气管滴注法与雾化吸入法建立小鼠急性肺损伤模型及其效果比较

目的：比较脂多糖（LPS）气管滴注法与雾化吸入法建立的小鼠急性肺损伤（ALI）模型,确立更为有效的小鼠肺损伤建模方法。方法20只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为生理盐水（NS）气管滴注组、NS雾化吸入组、LPS气管滴注组和LPS雾化吸入组。分别采用气管滴注法和雾化吸入法建立肺损伤模型,5 h后进行小鼠肺湿重/干重（W/D）比值测定、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量测定、细胞分类计数及炎性细胞因子检测。结果与对照组相比,LPS气管滴注组和LPS雾化吸入组小鼠肺W/D比值,BALF中总蛋白浓度,TNF-α、IL-6、MCP-1和IL-1β等多项炎性细胞因子以及中性粒细胞数目均显著升高（P均＜0.05）;NS气管滴注组较NS雾化吸入组炎症背景高;LPS气管滴注组较LPS雾化吸入组各项肺部炎症指标组内差异大。结论雾化吸入方法对于建立小鼠ALI模型更有效。     

氟比洛芬酯对大鼠机械通气所致肺损伤的影响

目的 探讨氟比洛芬酯对大鼠机械通气所致肺损伤的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠40只,体重300～350 g,随机分为4组(n=10),常规潮气量通气组(TV组,潮气量8 ml/ks)、大潮气量通气组(HV组,潮气量40 ml/ks)、大潮气量通气+氟比洛芬酯5 ms/kg组(HV+F1组)和大潮气量通气+氟比洛芬酯10 mg/kg组(HV+F2组).HV+F1组和HV+F2组于机械通气前15 min时分别静脉注射氟比洛芬酯5、10 mg/ks.于机械通气4 h时处死大鼠,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、血栓素B2(TXB2)和总蛋白浓度,计数白细胞及计算肺组织湿/干重比(W/D),光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与TV组相比,HV组BALF TNF-α、IL-6、TXB2、总蛋白浓度、白细胞计数和肺组织W/D升高(P<0.05),肺组织发生病理学损伤;与HV组相比,HV+F1组和HV+F2组BALF TNF-α、IL-6、TXB2、总蛋白浓度、白细胞计数和肺组织W/D降低(P<0.05),肺组织病理学损伤减轻;HV+F2组BALF TNF-α和TXB2浓度低于HV+F1组(P<0.05),其余指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论 氟比洛芬酯可通过抑制炎性反应减轻大鼠机械通气所致肺损伤.     

单肺通气前氯胺酮经单肺或双肺雾化吸入肺保护的研究

目的比较单肺通气(OLV)前氯胺酮经左单肺(OLV期间非通气侧肺)雾化或双肺雾化吸入的肺保护作用。方法择期行经左胸食管中段癌根治术患者60例,ASAⅠ或Ⅱ级,随机均分为两组:氯胺酮单肺雾化组(K1组),氯胺酮双肺雾化组(K2组)。静脉全麻双腔支气管插管后,K1组给予氯胺酮经左单肺雾化吸入(氯胺酮用量为1 mg/kg,用生理盐水稀释至10 ml),K2组给予氯胺酮经双肺雾化吸入(氯胺酮用量同K1组)。分别于雾化吸入前(T1)、OLV 30 min(T2)、OLV 60 min(T3)、OLV 120 min(T4)、OLV结束5 min(T5)、手术结束(T6)时抽取桡动脉血,行动脉血气分析,记录SpO2、P ET CO2、气道压(Paw)及血流动力学指标。于T1、T2、手术结束2 h(T7)抽取中心静脉血,检测血中IL-6、IL-8、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)水平。结果两组患者PaO2水平在T2~T4时明显低于T1时(P0.05),其中K1组在T5时即显著回升至T1时水平,K2组至T5时明显回升,但仍明显低于T1时(P0.05),T6时则较T5时进一步显著回升至T1时水平。两组Paw在T2~T4时明显高于T1时(P0.05)。K1组患者T7时的血清IL-6、IL-8、水平明显高于T1时(P0.05),K2组患者T2、T7时的血清IL-6、IL-8、sICAM-1水平明显高于T1时(P0.05);K1组患者T7时的血清IL-6、IL-8、sICAM-1水平明显低于K2组(P0.05)。结论 OLV前经单肺(OLV期间非通气侧肺)雾化吸入氯胺酮的肺保护效果优于经双肺雾化吸入氯胺酮;OLV时两侧肺的损伤是不均一的,非通气侧肺的损伤程度重于通气侧肺。     

