抗结核骨组织工程复合体局部治疗兔脊柱结核的对比研究

目的探讨以羟基磷灰石与/β-磷酸三钙(hydroxyapatite and/β-tricalcium phosphate,HA/β-TCP)复合体材料及同种异体骨为支架材料构建的抗结核性骨组织工程复合体,评价两种不同抗结核骨组织复合体治疗兔脊柱结核的效果。方法取3月龄经造模成功后的新西兰大白兔36只,行病灶清除术,随机分为3组,每组12只,A组于骨缺损处植入利福喷丁微球-rADSCs/HA/β-TCP抗结核骨组织工程复合体,B组于骨缺损处植入利福喷丁微球-rADSCs/同种异体骨抗结核骨组织工程复合体,C组清创后未做任何处理。术后4、8、12周行影像学(DR)检查,术后第12周将实验动物处死,取标本,行大体观察、组织病理学观察骨缺损修复情况。结果大体观察发现A组骨缺损区被新生骨组织取代;B组骨缺损基本修复,周边可见大量骨组织形成;C组骨缺损处有少量骨组织形成,可见大量纤维组织覆盖。X线观察发现:4周时,A组骨缺损区可见少量骨痂形成,材料与周围骨组织紧密接触。B组骨缺损区可见骨痂形成,C组骨缺损区界限清晰,可见片状低密度影。8周时,A组骨缺损区明显缩小,材料吸收,边界稍模糊。B组骨缺损区可见片絮状高密度影,C组骨缺损区可见点状钙化影。12周时,A组骨缺损区材料基本吸收,B组骨缺损材料部分吸收,椎间隙部分融合,C组骨缺损区界线尚清,椎间隙破坏缺损。组织病理学检查发现:术后12周,A组材料吸收明显,可见大量纤维骨痂组织生成骨组织。B组可见部分同种异体骨残留,周边可见大量纤维骨痂组织生成骨组织。C组可见大量纤维组织形成。结论利福喷丁微球-rADSCs/HA/β-TCP构建的抗结核骨组织工程复合体具有良好的生物相容性,能够有效填充兔腰椎结核病灶清除术后的骨缺损。     

三种骨移植材料的骨诱导活性对比实验研究

[目的]通过对人工骨硫酸钙(CS)、同种异体和异种脱矿骨(DBM)3种骨移植材料异位诱导成骨效应的观察,比较其骨诱导活性优劣,为临床选择合适的骨移植材料提供参考依据.[方法]采用大鼠股部肌袋内埋植实验.选择成年斯普拉大鼠共36只,随机分成A、B 2组,每组18只.A组左侧植入cs(A1),右侧植入同种异体DBM(A2);B组左侧植入异种DBM(B1),右侧不植入任何材料行空白对照(B2).通过异位诱导成骨实验,在植入后2、4、6周取材作大体、组织形态学观察及碱性磷酸酶(ALP)和钙离子生化测定,对不同材料的骨诱导活性进行评价.[结果]术后2周,2种DBM被纤维组织包裹,可观察到DBM骨片周围间充质细胞聚集;4周时可见软骨细胞、成骨细胞形成;6周时有类似软骨基质样物质形成;ALP和钙离子含量在各时间段均高于对照组,说明2种DBM具有骨诱导活性,其结果差异具有供体依赖性.而CS降解吸收快,炎症反应轻,未见诱导成骨现象.[结论]2种DBM具有骨诱导活性,同种异体DBM较好,异种DBM次之,供体的差异性和DBM的制备可影响其在体内的骨诱导活性.CS生物相容性较好,是可供选择的骨修复填充材料.     

黄骨髓对兔骨折愈合影响的实验研究

[目的]研究自体黄骨髓一期移植对骨折愈合作用的实验疗效,观察黄骨髓是否具有成骨能力,为进一步临床应用提供理论依据。[方法]36只新西兰大白兔随机分为3组,建立左侧胫骨骨折延迟愈合模型,A组仅以钢板内固定;B组钢板内固定后,植入空白明胶海绵,C组钢板内固定后,植入黄骨髓与明胶海绵复合物。术后每组分别于2、4、8、12周各处死3只动物,进行影像学检测、大体观察及HE染色检查,观察骨折愈合情况及骨痂形成情况。[结果]A组及B组在术后4周只可见少量骨痂形成,而C组在术后2周即可见骨痂形成,术后4周可见大量骨痂形成,至术后8周C组骨折线消失,而A、B组骨折线仍可见;术后12周,A、B组仍可见骨折线存在。[结论]黄骨髓在骨折后能明显促进骨折愈合,在预防骨不连或骨折延迟愈合中具有重要作用。     

