泛素连接酶与肿瘤关系的研究

目前认为,真核细胞内的蛋白质主要通过两种不同的蛋白酶解系统降解:溶酶体途径和泛素-蛋白酶途径.其中,约80%通过泛素-蛋白酶体途径降解.泛素连接酶是泛素-蛋白酶体系统的重要成分,它在癌形成过程中扮演着重要的角色[1].本文从细胞周期、凋亡、肿瘤治疗等方面来介绍泛素连接酶与肿瘤发生和治疗的关系.     

蛋白酶体抑制剂与肾脏疾病的研究进展

泛素一蛋白酶体途径（ the ubiquitin - proteasome pathway,UPP）是细胞内蛋白质代谢的一个重要通路,精确地控制着细胞中多种蛋白质成分的降解,包括细胞周期调节蛋白在内的80％的细胞内蛋白质均通过此途径降解,参与基因转录和细胞周期的调节以及细胞凋亡、抗原递呈等细胞生理过程。蛋白酶体抑制剂已经用于多发性骨髓瘤的临床治疗,具有抑制多种肿瘤细胞增殖及诱导肿瘤细胞凋亡的作用,     

泛素-蛋白酶体系统与肾脏纤维化信号通路

泛素-蛋白酶体系统是目前最重要的体内高度选择性调节蛋白质降解和功能的体系.最近研究发现泛素蛋白酶体参与了肾脏纤维化多条信号通路中重要信号蛋白分子(如转化生长因子β、丝裂原活化蛋白激酶、核因子-κB)的降解调节,引起信号通路的过度持久活化,造成肾脏损害.本文综述了泛素-蛋白酶体系统在肾脏纤维化中的作用以及蛋白酶体抑制剂在肾脏纤维化的预防和治疗中的前景.     

泛素-蛋白酶体途径与肾脏疾病

泛素-蛋白酶体途径（ubiquitin-proteasome pathway,UPP）是一种广泛存在于真核细胞胞浆中非常重要的、依赖ATP的非溶酶体蛋白降解通路,能高效并高度选择性地进行细胞内蛋白质转换.它涉及细胞周期的调控、细胞凋亡、抗原提呈、炎症演进和基因转录及表达[1]等多方面,尤其是通过降解细胞内各信号通路的抑制因子或/和激活因子发挥着上调或下调作用.其成分的改变或功能异常将引起蛋白质的降解障碍,导致细胞功能紊乱.UPP的异常可能与诸多疾病有关[2],现已证明,许多肾脏疾病的病理生理过程和UPP密切相关.     

HECT型E3泛素连接酶在肿瘤中作用的研究现状和进展

肿瘤的发生和发展是多因素、多步骤的复杂过程。而泛素化是多步级联的蛋白质修饰过程,是维持真核细胞内稳态的重要机制。其中E3泛素连接酶家族是泛素-蛋白酶体系统的重要成分,可催化多种蛋白底物的泛素化,促进其被蛋白酶体系统降解。迄今为止,E3泛素连接酶在多种肿瘤细胞生物学过程中发挥着重要作用,包括细胞增殖、凋亡及周期调控。而HECT型E3泛素连接酶作为E3泛素连接酶最早被研究的一种,其主要参与蛋白质翻译后转录调控的泛素化修饰过程。本文就HECT型E3泛素连接酶及其在肿瘤中作用的现状和最新研究进展进行综述。     

泛素-蛋白酶体系统与精子DNA损伤修复的研究进展

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是体内广泛存在的一种蛋白酶体系统,由泛素(Ub)、泛素激活酶(E1)、泛素结合酶(E2)、泛素连接酶(E3)、26S蛋白酶体和去泛素化酶(DUBs)组成,能够调控体内蛋白降解。研究发现UPS除了蛋白降解功能以外,还参与细胞周期调控、免疫应答、信号传导以及DNA损伤修复等过程。精子发生要经历染色体联会、同源重组等过程,精子DNA在这些过程中易受干扰而出现损伤。近年来研究发现,UPS与精子发生当中的DNA损伤修复有关。UPS参与DNA损伤的修复机制包括:泛素化调节DNA损伤修复相关酶类、协助识别DNA损伤位点、募集损伤修复相关蛋白、启动DNA损伤修复途径、维持染色体稳定,从而保证精子发生正常进行。     

