扩张型心肌病患者两种治疗方法前后microRNA-126 和microRNA-30a 水平表达的研究

目的 探讨microRNA-126（miRNA-126） 和microRNA-30a(miRNA-30a) 检测在扩张型心肌病（dilatedcardiomyopathy,DCM）患者诊断及预后评估的价值。方法 收集2014.2 ～ 2019.3 期间40 例DCM 患者,按治疗方法分为手术治疗组20 例和一般治疗组20 例,同期健康体检者20 例为对照组,采用qRT-PCR 法?检测治疗前后患者血清中miRNA-126 和miRNA-30a 的相对含量,并进行统计学分析。结果 ① DCM 患者与对照组血清miRNA-126 相对表达量为[1.40(0.44,3.28) vs 1.15（0.44,2.25）],miRNA-30a 为[2.37(0.70,4.25) vs 1.05（0.48,2.20）],差异无统计学意义（Z=-0.557,-1.662,P ＞ 0.05）。②治疗后,一般治疗组miRNA-126 为 1.35(0.66,2.00),miRNA-30a 为1.2(0.77,4.55)。手术治疗组miRNA-126 为 0.16(0.10,0.26),miRNA-30a 为0.20(0.14,0.33), 手术治疗组治疗前后miRNA-126,miRNA-30a 表达量差异有统计学意义（均Z =-3.059,均P ＜ 0.05）。一般治疗及手术治疗两者表达量差异有统计学意义（miRNA-126:Z = -3.806,P ＜ 0.05;miRNA-30a:Z = -3.24,P ＜ 0.05）。③ miRNA-126 与NT-proBNP 呈负相关;循环miRNA-30a 与NT-proBNP 呈正相关,与射血分数呈负相关。④ miRNA-126 的12 个月相对危险度为 0.768（95%CI 0.431~1.37,P ＞ 0.05）,miRNA-30a 的12 个月生存分析其相对危险度为1.141（95% CI 0.775~1.678,P ＞ 0.05）。结论 miRNA-126 和miRNA-30a 可为两种不同治疗方法的评价提供一定的参考价值。     

微小RNA-499对STEMI的早期诊断价值

目的研究微小RNA(miRNA)-499对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)的早期诊断价值。方法选取2016年1-11月该院心内科收治的30例STEMI患者为研究对象(STEMI组),同时选择30例健康体检者纳入对照组。检测对照组血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、miRNA-499水平,检测STEMI患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术前及PCI术后5d时血清cTnI、miRNA-499水平。结果 STEMI组患者PCI术前血清cTnI水平为(2.930±0.670)mg/L,明显高于对照组的(0.090±0.040)mg/L,差异有统计学意义(P0.05);STEMI组患者miRNA-499表达量为3.785±1.237,明显高于对照组的0.914±0.452,差异有统计学意义(P0.05)。PCI术后5d,STEMI组血清cTnI水平及miRNA-499表达量明显低于PCI术前,STEMI组cTnI水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);STEMI组miRNA-499表达量与对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 miRNA-499与心肌损伤关系密切,可作为STEMI早期诊断及疗效判断的新型敏感标志物。     

血清miRNA-21,miRNA-126表达在诊断PCI术后冠状动脉再狭窄的临床应用价值

目的研究血清miRNA-21,miRNA-126检测在诊断经皮冠状动脉介入术(PCI)术后冠状动脉再狭窄(ISR)的临床应用。方法收集82例在泾阳县医院和陕西中医药大学附属医院接受PCI治疗的急性冠脉综合征(ACS)患者(狭窄组30例,未狭窄组52例)及33例体验健康者(对照组)的血清及临床资料,采用real-time qPCR技术检测血清中miRNA-21和miRNA-126的相对表达量,比较分析其在各组中的变化。应用血管内超声(intravascular ultrasound,IVUS)来评价PCI术后再狭窄的发生。结果血清miRNA-21和miRNA-126在对照组、未狭窄组和狭窄组中的表达量分别为(0.22±0.03,0.43±0.08,0.92±0.17)和(0.87±0.15,0.49±0.10,0.23±0.04)。与对照组比较,血清miRNA-21在狭窄组与未狭窄组的表达量明显增高,而miRNA-126表达水平则显著降低,差异均有统计学意义(P=0.000)。狭窄组与未狭窄组比较miRNA-21表达水平明显增高,而miRNA-126表达水平则显著降低,差异均有统计学意义(P=0.000)。IVUS结果显示,狭窄组的斑块面积(PLA)与未狭窄组比较显著增高,而最小管腔面积(MLA)显著降低,其差异均有统计学意义(P=0.000)。两标志物在狭窄组的表达量具有负相关性(r=-0.919,P0.01)。狭窄组中miRNA-126和miRNA-21水平分别与PLA和MLA具有相关性(r=-0.945,0.926,P0.01)和(r=0.933,-0.917,P0.01)。结论血清miRNA-21和miRNA-126水平检测可用于急性冠脉综合征疾病PCI术后冠状动脉再狭窄的诊断以及预测,可能作为该疾病时的基因检测指标之一。     

