甘露糖结合凝集素缺失与自身免疫病

甘露糖结合凝集素又称甘露糖结合蛋白（MBP），是Ca^2 依赖型（C－型）动物凝集素家族一员。MBL可通过不同机制激活补体参与补体系统的经典与替代途径，又称凝集素途径。本文综述了近年来MBL结构与功能、MBL缺失等的研究进展，重点阐述了MBL缺失与自身免疫病的关系。     

甘露糖结合凝集素基因多态性与结核病易感性关系的研究

目的 了解甘露糖结合凝集素基因多态性与新疆喀什地区结核病易感性的关系。方法 选取2015年12月~2017年12月在新疆喀什地区收集肺结核患者193例血液样本,收集同时期健康体检人员142例血液样本,采用试剂盒法提取全血基因组DNA,采用英国LGC公司生产的基于竞争性等位基因特异性PCR（KASP）技术的SNPline基因分型平台对选定的MBL基因SNP位点rs7096206进行分型,获得该位点的基因型频率和等位基因频率。结果 MBL基因rs7096206位点的三个基因型CC、GC、GG在结核患者组和对照组中的分布,差异无统计学意义（P＞0.05）,但从等位基因在两组间的分布上看,突变型碱基G在结核患者组中的频率高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 MBL基因rs7096206多态性位点与新疆结核病易感性存在关联,携带G碱基比携带C碱基具有更高的结核病发病风险。     

MBL基因不同单倍体型启动活性的差异研究

甘露糖结合凝集素（mannose-binding lectin，MBL）是Ca^2＋依赖型（C型）凝集素家族一员，是固有免疫系统的重要成员。血清MBL水平低下导致调理吞噬缺损，使机体易患感染性疾病，还可明显加重疾病的症状，影响病程和转归。     

幼年特发性关节炎患儿甘露糖结合凝集素基因启动子区SNP研究

目的探讨甘露糖结合凝集素(MBL)基因启动子区单核苷酸多态性(SNP)与幼年特发性关节炎(JIA)易感性的关系。方法对50例JIA患儿和48名正常健康儿童MBL基因启动子区SNP位点-550(G/C,称H/L等位基因)和-221(G/C,称X/Y等位基因)采用等位基因特异性PCR法(PCR-SSP)检测,并分析其单元型及基因型频率。结果共检出HY、LY和LX三种单元型,在JIA患儿中的频率依次为0.540、0.270和0.190,而在正常儿童中频率分别为0.594、0.292和0.114;两组间各单元型比较均无显著性差异。结论MBL基因启动子区单核苷酸多态性与JIA无相关性。     

中国白族人群MBL基因SNP及其单倍型与基因型的研究

目的：研究中国云南白族人甘露聚糖结合凝集素（MBL）基因单核苷酸多态性（SNP）及其单倍型与基因型。方法：对MBL基因启动子区SNP位点-550G／C（称H／L等位基因）、-221C／G（X／Y）、＋4C／T（P／Q）已明确的白族DNA样本，采用序列特异性引物．多聚酶链反应技术检测结构基因第一外显子点突变CGT52TGT、CCC54GAC和CCA57CAA（分别称为D、B、C等位基因，野生型即A），并分析MBL基因的单倍型与基因型。结果：只检出GGC54GAC点突变，其频率为0．100；检出的5种单倍型及其频率是：HYPA0．250、LXPA0．107、LYQA0．407、LYPA0．135、LYPB0．100；各基因型及其频率为：LYPA／LYPA0．043、LXPA／LYQA0．143、LYPA／LYPB0．014、HYPA／LYQA0．086、LYPA／LYQA0．157、HYPA／LYPA0．014、LYPB／LYQA0．143、HYPA／LYPB0．043、LXPA／LXPA0．014、HYPA／LXPA0．043、LYQA／LYQA0．143、HYPA／HYPA0．157。结论：中国白族人群MBL基因存在GGC54GAC点突变，单倍型以LYQA和HYPA为主，基因型则多见LYPA／LYQA、HYPA／HYPA、LX—PA／LYQA、LYPB／LYQA和LYQA／LYQA。     

