西红花苷对AD大鼠海马BDNF-TrkB信号通路的影响

目的:观察西红花苷对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)酪氨酸蛋白激酶受体B(Trk B)信号通路的影响,探讨西红花苷改善AD大鼠学习记忆的机制。方法:108只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、白藜芦醇40mg/kg组、西红花苷20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg组。大鼠侧脑室注射Aβ_(25-35)建立AD大鼠模型,各组ip相应药物或生理盐水,连续注射14 d。Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,免疫组化、免疫荧光检测海马BDNF蛋白的表达,Western Blot检测BDNF和Trk B蛋白的表达。结果:Morris水迷宫实验中,与正常对照组比较,模型对照组大鼠潜伏期时间明显延长,目标象限的停留时间缩短,穿越原平台的次数明显减少。与模型对照组比较,西红花苷各剂量组潜伏期时间明显缩短,目标象限停留时间延长,穿越原平台的次数明显增加,西红花苷(40、80 mg/kg)与白藜芦醇组之间未见显著性差异。免疫组化、免疫荧光和Western Blot实验中,与正常组相比,模型对照组海马BDNF和Trk B的表达显著下调,与模型对照组比较,西红花苷各剂量组海马BDNF和Trk B的表达显著上调,西红花苷各剂量组BDNF平均积分光密度值增强,西红花苷(80 mg/kg)组与白藜芦醇组之间未见显著性差异。结论:西红花苷可以通过激活BDNF-TrkB信号通路,增加海马BDNF和Trk B的表达,改善AD大鼠的学习记忆能力。     

西红花苷-1对急性低氧条件下大鼠学习记忆及海马SIRT1表达的影响

目的 研究西红花苷-1对急性低氧条件下大鼠学习记忆及海马区沉默信息调节因子1(SIRT1)表达的影响.方法 SD大鼠随即分为5组:对照组,低氧模型组,西红花苷-1低、中、高剂量(25、50、100mg/kg)组.西红花苷-1各组每天im给药1次,给药3d后低氧环境下刺激72 h,采用Morris水迷宫观察大鼠的学习记忆行为,免疫组化法与Western blotting法检测大鼠海马SIRT1蛋白表达.结果 与低氧模型组相比,西红花苷-1各剂量使Morris水迷宫实验中大鼠逃避潜伏期均明显缩短,且穿越甲台次数增加(P＜0.05).免疫组化和Western blotting法检测显示,西红花苷-1各组大鼠海马组织SIRT1蛋白表达均显著高于低氧模型组(P＜0.05),其中以中、高剂量组作用明显.结论 西红花苷-1预先给药,可增加急性低氧大鼠海马组织SIRT1蛋白表达,这可能是其改善低氧条件下大鼠学习记忆的机制之一.     

西红花苷干预对急性低氧条件大鼠脑海马FOXO3α表达的影响

目的探讨西红花苷干预对急性低氧72小时大鼠脑海马FOXO3α表达的影响。方法 90只健康雄性SD大鼠随机分为5个组:正常对照组,低氧模型组,西红花苷低(25mg/kg)、中(50mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组。采用RT-PCR技术检测脑海马FOXO3αmRNA表达,免疫组化与Western blot蛋白免疫印迹法检测脑海马FOXO3α蛋白表达。结果 RTPCR、免疫组化及Western blot结果均显示:大鼠脑海马FOXO3αmRNA及蛋白表达量在低氧模型组高于正常对照组(P0.05),西红花苷干预各剂量组均低于低氧模型组,其中以中、高剂量组作用显著(P0.05)。结论急性低氧刺激后大鼠海马FOXO3α表达增强,西红花苷干预对其表达有明显的抑制作用,并发挥神经保护作用。     

