SDF-1/CXCR4轴在结直肠癌发病中的研究进展

结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)好发于直肠以及乙状结肠,故两者统称为大肠癌。本病发病机制中研究最多的是基质细胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1 SDF-1)及其特异性受体CXCR4(chemokine receptor 4),两者所构成的生物轴在结直肠癌的发生及病情进展中起着关键作用。故本文通过阐述SDF-1、CXCR4、以及两者组成的SDF-1/CXCR4轴的概念,其分别在大肠癌中的表达方面阐述本病的发病机制及通过干扰此轴治疗大肠癌进行归纳总结。     

肝星状细胞经趋化因子SDF-1/CXCR4轴途径促进肝癌细胞侵袭的作用及其机制

目的：探讨肝星状细胞（HSC）通过SDF-1/CXCR4轴对肝癌细胞侵袭的影响和可能机制,为研究肝癌的侵袭过程提供依据。方法: 采用Western blotting和RT-PCR检测HSC LX02和肝癌细胞MHCC97、SMMC7721、Hep3B、HepG2中SDF-1和CXCR4的表达。采用Transwell实验检测LX02共培养或外源性SDF-1干预对肝癌细胞HepG2以及CXCR4基因沉默后的HepG2侵袭的影响。Western blotting法检测上皮标志E-Cadherin和间质标志Vimentin的表达水平。结果：与肝癌细胞比较,LX02中趋化因子SDF-1呈高表达（P<0.05）。4株人肝细胞癌细胞均有CXCR4高表达。HSC或SDF-1均能促进肝癌细胞HepG2侵袭（P<0.05）,并诱导E-Cadeherin蛋白表达下调,Vimentin蛋白表达上调。通过RNA干扰技术靶向沉默肝癌细胞CXCR4基因后,HSC和SDF-1对肝癌细胞HepG2侵袭能力均无明显影响（P>0.05）,肝癌细胞E-Cadeherin、Vimentin蛋白及mRNA表达水平亦无明显变化。结论：HSC可通过SDF-1/CXCR4轴促进肝癌细胞侵袭,其机制可能与诱导肝癌细胞上皮-间质转化有关。     

CXCR4/SDF-1反应轴与VEGF在强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞中的表达及其相关性分析

［摘要］ 目的：探讨CXC趋化因子受体4/基质细胞衍生因子-1(CXCR4/SDF-1)反应轴与血管内皮细胞生长因子（VEGF）在强直性脊柱炎（AS）发病中的作用及其作用机制,阐明VEGF作为AS活动期和监测预后指标的可行性。方法：采用流式细胞术（FCM）检测30例AS患者及20例健康对照者外周血单个核细胞（PBMCs）CXCR4的表达情况;酶联免疫吸附法（ELISA）检测2组研究对象血清中的VEGF及SDF-1的表达水平;对CXCR4、SDF-1和VEGF三者间及其与疾病活动性指标血沉（ESR）和C反应蛋白（CRP）相关性进行分析。结果：AS组患者CXCR4表达阳性率显著高于健康对照组（P<0.05）;AS组患者VEGF及SDF-1的表达水平较健康对照组均明显增高（P<0.05）;CXCR4、SDF-1和VEGF三者间呈正相关关系,其相关系数(r)分别为0.828、0.638和0.723（P<0.05）;VEGF与ESR和CRP呈明显正相关关系,r分别为0.584和0.772（P<0.05）;CXCR4及SDF-1与ESR和CRP未见明显相关关系（P> 0.05）。结论：CXCR4/SDF-1反应轴与VEGF对AS发病、病情进展、严重程度及预后判断具有重要的作用;VEGF可作为活动期和监测预后的可靠指标,三者可能成为AS靶向治疗的主要靶点。     

