出率明显升高;2种培养基GBS的检出率差异无统计学意义(P0.05)。结论临床样本先经GBS增菌肉汤18~24 h增菌后再接种至GBS筛查培养基或哥伦比亚血琼脂培养基,24 h即可观察生长结果,GBS菌落易于辨认且提高了阳性检出率。     

2006-2008年上海市闵行区腹泻病病原菌的流行特征

目的了解上海市闵行区腹泻病病原菌的菌群分布以及变化趋势。方法采集2006-2008年闵行区3个监测点医院中腹泻患者的肛拭标本,做沙门菌、志贺菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌及致病性大肠埃希菌、产毒性大肠埃希菌、侵袭性大肠埃希菌及出血性大肠埃希菌的检测。结果8104份肛拭标本中,病原菌的检出率为15.4%（1251/8104）,在这些病原菌中占前3位的分别为副溶血弧菌、志贺菌和沙门菌。沙门菌的优势血清型为肠炎沙门菌,志贺菌的优势血清型福氏志贺菌和宋内菌。2006-2008年每年病原菌的阳性率分别为17.1%（439/2564）、16.7%（497/2961）、11.1%（315/2849）,各病原菌的分布存在明显的季节性差异,以夏秋季阳性率较高。副溶血弧菌和沙门菌在中青年的阳性率较高,志贺菌在20～岁以下人群中阳性率较高。结论2006-2008年上海市闵行区腹泻患者中分离的病原菌以副溶血弧菌、志贺菌和沙门菌为主,初步揭示了上海市闵行区细菌性腹泻的病原谱及流行病学分布特征。     

2007-2009年浙江省余姚市感染性腹泻沙门菌监测结果分析

目的了解浙江省余姚市感染性腹泻患者中沙门菌感染情况、血清分型以及各型对抗菌药物的敏感情况,为制定预防措施和临床治疗提供参考依据。方法采集感染性腹泻患者的粪便或肛试标本,依据GB/T 4789.4进行增菌、分离、生化鉴定、血清分型,药敏试验依据WS/T 125-1999测定。结果 719份腹泻患者粪便中检出沙门菌18株,检出率为2.5%。检出率最高的是O4群的鼠伤寒沙门菌,占50.0%;其次是O9群的肠炎沙门菌,占22.22%;阿汞纳、D群、C2群、阿伯丁和鸭沙门菌各1株。18株沙门菌均对头孢西丁、头孢他定、菌必治、氧氟沙星和亚胺培南敏感率为100%;检测发现有7株耐药菌,其中单耐药菌1株,多重耐药菌6株,而鸭沙门菌耐9种抗生素。结论 2007-2009年腹泻患者沙门菌检出率逐年下降,血清分型有其特点。多元耐药以鸭沙门菌明显,头孢类和喹诺酮类抗生菌对治疗沙门菌腹泻患者效果较好。     

特殊群体沙门菌调查分析

目的了解我市特殊群体-厨师沙门菌致病情况,防止食物中毒和肠道传染病的发生和流行。方法按《卫生防疫细菌检验》进行沙门菌检测。结果298份标本中分离出4株沙门菌,其中姆班达卡沙门菌和波恩沙门菌各一株、德尔卑沙门菌两株。结论姆班达卡沙门菌为我省首次新发现沙门菌血清型。     

特殊群体沙门菌调查分析

目的了解我市特殊群体-厨师沙门菌致病情况,防止食物中毒和肠道传染病的发生和流行.方法按<卫生防疫细菌检验>进行沙门菌检测.结果298份标本中分离出4株沙门菌,其中姆班达卡沙门菌和波恩沙门菌各一株、德尔卑沙门菌两株.结论姆班达卡沙门菌为我省首次新发现沙门菌血清型.     

2017—2020年儿科鼠伤寒沙门菌的分离及耐药情况分析

目的 分析2017—2020年儿科鼠伤寒沙门菌的分离及耐药情况,为临床合理选择抗生素提供依据.方法 对115例腹泻患儿的肛拭样本(分离后确诊为沙门菌)进行分离培养,在生化鉴定和血清学分型确定为鼠伤寒沙门菌后采用Kirby-Bauer纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验,并采用Whone5.6及SPSS21.0软件包进行数据...     