黄芩苷对四氧嘧啶致糖尿病小鼠学习记忆功能的影响

目的观察黄芩苷对四氧嘧啶致糖尿病小鼠学习记忆功能及去甲肾上腺素能神经活动的影响。方法实验分正常对照组、模型组、黄芩苷组(12.5 mg/kg)和尼莫地平组(15 mg/kg),采用腹腔注射四氧嘧啶(70 mg/kg)复制糖尿病模型,造模第4天起药物处理,每天一次,持续至第56天。采用血糖仪检测小鼠血糖,采用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆功能,采用酶联免疫吸附法测定小鼠大脑海马区和额叶皮层区去甲肾上腺素(NE)和间羟去甲肾上腺素(NMN)的量。结果造模后第28天和56天,与对照组相比,模型组潜伏期均明显延长(P0.01);穿台次数和目标象限停留时间比均显著性减少(P0.01)。与模型组比较,黄芩苷组潜伏期缩短(P0.05,P0.01),穿台次数和目标象限停留时间比明显增加(P0.05),且黄芩苷组和尼莫地平组之间差异无统计学意义。黄芩苷能够有效抑制糖尿病小鼠大脑海马区和额叶皮层区NE和NMN的量的降低(P0.05,P0.01)。结论黄芩苷能够有效改善四氧嘧啶致糖尿病小鼠学习记忆功能障碍,其机制可能与其增加NE能神经递质活动有关。     

解毒益智胶囊对慢性脑缺血性学习记忆障碍大鼠学习记忆和海马突触素表达的影响

目的:探讨解毒益智胶囊对AD大鼠学习记忆和海马突触素表达的影响。方法:建立慢性脑缺血性学习记忆障碍模型,采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组织化学和图像分析技术对大鼠海马突触素进行定量分析。结果:解毒益智胶囊158mg/kg和210mg/kg能够显著缩短逃避潜伏期,延迟平台停留时间,增加经过平台次数,延长平台停留距离,缩短探索总路程,与模型对照组比较有显著的统计学意义(P<0.05);105mg/kg缩短探索总路程与模型对照组比较有显著统计学意义(P<0.05);虽然对逃避潜伏期,平台停留时间,经过平台次数及平台停留距离影响与158mg/kg和210mg/kg两个剂量趋势一致,但没有统计学意义;105mg/kg、158mg/kg和210mg/kg三个剂量组均能够显著提高提高海马区突触素平均光密度,提高海马区、尤其是海马CA1区突触素的表达,与模型对照组比较有显著的统计学意义。结论:解毒益智胶囊具有促进AD鼠学习记忆恢复和海马突触素的表达的作用。     

淫羊藿苷对阿尔茨海默病炎症模型大鼠神经细胞的保护作用

目的:用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)炎症模型大鼠,观察淫羊藿苷(Icariin ICA)对该模型大鼠学习记忆及超微结构的影响。方法:经八臂迷宫训练成功的45只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、淫羊藿苷30mg/kg组、淫羊藿苷120mg/kg组、双氯芬酸组10mg/kg组,采用侧脑室注射LPS(10μl)制作实验性AD炎症模型,并八臂迷宫测验并记录其数据。迷宫测验完成后断头取脑海马组织。应用电镜观察大鼠海马组织CA1区神经细胞超微结构变化,用SPSS统计学软件进行统计学分析。结果:⑴侧脑室注射LPS(10μl)后对大鼠一般情况观察出现了行为异常。⑵八臂迷宫测试系统分析结果:制模后与对照组相比,其它各组大鼠总记忆错误(TE)、参考记忆错误(RME)、工作记忆错误(WME)明显增多,用淫羊藿苷治疗后与模型组比较,淫羊藿苷120mg/kg组和双氯芬酸组10mg/kg组大鼠的TE、RME、WME均明显减少,淫羊藿苷30mg/kg组错误选择次数无统计学意义。超微结构观察示:对照组、海马组织线粒体比较规则,淫羊藿苷120mg/kg组、双氯芬酸组线粒体轻度受损,模型组海马神经细胞核固缩,核周隙扩张,甚至核膜结构不清,核形态极不规则。结论:侧脑室注射LPS(10μl)能成功复制AD炎症动物模型;淫羊藿苷120mg/kg组显著改善AD模型大鼠的学习记忆能力,淫羊藿苷对炎症模型大鼠海马超微结构有保护作用。     