用金纳米-分子信标的荧光定量PCR新技术研究6个miRNAs在心肌缺血患者中的表达

目的探讨新建立金纳米-分子信标探针的实时荧光定量PCR技术及其分析不同程度心肌缺血患者的6个微小RNA(microRNA,miRNA):miRNA-1、miRNA-21、miRNA-133、miRNA-199、miRNA-208、miRNA-499的表达水平。方法用新构建金纳米-分子信标探针引入实时荧光定量PCR技术分析200例不同程度心肌缺血患者血清中的以上6个miRNAs的表达水平,并用xMAP液态芯片技术验证以上miRNAs的表达。结果急性心肌缺血组:在急性心肌梗死(AMI)发病后1～3h检测到miRNA-21、miRNA-133、miRNA-199、miRNA-208、miRNA-499的表达上调;慢性心肌缺血组:通过对原发性高血压并发心肌缺血患者研究显示miRNA-21、miRNA-133、miRNA-199、miRNA-1的表达上调,以上两组分别与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.001)。新构建的金纳米-分子信标探针检测的特异度为86.7%,灵敏度为90.2%,均高于常规分子信标(53.4%、66.8%),两种方法比较差异有统计学意义(P<0.001),与xMAP液态芯片技术比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论新建立的金纳米-分子信标探针的实时荧光定量PCR技术可作为早期检测miRNAs新的实验方法,为心肌梗死患者的早期诊断提供新的检测手段。     

心肌内miRNA-210过表达对急性心肌梗死大鼠梗死区域微血管密度和HGF表达的影响

目的分析心肌内微小RNA-210(miRNA-210)过表达对急性心肌梗死(AMI)大鼠梗死区域微血管密度和肝细胞生长因子(HGF)表达的影响。方法取40只SD大鼠,随机分为假手术组(缝针穿过心肌,不给予结扎处理)、模型组(结扎冠状动脉前降支建立AMI大鼠模型)、阴性对照组(建立AMI大鼠模型+阴性病毒对照)、实验组(建立AMI大鼠模型+体内转染miRNA-210激动剂),每组各10只。比较各组大鼠术后1个月心肌组织内miRNA-210和HGF表达水平的差异;比较各组大鼠心脏组织病理学改变、心肌组织内微血管密度及超声心动图参数的差异。结果阴性对照组大鼠LVDs较假手术组明显升高,LVFS和LVEF较假手术组、模型组均明显下降(P 0. 05);实验组大鼠LVDs较阴性对照组明显下降,LVFS和LVEF较阴性对照组明显升高(P 0. 05)。阴性对照组大鼠心肌组织内微血管密度较假手术组明显下降,实验组微血管密度较阴性对照组明显提高(P 0. 05)。实时荧光定量聚合酶链反应结果显示,相比假手术组、模型组和阴性对照组,实验组大鼠HGF与miRNA-210表达水平显著升高(P 0. 05);相比假手术组和阴性对照组,模型组大鼠miRNA-210表达水平显著升高(P 0. 05)。免疫印迹法检测结果显示,实验组大鼠HGF蛋白的表达水平明显高于其余各组,差异有显著性(P 0. 05)。结论心肌组织内miRNA-210过高表达可促使AMI大鼠梗死区域微血管密度和HGF表达升高,因此可起到诱导血管新生和改善心脏收缩功能的作用。     