白细胞介素-17A在小鼠机械通气相关性肺损伤中的作用

目的探讨白细胞介素-17A(IL-17A)在小鼠机械通气相关性肺损伤中的作用。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠40只,2～3月龄,体重25～30 g。将小鼠随机分为四组:假手术组(S组),假手术+IL-17A单克隆抗体组(SA组),机械通气肺损伤模型组(V组),机械通气损伤模型+IL-17A单克隆抗体组(VA组),每组10只。S组和SA组仅行气管切开保留自主呼吸。V组和VA组机械通气4 h。SA组和VA组在气管切开后于腹腔注射IL-17A单克隆抗体(10μg, 0.1 ml),S组和V组于腹腔注射等体积的抗体稀释液。机械通气结束时处死小鼠取肺组织,采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)浓度,测定肺组织湿干重比值(W/D),采用TUNEL染色法测定肺组织细胞凋亡指数,采用Western Blot法检测肺组织IL-17A和cleaved-caspase-3蛋白含量,采用HE染色法观察肺组织病理学结果并进行肺损伤评分。结果与S组比较,V组和VA组BALF中TNF-α和IL-6浓度、W/D、细胞凋亡指数、肺组织IL-17A和cleaved-caspase-3蛋白含量、肺损伤评分均明显升高(P0.05),肺组织病理学改变加重。与V组比较,VA组BALF中TNF-α和IL-6浓度、W/D、细胞凋亡指数、肺组织IL-17A和cleaved-caspase-3蛋白含量、肺损伤评分均明显降低(P0.05),肺组织病理学损伤改善。S组和SA组各项指标差异无统计学意义。结论大潮气量机械通气可导致机械通气相关性肺损伤,IL-17A介导了机械通气相关性肺损伤的发生、发展过程,可能与IL-17A加重炎症反应和诱导细胞凋亡有关。阻断IL-17A可通过减轻肺组织炎症反应、减少细胞凋亡改善机械通气相关性肺损伤。     

氯胺酮对家兔内毒素性急性肺损伤的影响

目的研究氯胺酮对家兔内毒素(ET)性急性肺损伤(ALI)的影响。方法采用两次注射脂多糖(LPS)的方法复制家兔ALI模型。动物随机分为四组,每组6只:氯胺酮1组(K1组)、氯胺酮2组(K2组)、LPS组(阳性对照)、生理盐水(NS)组(阴性对照),第2次LPS注射后8 h结束实验,测定以下指标变化:支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞和肺泡上皮细胞计数、肺水含量、肺通透指数(LPI)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)含量、肺组织病理。结果LPS组BALF中白细胞和肺泡上皮细胞数量、肺水含量、LPI和肺MPO含量均较NS组明显上升(P<0.01)。NS组肺病理检查正常;LPS组双肺明显肿胀,表面有点片状出血,轻挤切面有水肿液溢出,镜下有明显肺不张和肺泡萎陷,肺间质增厚,内有大量白细胞浸润,肺血管淤血;K1组与K2组前述各指标和病理变化的程度轻于LPS组,其中K2组又明显好于K1组。结论氯胺酮可减轻LPS注射后家兔ALI程度。     

