普罗布考防治大鼠顺铂急性肾损伤的实验研究

目的：复制大鼠顺铂急性肾损伤模型,研究氧化应激与核转录因子Sp1及凋亡的关系;探讨普罗布考对顺铂急性肾损伤的保护作用及作用机制。方法：24只SD雄性大鼠被随机分为生理盐水对照组、顺铂模型组、普罗布考干预组、普罗布考对照组,每组6只;检测尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖甘酶（NAG）、血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、肾组织匀浆液丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）,光镜观察肾脏病理改变;采用免疫组化染色检测肾组织Sp1蛋白表达;采用TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡。结果：与生理盐水对照组和普罗布考对照组相比,顺铂模型组大鼠血清BUN和Scr,尿NAG酶,肾脏组织匀浆MDA含量显著升高,肾组织匀浆GSH-Px活力显著下降（P〈0.01）;肾脏指数、肾小管损伤分数和肾小管上皮细胞凋亡百分比均明显增加（P〈0.01）;肾组织Sp1蛋白的表达上调。采用普罗布考干预后血清BUN和Scr,尿NAG酶,肾脏组织匀浆MDA含量显著下降（P〈0.05）;肾组织匀浆GSH-Px活力显著升高;肾脏指数、肾小管损伤分数和肾小管上皮细胞凋亡百分比均明显降低（P〈0.01）;肾组织Sp1蛋白的表达下调。结论：氧化应激和核转录因子Sp1在顺铂所致大鼠肾毒性中起一定作用;普罗布考对顺铂所致大鼠肾毒性有保护作用,其机制可能与抗氧化、抑制肾小管上皮细胞凋亡、下调肾组织Sp1蛋白表达有关。     

冬虫夏草通过抗氧化抗炎抑制细胞凋亡改善顺铂肾损伤

目的:观察顺铂(cisplatin,CP)小鼠肾损伤后肾组织氧化应激、炎症及细胞凋亡情况以及冬虫夏草干预的影响,探讨冬虫夏草的肾保护作用机制。方法:用腹腔注射cisplatin的方法建立顺铂肾损伤模型,28只8周龄C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、CP组、冬虫夏草组、冬虫夏草+CP组,每组7只。72 h后处死小鼠,检测各组小鼠血清尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr),肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),HE染色观察小鼠肾小管间质病理变化,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡情况; ELISA的方法测定组织中TNF-α、IL-1β、IL-6。结果:与对照组及冬虫夏草相比,CP组与冬虫夏草+CP组小鼠的BUN、Scr及肾组织MDA水平增高(P0.01),肾组织SOD降低(P0.01),肾小管病理半定量计分显示小管间质损伤明显加重(P0.01),TUNEL阳性细胞表达增多(P0.01),TNF-α、IL-1β、IL-6明显增加(P0.01);与CP组相比较,冬虫夏草+CP组的血清BUN、Scr及肾组织MDA水平下降(P0.01),肾组织SOD上升(P0.05),肾小管病理半定量计分显示冬虫夏草+CP组较CP组小管间质损伤明显改善(P0.01),TUNEL阳性细胞表达明显减少(P0.01),TNF-α、IL-1β、IL-6明显减少(P0.01)。结论:顺铂肾损伤肾组织中MDA明显增高,SOD活性降低,TNF-α、IL-1β、IL-6及凋亡细胞显著增加,提示顺铂至急性肾损伤与其诱导氧化应激、炎症及细胞凋亡有关。冬虫夏草干预后肾组织中MDA明显降低,SOD活性升高,TNF-α、IL-1β、IL-6及凋亡细胞显著减少,提示冬虫夏草可能通过抑制氧化应激、炎症及肾小管上皮细胞凋亡而达到肾保护作用。     