颅内动脉支架成形术后再狭窄患者血清miRNA-210,miRNA-126水平检测的临床应用价值

目的 研究血清miRNA-210,miRNA-126表达在颅内动脉支架成形术后再狭窄中的临床应用价值。方法 收集113例在延安大学咸阳医院接受颅内动脉支架成形术治疗的颅内动脉狭窄患者(再狭窄组23例,无狭窄组90例)及25例体检健康者(对照组)的血清及临床资料,采用实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测血清miRNA-210和miRNA-126 的表达,比较分析其在各组中的变化。应用颈动脉超声检查评价颅内动脉支架成形术后再狭窄的发生。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价血清miRNA-210和miRNA-126的临床意义。结果 血清miRNA-210和miRNA-126 在对照组、无狭窄组和再狭窄组中的表达分别为0.25±0.07,0.53±0.16,0.93±0.23和0.97±0.27,0.67±0.19,0.23±0.09。与对照组比较,血清miRNA-210在再狭窄组和无狭窄组的表达明显增高,而miRNA-126表达则显著降低,差异均有统计学意义; 与无狭窄组比较,再狭窄组miRNA-210表达水平明显增高,而miRNA-126表达则显著降低,其差异均有统计学意义(F=125.9,116.7,P=0.000)。颈动脉超声检查显示,颈内动脉内径(PD)和颈内动脉收缩期峰值流速(PSV)分别在对照组、无狭窄组和再狭窄组中的检查结果为5.51±0.72,4.70±0.63,3.07±0.52 mm和71.27±19.26,93.90±27.38,185.72±75.17 cm/s。与对照组比较,再狭窄组和无狭窄组的PSV均显著增高,而PD则显著降低,其差异均有统计学意义。再狭窄组的PD与无狭窄组比较显著减小,而PSV则显著增快,其差异均有统计学意义(F=38.96,99.75,P=0.000)。miRNA-210和miRNA-126在再狭窄组的表达具有负相关性(r=-0.859,P<0.01),且分别与PD和PSV具有相关性(r=0.868,-0.852,P<0.01),(r=-0.897,0.876,P<0.01)。ROC曲线分析显示血清miRNA-210和miRNA-126水平的AUC分别为0.839(95%CI:0.755～0.942,P<0.01)和0.857(95%CI:0.749～0.966,P<0.01)。结论 血清miRNA-210和miRNA-126水平检测可用于颅内动脉支架成形术后再狭窄的诊断以及预测,并可能成为该疾病的基因检测指标。     

多发性骨髓瘤患者骨髓液中miRNA-21、miRNA-15a和miRNA-16的表达及其临床意义分析

目的观察和分析多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓液中微小RNA(miRNA)-21、miRNA-15a和miRNA-16的表达及其临床意义。方法选取50例MM患者作为病例组,根据治疗效果将其分为初治组(19例)、难治组(18例)和缓解组(13例),选取20例非恶性血液疾病患者作为对照组。对各组患者骨髓液中的miRNA-21、miRNA-15a和miRNA-16表达水平和血清β2微球蛋白(β2-MG)水平进行检测和比较。结果各组患者骨髓液中miRNA-21、miRNA-15a、miRNA-16表达水平的差异均有统计学意义(F=37.839、419.707、445.998,P0.05)。其中,难治组患者骨髓液中miRNA-21表达水平显著高于其他三组,miRNA-15a、miRNA-16表达水平显著低于其他三组,初治组患者骨髓液中miRNA-21表达水平显著高于缓解组或对照组,miRNA-15a、miRNA-16表达水平显著低于缓解组或对照组,以上差异均有统计学意义(P0.05);直线相关分析显示,MM患者血清β2-MG水平与骨髓液中miRNA-21表达水平呈正相关关系(r=0.599,P0.05),与miRNA-15a表达水平(r=-0.829)、miRNA-16表达水平(r=-0.698)呈负相关关系(P0.05),多元线性回归分析结果显示,MM患者的血清β2-MG水平与骨髓液中miRNA-15a表达水平呈负相关关系(标化相关系数=-0.976,t=-5.838,P0.05)。结论 MM患者骨髓液中的miRNA-15a、miRNA-16和miRNA-21表达水平与患者对化疗的反应性和肿瘤负荷具有相关性,可用于评价患者病情的进展、预测治疗效果和患者的预后。     