异丙酚或氯胺酮对内毒素性急性肺损伤大鼠肺小动脉BMP-2表达的影响

目的评价异丙酚或氯胺酮对内毒素（LPS）性急性肺损伤大鼠肺小动脉骨形态构建蛋白-2（BMP-2）表达的影响。方法雌性Wistar大鼠60只，体重220—260g，6—7周龄。随机分为6组，每组10只。对照组（C组）：1．5h内经股静脉输注生理盐水5ml；LPS组（L组）：1h内输注生理盐水3ml，然后30min内输注内毒素1mg／kg（溶于2ml生理盐水中）；异丙酚20mg／kg＋LPS组（P1组）、异丙酚50mg／kg＋LPS组（P2组）、氯胺酮20mg／kg＋LPS组（K1组）、氯胺酮50mg／kg＋LPS组（K组）1h内经股静脉分别输注不同剂量的药物，然后30min内输注LPS1mg／kg（溶于2ml生理盐水中）。输注完毕后72b断头处死大鼠。RT-PCR法测定肺小动脉BMP-2mRNA、BaxmRNA表达。免疫组织化学法、Western blot测定肺小动脉BMP-2、Bax、Bcl-2表达。显微成像分析系统测量肺小动脉中膜厚度。结果各组肺小动脉BMP-2、Bax、Bcl-2均有表达。与C组比较，其余组BMP-2、Bax蛋白水平和mRNA表达降低，Bcl-2水平升高（P〈0．05或0．01）。与L组比较，异丙酚或氯胺酮使BMP-2、Bax蛋白水平及mRNA表达升高，Bcl-2水平降低（P〈0．05）。各组肺小动脉中膜厚度较C组增加（P〈0．05）；异丙酚或氯胺酮减轻了肺小动脉中膜的增厚（P〈0．05）。结论异丙酚或氯胺酮可以抑制大鼠LPS致急性肺损伤肺血管的重建，其机制可能与BMP-2、Bax基因表达上调，Bcl-2基因表达下调有关。     

七氟醚减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤

目的 探讨七氟醚对大鼠呼吸机相关性肺损伤（VILI）的影响并探讨其可能机制。
方法 健康SPF级雄性SD大鼠36只，6～8周龄，体重220～280 g。随机分为三组：对照组（C组）、VILI组（V组）和七氟醚组（S组），每组12只。大鼠给予1%戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉后行气管切开插管术，C组自主呼吸4 h，V组和S组插管后机械通气4 h，S组机械通气期间吸入2%七氟醚4 h。通气参数：V_T 20 ml/kg，RR 80次/分，I∶E 1∶1，FiO₂ 21%，PEEP 0 cmH₂O。机械通气结束时采集股动脉血测定PaO₂。处死大鼠，取肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF），计算肺组织湿/干重比值（W/D），采用ELISA法检测BALF中白细胞介素（IL）-1β、IL-18浓度，二氯荧光黄双乙酸盐法检测BALF中肺泡巨噬细胞活性氧（ROS）水平，Western blot法及qRT-PCR法检测肺组织NF-E2相关因子2（Nrf2）、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、caspase-1蛋白含量及其mRNA表达量，观察肺组织病理学改变并进行肺损伤评分。
结果 与C组比较，V组和S组机械通气结束时PaO₂、肺组织Nrf2蛋白含量及其mRNA表达量明显降低（P<0.05），肺组织W/D、BALF中IL-1β、IL-18浓度、BALF中肺泡巨噬细胞ROS水平、肺组织NLRP3、ASC、caspase-1蛋白含量及其mRNA表达量、肺损伤评分明显升高（P<0.05）。与V组比较，S组机械通气结束时PaO₂、肺组织Nrf2蛋白含量及其mRNA表达量明显升高（P<0.05），肺组织W/D、BALF中IL-1β、IL-18浓度、BALF中肺泡巨噬细胞ROS水平、肺组织NLRP3、ASC、caspase-1蛋白含量及其mRNA表达量、肺损伤评分明显降低（P<0.05）。
结论 七氟醚可能通过上调Nrf2和下调NLRP3炎性小体的表达，减轻肺组织氧化应激反应和炎症反应，减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤。     