低温保存的组织工程骨修复骨缺损的实验研究

目的探讨低温保存的组织工程骨修复骨缺损的能力及低温保存的可行性。方法将人源性生物衍生骨材料复合成骨细胞构建的组织工程骨,在4℃和-196℃的温度环境中保存3个月和6个月,同时以未行低温保存的组织工程骨和生物衍生骨材料作为对照,分别修复实验兔桡骨的长段骨缺损。80只成年日本大耳白兔,随机分为4个实验组(左前肢植入材料):A3组:组织工程骨在4℃保存3个月;A6组:组织工程骨在4℃保存6个月;B3组:组织工程骨在-196℃保存3个月;B6组:组织工程骨在-196℃保存6个月。2个对照组(右前肢植入材料):C组:组织工程骨未行低温保存;D组:单纯生物衍生骨材料。于术后2、4、6和12周行大体和组织学观察,并于6周和12周行X线片检查和生物力学检测。结果术后大体观察,A3、A6、B3、B6和C组间无显著差异,D组骨痂少且断端更为明显。各时间点组织学观察,A3、A6、B3、B6和C组植入材料周围胶原及骨痂均较D组明显,术后12周组织学评分,D组与其它各组比较P值<0.05。X线片示D组植入材料皮质骨无明显变化,骨痂较少;余各组12周植入材料与自体骨融合,髓腔开通,骨折线消失,塑形好。生物力学检测D组与其它各组比较P值<0.05。结论以4℃和-196℃保存方法能有效保存组织工程骨,对修复骨缺损有明显效果,这一方法适宜推广应用。     

含rhBMP-2活性生物骨修复山羊胫骨缺损的实验研究

[目的]研究含rh BMP-2生物活性骨修复山羊胫骨缺损后的生物学性能和新成骨特点。评价其局部成骨活性及修复骨缺损的能力,为临床骨缺损的治疗提供理论和实验依据。[方法]24只健康成年山羊,雌雄不限,体重20~25 kg,随机分为4组,每组6只,于双侧胫骨内侧正中,距平台下约20mm,制作成直径为10mm的圆形胫骨骨缺损模型,分组植入材料,A组:含rh BMP-2活性生物骨;B组:自体髂骨;C组:硫酸钙;D组:空白对照组。分别于术后4、8、12周时进行影像学及组织学检查以观察和评价骨缺损修复情况。[结果]影像学显示:术后4周可见含rh BMP-2活性生物骨开始降解吸收,骨缺损区有新生骨形成;8周可见缺损区骨痂性愈合;12周可见骨愈合,髓腔再通,皮质骨增厚。组织学显示:4周时植骨区出现大量骨小梁,材料开始降解;8周可见骨小梁融合成片,材料大部分降解;12周时骨缺损基本修复,可见板层骨,骨髓腔再通,材料被完全降解、吸收。[结论]含rh BMP-2活性生物骨具有较强的诱导成骨活性和修复骨缺损作用,具有良好的临床应用前景。     

重组人工骨修复实验性骨缺损影像学评价

[目的]探讨重组人胰岛素样生长因子-1（recombinant human insulinlike growth factor-1，rhIGF-1）／珊瑚羟基磷灰石（coralline hydroxyapatite，CHA）／自体红骨髓（autogeneous red bone marrow，ARBM）复合修复骨缺损的能力。[方法]成年中国家兔54只，随机分为3组，制成双侧桡骨中段11mm骨-骨膜全层缺损模型，每组18只，每组动物左右两侧缺损分别随机植入2种不同材料：1组两侧分别植入材料A（CHA／ARBM／rhlGF．1）和B（CHA／ARBM）；2组植入C（CHA／rhIGF-1）和D（CHA）；3组植入E（自体皮质骨）和F（缺损旷置）。术后行大体、X线（2、4、8、12周）和^99mTc—MDP骨扫描（12周）观察。[结果]A组X线片显示桥接骨痂生长良好，12周时缺损修复。12周^99mTc—MDP骨显像示A和E组修复区高度核浓聚。[结论]CHA／ARBM／rhIGF-1重组人工骨移植可协同实现骨传导、骨诱导和骨再生作用，促进骨缺损重建。     