自噬和ASPPs在老年大鼠急性肾损伤早期的表达

目的观察自噬相关蛋白和p53凋亡刺激蛋白(ASPPs)在肾损伤早期的表达变化,初步探讨自噬相关蛋白和ASPPs是否可能成为老年大鼠AKI早期生物标志物。 方法建立顺铂致AKI青年与老年大鼠模型。雄性SD老年大鼠随机分为假手术组(Sham),顺铂模型组,同时设数量匹配的雄性SD青年大鼠为对照;模型组大鼠一次性腹腔注射顺铂4 mg/kg,Sham组相同途径注射生理盐水4 ml/kg;在给药12 h、1 d、3 d、5 d、7 d时检测大鼠Scr、BUN;光镜观察大鼠肾脏病理变化;透射电镜观察大鼠肾小管上皮细胞超微结构变化及自噬体的情况;免疫印迹法检测肾脏组织Beclin 1、溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、p62、p53及ASPP抑制物(iASPP)和ASPP1表达情况。 结果顺铂诱导12 h后,与Sham组比较,青年与老年大鼠Scr无明显变化(P>0.05);电镜观察到大鼠肾小管上皮细胞自噬体出现而且数量显著增多;老年大鼠肾组织Beclin 1、p62、LAMP-2和p53表达水平明显升高(P<0.05),iASPP表达水平明显降低(P<0.05),并且老年大鼠肾组织Beclin 1、LAMP-2和p53变化时间早于青年大鼠(P<0.05)。 结论自噬和ASPPs在老年大鼠AKI发生早期即可出现,在Scr开始升高前,反应性自噬已经启动。自噬相关蛋白和ASPPs有望成为AKI早期的损伤标志物,可能是AKI早期干预的新靶点,但仍需更深入的研究。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠横纹肌溶解致急性肾损伤肾脏细胞凋亡的作用研究

目的:探究盐酸戊乙奎醚对大鼠横纹肌溶解致急性肾损伤时细胞凋亡影响。方法:将42只SD大鼠按随机数字表法分为对照组(C组)、急性肾损伤组(AKI组),盐酸戊乙奎醚干预组(PHC组)。采用甘油肌注法建立横纹肌溶解致大鼠急性肾损伤模型。速率法检测血清BUN、Cr水平;HE染色法观测肾组织病理学变化并行肾小管损伤评分;TUNEL法检测肾细胞凋亡情况并计算凋亡率;Western Blot法检测肾组织PTEN蛋白表达。结果:AKI 6 h、24 h组血清BUN、Cr水平高于C组(P0.01);PHC 6 h、24 h组血清BUN、Cr水平低于AKI组(P0.05、P0.01)。AKI组各时点肾小管损伤评分高于C组(P0.01);PHC组各时点肾小管损伤评分低于AKI组(P0.05、P0.01);AKI组各时点肾细胞凋亡率高于C组(P0.01);PHC组6 h、24 h肾细胞凋亡率低于AKI组(P0.05、P0.01)。AKI组各时点肾组织PTEN蛋白表达强于同期C组(P0.01);PHC组各时点肾组织PTEN蛋白表达弱于同期AKI组(P0.05、P0.01)。结论:盐酸戊乙奎醚可通过下调PTEN表达、抑制细胞凋亡来发挥肾脏保护作用。     

USP14抑制对肾缺血再灌注诱导的急性肾损伤及IRE1/JNK信号通路的影响

目的 研究USP14的抑制是否可以减轻缺血再灌注（ischemia-reperfusion,IR）诱导的急性肾损伤以及潜在机制。方法 通过对小鼠进行左侧肾动脉夹闭45 min和再通建立体内肾IR模型;HE染色观察各组肾组织损伤情况;生化试剂盒检测血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、肌酐（serum creatinine,Scr）水平;Western blot检测内质网（endoplasmic reticulum,ER）应激相关蛋白（GRP78、CHOP、IRE1和JNK）和凋亡相关蛋白（cleaved capase-3和Bcl-2）的表达;通过TUNEL检测肾组织细胞的凋亡水平。结果 与模型组比较,IR组中小鼠肾损伤和肾功能障碍在再灌注期呈时间依赖性逐渐加重,肾组织中USP14的表达和BUN及Scr的水平增加（P<0.05）;与IR+sh-NC组比较,IR+sh-USP14组中小鼠肾病理损伤及肾组织中USP14、BUN、Scr的水平降低（P<0.05）。此外,与模型组比较,IR组小鼠肾组织中肾细胞凋亡,cleaved caspase-3和ER应激相关...     