盐酸氨溴索预先给药对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的作用

目的探讨盐酸氨溴索（AMB）预先给药对内毒素（LPS）诱导大鼠急性肺损伤（ALI）的作用及其机制。方法雄性SD大鼠108只，体重196～273g，12～14周龄。随机分为6组（n=18），A组生理盐水（NS）0．5ml腹腔注射（i．p．）1h后，再i．p．NS0．5ml；B组i．p．AMB 10mg／kg 1h后i．p．NS0．5ml；C组i.p．NS0．5ml 1h后i．p．LPS 5mg／kg；D、E、F组分别i．p．AMB5、10、20mg／kg后1hi．p．LPS5mg／kg。i．p．NS（A、B组）或LPS（C、D、E、F组）后1、2、4h各处死5只大鼠，采用双夹心抗体酶联吸附免疫法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）浓度，蛋白印迹法检测肺组织细胞胞浆中磷酸化／非磷酸化c—Jun氨基末端激酶（JNK）的表达。另外3只i．p．NS（A、B组）或LPS（C、D、E、F组）后4h观察大鼠肺组织形态学变化。结果与A组比较，C、D、E、F组BALF中TNF-α、IL-1β和MIP-2升高；与C组比较，E、F组上述三指标均降低。与A组比较，C、D、E、F组磷酸化JNK表达增多；与C组比较，E、F组磷酸化JNK表达减少，D、E、F组非磷酸化JNK表达增多（P〈0．05或0．01）。AMP预先给药可减轻i．p.LPS诱导的肺组织损伤。结论AMB预先给药可减轻LPS诱导大鼠ALI，其机制与抑制肺组织JNK的活化、下调TNF-α、IL-1β和MIP-2的表达有关．且呈剂量依赖性。     

亚甲蓝对大鼠机械通气相关肺损伤中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体的影响

目的评价亚甲蓝对大鼠机械通气相关损伤(VILI)中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法清洁级成年雄性SD大鼠36只,8周龄,体重240～260 g,采用随机数字表法分为三组:自主呼吸对照组(C组)、大潮气量模型组(H组)和大潮气量+亚甲蓝组(MB组),每组12只。三组大鼠均行气管切开插管术,MB组经腹腔注射1%亚甲蓝50 mg/kg,10 min后以V_T 20 ml/kg行机械通气;C组经腹腔注射等容量生理盐水后保持自主呼吸;H组经腹腔注射等容量生理盐水,10 min后以V_T 20 ml/kg行机械通气。通气参数:FiO_2 21%,I∶E 1∶1,RR 80次/分,PEEP 0,通气时间4 h。于基础状态、通气结束时经颈总动脉取血行血气分析,通气结束后颈总动脉放血处死大鼠,收集肺组织标本、支气管肺泡灌洗液(BALF)。光镜下观察肺组织病理学改变,记录肺损伤评分,计算肺组织湿/干重比值(W/D)。采用ELISA法测定BALF中总蛋白含量以及血清、BALF中白细胞介素(IL)-1β、IL-18浓度;鲁米诺化学发光法检测肺组织中活性氧(ROS)含量;RT-PCR法及Western blot法分别检测肺组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)mRNA表达量及蛋白含量。结果与C组比较,H组肺损伤评分、W/D明显升高(P0.01),BALF中总蛋白以及血清、BALF中IL-1β和IL-18浓度明显升高(P0.01),肺组织中ROS含量、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量及蛋白含量明显升高(P0.01)。与H组比较,MB组肺损伤评分、W/D明显降低(P0.05),BALF中总蛋白以及血清、BALF中IL-1β和IL-18浓度明显降低(P0.05),肺组织中ROS含量、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量及蛋白含量明显降低(P0.05)。结论亚甲蓝通过抑制大鼠肺组织中NLRP3炎性小体的激活,阻碍促炎因子IL-1β及IL-18的形成,减轻大鼠VILI。     