清心开窍方皂苷对AD大鼠大脑皮层及海马区Bax、Bcl-2、Aβ及βAPP表达的影响

目的 探讨清心开窍方及其皂苷对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)大鼠大脑皮层与海马区Bax蛋白、Bcl-2 蛋白、β-淀粉样蛋白(β-amyloid, Aβ)及淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,βAPP)表达的影响。方法 选取32只SPF级SD大鼠,将Aβ25-35注入32只大鼠双侧杏仁核制作AD模型,造模后随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组（盐酸多奈哌齐片,1.67 mg/kg）、清心开窍方组（清心开窍方煎液,12.67 mL/kg）及皂苷组（皂苷,6.30 mg/kg）,每组8只,另选取8只大鼠作为正常组。正常组、模型组给予等量双蒸水灌胃,各组每天干预1次,连续2周。给药结束后进行Morris水迷宫测试,记录各组大鼠水迷宫测试期间第1～5天逃避潜伏期及跨越平台次数。免疫组织化学法检测各组大鼠大脑皮层与海马区Bax、Bcl-2、Aβ及βAPP表达。结果 与模型组比较,各用药组大鼠第3～5天逃避潜伏期均缩短,皮层与海马区Bax、Aβ及βAPP表达降低,跨越平台次数增加,皮层Bcl-2表达升高,西药组、中药组海马Bcl-2表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01, P<0.05)。与西药组比较,皂苷组βAPP均升高;中药组皮层及海马区Aβ均降低,海马区Bax表达降低,皮层Bcl-2表达升高;皂苷组第3～5天逃避潜伏期明显延长,跨越平台次数减少,皮层及海马区Bcl-2表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05, P<0.01)。结论 清心开窍方能显著改善AD大鼠学习记忆和空间探索的能力,可能是通过降低大脑皮层与海马区Bax、Aβ、βAPP表达,升高Bcl-2表达而发挥作用。     

银杏酮酯对自然衰老大鼠学习记忆及海马、前额叶皮层c-fos、Caspase-3和Caspase-8表达的影响

目的:探讨银杏酮酯(Ginkgo biloba extract,GBE50)对自然衰老大鼠学习记忆及海马、前额叶皮层c-fos、Caspase-3和Caspase-8表达的影响。方法:21月龄大鼠随机分为模型组、银杏酮酯组和阳性药银杏叶提取物组,1月龄大鼠作为正常组。其中正常组和模型组用1%羧甲基纤维素钠灌胃,银杏酮酯组和银杏叶提取物组分别予100 mg/kg的药物灌胃60天。新物体识别实验检测学习记忆,免疫组织化学方法检测海马CA1区和前额叶皮层c-fos和Caspase-8的蛋白水平,免疫印迹方法检测海马和前额叶皮层Caspase-3蛋白表达。结果:新物体识别实验结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物可使大鼠的分辨指数和优先指数明显升高。免疫组织化学结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物可使海马CA1区和前额叶皮层cfos表达增加,Caspase-8表达降低。免疫印迹结果显示:与模型组相比,100mg/kg银杏酮酯和银杏叶提取物组可使海马和前额叶皮层Caspase-3蛋白表达下降。结论:100mg/kg的银杏酮酯可以改善自然衰老大鼠学习记忆缺陷,这种改善可能与上调自然衰老大鼠海马和前额叶皮层c-fos表达,降低Caspase-3和Caspase-8蛋白水平有关。     

绞股蓝皂苷对嗅球损毁大鼠学习记忆能力减退的影响

目的观察绞股蓝皂苷对嗅球（oB）损毁AD模型大鼠学习记忆能力减退的影响。方法SD健康大鼠150只,随机分为5组：OB损毁组,绞股蓝皂苷高、中、低剂量干预组,正常对照组,每组30只。通过双侧OB损毁、复制AD大鼠模型。采用绞股蓝皂苷连续灌胃,观察各组大鼠行为学、海马GAP-43蛋白和GAP-43mRNA表达以及隔区胆碱乙酰转移酶（CHAT）免疫阳性神经元数的变化。结果与OB损毁组比较,绞股蓝皂苷中、高剂量组潜伏期明显缩短、穿过平台次数明显增加（P〈0．05）;海马GAP-43蛋白和GAP-43mRNA表达明显增多（P〈0．05）;内侧隔核和斜角带垂直支中ChAT免疫阳性神经元数也明显增多（P〈0．05）,且胞体变大、突起变长。绞股蓝皂苷低剂量组与OB损毁组比较,上述各指标均无明显差异（P〉0．05）。绞股蓝皂苷中、高剂量组之间比较,上述各指标均有明显差异（P〈0．05）。结论绞股蓝皂苷可能通过提高海马GAP-43蛋白和GAP-43mRNA表达以及保护隔区胆碱能神经元,改善OB损毁AD大鼠学习记忆功能。     