异体脱矿骨复合碱性成纤维细胞生长因子修复骨缺损的实验研究

目的评价异体脱矿骨(allograftdemineralizedbone,ALB)复合碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowthfactor,bFGF)诱导成骨的能力。方法以ALB作为bFGF可吸收性载体,制备成复合的bFGF/ALB复合骨。将32只新西兰大白兔随机分成A、B、C、D组,每组8只,制备左、右双侧桡骨中段15mm缺损模型,采用4种不同的处理方法:A组植入bFGF/ALB复合骨,B组植入ALB,C组植入bFGF,D组为空白对照。分别于术后2、4、6和8周摄X线片、组织切片和骨痂钙含量测定,了解各组骨缺损修复速度和愈合程度。结果X线片显示:2周时,A组和B组均表现为少量骨性阴影,而C组和D组表现为透亮阴影;4周和6周显示A组骨缺损处密度增高,部分新骨形成,B组和C组骨缺损处密度轻度增高,D组仅在两断端处有少量成骨阴影;8周A组在骨缺损处已桥接融合,B组从两断端形成新骨向中间靠拢、桥接,C组骨缺损处仍有间隙,其骨密度低于A组,D组骨缺损中央仍为软组织阴影。4周和8周骨痂钙含量测定显示A组骨痂钙含量相对值均高于B组、C组和D组(P<0.05和P<0.01)。组织学切片观察显示,在不同时间点骨缺损修复程度A组均明显高于B组和C组,D组骨缺损处被纤维组织及肌组织等填充。结论bFGF/ALB是一种较好的促进骨缺损修复的复合材料。     

比较带蒂筋膜瓣包裹接种自体红骨髓的组织工程骨修复骨缺损时促血管化成骨与膜诱导成骨作用

目的比较带蒂筋膜瓣包裹组织工程骨在修复骨缺损时促血管化成骨与膜诱导成骨的作用,为临床修复骨缺损提供参考依据。方法采用兔自体红骨髓(autologous red bone marrow,ARBM)及含重组人BMP-2的骨诱导活性材料构建组织工程骨。将4～5月龄新西兰大白兔60只(体重2.0～2.5 kg),随机分为A、B、C 3组,A组16只,B、C组各22只。制备长1.5 cm的右尺骨长段骨-骨膜完全缺损模型,A组于骨缺损处植入组织工程骨;B、C组在骨缺损邻近处制备一筋膜瓣包裹组织工程骨后植入骨缺损,B组将筋膜瓣蒂部切断形成游离筋膜瓣,C组为带蒂筋膜瓣。术后4、8、12、16周,每组随机取4只实验动物,取骨缺损区组织进行大体观察、组织学及免疫组织化学染色观察;8、12、16周B、C组各另取2只实验动物行腋动脉墨汁灌注观察。结果大体观察示,术后4、8周A组有纤维结缔组织形成,B、C组筋膜瓣形成类似骨膜样纤维组织,其中B组有软骨样组织形成,C组有新生骨形成;12、16周A组骨痂形成少,B组新生骨较多,C组骨干形成。组织学观察示,术后4、8周A、B组新生血管和骨小梁极少,C组血管丰富且成熟骨小梁及软骨组织形成;12、16周A组新生血管及骨小梁仍较少,B组血管数量较多且成熟骨小梁显著增加,髓腔结构形成但闭阻;C组血管数量减少,成熟骨结构形成,骨髓腔再通。免疫组织化学染色示,C组各时间点CD105、CD34、Ⅷ因子表达均高于A、B组。骨形态计量分析显示,术后各时间点C组新生骨小梁体积明显大于A、B组(P<0.05);A、B组间除4周差异无统计学意义(P>0.05)外,其余时间点差异均有统计学意义(P<0.05)。血管图像分析显示术后各时间点C组骨修复区内血管再生面积比值明显大于A、B组(P<0.05)。墨汁灌注检查示,各时间点B组成骨区为稀疏的墨染区;C组成骨区墨染数量多且较密集,8周达高峰,之后逐渐减少。结论 带蒂筋膜瓣包裹复合自体ARBM的组织工程骨,早期以促血管化成骨作用占主导地位,后期血管化成骨作用逐渐消失,以膜诱导成骨作用为主。     