蛋白酶体抑制剂诱导肿瘤细胞凋亡研究进展

抗肿瘤药物治疗主要面临抗癌效果和毒副反应这一矛盾,同时还出现耐药的肿瘤细胞株,使得肿瘤治疗难有较大进展.蛋白酶体抑制剂是新发现的具有抗癌效果的药物,它通过抑制泛素-蛋白酶体系统在细胞内的生物活性来调节细胞周期,促进细胞凋亡而起到抗癌作用,并可与其他化疗药物协同作用,减少耐药性.体内外实验研究发现蛋白酶体抑制剂对包括骨肉瘤在内的多种实体肿瘤细胞具有促凋亡的生物活性,可通过多种信号转导途径引起细胞凋亡.蛋白酶体抑制剂bortezomib已通过美国FDA认证而应用于临床治疗多种肿瘤并取得较好疗效.该文就蛋白酶体结构、蛋白酶体抑制剂作用途径、促凋亡作用机制的研究成果和面临问题、bortezomib临床应用前景作一综述.     

曲古抑菌素A通过雌激素受体α依赖和非依赖方式抑制乳腺癌细胞中细胞周期素D1的表达

目的探讨曲古抑菌素A（TSA）对ER—α阳性和ER—α阴性乳腺癌细胞系的作用机制。方法以含不同浓度TSA的培养液培养MCF-7（ER—α阳性）和MDA—MB-231细胞（ER—α阴性）；采用四甲基亚噻唑蓝（MTT）法检测TSA作用后肿瘤细胞的增殖状态；用流式细胞仪定量分析肿瘤细胞增殖周期的改变；用半定量RT—PCR法测定ER—α和cyclinD1mRNA的表达。Western blot检测ER—α、p21和细胞周期素cyclinD1的蛋白表达水平。结果ER—α阳性的MCF-7细胞对TSA的敏感性明显高于ER—α阴性的MDA—MB-231细胞，TSA作用48h时前者的IC50约为40．6nmol／L，后者的IC50约为272．4nmol／L。在MCF-7细胞系中，TSA能有效抑制ER—α和cyclinD1 mRNA的表达，并增强cyclinD1蛋白通过泛素-蛋白酶体通路降解，使肿瘤细胞主要阻滞在G0／G1和G2／M期。在MDA—MB-231细胞系中，TSA对cyclinD1蛋白通过泛素-蛋白酶体通路降解作用增强，但对其mRNA转录本表达无明显影响。结论TSA不仅可以通过依赖ER—α途径抑制cyclinD1 mRNA的表达，也可通过增强泛素-蛋白酶体通路降解cyclinD1蛋白而不依赖于雌激素途径。     

反义SKP2对胆管癌细胞系QBC中p27kip1表达的影响

目的 通过S期激酶相关蛋白（SKP2）反义寡核苷酸（ASODN）阻断泛素，蛋白酶体降解途径，观察对胆管癌细胞QBC中SKP2和p27^kip1表达的影响，探讨泛素-蛋白酶体途径在胆管癌发生发展中的作用。方法 SKP2反义寡核苷酸和胆管癌细胞QBC共培养，脂质体转染，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR），Western blot法检测SKP2和p27^kip1 mRNA和蛋白在QBC中的表达。结果 SKP2 ASODN作用于QBC后，SKP2在mRNA和蛋白的表达较对照组和NSODN组均显著降低（P〈0．05），p27^kip1 mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05），蛋白表达则较对照组和NSODN组明显增高（P〈0．05）。结论 SKV2介导的泛素-蛋白酶体途径在调节胆管癌细胞QBC中p27^kip1的降解中发挥重要作用，SKP2反义寡核苷酸在显著抑制QBC中SKP2 mRNA和蛋白的表达的同时，促进p27^kip1蛋白表达，但对p27^kip1 mRNA无明显影响，提示SKP2对p27^kip1的调节主要在转录后水平。SKV2作为胆管癌基因治疗中有效的潜在靶基因，在胆管癌的基因治疗方面具有重要意义。     