骨髓间充质干细胞干预对缺血再灌注诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的：观察骨髓间充质干细胞（mesenchymal stemcells,MSCs）对缺血再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）诱导的急性肾损伤模型小鼠肾小管上皮细胞（renal tubular epithelial cells,RTECs）凋亡的保护作用及机制。方法：Percoll密度梯度离心结合贴壁培养法有效分离出C57BL/6小鼠的骨髓间充质干细胞（mMSCs）。雄性C57BL/6小鼠45只,分为正常对照组（15只）、I/R组（15只、夹闭双侧肾蒂30min开放）、I/R＋mMSCs组（15只、夹闭双侧肾蒂30min开放的同时尾静脉注射mMSCs）。造模并干预后,于1d、2d、3d、7d、14d分别处死部分小鼠,留取动脉血及肾组织,检测血尿素氮（BUN）及肌酐（Scr）,制作肾组织切片行HE染色进行肾小管损伤程度评分,TUNEL法检测RTECs的凋亡,Western Blot法检测建模后第2天肾小管组织中Caspase-3、Bcl-2蛋白水平的表达。结果：I/R后小鼠的BUN及Scr均显著高于正常对照组,但同一时间点I/R＋mMSCs组小鼠的BUN及Scr水平较I/R组为低,以术后第7天差异最为显著（P〈0.01）,肾小管损伤程度评分也有着显著降低。TUNEL检测表明I/R可诱导RTECs发生明显的凋亡,以术后第2天凋亡指数（apoptosis index,AI）最高（46.71±11.20）（P〈0.01）,而mMSCs干预可显著降低各时间点RTECs的凋亡水平（P〈0.05或P〈0.01）,至14d时AI基本恢复至对照组水平。Western blot进一步显示：I/R＋mMSCs组小鼠的肾组织中Caspase-3蛋白水平明显下降（1.16±0.33,P〈0.01）,而Bcl-2水平却有明显增高（0.94±0.27,P〈0.01）。结论：移植的MSCs对I/R诱导的肾损害小鼠RTECs凋亡具有抑制作用,从而有利于肾小管损伤的早期恢复,其保护机制可能与抑制Caspase-3表达,上调Bcl-2表达有关,但其细胞学和分子机制还有待进一步研究。     

Akt介导炎症反应参与顺铂诱导的急性肾损伤

目的 目前急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）发病率和死亡率较高,尤其是肾毒性药物所致AKI更加常见,为了更好地理解和干预AKI,本实验拟研究顺铂诱发的小鼠AKI的潜在发病机制.方法 在小鼠成功构建顺铂诱发的AKI模型基础上,将10只雄性C57BL/6（25-30）克小鼠随机分为2个组,每组6只（n=6）,分为对照组和顺铂诱导的急性肾损伤模型组.模型组腹腔注射顺铂20 mg/kg,对照组腹腔注射生理盐水（20mg/kg）,顺铂或生理盐水注射72 h后处死小鼠,收集小鼠血清和肾脏标本.测定血清肌酐（SCr）和血尿素氮（BUN）.PAS染色后显微镜下观察肾脏形态学变化,Western blotting免疫蛋白印迹分析蛋白激酶B（Akt）和磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）的表达,实时定量（RT-PCR）检测白介素-6（IL-6）,干扰素-γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-a）.结果 与对照组相比,模型组SCr和BUN均明显升高,病理检查可见肾脏内肾小管上皮细胞明显肿胀坏死、蛋白管型形成明显,还可观察到炎症细胞浸润明显增加.Western blotting免疫蛋白印迹结果显示pAkt表达明显上调,Akt表达不变,RT-PCR检测显示IL-6,IFN γ和TNFα明显上调.结论 在顺铂导致的小鼠急性肾损伤模型中,Akt的激活通过介导炎症反应参与了顺铂诱导的小鼠急性肾损伤.     