汉族儿童MBL基因启动子-221位点、外显子I区SNP和基因单体型分析

研究浙江省汉族儿童MBL基因启动子-221位点和外显子I区单核苷酸多态性(SNP)、基因单体型与血浆MBL水平的关系。血浆MBL浓度的检测采用ELISA法,MBL基因SNP分析采用序列分析法,基因单体型分析采用SHEsis软件,统计分析采用SPSS软件11.0版。结果105例汉族儿童中MBL基因启动子区-221位点X/Y和Y/Y基因型分别占19%和81%,该位点变异频率为0.095;外显子I基因型A/A、A/B和B/B分别占69.5%、27.6%和2.9%,B型变异频率为0.167。基因单体型有YA、YB、XA三种,其中以YA最多见,频率为0.741,其次是YB,频率为0.164。血浆MBL浓度范围为3~6 025 ng/ml,中位数为1057 ng/ml,外显子A/A型的MBL浓度显著高于A/B型,后者又显著高于B/B型;而启动子Y/Y型的MBL浓度比X/Y型高。本研究中汉族儿童MBL基因外显子I区+230位点的变异频率为0.167,外显子I区+230位点变异可导致血浆MBL水平明显下降。     

儿童巨细胞病毒感染与甘露聚糖结合凝集素表达相关性研究

目的探讨甘露聚糖结合凝集素（MBL）基因多态性及血浆蛋白水平与儿童巨细胞病毒（HCMV）感染的相关性。方法收集2007年3～11月在浙江大学医学院附属儿童医院诊断为HCMV感染的患儿作为HCMV感染组,选择同期行健康体检的儿童作为对照组。对两组行MBL基因检测和分型,并对HCMV感染组进行随访,分别测定其急性期和恢复期血浆MBL蛋白水平。分别比较两组基因变异频率和血浆MBL蛋白水平。结果HCMV感染组纳入104例,对照组纳入105例;HCMV感染组有50例患儿进行随访,HCMV感染组MBL基因启动子区-550位点的L型变异频率明显高于对照组（56.7%vs34.3%,P=0.001）,野生单体基因型HYPA的频率明显低于对照组（47.6%vs62.8%,P=0.002）,完整基因型中高水平表达基因型（YA/YA）的频率低于对照组（41.3%vs60.0%,P=0.007）,而低水平表达基因型（YA/XA,YA/YB,XA/XA）的频率高于对照组（52.9%vs29.5%,P=0.001）。HCMV感染组急性期和恢复期血浆MBL蛋白水平均低于对照组（P=0.019和0.000）。HCMV感染组急性期血浆MBL蛋白水平高于恢复期（P=0.000）。结论MBL基因多态性导致的血浆MBL蛋白水平低下与儿童HCMV感染相关,提示MBL可能对儿童HCMV感染具有保护作用。     

联合应用配体和单克隆抗体亲和层析纯化人血浆天然MBL蛋白

目的优化从人血浆分离纯化天然甘露聚糖结合凝集素（MBL）的方法。方法联合应用甘露聚糖-Sepharose 4B层析柱和抗人MBL-CRD单克隆抗体-Sepharose 4B层析柱，3次上柱亲和层析分离，分别用EDTA、D-甘露糖、Gly-HCl（pH2．4）溶液洗脱结合蛋白。以SDS-PAGE、Western blot和ELISA等技术鉴定纯化产物。结果所获纯化MBL为Mr28000和Mr32000肽链构成的功能性寡聚体，其纯度较高，可与配体甘露聚糖结合并有效凝集酵母菌，还能与U937细胞胶凝素受体结合。结论联合使用配体亲和层析和单克隆抗体亲和层析从血浆中分离纯化MBL，获得高纯度、高活性的天然MBL蛋白。     

中国蒙古族人MBL基因启动子区SNP的研究

目的 研究中国蒙古族人群甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因启动子区单核苷酸多态性(SNP)。方法 抽提人外周血白细胞基因组DNA，建立SSP-PCR及分子灯塔实时荧光PCR技术，检测MBL基因启动子区SNP位点-550(G／C，称H/L等位基因)、-220(G／C，X／Y等位基因)和 4(C／T，P／Q等位基因)，分析其单倍型及基因型频率。结果 从82人中检出等位基因型LYP／LYP4例(4．9％)，HYP／LYQ5例(6．1％)，LYP／LYQ35例(42．9％)，LXP／LXP1例(1．2％)，LYQ／LYQ11例(13．4％)，LXP／LYQ14例(17．1％)，HYP／LYP2例(2．4％)，HYP／LXP1例(1．2％)，HYP／HYP9例(11．0％)。结论 中国蒙古族人群MBL基因启动子区SNP等位基因型以LYP／LYQ、LXP／LYQ、LYQ／LYQ和HYP／HYP为主。     