丝素蛋白/羟基磷灰石组织工程化骨修复兔桡骨节段性骨缺损

目的 探讨丝素蛋白/羟基磷灰石(SF/HA)组织工程化骨的成骨作用,以期为临床治疗骨缺损提供新的人工骨材料.方法 将SF/HA与成骨诱导的兔骨髓基质干细胞(BMSCs)复合,构建组织工程化骨.取54只兔于左侧桡骨中上段制备15 mm节段性骨缺损.实验分3组(A、B组各24只,C组6只):A组:植入SF/HA组织工程化骨,B组:单纯植入SF/HA;C组:骨缺损区不植入任何材料.于术后4、8、12及16周摄X线片,并于16周行螺旋CT扫描重建,观察骨缺损修复及骨塑形情况,参照Lane-Sandhu X线评分标准对各组骨缺损的骨修复程度评分.骨痂标本行 HE染色组织学观察,按照Lane-Sandhu组织学评分法比较12周和16周时各组的骨修复情况. 结果 术后16周,X线片示A组髓腔通畅,新骨塑形好,骨皮质连续;B组缺损区有缩小,两断端不连接;C组缺损区无明显骨痂生长.16周时螺旋CT扫描重建显示:A组骨塑形明显,骨缺损完全修复;B组有部分皮质骨形成,缺损区不能完全修复;C组骨缺损基本无修复.每组术后4、8、12、16周不同时间点的放射学评分差异均有统计学意义(P＜0.05).术后12、16周时3组间Lane-Sandhu组织学评分差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 SF/HA组织工程化骨具有良好的节段性骨缺损修复能力,但SF/HA本身缺乏骨诱导作用,单独修复节段性骨缺损作用有限.     

隔膜引导下血管内皮生长因子复合煅烧骨对骨缺损修复作用的实验研究

[目的]研究隔膜引导下VEGF复合煅烧骨（TBC）修复骨缺损的作用，探讨其临床应用前景。[方法]新西兰大白兔80只，建立桡骨干中段10mm骨缺损模型。A组植入e—PTFE膜包绕的VEGF复合TBC，B组植入VEGF复合的TBC，C组植入e-PTFE膜包绕的TBC，D组单纯植入TBC。术后第2、4、6、8和12周行X线、组织学观察，测定骨密度并分析其成骨量。[结果]D组的骨缺损修复效果最差，B、C组中等，A组最佳。A组在各时段上其骨密度测量的结果优于B、C、D组，差异性显著（P〈0．01）。[结论]e—PTFE膜包绕的VEGF复合TBC能够更好地修复骨缺损，是一种较为理想的骨组织工程材料，具有良好的临床应用前景。     

可溶性载体复合成肌细胞移植对胫前肌深度冻伤的修复作用研究

目的探讨利用可溶性载体能否提高成肌细胞移植对胫前肌深度冻伤的修复效率。方法采用酶消化法分离出新生SD大鼠的骨骼肌成肌细胞,经纯化并传代培养,取第3代细胞用BrdU标记。取84只5月龄SD大鼠,建立胫前肌深度冻伤模型,随机分为4组,分别植入含0.1%透明质酸钠的F12培养基为载体的成肌细胞(A1组),不含透明质酸钠的F12培养基为载体的成肌细胞(A2组),含0.1%透明质酸钠的F12培养基载体溶液(B1组)及不作任何处理作对照组(B2组)。分别于术后2、5、9d,2、4、8、12周各处死大鼠6只,通过免疫组织化学和Mallory三色染色观察冻伤组织的修复情况,通过图像分析比较第2天各组细胞存留数和第8周各组胶原纤维面积比。结果BrdU免疫组织化学染色显示,各时间点A1组移植细胞在受体的存留数明显高于A2组,成肌细胞的迁移范围更大,细胞分布更均匀,细胞的分化潜能未受到破坏,移植效率得到提高。B组各时间点未见蓝染的细胞核。Mallory三色染色法显示A1、A2及B1组冻伤组织修复过程中的纤维化明显受到抑制。抑制作用在A1组最明显,其次是A2组。图像分析提示术后第2天A1组移植细胞存留数明显大于A2组(P<0.05),术后第8周各组胶原纤维面积A1组最少,A2组其次,B1组较多,B2组最多(P<0.05)。结论成肌细胞移植对冻伤的肌肉组织有明显的修复作用,以0.1%透明质酸钠溶液为载体可提高成肌细胞移植效率。     