CXCR4/SDF-1对鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响

目的 观察鼻咽癌不同恶性程度的细胞中趋化因子受体CXCR4的表达,检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的增殖作用,SDF-1对CXCR4阳性肿瘤细胞的趋化作用,探讨CXCR4/SDF-1生物学轴对人鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响.方法 以鼻咽癌成瘤高转移细胞株5-8F及成瘤不转移细胞株6-10B为研究对象,采用Western blot免疫印迹法检测鼻咽癌细胞株CXCR4蛋白的表达情况,SDF-1及CXCR4阻断剂AMD3100作用于两种细胞后,MTT法检测细胞的增殖能力,体外迂徙实验检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的趋化作用.结果 5-8F细胞株CXCR4蛋白的表达明显高于6-10B细胞株;SDF-1能明显增强5-8F细胞增殖与迁移能力,CXCR4阻断剂AMD3100作用后,5-8F细胞增殖与迁移能力明显降低;SDF-1对6-10B细胞的迁移及增殖能力无明显影响.结论 CXCR4/SDF-1生物学轴与鼻咽癌细胞株的增殖与迁移有一定的关系,AMD3100可明显抑制鼻咽癌细胞的增殖与迁移能力.     

CXCR4和MMP-9表达与结直肠癌根治术后早期复发的关系及临床病理意义

目的  探讨CXCR4和MMP-9表达及临床病理因素与结直肠癌根治术后早期复发的关系。方法  应用免疫组化SP法检测同期结直肠癌根治术后早期复发患者40例（复发时间为术后3个月～1年）与3年以上未复发者30例的癌组织中CXCR4和MMP-9表达水平,应用χ2检验、logistic回归分析统计学方法分析二者及临床病理因素与结直肠癌早期复发的关系。结果  早期复发组与未复发组结直肠癌组织中CXCR4呈阳性表达率分别为75.0%(30/40)和43.3%(13/30),两组比较差异具统计学意义（P＜0.05）。早期复发组与未复发组癌组织中MMP-9呈阳性表达率分别为65.0% (26/40)和40.0% (12/30),两组比较差异具统计学意义（P＜0.05）。结直肠癌患者的肿瘤部位（P=0.004,β为1.957,OR值为7.079）、肠壁浸润深度（P=0.047,β为0.889,OR值为2.434）和CXCR4表达（P=0.008,β为1.855,OR值为6.391）是术后早期复发的危险因素。其中肿瘤部位和CXCR4表达是影响术后早期复发最重要因素。而术后辅助化疗（P=0.026,β为-2.440,OR值为0.087）是早期复发的保护性因素。结论   CXCR4的异常表达与结直肠癌根治术后早期复发密切相关,提示其可能对结直肠癌术后早期复发的发生和发展有重要作用。     

CXCR4特异性拮抗剂SDF-1P2G54的构建及活性评价

摘要：目的对SDF-1进行遗传改造,将其第2位氨基酸由脯氨酸（P）突变为甘氨酸（G）,且缺失其C-端α螺旋结构,以获得一种
CXCR4特异性拮抗剂SDF-1P2G54。方法将PCR扩增的SDF-1突变体SDF-1p2g54的基因插入表达载体pET-30a(+),并转化
BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达的重组蛋白SDF-1P2G54在变性条件下采用镍柱亲和层析纯化,并通过梯度稀释和超滤方法
得以复性。利用趋化实验鉴定SDF-1P2G54 对Jurkat 细胞的趋化活性及对SDF-1 趋化活性的抑制效应,流式细胞仪检测
SDF-1P2G54 诱导MOLT4 细胞钙内流及细胞表面CXCR4 内在化的能力。结果SDF-1P2G54 完全丧失激活CXCR4、趋化
Jurkat细胞跨膜迁移和诱导MOLT4细胞钙内流的能力,却保持了与CXCR4的高亲和性,能有效抑制野生型SDF-1对Jurkat的
趋化效应、诱导MOLT4细胞表面CXCR4的快速内在化。结论SDF-1P2G54是一种新型的CXCR4特异性拮抗剂,具有开发成
抑制HIV-1感染和癌细胞转移等重大疾病特效药物的潜在应用价值。
     