基于线粒体自噬探讨黄芪甲苷孵育的脂肪干细胞对糖尿病肾脏疾病大鼠的保护作用

目的 观察尾静脉移植黄芪甲苷（astragaloside,Ast）孵育的人脂肪干细胞（human adipose derived stem cell,h ADSC）对糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）大鼠肾损伤的修复作用,探讨其可能机制。方法 将21只SD大鼠按随机数字表法分为正常组（5只）、模型组（6只）、hADSC组（5只）及Ast-hADSC组（5只）,后3组大鼠建立DKD模型,hADSC组及AsthADSC组尾静脉注射hADSC或Ast-hADSC悬液,每2周1次,共6次,模型组予等量生理盐水。检测肾功能、血脂、尿微量白蛋白/尿肌酐及尿蛋白定量,HE及Masson染色观察肾脏病理,激光共聚焦观察hADSC在肾脏定植情况,免疫组化及免疫蛋白印迹观察肾组织电压依赖性阴离子通道（voltage-dependent anion channel,VDAC）、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated-protein-lightchain-3,LC3)、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、自噬底物P62蛋白、磷酸酶及张力蛋白同源物诱导的蛋白激酶1...     

肾损伤分子-1在肾小管损伤中的表达

肾损伤分子-I(Kidneyi.injury molecule-1,KIM-1)是多种急性肾损伤(Acute kidney injury,AKI)早期特异和敏感的标志物,近期研究表明,对肾组织及尿液中KIM-1的检测有助于诊断和鉴别AKI,其应用价值优于血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN),此外,KIM-1还参与肾小管上皮细胞的增殖、修复、转分化及肾间质的纤维化过程.本文对近期KIM-1的研究作一综述.     

脐带间充质干细胞调节炎性微环境干预急性肾损伤的效应研究

目的：观察移植外源性脐带间充质干细胞（UC-MSCs）对小鼠急性肾损伤（AKI）炎性微环境的影响及对肾组织的修复作用。方法：分离培养孕后期C57BL/6雌性小鼠的UC-MSCs。另取雌性C57BL/6小鼠60只,随机分为正常对照组、AKI组、AKI＋MSC移植组,每组20只。AKI组和AKI＋MSC组用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾蒂45 min复制AKI模型,并于模型制备成功时腹腔内注射生理盐水0.2 ml（AKI组）或1＆#215;106 UC-MSCs（AKI＋MSC组）。于第2天和第7天每组活杀10只小鼠,取眼球血及肾组织,检测血尿素氮（BUN）及血肌酐（SCr）水平;肾组织行HE染色,观察组织病理学变化;ELISA法检测肾组织匀浆中促炎因子IL-1β、TNF-α、干扰素-1（IFN-1）及抗炎因子碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、IL-10、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的水平。结果：2 d时AKI组小鼠肾小管上皮细胞肿胀,胞质空泡性变,BUN和Cr均显著高于正常对照组,提示造模成功后肾小管受损严重,7 d稍有减轻;AKI＋MSC移植组小鼠肾功能在2 d时较AKI组有所恢复,肾组织病理学变化明显减轻（P＜0.01）,7 d基本恢复正常。ELISA结果显示,与正常对照组比较, AKI组各时间点肾组织匀浆中促炎因子的水平均显著升高（P＜0.01或P＜0.05）,抗炎因子的水平均显著降低（P＜0.01或P＜0.05）,2 d较7 d更加明显。各时间点AKI＋MSC组抗炎因子的水平较AKI组明显升高,促炎因子的水平明显下降,但与正常对照组比较差异均有显著性（P＜0.01或P＜0.05）,7d较2 d改善更明显。结论：MSC可通过减轻AKI肾组织炎症反应,调节损伤肾脏组织微环境中的细胞因子水平发挥保护肾损害的修复作用。     