泛素-蛋白酶体系统介导的蛋白质降解对L—LTP维持期的影响

泛素-蛋白酶体系统作为细胞内局部迅速降解蛋白质的主要途径之一,其介导的蛋白质降解对LTP有重要影响。该系统可通过降解某些抑制性因子促进蛋白质合成,从而对L-LTP的维持期产生一定的正性调控作用。泛素一蛋白酶体系统本身的活性受到神经兴奋性的调节,使得蛋白质的降解作用与神经元的功能相适应。深入探讨泛素一蛋白酶体系统对L—LTP维持期的影响以及神经兴奋性对泛素一蛋白酶体系统的调控。不仅有助于更全面地了解学习记忆的分子机制。更合理地解释实验现象．还将有助于拓展认知功能障碍的治疗思路。     

Time window characteristics of cultured rat hippocampal neurons subjected to ischemia and reperfusion

Themolecularmechanismofneuronalinjurycausedbycerebralischemiahasnotbeenclearlyunderstood.However,studieshaveprovedthatthepatho physiologicalmechanisminvolvedisakind ofcascadeofdamageandisrelatedtoatleastfour differentmechanism,thatisexcitotoxity,periinfarct depolarization,inflammationandprogrammedcell death(PCD).Before1990s ,neurondeathcausedby cerebralischemiahadbeenthoughttobeapassive processofnecrosis.Inrecentyears,withmoreand moreresearchesinneurondeath,ourunderstandingin celldeathhasunde…     

肝缺血再灌注细胞凋亡现象及Fas蛋白、PCNA 、p53、bcl-2 mRNA表达

目的：探讨肝缺血再灌注肝细胞凋亡发生的时空分布、基因表达特点及意义。方法：在观察SD大鼠（n=40）肝缺血0,30,45,60min再灌注3,6,24h存活率及病理形态基础上,重点观察大鼠（n=100)全肝血流阻断30min再灌注0,0.5,1,3,6,12,24,48,72,96h凋亡细胞分布（原位末端标记术,TUNEL）,G0-G1期细胞、凋亡细胞、增殖细胞指数分布（流式细胞术）,肝细胞显微及超微结构（光镜、电镜技术）,Fas蛋白、PCNA蛋白（免疫组化）及p53、bcl-2基因mRNA表达（原位杂交）。结果：缺血30min组多见细胞凋亡,细胞应答反应主要为三期：①急性期：再灌注0.5h Fas蛋白首先在血管周围高表达;②亚急期（3-24h):TUNEL阳性细胞在血管周围高分布,并向周围扩展;病理形态可见严重变性、细胞皱缩、细胞增殖三种变化;G1期细胞数大量减少,凋亡峰逐渐升高,12h后出现增殖峰,相关基因表达增强;③恢复早期（24-96h)：G1期细胞指数回升,凋亡峰和增殖峰持续并缓慢下降;相关基因表达陆续减弱。结论：肝缺血30min再灌注期机体可能通过下述基因调控途径影响细胞损伤应答反应：①Fas死亡基因与bcl-2存活基因的双重调控;②细胞凋亡与增殖双重调控;③经p53基因实现的细胞周期调控。     

环状RNA在脑缺血性损伤中作用机制的研究进展

环状RNA（circular RNA, circRNA）是广泛存在于生物体内的一种非编码RNA,具有闭合环状结构,经过特殊剪切机制形成,在基因转录后水平发挥重要调控作用。哺乳动物中枢神经系统中存在大量circRNA,与神经细胞增殖、分化、凋亡及脑缺血后神经细胞损伤密切相关。有研究表明脑缺血性疾病发生时,circRNA表...     

运动训练诱发脑缺血耐受的机制研究进展

运动训练能够减轻脑缺血发生后的运动功能障碍,临床和基础研究均对其作用机制进行了深入探索。但是,关于缺血前的运动训练减轻脑缺血发生后神经损伤的具体机制尚不明确,本文就其相关机制进行了综述。缺血前运动训练可通过降低炎症反应,减少神经细胞凋亡,减轻血脑屏障功能障碍,改善脑血管系统,减轻谷氨酸毒性,从而诱发脑缺血耐受。运动训练的神经保护作用机制的阐明有利于针对脑卒中高危人群进行运动干预,减轻缺血性脑卒中后神经功能障碍,产生良好的社会效益。     

缺血预处理对家兔脑缺血保护效应的实验研究

目的 探讨缺血预处理脑保护效应,以及神经细胞凋亡与缺血性脑损害的关系。方法 家兔１５只,随机分为３组,对照组,缺血组,缺血预处理组。Ａ组只做手术操作,Ｂ组采用二血管夹闭全脑缺血１０分钟,Ｃ组在缺血前增加缺血预处理２分钟再灌注３０分钟。对比观察缺血后３天海马ＣＡ１区神经元密度和缺血细胞数,同时使用ＴＵＮＥＬ原位标记法,检测缺血３天后海马区的凋亡细胞。     