MsrA在结直肠癌干细胞中的表达及意义

目的探讨MsrA 在结直肠癌干细胞中的表达及与结直肠癌发生、发展的关系。方法免疫磁珠分选结直肠癌细胞株
SW480细胞中CD133+/CD44+/ESA+亚群细胞,RT-PCR检测癌细胞、癌干细胞和正常大肠粘膜细胞中MsrA的表达以及MsrA过
表达对VEGF、MMP-13和CXCR4表达的影响,MTT检测过表达MsrA对结直肠癌干细胞增殖的影响。结果癌干细胞中MsrA
的表达水平明显高于癌细胞,癌细胞中MsrA的表达水平明显高于正常大肠粘膜细胞。MsrA过表达会抑制结直肠癌干细胞的
增殖以及下调VEGF、MMP-13和CXCR4的表达。结论MsrA可能通过下调VEGF、MMP-13和CXCR4的表达和抑制细胞增
殖来抑制结直肠癌的发生、发展。
     

类风湿关节炎病人外周血中趋化因子受体CXCR4与其配体SDF-1α的表达研究

目的:探讨类风湿关节炎病人外周血中趋化因子受体CXCR4与其配体SDF-1α的表达水平。方法:选取类风湿性关节炎病人52例为观察组。另外选取同期健康体检的健康人群30名为对照组。采集受试者静脉血,检测外周血CXCR4、SDF-1α及白细胞介素（IL）-8表达水平。结果:观察组外周血CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞表面CXCR4表达百分率和血清SDF-1α、IL-8表达水平均高于对照组（P<0.01）。随着病程的延长,外周血CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞表面CXCR4表达百分率和血清SDF-1α表达水平上升（P<0.01）。直线相关性分析结果显示,外周血CXCR4及SDF-1α表达水平与IL-8均呈正相关关系（P<0.05）。结论:SDF-1α/CXCR4信号转导通路和IL-8与类风湿性关节炎的发病和进展过程有关。     

CXCR4和CXCL12在结直肠癌中的表达与意义

目的：探讨CXCL12和CXCR4在结直肠癌中的表达及其与结直肠癌临床、病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测65例结肠直肠癌组织、30例癌旁正常组织中CXCR4及CXCL12的表达。始果：65例结直肠癌组织中CXCR4的表达率为67．7％,CXCL12的表达率为60．0％,30例正常结直肠组织中无CXCR4及CXCL12蛋白表达。CXCR4、CXCL12高表达与结直肠癌患者的年龄、性别、病变部位、病变长度、结直肠癌组织类型、分化程度无关（P〉0．05）,而与结直肠癌局部浸润及淋巴结转移有关（P〈0．01）。结论：CXCL12和CXCR4在结直肠癌组织中均有较高的表达,CXCR4及CXCL12的表达水平与结直肠肿瘤的发展及转移有一定的关系。     

SDF-1/CXCR4生物学轴在乳腺癌中的表达及其临床意义

 目的 检测SDF-1及其配体CXCR4在乳腺浸润癌、导管原位癌及癌旁组织中的表达,分析两者与乳腺浸润癌临床病理特征的关系,探讨SDF-1/CXCR4生物学轴在乳腺癌发生发展过程中的相关性。 方法 免疫组化检测80例乳腺浸润癌、15例导管原位癌和15例癌旁组织中SDF-1及CXCR4蛋白的表达。RT-PCR检测40例乳腺浸润癌、5例导管原位癌和5例癌旁组织中SDF-1及CXCR4mRNA的表达。结果 免疫组化检测SDF-1、CXCR4在乳腺浸润癌与导管原位癌,导管原位癌与癌旁组织中的表达均有差异（P＜0.05）,其中CXCR4表达与乳腺癌的淋巴结转移和分期有关（P＜0.05）。RT-PCR检测 SDF-1与CXCR4mRNA在乳腺浸润癌与导管原位癌,导管原位癌与癌旁组织中的表达均有差异（P＜0.05）。两者蛋白及mRNA在乳腺浸润癌中的表达均呈正相关（P＜0.05）。结论 SDF-1/CXCR4生物学轴在促进乳腺癌的发生发展以及侵袭转移过程中起到重要促进作用。     

