酪萨维片质量标准及药效学研究

目的建立酪萨维片的质量标准,并对其主要药效学进行研究。方法采用TLC法对酪萨维片中蔷薇红景天进行定性鉴别;采用HPLC法同时测定蔷薇红景天中红景天苷和酪萨维的含量。采用小鼠负重游泳、常压缺氧、耐高温和耐低温实验,观察酪萨维片的抗疲劳和抗应激作用;通过小鼠肿瘤抑制率实验,观察酪萨维片的抗肿瘤活性;采用碳粒廓清实验、绵羊红细胞致小鼠溶血素抗体生成法和小鼠外周血液T淋巴细胞百分计数,观察酪萨维片对荷瘤小鼠免疫功能的作用。结果 TLC鉴别中,蔷薇红景天特征斑点清晰,分离度良好;含量测定中,红景天苷在0.0601~0.601μg与峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.9%,RSD为1.7%;酪萨维在0.0501~0.501μg与峰面积线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为100.9%,RSD为1.4%。酪萨维片能够显著延长小鼠在负重游泳、常压缺氧和高温条件下的存活时间,提高小鼠低温条件下存活率;酪萨维片对H22荷瘤小鼠的抑制率为31.1%~55.4%;酪萨维片明显增强荷瘤小鼠网状内皮系统吞噬功能,提高半数溶血值,增加小鼠外周血液中T淋巴细胞百分比。结论本方法简便易行,专属性强,可用于酪萨维片的质量控制;酪萨维片可增强小鼠抗疲劳、抗应激能力,具有抗肿瘤作用,可增强荷瘤小鼠细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫功能。     

HPLC法测定复方红景天口含片中红景天苷和酪醇的含量

目的:建立测定复方红景天口含片中红景天苷和酪醇含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为AgilentTC-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(8.5∶91.5),流速为1.0mL·min-1,检测波长为275nm。结果:红景天苷、酪醇的进样量分别在0.642～5.136μg(r=0.9997)、3.600～36.000μg(r=0.9991)范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;平均回收率分别为100.29%、99.46%,RSD分别为1.69%、2.25%(n=9)。结论:本方法简便、快速、重复性好,可用于复方红景天口含片的质量控制。     

高效液相色谱法测定红景天中酪萨维含量

目的建立红景天中酪萨维含量测定方法。方法采用高效液相色谱（HPLc）法。色谱柱为KromasilC19柱（150mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-7K（50：50）,检测波长为270nm,柱温为室温,流速为1．0mL／min。结果酪萨维进样量在5．2～52Ixg范围内与峰面积线性关系良好（r=0．9998）,平均加样回收率为98．60％,RSD=1．54％（n=6）。结论所建立的HPLC法操作简便、快速,灵敏度高,结果准确可靠,专属性强,重现性好,可用于红景天药材的质量控制。     

RP-HPLC法同时测定红景天口服液中红景天苷和酪醇的含量

目的建立反相高效液相色谱法同时测定红景天口服液中红景天苷和酪醇的含量。方法采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-水(体积比为20∶80)为流动相;柱温:30℃;检测波长:275 nm;流速:1.0 mL.min-1。结果红景天苷和酪醇分别在0.048~0.960 g.L-1(r=0.999 9,n=6)和0.013~0.390 g.L-1(r=1.000 0,n=6)内线性关系良好;平均回收率(n=9)分别为95.5%(RSD=1.3%)和95.2%(RSD=1.6%)。结论本方法可用于红景天口服液的质量控制。     