JNK信号转导通路在大潮气量机械通气诱发兔肺泡巨噬细胞分泌IL-8和TNF-α中的作用

目的 评价c-Jun氨基末端激酶(JNK)在大潮气量机械通气诱发兔肺泡巨噬细胞分泌IL-8和TNF-α中的作用.方法 清洁级雄性新西兰白兔30只,体重210～260 g,随机分为3组(n=10):正常对照组(C组)不予任何刺激;机械通气组(V组)大潮气量机械通气3 d,VT 15 ml/kg,I∶E 1∶2,RR 30～40次/min,PEEP 0;SB203580干预组(S组)大潮气量机械通气3 d,同时每天机械通气时静脉注射JNK特异性抑制剂(SB203580)6 mg/kg,通气参数同V组.采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液中IL-8和TNF-α浓度,同时收集肺泡巨噬细胞,体外培养2 h后应用RT-PCR法检测IL-8 mRNA和TNF-α mRNA水平.结果 与C组比较,V组TNF-α、TNF-α mRNA、IL-8、IL-8 mRNA水平升高(P＜0.05).与V组比较,S组TNF-α和TNF-α mRNA水平降低(P＜0.01),IL-8和IL-8 mRNA水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 JNK信号转导通路在大潮气量机械通气诱发兔肺泡巨噬细胞分泌TNF-α过程中起重要作用,而不参与分泌IL-8的过程.     

参附注射液对大鼠机械通气相关性肺损伤的保护作用及其机制

目的 探讨参附注射液(Shenfu injection,SF)对大鼠机械通气(mechanical ventilation,MV)相关性肺损伤的保护作用及其机制. 方法 40只健康成年雄性Wister大鼠采用随机数字表法分为4组,每组10只:对照组(C组)、正常潮气量MV组(N组)、大潮气量MV组(L组)、大潮气量MV+SF处理组(SF组).C组保留自主呼吸;N组、L组和SF组MV4h,潮气量分别设置为8～10 ml/kg、40 ml/kg、40 ml/kg,SF组于MV前15 min静脉注射SF 10 ml/kg.实验结束处死动物,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),测定BALF中总蛋白、IL-1β、IL-18和TNF-α的浓度;取肺组织,测量湿/干重比(wet/dry,W/D),采用免疫组化法检测肺组织NF-κB的表达,观察病理学改变并进行肺损伤评分. 结果 SF组BALF中TNF-α、IL-1β、IL-18浓度分别为(65±11)、(47±9)、(58±8) ng/L,较L组(99±7)、(69±7)、(86±7) ng/L明显降低(P＜0.05);SF组大鼠肺损伤评分、W/D、肺组织NF-κB光密度值分别为(8.5±1.8)分、(5.0±1.6)、(0.32±0.28),较L组(14.1±2.7)分、(5.5±1.8)、(0.54±0.33)均明显降低(P＜0.05). 结论 SF可减轻大鼠MV相关性肺损伤,其机制可能与SF抑制肺内NF-κB通路的活性且降低肺内炎性因子的释放有关.     

氯胺酮对哮喘模型大鼠氧化应激反应及JNK活化的影响

目的研究氯胺酮对哮喘模型大鼠氧化应激反应及相关蛋白表达的影响。方法51只Brown-Norway大鼠随机分成不同浓度氯胺酮雾化吸入组(K1组、K2组、K3组,每组8只)、不同剂量氯胺酮腹腔注射组(V1组、V2组,每组6只)、卵蛋白组(A组,8只)和对照组(C组,7只)。采用鸡卵蛋白(OVA)辅以百日咳杆菌菌苗和氢氧化铝为佐剂注射致敏大鼠。雾化吸入OVA激发。K1、K2、K3组大鼠在激发前分别给予12.5、25及50 mg/ml浓度的氯胺酮雾化吸入,V1、V2组在激发前分别给予50和100 mg/kg氯胺酮腹腔注射。A组在激发前给予PBS雾化吸入,C组采用PBS替代OVA进行雾化吸入。最后一次激发后取血和肺组织,检测一氧化氮(NO)、过氧化氢(H2O2)的量及c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白的表达。结果与C组相比,A组的NO及H2O2的量均增高(P<0.01);氯胺酮处理组测得的NO及H2O2量明显低于A组(P<0.05或P<0.01)。与C组相比,A组JNK的激活程度(pJNK/JNK)增高(P<0.01)。JNK的激活程度在氯胺酮处理组均降低,其中K1、K2、K3、V1、V2组明显低于A组(P<0.05或P<0.01)。结论氯胺酮通过全身用药和局部雾化吸入均可抑制哮喘模型大鼠增高的氧化应激反应,并抑制JNK蛋白的激活。     