尿液miRNA143和miRNA133a在膀胱癌诊断中的应用

目的探讨尿液中微小RNA143(miRNA143)、微小RNA133a(miRNA133a)相对表达量在膀胱癌诊断中的价值。方法选取膀胱癌患者(膀胱癌组)50例、泌尿系统非肿瘤患者(疾病对照组)60例、体检健康者(正常对照组)60名。采用聚合酶链反应(PCR)检测膀胱癌组术前、术后及疾病对照组、正常对照组尿液miRNA143、miRNA133a的相对表达量。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价尿液miRNA143和miRNA133a诊断膀胱癌的价值。结果膀胱癌组术前尿液miRNA133a、miRNA143的相对表达量明显低于疾病对照组及正常对照组(P0.05),而疾病对照组与正常对照组之间差异无统计学意义(P0.05)。膀胱癌组术后尿液miRNA143和miRNA133a的相对表达量均明显高于术前(P0.05)。不同TNM分期患者尿液miRNA143和miRNA133a的相对表达量差异无统计学意义(P0.05)。ROC曲线分析显示,术前尿液miRNA143相对表达量诊断膀胱癌的最佳临界值为≤0.165,曲线下面积(AUC)为0.827,敏感性为72.7%、特异性为80.8%;尿液miRNA133a相对表达量诊断膀胱癌的最佳临界值为≤0.165,AUC为0.846,敏感性为75.0%、特异性为85.4%;二者联合检测的诊断性能无显著提高。结论膀胱癌患者尿液miRNA143和miRNA133a呈低表达,其或许可作为辅助诊断膀胱癌的生物标志物。     

参附注射液对心肺复苏后大鼠心肌细胞保护作用的研究

目的探讨参附注射液对心肺复苏后大鼠心肌细胞凋亡及bcl-2、bax、NF-κB等蛋白表达的影响,为防治心肌细胞的凋亡提供理论依据.方法 72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、参附治疗组,采用窒息合并冰氯化钾致大鼠心跳骤停-心肺复苏模型,运用免疫组织细胞化学方法观察复苏后不同时间点心肌细胞bcl-2、bax基因的蛋白表达,采用末端标记技术(TUNEL)检测各组心肌细胞的凋亡情况;并在电镜下观察各组心肌细胞超微结构.结果复苏后3 h CK-MB开始升高,复苏后24h明显升高达顶峰,各时相点参附治疗组与模型对照组比较CK-MB显著降低(P＜0.05).复苏后各时相点参附治疗组bcl-2表达明显增强(P＜0.01),而bax表达无明显差异(P＞0.05),参附治疗组NF-κB的表达明显降低(P＜0.05).bcl-2阳性表达率在复苏后24 h达到高峰,参附治疗组阳性表达率明显高于模型组(P＜0.01).各时相点参附治疗组bax表达与复苏模型组比较无显著差异(P＜0.05).在心肺复苏后的不同时段心肌细胞均有凋亡发生.参附治疗组各时相点凋亡细胞阳性指数均明显低于复苏模型组(P＜0.05);而假手术组无明显凋亡现象发生(P＞0.01).超微结构显示参附治疗组心肌损伤较模型组明显减轻,假手术组心肌超微结构正常.结论细胞凋亡参与了心肺复苏后大鼠心肌细胞的损伤,参附注射液可降低NF-κB活性,上调bcl-2蛋白表达,改善心肌细胞的超微结构,抑制细胞凋亡的发生,对心肌细胞具有明显的保护作用.     

食管癌和良性食管疾病患者血浆miRNA-21和miRNA-143检测的临床应用研究

目的探讨血浆微小RNA(microRNA,miRNA)-21,miRNA-143水平在鉴别早期食管癌和良性食管疾病中的临床应用。方法收集27例早期食管癌患者(食管癌组)和25例良性食管疾病患者(良性食管疾病组)的血液及临床资料,并设立健康对照组,采用实时荧光定量PCR(real-time-PCR,RT-PCR)技术检测研究对象血浆miRNA-21,miRNA-143水平的表达,采用电化学发光技术检测血浆CEA和CA72-4水平,探讨两标志物的变化与食管癌和良性食管疾病之间的关系。结果食管癌组血浆miRNA-21,miRNA-143的表达量分别为0.93±0.17和0.27±0.05;两标志物在良性食管疾病组的表达量分别为0.25±0.03和0.99±0.15;两标志物在对照组的表达量分别为0.23±0.03和1.02±0.15。食管癌组miRNA-21,miRNA-143表达量分别与良性食管疾病组比较呈现上调、下调,差异有统计学意义(t=10.87,11.55,均P0.01),与对照组比较呈现上调、下调,差异有统计学意义(t=9.20,9.07,均P0.01)。良性食管疾病组血浆miRNA-21,miRNA-143表达量与对照组比较差异则无统计学意义(t=1.39,1.19,均P0.05)。血浆miRNA-21,miRNA-143分别在食管癌组、良性食管疾病组和对照组的阳性率分别为81.5%(22/27),4.0%(1/25),0(0/24);85.2%(23/27),4.0%(1/25),0(0/24)。食管癌组miRNA-21,miRNA-143阳性率分别与良性食管疾病组和对照组比较增高,差异有统计学意义(X~2=31.59,34.39,均p0.01;x~2=34.42,37.23,均P0.01),良性食管疾病组两标志物水平与对照组比较差异则无统计学意义(X~2=0.980,0.980,均p0.01)。血浆miRNA-21,miRNA-143诊断早期食管癌的敏感度及特异度分别为81.4%,97.9%;85.1%,97.9%。食管癌组miRNA-21,miRNA-143的灵敏度分别与CEA和CA72-4比较明显增高,差异有统计学意义(X~2=12.79,P0.01;x~2=5.33,P0.05;X~2=15.03,P0.01;X~2=6.95,P0.05)。食管癌组miRNA-21,miRNA-143的特异度分别与CEA和CA72-4比较,差异无统计学意义(X~2=1.043,0.000,均P0.05,X~2=1.043,0.000,均P0.05)。采用Spearman相关性分析显示,在食管癌组中,血浆miRNA-21,miRNA-143表达量呈负相关(r=-0.658,P0.01)。在该组中miRNA-21,miRNA-143表达量分别与CEA和CA72-4水平也具有相关性(r=0.607,-0.623,均P0.01;r=0.579,-0.610,均P0.01)。结论通过检测miRNA-21,miRNA-143水平在早期食管癌和良性食管疾病患者血浆中的表达,为早期食管癌的病理诊断提供新的思路。     