HPLC法同时测定大株红景天中红景天苷、酪醇和没食子酸的含量

目的建立同时测定大株红景天中红景天苷、酪醇和没食子酸含量的方法。方法采用HPLC法。色谱柱为Inertsil ODS-SP柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-体积分数0.03%磷酸水溶液(体积比7∶93);检测波长为220 nm;流速为1.0 mL.min-1。结果红景天苷、酪醇和没食子酸质量浓度分别在4.100~121.9 mg.L-1(r=0.999 9,n=6)、1.10~31.9 mg.L-1(r=0.999 8,n=6)、2.00~60.7 mg.L-1(r=0.999 9,n=6)内与峰面积呈良好的线性关系。平均回收率(n=9)分别为99.1%、98.9%和103.0%,RSD分别为3.0%、2.1%和0.8%。结论本方法快捷、简便,结果准确、可靠、重复性好,可作为大株红景天药材中红景天苷、酪醇和没食子酸的测定方法。     

HPLC测定心脑欣滴丸中红景天苷和酪醇含量

目的建立HPLC同时测定心脑欣滴丸中红景天苷和酪醇含量的方法,为科学评价和有效控制心脑欣滴丸提供依据。方法采用WondasiL C18（4.6×250mm,5μm）色谱柱,以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,流速为1mL·min-1,检测波长275nm,柱温25℃。结果红景天苷、酪醇均能达到基线分离,线性范围分别为：25~400μg·mL-1（R2=1）,2.7~43.2μg·mL-1（R2=1）,平均回收率分别是99.82%（RSD=1.8%,n=6）,100.57%（RSD=2.5%,n=6）。结论该方法简单、准确度高、重复性好可用于测定心脑欣滴丸中红景天苷和酪醇的含量,可为该药的质量评价提供参考。     

高效液相色谱法测定清新胶囊中红景天苷和酪醇的含量

目的:建立用高效液相色谱法测定清新胶囊中红景天苷和酪醇含量的方法。方法:色谱柱:安捷仑ZORBAX Stable Bound(50mm×4．6mm,1．8μm);流动相:甲醇-乙腈-水(6．5:3．5:90),流速0．8 ml·min-1,检测波长275 nm,柱温30℃。结果:红景天苷在0．11～1．59μg,酪醇在0．03～0．39μg范围内呈现良好的线性关系,相关系数分别为r1=0．999 9和r2= 0.999 9。平均回收率为红景天苷101．0％,酪醇99.6％,RSD分别为1．2％,2．0％。结论:谈方法简便,快速,结果准确可靠,可用于该制剂质量控制。     

RP-HPLC法测定新扶正除疫颗粒中红景天苷和虎杖苷的含量

目的:建立测定新扶正除疫颗粒中红景天苷和虎杖苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为GRACE Alltima TMC 18,流动相为甲醇-水(15∶85,V/V,红景天苷)、乙腈-水(23∶77,V/V,虎杖苷),流速为1.0 m L/min,检测波长为275 nm(红景天苷)、306 nm(虎杖苷),柱温为25℃,进样量为10μL。结果:红景天苷和虎杖苷检测进样量线性范围分别为0.99~10.89μg(r=0.999 8)、0.046~1.196μg(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;加样回收率分别为96.31%~99.44%(RSD=1.20%,n=6)、95.96%~99.73%(RSD=1.42%,n=6)。结论:该方法操作简单方便、结果准确可靠,适用于测定新扶正除疫颗粒中红景天苷和虎杖苷的含量。     

HPLC法测定复方红景天胶囊中红景天苷和紫丁香苷的含量

目的:建立测定复方红景天胶囊中红景天苷和紫丁香苷含量的HPLC法。方法:采用Phenomenex C18(250 mm×4.6mm,10μm)色谱柱测定红景天苷的含量,流动相为甲醇-水(10∶55),流速1.0 mL.min-1,检测波长225 nm,柱温30℃;采用DiscoveryC18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱测定紫丁香苷的含量,流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱[0～35 min,A-B(6∶94);35～50 min,A-B(60∶40);50～60 min,A-B(6∶94)],流速1.0 mL.min-1,检测波长265 nm,柱温35℃。结果:红景天苷进样量在0.115～0.920μg(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均回收率(n=5)为98.53%(RSD=1.1%);紫丁香苷进样量在0.0643～0.515μg(r=0.9999)范围内线性关系良好,平均回收率(n=5)为99.06%(RSD=0.74%)。结论:本方法操作简便,结果准确可靠,重复性好。     