甘露糖结合凝集素缺失与自身免疫病

甘露糖结合凝集素又称甘露糖结合蛋白 (MBP) ,是Ca2 + 依赖型 (C 型 )动物凝集素家族一员。MBL可通过不同机制激活补体参与补体系统的经典与替代途径 ,又称凝集素途径。本文综述了近年来MBL结构与功能、MBL缺失等的研究进展 ,重点阐述了MBL缺失与自身免疫病的关系     

甘露聚糖结合凝集素缺损与自身免疫性疾病

甘露聚糖结合凝集素(MBL)系胶原凝集素家族成员,是天然免疫系统中的重要分子。血清MBL浓度受其结构基因第一外显子几个点突变的影响和启动子区多态性的调控。MBL基因突变使其血清浓度降低,除导致调理吞噬缺损外,还与自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征、皮肌炎、克隆病、动脉炎等有关。     

甘露聚糖结合凝集素与妊娠期糖尿病的研究进展

甘露聚糖结合凝集素(mannose binding lectin,MBL)也曾称为甘露聚糖结合蛋白(mannan binding protein)是一种钙离子依赖的(C型)血清凝集素蛋白,也是第一个被发现的具有防御功能的C型凝集素。MBL作一种急性时相蛋白由肝脏合成分泌,是宿主体内非特异免疫最重要的免疫分子。一直以     

蒙古族与回族人群MBL结构基因型及其与血浆蛋白浓度的关系

目的：分析内蒙古自治区蒙古族人群和宁夏回族自治区回族人群血浆甘露聚糖结合凝集素（MBL）的结构基因型,并探讨其与血浆蛋白浓度的关系。方法：用ELISA法检测血浆MBL浓度,用序列分析法分析MBL基因外显子1区52、54和57密码子的单核苷酸多态性;统计分析采用SPSS软件11.0版,遗传学分析采用SHEsis软件。结果：79例蒙古族人和69例回族人血浆MBL浓度中位数分别为1686和1909ng/ml,两组间无显著性差异（Z=0.63,P=0.4）。蒙古族人群外显子1A/A型、A/B型和B/B型分别占62.0%、35.4%和2.5%,而回族人群A/A型、A/B型和B/B型分别占58.0%、30.4%和11.6%,蒙古族和回族人群＋230位点变异频率分别为0.203和0.268,两者变异频率无显著性差异（χ^2 1.772,P=0.183）。所有样本无C或D型外显子发现。A/A型外显子的血浆MBL浓度显著高于A/B型,后者又显著高于B/B型（χ^2 86.526,P〈0.01）。结论：蒙古族和回族人群MBL基因只有A/A,A/B和B/B3种外显子基因型,A/A型结构基因MBL浓度显著高于A/B型,又显著高于B/B型。     

128甘露糖结合凝集素缺失与自身免疫病

甘露糖结合凝集素又称甘露糖结合蛋白(MBP),是Ca2+依赖型(C-型)动物凝集素家族一员.MBL可通过不同机制激活补体参与补体系统的经典与替代途径,又称凝集素途径.本文综述了近年来MBL结构与功能、MBL缺失等的研究进展,重点阐述了MBL缺失与自身免疫病的关系.     

湖北省汉族人群甘露糖结合凝集素基因启动子区多态性与SLE关联性的研究

甘露糖结合凝集素 (mannose bindinglectin ,MBL)是一种由肝脏合成和分泌的急性期蛋白 ,可激活补体 ,溶解病原菌〔1〕,并具有调理吞噬作用。是参与非特异性免疫防御的重要分子。MBL基因启动子区具有两个多态性位点 :H L( 5 5 0bp ,G C)和X Y( 2 2 1bp ,C G) ,可影响MBL基因的转录 ,降低血清中MBL的浓度。已证明启动子的单元型HY、LY、LX分别与血清中高、中、低水平的MBL相关〔2〕。系统性红斑狼疮 (SLE)的发病与抗原 抗体复合物的清除缺陷有关。由于MBL基因启动子区的多态性可影响MBL的基因转录及其在血清中的浓度 ,从而影…     

儿童肺炎支原体感染检测MBL和CRP的意义

探讨肺炎支原体（MP）感染患儿血清甘露糖结合凝集素（MBL）和C-反应蛋白（CRP）水平变化的意义。用EL／SA和速率散射比浊法分别检测患儿血清MBL和CRP水平。结果显示,57例MP感染患儿MBL水平（3．64±1．72mg／L）和CRP（21．44±15．02mg／L）比对照组（2．18±1．05mg／L和2．76±1．81mg／L）显著增高（P〈0．001）。年龄小于8岁患儿MBL水平低于年龄大于8岁患儿,其中8例反复呼吸道感染患儿MBL水平（2．02±1．21mg／L）显著低于其它患儿（3．95±1．63mg／L,P〈0．01）。患儿恢复期CRP水平明显降低。结果提示,血清MBL和CRP水平可作为监测MP感染患儿天然免疫功能的指标,动态检测有助于评价疗效。     