CXCR4 特异性拮抗剂 SDF-1P2G54 的构建及活性研究

对SDF-1进行遗传改造，将其第二位氨基酸由脯氨酸（P）突变为甘氨酸（G），且缺失其C-端α螺旋结构，以获得一种CXCR4特异性拮抗剂SDF-1P2G54。方法 将PCR扩增的SDF-1突变体SDF-1p2g54的基因插入表达载体pET-30a(+)，并转化BL21(DE3)菌株。IPTG诱导表达的重组蛋白SDF-1P2G54在变性条件下采用镍柱亲和层析纯化，并通过梯度稀释和超滤方法得以复性。利用趋化实验鉴定SDF-1P2G54对Jurkat细胞的趋化活性及对SDF-1趋化活性的抑制效应，流式细胞仪检测SDF-1P2G54 诱导 MOLT4 细胞钙内流及细胞表面 CXCR4 内在化的能力。结果 SDF-1P2G54 完全丧失激活 CXCR4、趋化Jurkat细胞跨膜迁移和诱导MOLT4细胞钙内流的能力，却保持了与CXCR4的高亲和性，能有效抑制野生型SDF-1对Jurkat的趋化效应、诱导MOLT4细胞表面CXCR4的快速内在化。结论 SDF-1P2G54是一种新型的CXCR4特异性拮抗剂，具有开发成抑制HIV-1感染和癌细胞转移等重大疾病特效药物的潜在应用价值。     

SDF-1和CXCR4在脑胶质瘤中的表达及关系的研究

目的检测基质细胞衍生因子-1（SDF-1）和趋化生长因子受体-4（CXCR4）在胶质瘤中的表达,探讨二者在胶质瘤中表达的关系。方法以98例胶质瘤标本作为观察组,50例正常脑组织作为 对照组,采用免疫组织化学技术,分别检测SDF-1和CXCR4的表达及在不同分级胶质瘤中表达的关系。结果胶质瘤中SDF-1和CXCR4表达的阳性率明显于正常脑组织,SDF-1和CXCR4的表达与胶质瘤的分级密切相关,且肿瘤中SDF-1和CXCR4的表达呈正相关。结论 SDF-1和CXCR4在胶质瘤发生发展中可能具有协同作用,在肿瘤进展中可能有一定促进作用,联合检测SDF-1和CXCR4可能有助于判断胶质瘤的恶性程度。     

SDF-1/CXCR4轴与髓外白血病

基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXCR4所构成的SDF-1/CXCR4轴生物效应的研究近些年来进展迅速,其在肿瘤发生及发展中起重要作用,并与髓外白血病密切相关。本文就SDF-1及其受体CXCR4在白血病细胞中的表达,SDF-1/CXCR4轴与髓外白血病的关系的研究进展加以综述。     

SDF-1／CXCR4在喉癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨趋化因子基质细胞衍生因子1（SDF-1）及其受体（CXCchemokinereceptor4,CXCR4）与喉癌病理特征及预后的关系。方法应用免疫组化法和实时荧光定量PCR方法检测SDF-1及CXCR4在45例喉癌和20例声带息肉组织中的表达,并结合临床病理特征和生存资料进行相关分析。结果喉癌组SDF-1、CX—CR4蛋白及mRNA的表达较声带息肉组显著增加（P〈0．05）;SDF-1和CXCR4表达与喉癌淋巴结转移、淋巴管浸润、TNM临床分期有关（P〈0．05）。SDF-1和CXCR4蛋白在喉癌中的表达呈正相关（p〈0．05）,SDF-1阳性表达与生存率呈负相关（P〈0．05）。结论SDF-1／CXCRd生物学轴促进喉癌的发生发展及淋巴结转移,SDF-1高表达是喉癌预后不良的重要指标。     