柱层析预处理RP-HPLC法测定女贞子中红景天苷的含量

目的:建立女贞子中红景天苷含量测定的RP-HPLC法。方法:样品溶液经大孔树脂和聚酰胺柱层析纯化,采用Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇∶水(20∶80),流速0.4 mL/min,检测波长220 nm。结果:红景天苷在1~80μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 9),高、中、低浓度(40、10、5μg/mL)加样回收率分别为(101.4±1.52)%(、95.6±1.45)%、(100.5±2.18)%(n=5)。浓度为80、40、10μg/mL的红景天苷日内RSD分别为0.28%、0.17%、0.48%(n=5);日间RSD分别为0.56%、0.06%、0.12%(n=5)。稳定性的RSD=1.64%,表明红景天苷在24 h内稳定。应用该法测定女贞子中红景天苷的含量为0.718 mg/g。结论:本法简便、快捷、准确,适用于女贞子中红景天苷的含量测定。     

HPLC法同时测定复方紫草颗粒中咖啡酸四聚体和丹酚酸B的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定复方紫草颗粒中咖啡酸四聚体和丹酚酸B含量的方法。方法:色谱柱为YMC-PackODS-AC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%磷酸水(40∶60),流速为1.0mL·min-1,检测波长为252nm,柱温为室温,进样量为10μL。结果:咖啡酸四聚体、丹酚酸B的进样量分别在0.065～1.82、0.205～5.74μg范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.9996、0.9997);平均回收率分别为98.72%(RSD=3.27%,n=9)、101.39%(RSD=1.81%,n=9)。结论:本方法简便、可靠、结果稳定、重复性好,可用于复方紫草颗粒的质量控制。关键词复方紫草颗粒;高效液相色谱法;咖啡酸四聚体;丹酚酸B;含量测定     

RP-HPLC法测定复方丹栀逍遥丸中栀子苷的含量

目的:建立以反相高效液相色谱法测定复方丹栀逍遥丸中栀子苷含量的方法。方法:色谱柱为Shim-pack-vp-ODS(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(15∶85),流速为1.0mL·min-1,检测波长为240nm。结果:栀子苷的进样量在0.11～0.67μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9992);平均回收率为96.7%,RSD=1.2%(n=6)。结论:本方法简单、准确、快速,可用于复方丹栀逍遥丸的质量控制。     

HPLC法同时测定复方土茯苓胶囊中落新妇苷和芦丁的含量

目的:建立同时测定复方土茯苓胶囊中落新妇苷和芦丁含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为WatersSymmetry-C1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(15∶85,V/V),检测波长为291nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃。结果:落新妇苷和芦丁的检测浓度分别在2.00～20.00、47.96～239.80mg·L-1范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.9999);二者平均加样回收率分别为100.40%和101.51%,RSD分别为1.61%和0.66%(n均为9)。结论:本方法简便、准确、稳定,可用于复方土茯苓胶囊的质量控制。     

RP-HPLC法同时测定复方益肾软胶囊中盐酸巴马汀、盐酸小檗碱和丹皮酚的含量

目的:建立同时测定复方益肾软胶囊中盐酸巴马汀、盐酸小檗碱和丹皮酚含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil-C1(8200mm×4.6mm,5μm),流速为1mL.min-1,流动相为乙腈-0.03mol.L-1磷酸二氢钾缓冲溶液(pH3.10,梯度洗脱),检测波长为265nm,进样量为20μL。结果:盐酸巴马汀、盐酸小檗碱和丹皮酚进样量的线性范围分别为0.01661～0.41520μg(r=0.9999)、0.02701～0.67520μg(r=0.9999)、0.15700～1.25570μg(r=0.9999);平均加样回收率分别为99.81%(RSD=0.82%,n=6)、99.53%(RSD=0.74%,n=6)、98.32%(RSD=0.87%,n=6)。结论:本方法操作简便、准确、重复性好,可作为复方益肾软胶囊的质控方法。     