广东地区汉族人MBL基因点突变的研究

目的：研究我国汉族人群甘露聚糖结合凝集素（MBL）结构基因外显子1第52、54、57位密码点突变（CGT52TGT、GGC54GAC和GGA57GAA）。方法：收集广东地区汉族普通人群的血标本，提取白细胞基因组DNA，以PCR扩增目的基冈片段，应用荧光探针杂交可视技术检测其MBL基因的点突变。结果：从202份样本中，检出GGC54GAC点突变纯合子6例和杂合子44例（等位基因频率为0．139），GGA57GAA点突变杂合子1例（频率为0．002），未发现CGT52TGT点突变（频率为0）。结论：广东地区汉族人群MBL基因点突变的频率较高，为防治MBL缺损病提供了一定的实验依据。     

旋毛虫钙网蛋白对补体甘露糖结合凝集素途径活化的影响?

为研究旋毛虫感染的致病机制,探讨旋毛虫钙网蛋白对补体凝集素途径活化的影响,本文首先通过ELISA和Far western blot方法检测重组旋毛虫钙网蛋白(recombinant Trichinella spiralis calreticulin,rTs-CRT)与甘露糖结合凝集素(mannose binding lectin,MBL)的相互作用情况,随后采用ELISA法研究rTs-CRT对血清中的MBL以及重组MBL分子与甘露糖的结合的抑制作用,最后,研究这种抑制效果是否会抑制补体凝聚素途径的活化。ELISA及Far western blot结果证实rTs-CRT可结合MBL分子,且二者的结合可抑制血清以及重组MBL分子结合甘露糖。同时,这种抑制作用会减弱补体凝集素途径活化后C4b的沉积。结果表明,rTs-CRT可通过结合补体MBL抑制其识别甘露糖,进而减弱补体凝集素途径的活化。     

抗人甘露聚糖结合凝集素(MBL)单克隆抗体的制备、鉴定与检测方法的建立

目的 制备抗甘露聚糖结合凝集素(MBL)的单克隆抗体(McAb),建立免疫学检测方法.方法 以纯化MBL为抗原,免疫Ualb/c小鼠,制备单克隆抗体,鉴定其特性,建立并验证夹心ELISA定量检测法.结果 筛选出2株稳定分泌抗MBL的单抗杂交瘤细胞株,免疫球蛋白亚类均为IgG1.两单抗间抑制率＜50%,结合位点不同两单抗特异识别MBL.选择包被抗体B10浓度为8μg/mL,酶标抗体B3稀释度为1:500,建立夹心EIJSA定量检测法.该法检出范围为1～100 μg/mL,与其他抗原无交叉反应.重复性试验的批内批间变异均小于10%,回收率在101%～103%之间,cv小于7%.检测结果与国外试剂盒比较无显著差异.结论 制备的抗MBL单克隆抗体可用于MBL的免疫学检测.     

人甘露糖结合凝集素在小鼠肝脏细胞内表达

目的：在小鼠肝脏组织中表达人甘露糖结合凝集素（mannose-binding lectin，MBL）。方法：采用PCR方法从pGEMT-MBL质粒中扩增人MBLcDNA序列，克隆人pUC19载体中，限制性酶切鉴定及测序正确后，将MBLcDNA克隆人真核表达载体pcDNA3质粒中，构建成pcDNA3-MBL质粒，经尾静脉大容量快速注射pcDNA3-MBL质粒20μg，8h后处死小鼠，Western Blot方法检测小鼠肝脏组织和血清中人MBL，免疫组织化学方法检测小鼠肝脏组织中人MBL的表达情况。结果：成功扩增出人MBLcDNA序列并构建克隆载体pUC19-MBL，测序结果正确，成功构建pcDNA3-MBL真核表达载体。小鼠尾静脉注射pcDNA3-MBL质粒后8h，免疫组化检测证实肝细胞中有人MBL表达，Western blot方法检测发现血清和肝脏组织中出现人MBL蛋白。结论：真核表达载体pcDNA3-MBL裸质粒DNA静脉注射可以在小鼠肝脏中大量表达人MBL，并分泌人血，为临床纠正先天性低MBL患者的易感染状态提供了新的思路。