透明质酸钠对大鼠成肌细胞增殖和分化的影响

目的 研究透明质酸钠对成肌细胞增殖和分化的影响。方法 采用酶消化法将新生SD大鼠骨骼肌组织分离、纯化、原代培养及传代培养；取第3代成肌细胞，分别加入浓度为0．05%、0．1％及0．2％的透明质酸钠溶液作为生长培养基行体外培养为实验A、B及C组，加入常规生长培养基为对照D组，观察各组成肌细胞增殖情况，并采用细胞计数及MTT法绘制生长曲线。另选择0．1%透明质酸钠融合培养基行体外成肌细胞培养，常规融合培养基作对照，观察透明质酸钠对成肌细胞分化功能的影响。结果A、B及C组成肌细胞增殖表现相似，2d时进入对数生长期，4d时均达顶峰；D组成肌细胞于3d时进入对数生长期，5d时细胞数倍增，6d时达顶峰。MTT法所测吸光度（A）值的变化反映成肌细胞的增殖情况，与细胞计数的结果一致，以B组细胞增殖作用最明显，B组A值在2～8d时均高于C、D组（P〈0．05），8d时高于A组（P〈0．05）。0．1％透明质酸钠融合培养基中的成肌细胞融合率较低且上升缓慢，7d时融合率最高，为11．7％；常规融合培养基成肌细胞融合率于6d时达到峰值，约为35．0%。结论 透明质酸钠与成肌细胞的细胞相容性较好，可以作为良好的成肌细胞培养基。     

T-lymphocytes are not necessary for particulate polyethylene-induced macrophage recruitment: Histologic studies of the rat tibia

Immunological processes involving T-lymphocytes have been implicated in the mechanisms of aseptic loosening of joint endoprostheses. We report the histological reaction of bone to phagocytosable particles of high-density polyethylene (HDPE) in normal and T-cell deficient rats. A bolus of 3 × 10⁷ polyethylene particles averaging 4.7 urn in size, mixed in 0.1 mL of sodium hyaluronate, was injected into the right proximal tibia of 10 normal and 10 T-cell deficient (nude) Rowett rats from the same litter. The left control side was injected with sodium hyaluronate alone. The animals were killed after 6 weeks. Transverse     

脑源性神经营养因子转基因细胞移植和神经节苷脂对大鼠脊髓损伤N-甲基-D-天门冬氨酸受体的影响

目的研究脑源性神经营养因子（BDNF）转基因细胞移植和神经节苷脂（GM-1）对大鼠脊髓损伤N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体的影响。方法将成年大鼠分为四组，A组：单纯脊髓损伤组；B组：脊髓损伤＋AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植组；C组：脊髓损伤＋GM-1组；D组：脊髓损伤＋AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植＋GM-1组。伤后1、3、7、14d采用[^3H]MK-801放射性配基分析法检测大鼠损伤后脊髓NMDA受体的变化。结果发现各组[^3H]MK-801放射性配基分析最大结合容量都有不同程度的减少，其减少程度顺序是A组〉B组〉C组〉D组。结论应用GM-1和BDNF转基因细胞移植后可以通过影响脊髓NMDA受体，从而减轻脊髓继发性损伤。     

透明质酸钠预防术后硬膜外粘连的组织学和超微结构研究

为了探讨透明质酸钠预防椎板切除后硬膜外粘连机理，本研究采用高分子量（１．５×１０６）透明质酸钠作实验植入材料，使用兔非相邻节段椎板切除动物模型进行实验研究。３０只兔共６０个节段随机分成两组，⑴２％透明质酸钠组；⑵生理盐水对照组。术后２、４、６、８周处死动物取材，分别做光镜、扫描电镜、透视电镜检查。结果表明：高分子透明质酸钠具有明显预防术后硬膜外粘连的效果。它具有屏障作用，能抑制成纤维细胞、炎性细胞的渗出，是预防硬膜外粘连的良好材料     

壳聚糖与重组人骨形成蛋白2复合物体外成骨作用的研究

目的探讨复合重组人骨形成蛋白2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein2,rhBMP-2)的壳聚糖-明胶支架的体外成骨作用。方法将rhBMP-2与壳聚糖-明胶支架复合,按2×104/ml的密度接种成骨细胞系或成肌细胞系至rhBMP-2复合材料上,以及无rhBMP-2复合的对照材料上。A组(2T3成骨细胞接种组),其中实验A组复合有rhBMP-2的材料14块,分别于接种培养第3、7、14和21天各取3块,以管家基因β-tubulin为内参照,RT-PCR行半定量分析,测定骨钙素基因表达水平,余2块于第14天终止培养,茜素红-S染色观察钙盐沉积情况;对照A组未复合rhBMP-2的材料5块,接种培养至14d终止,其中3块用于测定骨钙素基因表达,2块测定钙盐沉积。B组(C2C12成肌细胞接种组),实验组及对照组情况、培养时间及检测指标同A组。另取接种有rhBMP-2的材料2块接种2T3成骨细胞,培养3d后扫描电镜观察细胞与材料的黏附情况。结果A组培养3d,扫描电镜可见成骨细胞紧密黏附于多孔材料网表面,生长状态良好。实验A组成骨细胞中骨钙素基因的表达为1.28±0.17,对照A组14d为0.56±0.09,表明复合rhBMP-2可促进材料中骨钙素基因表达,两者差异有统计学意义(P<0.01);rhBMP-2还可诱导不表达骨钙素基因的C2C12成肌细胞出现基因表达,B组培养21d,实验B组为0.58±0.13,对照B组为0,差异有统计学意义(P<0.01)。茜素红-S染色可见,A组材料网络内均有不同程度的钙盐沉积。接种相同的细胞时,复合有rhBMP-2的材料中有更多的钙盐沉积。结论复合有rhBMP-2的壳聚糖-明胶人工骨支架材料在体外具有良好的诱导成骨能力。     