胚胎后肾间充质细胞移植对急性肾小管坏死肾功能的修复作用

目的：将体外培养的胚胎后肾间充质细胞,通过尾静脉注射移植给急性肾小管坏死的模型大鼠,观察是否改善对肾功能起修复作用。方法：（1）体外培养、扩增及生物学鉴定大鼠胚胎后肾间充质细胞株（RIMM-18）;（2）通过皮下注射总量为900mg/kg庆大霉素,建立急性肾小管坏死的大鼠模型;（3）除空白组外,将造模大鼠随机分为3组：①移植组：造模后通过尾静脉注射移植培养的RIMM-18细胞1～6×107/ml;②培基组：造模后通过尾静脉注射等量的无血清培养基;③急性肾小管坏死组（ATN组）：皮下注射总量为900mg/kg的庆大霉素×3d。（4）留取标本：分别于成模后1d、4d、1周、2周及4周杀鼠,留取尿和血标本;（5）生化指标检测：BUN、Scr、尿蛋白、尿肌酐、β2-MG、NAG和RBP等。结果：（1）RIMM-18细胞体外生长良好,保持间充质细胞特性。（2）皮下注射总量900mg/kg的庆大霉素3d成模。（3）移植组大鼠毛发有光泽、脱毛少,体重及尿量的恢复较快,死亡率下降。（4）各组大鼠生化指标比较：移植组尿蛋白于4d时达峰值,2周时下降接近正常;而培基组和ATN组于1周达峰值,持续至4周降至正常。移植组、培基组和ATN组于1周、2周时其值分别为（1.37±0.10）mg/L、（1.97±0.21）mg/L、（2.05±0.19）mg/L,（0.56±0.07）mg/L、（1.59±0.07）mg/L、（1.66±0.11）mg/L,移植组与培基组及ATN组之间差异有统计学意义（P〈0.01）。BUN、Scr、NAG、RBP及β2-MG变化规律类似。（5）肾脏病理：移植组4d时肾小管病变最显著,培基组和ATN组则于1周时肾小管病变最明显,恢复较移植组慢。肾小管Paller氏评分显示于1周、2周、4周时移植组与培基组及ATN组之间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：胚胎后肾间充质细胞通过尾静脉移植能改善ATN的肾功能。     

自体原位肝移植逆行灌注法对大鼠急性肾损伤的影响

目的探讨自体原位肝移植术中经下腔静脉逆行灌注对大鼠肾功能的影响,为临床肝移植应用经下腔静脉逆行灌注法提供实验依据。方法 60只自体原位肝移植大鼠随机分为逆行灌注组、门静脉灌注组与假手术组各20只。前两组建立自体肝移植模型,其中逆行灌注组采用经下腔静脉逆行灌注法,先开放下腔静脉,再开放门静脉,最后开放肝动脉。门静脉灌注组采用常规经门静脉正向灌注法,先开放门静脉,再开放下腔静脉,最后开放肝动脉。假手术组开腹后游离肝门处门静脉、肝动脉及肝上、下下腔静脉,不予阻断,17min后关腹。分别检测3组术前1h、术后1h、8h及术后1d、5d的血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)水平;无肝期结束后1h、8h、1d取左肾组织行光镜检查观察肾组织病理形态学变化。结果术前1h,各组肾功能指标比较差异均无统计学意义(均为P>0.05);与假手术组比较,逆行灌注组、门静脉灌注组术后1h、8h及1d的Scr、BUN水平显著增高,而且逆行灌注组上述两指标明显低于门静脉灌注组(均为P<0.05),但术后5d3组比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。无肝期结束后1h,逆行灌注组和门静脉灌注组肾组织病理学检查发现肾间质充血,8h出现明显的肾小管上皮细胞水肿及肾间质充血,逆行灌注组明显轻于门静脉灌注组;无肝期结束后1d两组肾组织损伤呈现好转趋势,且逆行灌注组明显优于门静脉灌注组。结论自体原位肝移植术中实施逆行灌注可减轻大鼠急性肾损伤,改善大鼠早期肾功能。     