γ-氨基丁酸及其受体在脑缺血性损伤中的作用

背景脑缺血时引起的兴奋性氨基酸过量释放是导致神经元死亡的重要原因。γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）是哺乳动物中枢神经系统主要的抑制性神经递质,GABA递质及其受体的改变能改善兴奋性氨基酸过量造成的不利影响。以往对抑制性递质系统在脑缺血性损伤中的作用的研究较少,近年来,研究发现采取有效措施增强GABA能系统功能可以改善脑缺血结局。目的探讨GABA能系统在脑缺血性损伤中的作用。内容综述GABA递质、GABA受体结构、分布、生理作用机制及其在脑缺血过程中不同水平的改变及其相关机制。趋向GABA能系统有望为临床脑缺血性损伤的治疗提供新思路。     

Effect of Endoplasmic Reticulum Stress in VEGF-Induced Neuroprotection

Researchers suggest that endoplasmic reticulum (ER) stress cause apoptosis after ischemia. Caspase-12 has been localized to the ER and is a signal for apoptosis. We sought to clarify the role of caspase-12 in the vascular endothelial growth factor (VEGF) induced neuroprotective effect. Transient focal cerebral ischemia was produced by occluding left middle cerebral artery in rabbit. The expressions of caspase-12 and caspase-3 were detected by immunohistochemistry. Neuronal apoptosis was detected by TUNEL staining. We confirmed that the number of apoptotic cells and the expressions of caspase-12 and caspase-3 significantly increased during reperfusion. VEGF inhibited the cell apoptosis and the expressions of caspase-12 and caspase-3. These results suggest that VEGF may protect neurons from apoptosis by inhibiting ER stress pathway.     

Involvement of the activin-follistatin system in tubular regeneration after renal ischemia in rats.

This study was conducted to investigate the involvement of the activin-follistatin system in renal regeneration after ischemic injury. Expression of mRNA for the activin beta(A) subunit was not detected in normal kidneys but increased markedly after renal ischemia. Immunoreactive beta(A) subunit was detected in tubular cells of the outer medulla in ischemic but not normal kidneys. Expression of mRNA for follistatin, an antagonist of activin A, was abundant in tubular cells of the outer medulla in normal kidneys and decreased significantly after renal ischemia. For assessment of the role of the activin-follistatin system in renal regeneration after ischemic injury, recombinant follistatin was intravenously infused into rats with renal ischemia, at the time of reperfusion. Exogenous follistatin prevented the histologic changes induced by ischemic injury, reduced apoptosis in tubular cells, and accelerated tubular cell proliferation. Serum levels of creatinine and blood urea nitrogen were significantly lower in follistatin-treated rats. Conversely, intravenous administration of recombinant activin A inhibited tubular cell proliferation after ischemic injury. These results indicate that the activin-follistatin system participates in renal regeneration after ischemic injury. Follistatin administered intravenously accelerates renal regeneration after renal ischemia, presumably by blocking the actions of endogenous activin.     

Selective vulnerability of peptide-containing neurons in cerebral ischemia; immunohistochemical study]

Histochemical changes in peptidergic and catecholaminergic neurons during ischemia were investigated in the cerebral neocortex of the gerbil. Catecholaminergic fibers were observed by catecholamine histofluorescence with glyoxylic acid solution, and peptidergic neuron systems such as vasoactive intestinal polypeptide (VIP), somatostatin (SOM), and neuropeptide Y (NPY) were observed by immunohistochemistry. Two hours after unilateral occlusion of the internal carotid artery, catecholaminergic fibers disappeared in the neocortex on the occlusion side, while peptidergic nerve fibers except for NPY fibers were intact after 2 hours of ischemia. NPY fibers had decreased in number on the occlusion side 2 hours after ischemia. VIP-, SOM-, and NPY-immunoreactive neurons showed a decrease of 60% six hours after ischemia, and these neurons completely disappeared in the cerebral neocortex 24 hours after ischemia. These results suggest that catecholaminergic neuron system is more vulnerable than the peptidergic one in ischemic event.