SDF-1/CXCR 4在槲皮素抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成过程中的作用

目的：探讨槲皮素对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成及基质细胞衍生因子-1（stromal derived factor-1,SDF-1）及其特异性受体CXCR 4表达的影响,为槲皮素抗动脉粥样硬化提供实验依据。方法：40只6周龄的ApoE-/-小鼠随机分为：正常对照组、模型对照组和实验组（槲皮素低、中、高剂量组）,于给药后第10、20周取材,HE染色观察动脉粥样硬化病变情况;ELISA法、免疫组织化学技术及real-time PCR检测SDF-1和CXCR 4的蛋白和基因表达情况。结果：（1）HE染色发现正常对照组无粥样斑块形成;实验组与模型对照组相比动脉粥样斑块病变明显减轻。（2）免疫组化结果显示相同时间点比较,正常对照组：SDF-1主要表达于内皮细胞和平滑肌细胞,CXCR 4主要表达于内皮细胞,但细胞着色浅,表达量少;模型对照组：平滑肌细胞以及泡沫细胞呈深棕黄色,显示SDF-1和CXCR 4有大量表达;槲皮素组：高中低剂量的3个实验组与模型对照组比较,细胞着色较浅,表达量均有减少（P=0.010）;与正常对照组比较,低剂量组、中剂量组有统计学差异（P=0.000）。不同时间点比较,SDF-1在模型对照组的表达量随时间延长而增加（P=0.000）。（3）ELISA检测血清中SDF-1和CXCR 4水平,real-time PCR检测SDF-1和CXCR 4的 mRNA基因表达结果：在相同时间点比较,SDF-1及CXCR 4在模型对照组中表达最高（与其余各组比较P=0.000）,正常对照组表达最低,槲皮素组介于两者之间,且随着药物剂量的增加SDF-1和CXCR 4表达量进行性下降,尤其是CXCR 4在高剂量组与正常对照组比较无统计学差异（P >0.05）;不同时间点相同组比较,模型对照组的SDF-1和CXCR 4均随时间延长而增加（P=0.00）,槲皮素组和正常对照组无明显的时间依赖性。结论：（1）SDF-1/CXCR 4可能促进血管平滑肌细胞增殖以及迁移至内膜,从而使内膜增厚和泡沫细胞形成,导致粥样斑块形成。（2）槲皮素可能通过抑制SDF-1与CXCR 4的表达从而抑制ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成。     

SDF-1/CXCR4在膀胱癌组织中的表达及其与负性共刺激分子PD-L1、细胞凋亡和侵袭性的相关性研究

目的:研究SDF-1/CXCR4在膀胱癌组织中的表达及其与负性共刺激分子PD-L1、细胞凋亡和侵袭的相关性。方法:选择在我院手术切除的118例膀胱癌组织和癌旁组织作为研究样本,抽提RNA后反转录为cDNA,检测SDF-1/CXCR4、PD-L1/PD-1以及细胞凋亡相关分子、细胞侵袭相关分子的表达量。结果:膀胱癌组织中SDF-1、CXCR4的mRNA表达量显著高于癌旁组织;膀胱癌组织中PD-L1、PD-1、Rec1、Survivin、MRPS5、Nanog、BCAPP2Ac、TRPM8、TRPV2、ILK、β-catenin、GUGBP1的mRNA表达量显著高于癌旁组织且与SDF-1、CXCR4的mRNA表达量呈正相关。结论:膀胱癌组织中高表达的SDF-1/CXCR4与负性共刺激分子PD-L1、促增殖分子、促侵袭分子的高表达密切相关,SDF-1/CXCR4能够促进膀胱癌细胞的免疫逃逸、增殖以及侵袭。     