A20转染对大鼠肾脏缺血再灌注后肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 观察和分析A20基因转染对大鼠肾脏缺血再灌注后诱发的肾小管损伤及凋亡的影响。 方法 通过构建人源的A20基因表达载体pcDNA3.1-A20及空质粒载体pcDNA3.1,并将其表达载体及pcDNA3.1空质粒载体转化到感受态大肠杆菌。大肠杆菌采用固体LB培养基划盘,37℃恒温培养箱培养12～16 h,挑取单菌落,接种于5 ml 含氨苄青霉素的LB液体培养基中,置37℃恒温摇床,转速210 r/min,培养12～16 h,后接种于200ml含氨苄青霉素的LB液体培养基中继续培养12～16 h,提取质粒DNA,并对其进行1%琼脂糖凝胶电泳,以确定是目的基因。雄性SD大鼠24只,随机分为3组：生理盐水组、A20组、空质粒组,每组8只大鼠。术前48 h,脂质体Lipofectamine 2000包裹DNA,即脂质体pcDNA3.1-A20 + 生理盐水至250 ul (15 ul脂质体加10 ug构建的质粒DNA混匀后加入生理盐水至250 ul)、脂质体-pcDNA3.1 + 生理盐水至250 ul (方法同上), 混匀室温静置30min,分别通过大鼠尾静脉注射。手术方法：打开腹腔,分离左侧肾脏动脉和静脉,夹闭左侧肾脏动静脉45 min,观察大鼠左侧肾脏缺血后颜色变化,期间行右肾切除术,后左侧肾血管再灌注,制成大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型。术后24 h收获大鼠,采用全自动生化分析仪检测肾功能,肾组织HE染色行病理学检测,TUNEL法检测肾组织细胞凋亡的情况。 结果 A20组Scr、BUN水平明显低于空质粒组和生理盐水组（P均 ﹤0.05）,差异有统计学意义。各组肾小管都有不同程度的损伤,A20组与生理盐水组及空质粒组比较,肾小管扩张,肾小管上皮细胞刷状缘脱落、坏死,蛋白管型等肾脏组织病理损伤明显减轻（P均 ﹤0.05）,差异有统计学意义;空质粒组与生理盐水组比较,差异无统计学意义（P＞ 0.05）。肾小管上皮细胞凋亡多见于远端小管,A20组与生理盐水组和空质粒组比较,凋亡细胞数明显减少,差异有统计学意义（P均 ﹤0.05）;生理盐水组和空质粒组比较无显著性差异（P ＞0.05）。 结论 A20基因转染能明显减轻肾脏缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制肾小管上皮细胞凋亡有关。     

黄芪甲苷孵育脂肪源性干细胞对顺铂诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

目的 观察黄芪甲苷(Ast)孵育后的脂肪源性干细胞(ADSC)对顺铂诱导的肾小管上皮细胞(HKC)损伤的影响.方法 HKC被分为4组:(1)对照组;(2)顺铂组;(3) ADSC与损伤HKC共培养组(ADSC+HKC组);(4)Ast孵育ADSC后与损伤HKC共培养组(Ast+ADSC+HKC组).分别用不同浓度的顺铂(2.5、5、10、20μmol/L)诱导HKC 6、24 h,建立肾小管细胞损伤模型.用Transwell小室与20 mg/L Ast孵育的ADSC间接共培养48 h.流式细胞术(FCM)和原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测HKC的细胞凋亡;以增殖细胞核抗原(PCNA)反映HKC增殖情况;ELISA法检测下室HKC培养液中白细胞介素6(IL-6)、T细胞表达和分泌因子(RANTES)、红细胞生成素(EPO)、类胰岛素一号增长因子(IGF-1)的表达;结晶紫染色观察上室膜下ADSC的迁移指数.结果 FCM和TUNEL结果均显示,与顺铂组相比,ADSC+HKC组和Ast+ADSC+HKC组细胞凋亡的比例和数量减少,差异有统计学意义(均P＜0.05);PCNA染色结果显示ADSC+HKC组和Ast+ADSC+HKC组的细胞增殖数量高于顺铂组,差异有统计学意义(P＜0.05);与顺铂组相比,Ast+ADSC+HKC组IL-6、RANTES水平明显降低,EPO、IGF-1水平升高,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05);结晶紫染色显示Ast+ADSC+HKC组ADSC的迁移指数高于其他3组(均P＜ 0.05).结论 黄芪甲苷可刺激ADSC的旁分泌效应,增强ADSC向受损部位定向迁移,从而减少HKC凋亡.     