内质网IRE1α/XBP1信号通路在小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用：与NLRP3炎症小体的关系

目的评价内质网肌醇需要酶1α/X盒结合蛋白1(IRE1α/XBP1)信号通路在小鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的关系。方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠36只, 6～8周龄, 体质量25～30 g, 采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、内毒素性ALI组(ALI组)和内毒素性ALI+STF-083010组(ST组)。ALI组和ST组雾化吸入LPS 3 mg/ml 30 min制备小鼠内毒素性ALI模型, C组雾化吸入等量生理盐水, ST组于雾化吸入LPS前1 h时腹腔注射IRE1α/XBP1信号通路阻断剂STF-083010 50 mg/kg, 其余2组腹腔注射等容量生理盐水。LPS或生理盐水雾化吸入后24 h时处死小鼠, 收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并取肺组织标本, 肺组织HE染色后光镜观察病理学结果, 行肺损伤评分并计算肺湿重/干重(W/D)比值;ELISA法测定BALF上清液IL-1β和IL-18浓度;Western blot法检测肺组织p-IRE1α、XBP1s、NLRP3、ASC和...     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织内毒素CD14受体表达的影响

目的 观察不同潮气量机械通气对大鼠肺组织内毒素CD14受体表达的影响。方法 成年雄性SD大鼠30只，体重200～300g，随机分为3组（n=10）：正常对照组（C组）、小潮气量机械：通气组（S组）和大潮气量机械通气组（L组）。S组潮气量（VT）8ml／kg，N组VT40ml／kg；吸：呼比均为1：1；调整呼吸频率60—80次／min，维持呼气末二氧化碳分压在35—45mmHg。分别于机械通气前（基础值）、机械通气1、2、3h行动脉血气分析，机械通气3h时放血处死大鼠，采用逆转录聚合酶链反应测定肺组织内毒素CD14受体mRNA表达；用免疫组织化学法测定左肺支气管灌洗液内毒素CD14受体蛋白表达。结果 与C组比较，L组机械通气1h时动脉血pH值、氧分压升高，动脉血二氧化碳分压降低，肺组织内毒素CD14受体蛋白及mRNA表达均升高（P〈0．01）。结论 大潮气量机械通气3h可上调大鼠肺组织内毒素CD14受体表达。     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织TLR-4表达的影响

目的 观察不同潮气量（Vt）机械通气对大鼠肺组织Toll样受体-4（TLR-4）表达的影响。方法 成年雄性SD大鼠30只，体重200—210g，随机分为3组（n=10）：自然呼吸组（C组）、小Vt机械通气组（S组）和大Vt机械通气组（L组）。S组Vt8ml／kg，L组Vt40ml／kg。机械通气3h后放血处死大鼠，取肺组织，进行肺病理学评分，测定肺组织湿／干重比（W／D），对支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞（WBC）进行计数，用RT—PCR法测定肺组织TLR-4 mRNA表达，用免疫组织化学法测定BALF中巨噬细胞TLR-4蛋白表达。结果与C组比较，L组肺组织病理学评分、W／D和BALF中WBC升高，肺组织TLR-4 mRNA及BALF中巨噬细胞TLR-4蛋白表达均升高（P〈0．01），S组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论大Vt机械通气3h可上调肺组织TLR-4的表达。     