HIF-1α对间充质干细胞SDF-1/CXCR4的调控作用研究

[目的]探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）对间充质干细胞基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor-1,SDF-1）/CXC趋化因子受体4（chemokine receptor 4,CXCR4）的调控作用。[方法]贴壁法培养ICR小鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）;采用RNA干扰技术用SuperFectinTMⅡ转染HIF-1αsiRNA于MSCs;实验分为五组：常氧组、缺氧组、转染Control siRNA组、转染HIF-1αsiRNA常氧培养组、转染HIF-1αsiRNA缺氧培养组;RT-PCR检测HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA表达水平;Western blotting检测HIF-1α、SDF-1α、CXCR4蛋白表达水平。[结果]同常氧组比较,缺氧组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平提高（P〈0.05）;同转染Control siRNA组比较,转染HIF-1αsiRNA常氧培养组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平降低（P〈0.05）;同缺氧组比较,转染HIF-1αsiRNA缺氧培养组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平降低（P〈0.05）。[结论]缺氧可使MSCs的HIF-1α、SDF-1α、CXCR4的表达提高,常氧与缺氧条件下抑制HIF-1α的表达可使SDF-1α、CXCR4的表达降低,HIF-1α在间充质干细胞中对SDF-1/CXCR4有调控作用。     

PCNA、CXCR4在结直肠癌组织芯片中的表达及意义

目的探讨PCNA和CXCR4蛋白在结直肠癌组织芯片中的表达及其意义。方法在结直肠癌组织芯片上,应用免疫组化EnVision法检测PCNA和CXCR4表达水平,分析PCNA和CXCR4在结直肠癌的表达与患者淋巴结转移状态、肿瘤分化程度的关系及其相互关系。结果 PCNA在结直肠癌组织中的表达率为44.5%(57/128);CXCR4的表达率为43.8%(56/128),PCNA和CXCR4与患者淋巴结转移状态、肿瘤分化程度相关(P<0.05)、二者之间呈正相关(P<0.05)。结论同时检测结直肠癌组织中的PCNA和CXCR4蛋白的表达对判断肿瘤的恶性程度和估计预后有一定意义。     

SDF-1/CXCR4在非小细胞肺癌的表达及其临床意义

目的分析SDF-1/CXCR4在非小细胞肺癌的表达与早期出现淋巴结转移的相关性。方法选择2008年8月至2011年7月期间于我院肿瘤外科接受手术治疗的非小细胞肺癌患者50例患者的癌组织及其病理已证实癌转移的纵隔淋巴结作为本次实验研究项目的目标,将其定义为实验组,另外50例肺癌患者的正常肺组织及其病理证实无淋巴结转移的标本作为其参照组,采取免疫组织化学手段分别对其SDF-1/CXCR4基因的具体情况进行检查,并对其表达情况以及临床意义进行分析。结果正常肺组织细胞中,SDF-1/CXCR4均显示为阴性表达,在癌组织中高表达且以细胞质为其主要定位,表现出显著的差异,数据差异具有统计学意义(P0.05)。SDF-1/CXCR4基因的表达与肿瘤的淋巴结转移存在正相关的关系,数据差异具有统计学意义(P0.05)。而SDF-1/CXCR4的表达与其年龄以及性别等均无明显的关系,未表现出明显的差异,数据差异无统计学意义(P0.05)。结论 SDF-1/CXCR4基因的表达与癌细胞的淋巴转移以及肿瘤的分化程度有着密切的联系,为其预后的评估、术后早期复发的预测提供相应的科学依据以及数据支持,因此在具体的治疗与诊断中,可对基因指标进行检测,从而起到辅助检查的效果,使其五年生存率得到提高,并对其术后辅助化疗时机进掌控。     

基质细胞衍生因子1及其受体趋化因子受体4生物学轴与头颈肿瘤

许多恶性肿瘤细胞均能分泌趋化因子,其与肿瘤细胞相互作用。关于趋化因子的研究已成为肿瘤研究的热点领域之一。基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其受体CXC趋化因子受体4(CXCR4)广泛参与肿瘤的发生、增殖、侵袭、转移等过程,并可能与肿瘤的治疗、TNM分期及预后相关。但SDF-1/CXCR4生物学轴与头颈肿瘤的关系尤其是作用和机制的研究较少。近年来,SDF-1/CXCR4生物学轴与头颈肿瘤的研究逐渐成为热门,为头颈肿瘤的诊疗指出新思路。