预防性健康体检快速筛查沙门志贺氏菌的价值研究

目的探讨PCR方法快速筛查健康体检沙门志贺氏菌的临床价值。方法选取2011年7月至2015年6月3 256例健康体检人员作为研究对象,采用实时荧光PCR法和培养法检测沙门志贺氏菌,比较两种方法筛查沙门志贺氏菌的优劣。结果沙门氏菌PCR法检出46例,检出率为为1.41%,传统培养法检出41例,检出率为1.26%;志贺氏菌PCR法检出39例,检出率为1.20%,传统培养法检出数32例,检出率为0.98%,两者比较差异有统计学意义(P0.05)。PCR法检测沙门氏菌灵敏度100.00%、特异性为99.84%,检测志贺氏菌灵敏度100.00%,特异性为99.78%。PCR法在人力、办证时间、满意度上优于传统培养法,成本上显著高于传统培养法,两者比较差异有统计学意义(P0.05),且PCR法技术含量高、客观性强。结论实时荧光PCR法能很好地筛查肠道致病菌,提高沙门志贺氏菌检出率和准确性,省时省力,效率高。     

改良麦康凯平板筛查肠道定植耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的性能评价

目的建立一种运用改良麦康凯平板快速筛查肠道定植耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的方法,并进行性能评价。方法分别制备含有终浓度为4μg/mL亚胺培南、4μg/mL美罗培南、2μg/mL厄他培南的改良麦康凯平板。选用临床连续分离45株CRE及30株非CRE菌株,检测改良麦康凯平板的敏感性及特异性,采用其中20株CRE菌株对改良平板的最低检测限进行评估。PCR方法检测CRE菌株耐药基因(TEM、SHV、NDM、KPC、OXA-48、VIM、IMP)。收集142例粪便样本评价改良平板的筛查性能,并与肉汤增菌法及CHROMagar KPC显色培养基进行比较。结果45株CRE菌株中TEM、SHV检出率分别为62.22%(28/45)和24.44%(11/45),NDM、KPC、OXA-48的检出率分别为62.22%(28/45)、15.56%(7/45)和13.33%(6/45),未检出VIM和IMP。45株CRE菌株在厄他培南改良平板上均生长,亚胺培南改良平板生长44株,美罗培南改良平板生长43株,敏感性分别为100%(45/45)、97.78%(44/45)和95.56%(43/45)。30株非CRE菌株在亚胺培南与美罗培南改良平板上均未生长,在厄他培南改良平板上生长2株,特异性分别为100%(30/30)、100%(30/30)和93.33%(28/30)。20株CRE中,接种菌液浓度为10⁵~10⁸ CFU/mL时,亚胺培南、美罗培南和厄他培南改良平板的检出率分别为70%(14/20)、65%(13/20)和100%(20/20);接种浓度为10⁵ CFU/mL以下时亚胺培南、美罗培南、厄他培南改良平板的检出率分别为10%(2/20)、10%(2/20)和95%(19/20)。亚胺培南、美罗培南改良麦康凯平板最低检测限大多分布在10⁵~10⁸ CFU/mL接种水平,而厄他培南改良麦康凯平板最低检测限集中分布于10²~10³ CFU/mL。142份粪便样本中,亚胺培南、美罗培南、厄他培南改良麦康凯平板分别筛查出3株、2株、4株CRE,均未检出非CRE菌株;肉汤增菌法检出5株CRE及2株非CRE;CHROMagar KPC显色培养基检出5株CRE及1株非CRE。3种改良平板与肉汤增菌法及CHROMagar KPC显色培养基筛查结果间差异均无统计学意义(P>0.05)。与亚胺培南和美罗培南相比,厄他培南平板筛查结果与肉汤增菌法、CHROMagar KPC显色培养基一致性更好,Kappa值分别为0.717和0.885。结论改良麦康凯平板筛查肠道CRE菌株敏感性和特异性高,且操作简便,价格低廉,对操作人员技术要求低。厄他培南改良麦康凯平板具有更低的检测限,且与肉汤增菌法及CHROMagar KPC显色培养基筛查结果有更好的一致性,更适合推广使用。     

一株非A～F群沙门菌的鉴定与分析

目的对一株来源于本市饮食服务行业从业人员肛拭标本中的沙门菌,探求其鉴定方法,为非A~F群沙门菌的判定提供参考。方法采用噬菌体检验方法,在现有只涵盖A~F群沙门菌诊断血清未能分型的情况下,结合培养基生长特性、全面生化试验进行分析。结果该菌生化反应符合肠道沙门菌定义,能被沙门菌O-I噬菌体裂解,连续数代纯培养物进行血清凝集试验均为A~F多价O血清(-),Vi(-)。结论该菌是一株罕见的非A~F群旺兹沃思沙门菌。     

日常沙门菌血清分型思路于一次盲样考核中的应用

目的通过梳理日常沙门菌血清分型思路及总结积累的经验,借以探讨考核样本中沙门菌血清分型方法。方法采用GB4789.4-2010沙门菌检验位相变异试验简易平板法,作为参考方法。同时运用传代与简易平板法相结合的方法,以及血平板-滤纸条搭桥法进行鉴定。结果运用传代与简易平板法相结合的方法和血平板-滤纸条搭桥法,一次性诱导鉴定出准确的沙门菌血清型。简易平板法诱导三次得出菌型。结论经过这次考核样的检测,提高了检验人员对沙门菌血清型的鉴定水平,提升了解决位相变异试验所遇难题的能力。