血管紧张素Ⅱ受体在大鼠机械通气所致肺损伤中的作用

【摘要】目的研究血管紧张素Ⅱ受体（AT1型）在机械通气所致肺损伤中的作用。方法40只健康SD大鼠随机分成4组（n=10）：对照组（A组）、正常潮气量机械通气组（B组）、大潮气量机械通气组（C组）和大潮气量机械通气加洛沙坦预处理组（D组）。A组不行机械通气，B组潮气量（VT）为10ml／kg，C组VT为40ml／kg，D组实验前1周每天用血管紧张素Ⅱ受体（AT1型）特异性阻滞剂洛沙坦溶液100mg灌胃后，行大潮气量机械通气，VT为40ml／kg。机械通气2h后处死大鼠，收集肺组织和支所管肺泡灌洗液，光镜下观察肺组织病理改变，RT-PCR法检测A组、B组和C组肺组织中AT。受体mRNA的表达，同时测定支气管肺泡灌洗液总蛋白、白细胞计数、肺湿，干重比（W／D）和中性粒细胞髓过氧化物酶（MPO）、巨噬细胞炎症蛋白-2（MIP-2）的水平。结果C组和D组肺泡间隔明显增厚，肺泡腔内有渗出物，可见较多的炎性细胞浸润，其病理损伤程度较A组和B组重。与A组和B组比较，C组和D组AT1受体mRNA表达、支气管肺泡灌洗液中总蛋白浓度、白细胞计数、MIP-2浓度和肺组织中MPO活性、W／D均增高（P〈0．01）；与C组比较，D组上述各项指标均降低（P〈0．05或0．01）。结论AT1受体参与了大鼠机械通气所致肺损伤。     

桑菊清解汤对大鼠呼吸机相关性肺损伤的影响

目的 评价桑菊清解汤对大鼠呼吸机相关性肺损伤的影响.方法 健康成年SD大鼠36只,雌雄不拘,体重300～ 350 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=12):对照组(C组)、机械通气组(V组)和桑菊清解汤组(SJ组).采用大潮气量(VT=40 ml/kg)机械通气2.5h制备大鼠呼吸机相关性肺损伤模型.SJ组于术前10 d采用桑菊清解汤300 g灌胃,1次/d,于第10次灌胃后2h时开始制备模型,V组和C组给予等容量生理盐水.于机械通气前(T0)、机械通气结束(T1)、机械通气后30 min(T2)时采集股动脉血样测定动脉血气,计算呼吸指数(RI)和氧合指数(OI),然后处死大鼠,取肺组织,采用双抗体夹心ELISA法测定肺组织TNF-α、IL-6和IL-10的含量,测定肺组织湿/干重(W/D)比,光镜下观察肺组织病理学结果.结果 与C组比较,V组和SJ组T1.2时RI升高,OI降低,肺组织TNF-α、IL-6、IL-10含量和W/D比升高(P＜0.05);与V组比较,SJ组RI降低,OI升高(P＜0.05),SJ组肺组织TNF-α、IL-6含量和W/D比降低,IL-10含量升高(P＜0.05).SJ组肺组织病理学损伤较V组减轻.结论 桑菊清解汤可减轻呼吸机相关性肺损伤,其机制与抑制炎性反应有关.     

不同剂量瘦素对大鼠机械通气肺损伤的影响

目的评价不同剂量瘦素对大鼠机械通气肺损伤的影响。方法健康清洁级SD雄性大鼠48只,6～8周龄,采用随机数字表法分为四组:气管切开保留自主呼吸的假手术组(A组)、机械通气模型组(B组)、瘦素10μg/kg组(C组)和瘦素50μg/kg组(D组),每组12只。采用10%水合氯醛3.5 ml/kg麻醉大鼠,疼痛反射消失后C组腹腔注射瘦素10μg/kg,D组腹腔注射瘦素50μg/kg,A、B组腹腔注射等容量生理盐水,注射后即刻进行气管切开,插管机械通气。A组气管插管后保留自主呼吸,B、C、D组机械通气建立VILI模型,参数设置:V_T 20 ml/kg,RR 80次/分,I∶E 1∶1,FiO_2 21%,PEEP 0 mmHg,通气时间4 h。分别于基础状态、通气结束时抽取股动脉血进行血气分析。通气结束后放血处死大鼠,在4℃下取肺组织并收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF),光镜下进行中性粒细胞计数,采用ELISA法测定TNF-α、IL-6、IL-1β浓度;取肺组织称重,计算肺湿干重比(W/D);观察肺组织病理改变并进行病理评分;采用Western blot检测肺组织研磨液中NF-κB p65含量。结果与A组比较,B、C、D组W/D、肺损伤评分、BALF中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β浓度及肺组织NF-κB p65含量明显升高(P0.01)。与B组比较,C、D组BALF中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β浓度及肺组织肺损伤评分、NF-κB p65含量明显降低(P0.05)。与C组比较,D组BALF中性粒细胞计数、TNF-α、IL-6、IL-1β浓度及肺组织肺损伤评分、NF-κB p65含量明显降低(P0.05)。结论瘦素可降低大鼠机械通气肺损伤中炎性因子的表达水平,减轻肺损伤,50μg/kg较10μg/kg作用明显。     