血清miRNA-10b和miRNA-34a在子宫内膜异位症患者中的表达及与术后复发关系研究

目的探讨血清微小RNA（miRNA）-10b和miRNA-34a在子宫内膜异位症（EMT）患者中的表达及与术后复发关系。 方法选择就诊于承德医学院附属医院妇科2017年1月~2019年12月子宫内膜异位症患者126例作为观察组；另选择同期健康育龄期女性89例作为对照组。所有EMT患者均随访1年，采用门诊、电话或微信等方式，观察患者术后复发情况。采用实时荧光聚合酶链反应（RT-PCR）法测定血清miRNA-10b和miRNA-34a表达。比较EMT组与对照组血清miRNA-10b和miRNA-34a相对表达量；复发组与未复发组血清miRNA-10b和miRNA-34a相对表达量；采用ROC曲线分析miRNA-10b和miRNA-34a对EMT术后复发预测价值；采用多因素Logistic回归分析EMT术后复发危险因素；采用Pearson分析miRNA-10b和miRNA-34a与术后复发相关性。 结果EMT组血清miRNA-10b和miRNA-34a相对表达量高于对照组（P＜0.05）。随访1年，均完成随访，复发29例，未复发97例。复发组血清miRNA-10b和miRNA-34a相对表达量高于未复发组（P＜0.05）。经ROC曲线分析显示，miRNA-10b预测EMT术后复发中，敏感度为68.75%，特异度为69.23%；miRNA-34a预测EMT术后复发中，敏感度为66.67%，特异度为57.14%。经多因素Logistic回归分析显示，miRNA-10b和miRNA-34a为影响EMT术后复发危险因素。经Pearson分析，miRNA-10b和miRNA-34a与术后复发呈正相关。 结论血清miRNA-10b和miRNA-34a在EMT患者中表达升高，与术后复发呈正相关，且为影响EMT术后复发危险因素，及对EMT术后复发预测敏感度和特异度良好。     

冠心病患者血清同型半胱胺酸与微小RNAs的相关性分析

目的分析冠心病患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、微小RNA-1(miRNA-1)、微小RNA-126(miRNA-126)和微小RNA-208(miRNA-208)的相关性,以探寻冠心病新的生物标记物,更好地指导临床诊治。方法选取2013年1月至2015年1月入院治疗确诊的冠心病患者380例(试验组),另选取同期入院检查的非冠心病患者200例(对照组),提取血浆总RNA,设计特异性引物检测miRNA-1、miRNA-126和miRNA-208在两组人群中的表达情况。观察分析血浆中循环miRNAs作为冠心病检测指标的指导意义。结果试验组血清Hcy、miRNA-1与miRNA-126水平高于对照组,miRNA-208水平低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);且试验组中冠状动脉狭窄程度积分(Gensini积分)大于25分者上述各指标均高于Gensini积分小于或等于25分者,差异均有统计学意义(P0.05)。血清Hcy、miRNA-1、miRNA-126水平与Gensini积分呈正相关(P0.05),血清Hcy水平与miRNA-1、miRNA-126水平同样呈正相关(P0.05)。结论血清Hcy、miRNA-1、miRNA-126、miRNA-208均可作为评价冠心病的生物标记物。除miRNA-208,各指标水平随冠状动脉狭窄程度的加重而升高。     