肾络宁对IgA肾病大鼠肾小管间质损害的实验研究

目的：探讨IgA肾病大鼠肾小管间质损害及中药复方肾络宁的干预作用。方法：SD大鼠随机分为正常组、模型组、肾络宁组、肾炎康复片组。采用牛血清白蛋白和葡萄球菌肠毒素B复合感染的方法建立大鼠IgA肾病模型；实验共16周，药物干预后常规检测尿红细胞、尿蛋白、血尿素氮、肌酐、尿NAG酶，以及免疫荧光观察肾组织病理；原住杂交，免疫组化及计算机图像分析系统观察大鼠肾小管间质损害的病理变化，以及Ⅲ型胶原（Col-Ⅲ）、转化生长因子β1（TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的表达情况。结果：模型组出现肾小管上皮细胞变性，线粒体结构消失，数量减少，间质成纤维细胞增生及胶原纤维形成；尿红细胞、尿蛋白、NAG酶、血肌酐、尿素氮明显增高，Col—Ⅲ、TGF-β1、PAI-1、TIMP-1表达明显增高，MMP-1表达明显降低。肾络宁及肾炎康复片组小管间质损害明显减轻；血尿、蛋白尿、血肌酐、尿素氮、尿NAG明显降低，Col—Ⅲ、TGF-β1、PAI—1、TIMP—1表达明显降低，MMP—1表达明显升高。结论：肾络宁可明显减轻IgA肾病大鼠肾小管间质损害，改善肾功能，延缓间质纤维化及肾衰竭的进程。     

促红细胞生成素对大鼠移植肾缺血-再灌注损伤的防护作用

目的探讨促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）对大鼠移植肾缺血-再灌注损伤（ischemia—reperfusion injury,IRI）的保护作用。方法采用BN大鼠和Lewis大鼠,分别随机分为实验组和对照组,每组各15只。BN大鼠作为供体,Lewis大鼠为受体,建立单侧原位大鼠肾移植模型。实验组受体大鼠术后立即腹腔注射重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）1000U／kg,对照组大鼠同样予腹腔注射等量生理盐水。两组受体大鼠在术后5d剪尾取血,检测血清肌酐（Scr）水平。同时将移植肾取出,肾组织行病理切片苏木素-伊红（HE）染色、过碘酸-雪夫（periodic acid Schiff,PAS）染色、马松（Masson）染色和过碘酸六胺银（periodic acid—silver methenamine,PASM）染色,观察肾组织病理学改变情况。结果实验组受体大鼠术后Scr水平为（102±3）μmol／L,对照组为（369±7）μmol／L,两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。两组受体大鼠移植肾均出现肾小管坏死改变。对照组移植肾组织病理切片主要表现为大片肾组织坏死,提示出现严重的急性排斥反应、肾小管坏死及动脉损伤;实验组肾组织病理切片主要表现为肾被膜下小灶性肾组织凝固性坏死;与对照组相比,实验组肾组织坏死面积较小,提示急性排斥反应程度较轻。结论肾移植术后早期使用EPO进行预处理可抑制肾脏IRI炎症反应,减少细胞凋亡,缓解移植后IRI。     

静脉注射含饱和氢气生理盐水减轻小鼠肾脏缺血再灌注损伤

目的 研究静脉注射含饱和氢气生理盐水对小鼠肾脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制.方法 健康、雄性的C57BL/6小鼠随机分为3组,每组10只.假手术组(SO组)小鼠仅接受中线开腹、双侧肾蒂游离及关腹操作;缺血再灌注组(IR组)小鼠用无损伤动脉夹同时钳夹双侧肾蒂,阻断45 min,制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射生理盐水,5 ml/kg;实验组小鼠制成肾脏IR损伤模型,并于肾脏缺血同时经尾静脉注射含饱和氢气生理盐水,5 ml/kg.各组小鼠于肾脏再灌注6 h时检测血清尿素氮(BUN)和肌酐(Scr);检测肾组织中丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的含量;观察肾脏组织形态学变化并检测肾小管上皮细胞的凋亡情况;观察肾组织中巨噬细胞的浸润情况;检测各组小鼠肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和IL-17 mRNA的水平.结果 实验组血清BUN和Scr水平明显低于IR组(P<0.05).实验组肾组织病理改变较IR组明显减轻,其肾小管损伤评分明显低于IR组(P<0.01),肾小管上皮细胞凋亡明显轻于IR组(P<0.05).实验组肾组织内MDA含量低于IR组(P<0.05).实验组小鼠肾组织内中性粒细胞和巨噬细胞的浸润较IR组减少(P<0.05).实验组TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-17mRNA的水平均低于IR组(P<0.05).结论 静脉注射含饱和氢气生理盐水能够在一定程度上减轻肾脏IR损伤,其机制可能与抑制肾脏IR后炎症反应有关.