不同穴位电针对阿尔茨海默症大鼠的疗效及其机制研究

目的:观察并比较"益肾调督"电针法和"补肺益肾调督"电针法对阿尔茨海默症(AD)大鼠学习和记忆能力的改善情况,以及对大鼠海马及前额叶皮层部分炎性因子的影响,对其相关机制进行初步探讨。方法:将SD大鼠随机分为对照组、假手术组、模型组、两穴位治疗组和三穴位治疗组,每组各8只。于双侧海马注射10μLβ-淀粉样蛋白(Aβ_(25-35))制作AD模型,假手术组注射等量的0.9%氯化钠溶液。两穴位治疗组造模成功后电针"百会"和"肾俞",三穴位治疗组造模成功后电针"百会""肾俞"和"肺俞",1次/d,共10 d。通过Morris水迷宫实验观察各组大鼠的学习和记忆能力变化,用Western blot法检测各组大鼠前额叶皮层和海马组织中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达变化。结果:造模后大鼠饮食、行动等一般情况较差,干预后两治疗组一般情况均较模型组有所好转。水迷宫实验结果显示,与对照组和假手术组比较,模型组大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P0.05),穿越原平台的次数明显减少(P0.05);与模型组比较,两治疗组平均逃避潜伏期均明显缩短(P0.05),穿越原平台次数均明显增加(P0.05)。Western blot结果显示,与对照组和假手术组比较,模型组大鼠前额叶皮层和海马组织中IL-1β、TNF-α蛋白的相对表达量明显升高(P0.000 1,P0.001,P0.01);与模型组比较,两治疗组IL-1β、TNF-α相对表达量均明显降低(P0.01,P0.05)。结论:无论是"益肾调督"电针法还是"补肺益肾调督"电针法均可改善AD模型大鼠的一般情况和学习记忆能力,且电针干预可抑制AD模型大鼠前额叶皮层和海马组织中IL-1β、TNF-α表达的增加,这可能是电针治疗AD的潜在机制之一。     

草酸铵对僵蚕抗凝作用的影响

目的：研究草酸铵对僵蚕抗凝作用的影响。方法：以凝血酶时间(TT)为指标，用添加法比较不同浓度草酸铵对僵蚕提取液和凝胶分离液抗凝作用的影响。结果：添加草酸铵浓度在1．8～21．3mg／ml范围内，对固形物含量15．8～31．6mg／ml的提取液和14．6～29．1mg／ml的凝胶分离液的TT值增加成正相关。结论：草酸铵对僵蚕提取液、凝胶分离样品的抗凝作用均有增强作用，随提取液浓度降低影响增大，而随凝胶分离液浓度增大影响增大。     

蛇床子素抗凝血作用

目的:研究蛇床子素的抗凝血作用。方法:通过测定小鼠凝血时间(CT)、大鼠的凝血酶原时间(PT)和优球蛋白溶解时间(ELT),观测蛇床子素的抗凝作用。结果:蛇床子素能显著处长CT、PT,缩短ELT。结论:蛇床子素具有明确的抗凝血作用。     

"软系"疗法的中医探讨

从中医角度探讨“软系”疗法的科学性,探求“软系”疗法疗效显著的原因。     

中医药治疗黄褐斑现状

综述了1995－2001年中药内治、外治疗法及针灸治疗黄褐斑的特色和优势。     

大黄素对急性胰腺炎胰腺组织TGFβ1表达的影响

目的通过分析中药大黄素对大鼠急性胰腺炎治疗前后胰腺组织细胞转化因子β1(TGFβ1)的表达、DNA合成及总蛋白含量的影响，从胰腺再生角度探讨大黄素治疗急性胰腺炎的作用机制。方法以雨蛙肽(caerulein)腹腔注射诱导大鼠急性胰腺炎模型，并于大黄素治疗前后6、24、48、72及96h处死大鼠。同时应用RT-PCR技术检测治疗前后胰腺组织TGFβ1mRNA表达，同位素体外掺入法测定胰腺组织DNA合成以及Lowry′s法测定胰腺组织总蛋白含量。结果大黄素治疗后血清淀粉酶显著下降。正常胰腺组织、胰腺炎诱导后6h未见TGFβ1mRNA表达。TGFβ124h后出现表达，72h时达高峰。大黄素治疗后6h即可检测到TGFβ1mRNA表达，且24、48h时表达均较非治疗组显著增强，并于48h时达最大值。同时胰腺炎诱导后72h，胰腺组织DNA合成显著下降，大黄素治疗后96hDNA合成明显增加，胰腺炎诱导后48h胰腺组织总蛋白含量下降，大黄素治疗后96h显著增加。结论大黄素治疗急性胰腺炎的作用机制可能是通过诱导细胞因子TGFβ1基因表达增强，调控细胞增殖和分化，刺激多种细胞外基质成分合成，增加胰组织DNA合成和蛋白含量，参与胰腺细胞修复、再塑过程。     