联合检测血清Myo、cTnI、GDF-15及miRNA-499对AMI的诊断价值

目的探讨联合检测血清生长分化因子-15(GDF-15)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌红蛋白(Myo)、微小RNA-499(miRNA-499)在急性心肌梗死(AMI)鉴别诊断中的临床价值。方法选取2014年4月至2016年8月我院确诊的AMI患者80例(AMI组)、80例不稳定型心绞痛患者(UAP组)和稳定型心绞痛患者80例(SAP组),选取80例健康体检对象作为对照组,检测并比较4组研究对象的血清GDF-15、c TnI、Myo、miRNA-499水平,并通过绘制ROC曲线分析各项指标及联合应用诊断AMI的临床价值。结果 AMI组患者的血清GDF-15、cTnI、Myo、miRNA-499水平均显著的高于UAP组、SAP组和对照组,差异具有统计学意义(P0.05);UAP组、SAP组患者的血清GDF-15、cTnI、Myo、miRNA-499水平均显著的高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);治疗后AMI组患者的血清GDF-15、cTnI、Myo、miRNA-499水平均较本组治疗前显著的降低P0.05);血清GDF-15、cTnI、Myo、miRNA-499水平联合检测用于鉴别诊断AMI的灵敏度为96.42%、特异度为91.75%、漏诊率为3.58%、误诊率为8.52%、AUC值为0.933。结论血清GDF-15、cTnI、Myo、miRNA-499水平联合检测可以作为AMI早期诊断的一种手段,具有较高的临床实用价值。     

血清HE4与miRNA-21在上皮性卵巢癌中的表达及相关性研究

目的探讨人附睾蛋白4(HE4)和微小RNA-21(miRNA-21)在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达变化及相关性研究。方法选取80例初诊EOC患者(试验组)、40例良性卵巢肿瘤患者(良性组)和30例体检健康者(对照组)作为研究对象,采集静脉血进行血清HE4和miRNA-21水平检测,进行各组间血清HE4和miRNA-21表达的比较,分析EOC患者血清HE4和miRNA-21与临床病理特征的关系,采用Pearson分析研究血清HE4和miRNA-21间的相关性。结果试验组血清HE4水平和miRNA-21相对表达量明显高于良性组和对照组,差异有统计学意义(P0.05);试验组患者临床Ⅲ～Ⅳ期、浆液型和有淋巴结转移患者血清HE4水平和miRNA-21相对表达量显著高于临床0～Ⅱ期、黏液型和无淋巴结转移患者(P0.05)。Pearson分析发现血清HE4和miRNA-21间呈正相关性,r值为0.264,差异有统计学意义(P0.05)。结论血清HE4和miRNA-21的高表达与EOC的发生发展密切相关,且二者间存在正相关性,可作为EOC诊断、转移和预后的生物学指标。     

急性胰腺炎患者外周血miRNA-16和miRNA-192表达及其与病情严重程度的相关性

目的:探讨急性胰腺炎(AP)患者外周血miRNA-16和miRNA-192表达及其与病情程度的相关性。方法:选取广东省第二人民医院2019年1月至2021年1月诊治的AP患者91例为研究对象,按照病情程度分为轻中度组(n=57)和重度组(n=34);另选同期健康体检者为对照组(n=50)。受试者入院24h内采集外周静脉血,分离血清后采用实时荧光定量PCR法测定血清miRNA-16和miRNA-192表达程度。比较三组急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)、miRNA-16和miRNA-192表达量;采用ROC曲线分析miRNA-16和miRNA-192在AP中的诊断价值;采用Pearson分析miRNA-16和miRNA-192与APACHEⅡ评分相关性。结果:轻中度组和重度组APACHEⅡ评分明显高于对照组,且重度组APACHEⅡ评分明显高于轻中度组,P均0.05。轻中度组和重度组血清miRNA-16和miRNA-192相对表达量明显高于对照组,且重度组血清miRNA-16和miRNA-192相对表达量明显高于轻中度组,P均0.05。ROC曲线分析显示,miRNA-16和miRNA-192诊断AP的灵敏度分别为67.27%和72.22%,特异度分别为63.89%和72.97%。miRNA-16和miRNA-192与APACHEⅡ评分均呈明显线性正相关,P均0.05。结论:AP患者外周血miRNA-16和miRNA-192均呈高表达,且与病情严重程度呈明显线性正相关。     