HPLC法测定盐酸氟桂利嗪口腔崩解片的含量

目的：建立盐酸氟桂利嗪口腔崩解片的HPLC含量测定方法。方法：采用shimadzu ODS C18色谱柱（150.0 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为甲醇-磷酸二氢钾（0.01 mol/L,pH=3.5）（68∶32）;流速为1.0 ml/min;检测波长为254 nm;柱温：30℃。结果：盐酸氟桂利嗪浓度为4.8～57.6μg/ml线性关系良好（r=0.999 9）;平均回收率为100.27%,RSD为1.00%（n=9）。结论：本方法简便、灵敏,精密度高,重现性好,可用于盐酸氟桂利嗪口腔崩解片的含量测定。     

HPLC法测定夏天无薄膜衣片中原阿片碱的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定夏天无薄膜衣片中原阿片碱含量的方法。方法:色谱柱为Kromasil C18(250 mm×460mm,5μm),柱温为30℃,进样量为20μL,流动相为乙腈-三乙胺醋酸溶液(取三乙胺8 mL,冰醋酸30 mL,加水稀释至1 000 mL,1μ8g∶.8m2L)-1,流范速围为内1.,0进m样L.量mi与n-1峰,面检积测积波分长值为线28性9 n关m系,良理好论(r板=数0.按99原9 9阿)片;平碱均计回算收≥3率00为099。.3结9果%:,R原SD阿=片0.碱92的%质(n量=浓6)度。在结8.4论8:～该76方.3法2简单、准确、重复性好,可用于夏天无薄膜衣片质量控制。     

HPLC法同时测定黄海棠中山柰酚和槲皮素的含量

目的:建立同时测定黄海棠中山柰酚和槲皮素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Purospher Star RP-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.025mo·lL-1磷酸水溶液(60∶40),流速为1.0mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为370nm。结果:山柰酚、槲皮素进样量的线性范围分别为0.0184～0.1288μg(r=0.9998)、0.008～0.064μg(r=0.9999);二者的平均加样回收率分别为97.12%(RSD=1.03%,n=6)、96.51%(RSD=1.32%,n=6)。结论:本方法灵敏、准确、重复性好,可用于黄海棠的质量控制。     

HPLC法测定小儿清热止咳口服液中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和苦杏仁苷的含量

目的:建立同时测定小儿清热止咳口服液中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和苦杏仁苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Platisil ODS柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(含0.1%三乙胺)=5∶95,流速为1.0mL·min-1,检测波长为215nm,进样量为10μL,柱温为30℃。结果:盐酸麻黄碱进样量在0.146～4.85μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为99.4%,RSD=1.0%;盐酸伪麻黄碱进样量在0.157～5.23μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为99.6%,RSD=1.7%;苦杏仁苷进样量在0.297～9.90μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为98.9%,RSD=0.7%。结论:该方法简便、灵敏、准确,可用于小儿清热止咳口服液的质量控制。     

HPLC柱前程序衍生法测定复方α-酮酸片中5种氨基酸的含量

目的:采用HPLC柱前程序衍生法测定复方α-酮酸片中5种氨基酸的含量。方法:以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂,梯度洗脱方式,柱温为40℃,以邻苯二甲醛为衍生试剂,检测波长为338 nm。检测复方α-酮酸片中L-醋酸赖氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-组氨酸、L-酪氨酸的含量。结果:L-醋酸赖氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-组氨酸和L-酪氨酸检测浓度的线性范围分别为0.10～5.25(r=0.999 9)、0.052～2.65(r=0.999 8)、0.022～1.15(r=0.999 9)、0.038～1.91(r=0.999 7)、0.030～1.51(r=1.000 0)mg·mL-1;平均回收率为99.8%～100.1%(RSD均为0.1%)。结论:该方法灵敏度高,专属性强,结果准确可靠,可用于测定复方α-酮酸片中氨基酸的含量。