蛇床子素抗凝血作用

目的：研究蛇床子素的抗凝血作用。方法：通过测定小鼠凝血时间（CT）、大鼠的凝血酶原时间（PT）和优球蛋白溶解时间（ELT），观测蛇床子素的抗凝作用。结果：蛇床子素能显著处长CT、PT，缩短ELT。结论：蛇床子素具有明确的抗凝血作用。     

苯唑青霉素对丁胺卡那毒素药动学的影响

 采用微量微生物法对丁胺卡那霉素（AMK）单用及AMK与苯唑青霉素（OXA）合用后，兔体内AMK血药浓度进行测定；药时数据用MCPKP软件经IBM计算机处理，并对两组药动学参数进行了统计学处理，结果表明OXA对AMK的药动学有显著的影响。     

《诸病源候论》对皮肤病学的贡献

对《诸病源候论》在皮肤病方面的成就进行了较为系统的整理总结 ,该书着重讨论了皮肤病的命名、分类、病因病机 ,并阐发了《内经》“邪之所凑 ,其气必虚”理论和预防为主的思想。     

缓冲盐对大孔吸附树脂分离阿魏酸脂质体及游离药物的影响

目的：研究缓冲盐对不同型号大孔吸附树脂分离脂质体及其游离药物能力的影响,并对阿魏酸脂质体进行质量评价。方法：采用缓冲盐（Na₂HPO₃-NaH₂PO₃）平衡的大孔吸附树脂分离脂质体与游离药物,用高效液相色谱检测药物含量,计算包封率。结果：该法在0.56~2.8 μg· mL^-1线性关系良好（r=0.999 6）,精密度小于1.1%。缓冲盐平衡后的大孔吸附树脂对脂质体的吸附作用均有所降低,且不影响大孔吸附树脂对阿魏酸的吸附能力。其中HPD450对空白脂质体的回收率在97.2%~100.8%,平均回收率为98.1%。结论：缓冲盐可提高大孔吸附树脂分离脂质体及游离药物的能力。     

基于细胞自噬探讨左归丸对肾虚仔鼠皮肤发育的影响

目的:研究左归丸对先天肾虚仔鼠发育过程中皮肤内细胞自噬的影响及其机制,探索补肾填精法在生长发育异常中的应用价值。方法:36只雌雄比例为2∶1的大鼠进行配对,复合应激法刺激孕鼠构建先天肾虚仔鼠模型,根据将孕鼠处理方式不同,分为正常组,肾虚组,左归丸低、高剂量组(2,8 g·kg^-1)。正常组不造模给予生理盐水灌胃,肾虚组造模给予生理盐水灌胃,左归丸低、高剂量组造模给予左归丸悬浊液灌胃。切取出生后21 d仔鼠的背部皮肤,苏木素-伊红(HE)染色观察仔鼠皮肤显微结构形态,测量真皮层和表皮层厚度,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测仔鼠皮肤分泌型糖蛋白3a(Wnt3a)和β-连环蛋白(β-catenin)mRNA和蛋白表达量,免疫双荧光检测皮肤内自噬指标微管相关蛋白轻链3(LC3)和人死骨片1-泛素结合蛋白p62(SQSTM1-p62)的表达。结果:正常组仔鼠皮肤层次清楚,结构正常,肾虚组真皮层胶原排列疏松,左归丸低、高剂量组皮肤组成基本正常;与正常组比较,肾虚组仔鼠在皮肤的表皮层增厚,真皮层变薄(P<0.05);与肾虚组比较,左归丸低、高剂量组皮肤的表皮层和真皮层厚度的改变明显恢复(P<0.05)。与正常组比较,肾虚组仔鼠Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA表达明显下降(P<0.05);与肾虚组比较,左归丸低、高剂量组Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA表达升高(P<0.05)。同时免疫荧光法检测发现与正常组比较,肾虚组的LC3的表达上调,SQSTM1-p62表达下调;与肾虚组比较,左归丸可以逆转SQSTM1-p62和LC3的异常表达(P<0.05)。结论:左归丸可以通过增加仔鼠皮肤内Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA的表达,下调皮肤细胞自噬水平,改善先天肾虚仔鼠皮肤异常发育。