血清miRNA-21、miRNA-126异常表达对慢性心力衰竭患者的临床意义

目的探讨循环血清miRNA-21、miRNA-126检测对慢性心力衰竭患者的临床意义。方法选取该院收治的慢性心力衰竭患者128例(CHF组)为研究对象(NYHA心功能Ⅱ级40例,NYHA心功能Ⅲ级46例,NYHA心功能Ⅳ级42例),另选择同期100例体检中心健康患者为对照组,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清miRNA-21和miRNA-126水平,同时测定CHF患者B型脑钠肽(BNP)、左室舒张末内径(LVEDD)和左室射血分数(LVEF),并进行统计学分析。结果 CHF组患者血清miRNA-21和miRNA-126水平显著高于健康对照组(P0.05);心功能Ⅳ级患者miRNA-21水平显著高于心功能Ⅱ级、Ⅲ级患者(P0.05),心功能Ⅲ级患者miRNA-21显著高于心功能Ⅱ级患者(P0.05);心功能Ⅳ级患者miRNA-126水平显著高于心功能Ⅱ级、Ⅲ级患者(P0.05),但是心功能Ⅱ级、Ⅲ级患者间比较差异无统计学意义(P0.05);CHF患者血清miRNA-21水平与BNP(r=0.792,P=0.001)、LVEDD(r=0.618,P=0.003)呈正相关,与LVEF呈负相关(r=-0.521,P=0.010),血清miRNA-126水平与BNP呈正相关(r=0.753,P=0.001),与LVEDD(r=0.207,P=0.096)、LVEF(r=-0.159,P=0.176)无明显相关性;血清miRNA-21(RR:2.158,95%CI:1.681~3.539,P=0.005)和miRNA-126(RR:1.852,95%CI:1.105~2.996,P=0.012)均是CHF的独立危险因素。结论慢性心力衰竭患者血清miRNA-21、miRNA-126水平异常升高,二者可能参与了慢性心力衰竭的发生与进展,是其独立危险因素。     

血红素氧合酶对复苏后心功能不全的保护作用

目的 探讨诱导血红素氧合酶表达对复苏后心肌损伤的保护作用,为复苏后心功能不全探索新的治疗手段.方法 采用窒息法制作大鼠心跳骤停与心肺复苏(CPR)模型.实验动物分为4组:假手术组、CPR组、血晶素组(Hemin组)、血晶素+锌原卟啉组(Hemin+ZnPP组),各复苏组又分复苏后6 h及24 h 2个亚组.各实验组记录血流动力学资料;测定血清肌酸肌酶同功酶(CPK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量;测定心肌组织匀浆HO-1含量;观察心肌超微结构变化.对结果进行方差分析.结果 各复苏组复苏后平均动脉压(MBP)显著低于复苏前(均P＜0.05),但组间比较差异无统计学意义.CPR组、Hemin+ZnPP组复苏后各时相点dp/dt40值、-dp/dt值均显著低于复苏前(P＜0.05),但Hemin组复苏前后dp/dt40值无显著性变化,-dp/dt值仅复苏后0.5 h和1 h低于复苏前(P＜0.05);Hemin组复苏后各时相点dp/dt40值、-dp/dt值均高于其他两组(P＜0.05).复苏后6h及24 h血清CPK-MB、LDH水平,Hemin组均低于CPR组及Heroin+ZnPP组(P＜0.05),但CPR组和Hemin+ZnPP组两组之间比较差异无统计学意义.Hemin组复苏后6 h心肌超微结构完整性明显优于CPR组及Hemin+ZnPP组.复苏后6 h及24 h心肌组织匀浆HO-1水平,Hemin组均高于CPR组及Hemin+ZnPP组(均P＜0.05),但CPR组和Hemin+ZnPP组两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 诱导HO-1表达可有效改善复苏后心功能不全,减轻心肌损伤,保存心肌细胞超微结构的完整性,为复苏后心功能不全的治疗提供了新的手段.     