白细胞介素-10通过降低脂多糖诱导大鼠急性肺损伤高迁移率组蛋白1释放产生保护作用

目的 旨在研究白细胞介素（interleukin,IL）-10对高迁移率组蛋白l（high mobility group protein 1,HMGB1）释放的影响及其肺保护作用,进而探讨IL-10在治疗急性肺损伤中的可能机制. 方法 采用腹腔注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）致大鼠脓毒症急性肺损伤模型,健康SPF级雄性SD大鼠72只,体重180 g～220 g,采用随机数字表法,随机分为对照组即磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution,PBS）组（P组,6只）、急性肺损伤组即LPS组（L组,30只）、PBS＋IL-10组（PI组,6只）、LPS＋IL-10组（LI组,30只）.P组和PI组腹腔注射等体积PBS的同时分别经由气道滴注5 ml的PBS和IL-10,L组和LI组腹腔注射LPS的同时分别经由气道滴注等体积的PBS和IL-10.L组和LI组注射LPS后的4、8、16、24 h和48 h分别检测各组大鼠肺湿/干重比（wet/dry weight ratio,W/D）和支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中总蛋白浓度,酶联免疫吸附实验法检测BALF中炎性因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和IL-6水平,苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察肺组织的病理变化,Western Blot分析肺组织中HMGB1表达水平. 结果 腹腔注射LPS后,L组大鼠肺组织W/D和BALF中总蛋白浓度分别为（5.68±0.12） mg/L和（254±105） mg/L,与P组比较,分别增加了12％和297％（P＜0.05）,BALF中TNF-α和IL-6水平明显增加（P＜0.05）,HE染色显示在注射LPS后4h肺组织的细胞浸润达到峰值随后减少,肺组织中HMGB1水平升高（P＜0.05）;使用IL-10后,LI组肺组织W/D和BALF中总蛋白浓度分别为（5.28±0.14） mg/L和（109±48） mg/L,与L组比较,分别降低了7％和57％ （P＜0.05）,BALF中炎性因子水平降低（P＜0.05）,肺组织细胞浸润改善,HMGB1表达下调（P＜0.05）. 结论 IL-10对急性肺损伤具有保护作用,其机制可能为降低BALF中炎性因子的水平,下调晚期炎症介质HMGB1的表达,从而改善肺组织的细胞?     

合成短肽S247对呼吸机所致肺损伤中肺上皮细胞凋亡的影响

目的 研究合成短肽S247对呼吸机相关性肺损伤凋亡的影响，探索其在肺损伤中的防护作用。方法 30只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组：对照组（C组）、肺损伤组（Ⅰ组）和S247治疗组（S组），每组10只，大潮气量损伤性通气4h建立呼吸机相关性肺损伤模型（呼吸参数：Vt=40ml／kg体重，呼吸频率=80次／min，FiO2=21％），光镜下观察肺病理改变，测定肺湿／干比；收集肺泡灌洗液（BALF），考马思亮兰法测BALF中总蛋白含量，光境下行WBC计数，免疫组织化学检查肺组织Fas、Caspase-3蛋白的表达水平，TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况。结果 Ⅰ组肺病理改变明显，各组肺湿／干比、BALF中总蛋白含量、WBC计数差异都有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01），Ⅰ组Fas、Caspase-3蛋白的表达水平（0．359±0．055；0．152±0．007）显著增高（P〈0．01），凋亡指数（60．000±7．461）明显增加（P〈0．01）；在用S247后，Fas、Caspase-3蛋白的表达水平（0．240±0．062；0．146±0．004）显著下降（P〈0．05），凋亡指数（47．857±3．716）有所减少（P〈0．05）。结论 S247能通过抑制细胞凋亡，有效降低呼吸机相关性肺损伤的程度。