参附注射液对大鼠心肺复苏后神经元特异性烯醇化酶变化的影响

目的 探讨参附注射液对大鼠心肺复苏后血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、大脑皮层NSE表达及超微结构变化的影响.方法 成年雄性SD大鼠160只,随机分为假手术对照组、复苏组、小剂量参附组(10 ml/kg)和大剂量参附组(20 ml/kg),每组按气管切开后(对照组)或自主循环恢复(ROSC)后(复苏组、参附组)0.5 h、3 h、6 h、12 h和24 h分为5个亚组(n=8).复苏组和参附组采用窒息致大鼠心脏骤停和心肺复苏模型,参附组于复苏开始经静脉加用参附注射液.对照组仅行麻醉、气管切开和血管穿刺.分别于各时间点取血和组织标本,以ELISA法检测血清NSE浓度,免疫组化测定皮层NSE表达,电镜下观察大脑皮层超微结构改变.结果 与对照组比较,复苏组ROSC后各亚组血清NSE含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01);与复苏组比较,小剂量参附组ROSC后6 h、12 h血清NSE含量显著降低(P＜0.05),大剂量参附组ROSC后6h、12 h、24 h血清NSE含量显著降低(P＜0.01).免疫组化显示对照组NSE阳性细胞均维持在较低水平,复苏组ROSC后各时相皮层NSE阳性细胞数均显著高于对照组(P＜0.01);与复苏组相比,小剂量参附组在ROSC后24 h NSE阳性表达显著增加(P＜0.01),大剂量参附组从ROSC后3 h起NSE阳性细胞表达显著增加(P＜0.05或P＜0.01);与小剂量参附组相比,大剂量参附组NSE阳性细胞表达ROSC后6 h、12 h、24h显著增加(P＜0.05或P＜0.01).与复苏组比较,参附组大脑皮层超微结构损害程度明显减轻.结论 参附注射液可促进心肺复苏后大鼠神经元NSE的表达,对脑损伤具有一定的保护作用,大剂量时作用更明显.     

肺癌组织中miRNA-449a的表达及其临床意义

目的探讨miRNA-449a在肺癌细胞中的表达及其临床应用价值。方法收集右江民族医学院附属医院2011年1月1日至2013年6月30日收治的58例肺癌患者作为研究对象,采用逆转录荧光定量聚合酶链反应检测miRNA-449a在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达量,分析miRNA-449a与临床病理特征的关系,并采用荧光电子显微镜观察miRNA-449a模拟物对体外培养肺癌细胞株95D细胞凋亡的影响。结果鳞癌组和腺癌组miRNA-449a平均表达量均明显低于癌旁正常对照组(t=6.712,P0.05;t=4.572,P0.05),其相对表达量与瘤体大小(U=78.412,P=0.012)有关,与患者年龄(U=920.000,P=0.615)、性别(U=800.000,P=0.215)、病理类型(χ2=4.221,P=0.155)和临床分期(U=754.000,P=0.009)无关。与阴性对照组比较,miRNA-449a模拟物可明显促进肺癌细胞的凋亡,且呈剂量依赖性。结论 miRNA-449a在肺癌组织中呈低表达,可诱导肺癌细胞凋亡,发挥抑癌基因的作用,可能成为肺癌早期诊断与治疗的新分子靶标。     

高通量连续性血液滤过技术对脓毒症患者外周血单个核细胞miRNA-146a表达的影响

目的 前瞻性观察高通量连续性血液滤过(HVHF)治疗对严重脓毒症患者免疫功能及其外周血单个核细胞中miRNA-146a表达的影响.方法 选择严重脓毒症患者30例,分为HVHF组及对照组.①在两组治疗过程的0、6、12、24、48 h时相点,分离外周血单个核细胞,提取总RNA,荧光定量PCR法检测miRNA-146a表达量的变化;②两组患者治疗24 h后分离出外周血单个核细胞于体外培养,以LPS刺激,在4、8、12、24、48 h时相点检测单个核细胞中miRNA-146a表达量的变化;ELISA法检测单个核细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-10水平.结果 ①两组患者miRNA-146a表达量较治疗前均有所下调,但HVHF组较对照组下调明显(P<0.05);②HVHF组孵育的细胞在LPS刺激下各个时相TNF-α、IL-6的分泌水平均明显高于对照组(P<0.05);HVHF组TNF-α、IL-6在12 h分泌达高峰,对照组在8 h即达高峰;两组细胞IL-10分泌水平均持续升高,两组间各时相点IL-10分泌水平比较差异无统计学意义(P>0.05);③HVHF组孵育的细胞在LPS刺激下miRNA-146a表达量较孵育前有所升高,在12 h升高最明显(P<0.05),对照组在4、8 h时miRNA-146a表达都处于高水平状态,明显高于同时相的HVHF组(P<0.05).结论 HVHF通过大量清除脓毒症患者血循环中的炎症因子及促炎介质,从而下调部分miRNA-146a的表达水平,减轻严重脓毒症患者外周血单个核细胞的免疫抑制状态,使部分免疫功能得到恢复,可能是HVHF参与机体免疫内稳状态重建的作用机制之一.