Intravesical sodium hyaluronate inhibits the rat urinary mast cell mediator increase triggered by acute immobilization stress.

PURPOSE: Mast cell activation and stress have been suggested as factors in the pathogenesis of interstitial cystitis, a painful disorder of the bladder that is diagnosed more frequently in women and characterized by increased urgency and frequency with absent infection. Intravesical sodium hyaluronate has been used to treat interstitial cystitis due to its possible replenishment of bladder glycosaminoglycans. We investigated the effect of sodium hyaluronate on the activation of bladder mast cell and release of proinflammatory mediators in the urine induced by acute immobilization stress in rats. MATERIALS AND METHODS: Using anesthesia a catheter was inserted in the bladder of 170 gm. female Sprague-Dawley rats. After emptying post-void residual urine a solution of normal saline, 0.08% or 0.4% sodium hyaluronate was introduced for 30 minutes. Each rat was allowed to recover from anesthesia and stressed for 30 minutes by confining it in a clear acrylic plastic immobilizer, while urine was continuously collected. Urinary histamine, rat mast cell protease-I and interleukin (IL)-6 were then determined. At the end of the experiments each rat was sacrificed by CO2 asphyxiation, and the bladder was removed and fixed with 4% paraformaldehyde. Frozen sections were stained with acidified toluidine blue, and the mast cell number and degree of activation were determined by granule extrusion and reduced cellular staining. RESULTS: Mean bladder mast cell activation plus or minus standard deviation in 6 control rats was 30.4% +/- 3.7% but it increased to 76.2% +/- 6.1% in 6 stressed animals (p = 0.0001). Intravesical administration of 0.4% sodium hyaluronate for 30 minutes in 6 rats before stress reduced mean bladder mast cell activation by 69.7% to 23.1% +/- 6.1% compared with stressed controls (p = 0.0003). However, compared to itself before stress there was no significant difference, indicating complete inhibition in 6 rats. Intravesical 0.08% sodium hyaluronate had a weaker inhibitory effect in 6 rats, decreasing mean degranulation by 22.5% to 59.1% +/- 7.6% (p = 0.02). In 6 rats stress increased the total mean amount of urinary rat mast cell protease-I by 271% from 0.14 +/- 0.09 to 0.52 +/- 0.17 ng. (p = 0.008). Pretreatment with 0.4% sodium hyaluronate reduced mean rat mast cell protease-I 80.8% compared with stressed controls (p = 0.008) and prevented any increase in response to stress in the same group of 8 rats with a mean pre-stress and post-stress level of 0.09 +/- 0.04 and 0.1 +/- 0.04 ng., respectively (p = 0.8). Acute stress increased mean urinary histamine in 6 rats 40.2% from 137.3 +/- 29.7 before to 193.7 +/- 7.6 ng./ml. after stress (p = 0.004). Pretreatment with 0.4% sodium hyaluronate reduced mean histamine 7.1% compared with stressed controls but completely prevented any increase in the same group of 8 rats, in which it was 174.5 +/- 23.1 before and remained 179.4 +/- 9.9 ng./ml. after stress (p = 0.75). Acute stress in 7 rats also increased the mean amount of IL-6 released in the urine by 31.5% from 775.9 +/- 69.2 to 1,021.1 +/- 93.3 pg./ml. (p = 0.007). Pretreatment with 0.4% sodium hyaluronate in 9 rats reduced mean IL-6 17% compared with stressed controls but again prevented any increase from baseline, since the value was 898.6 +/- 299.3 before and 824.4 +/- 196.4 pg./ml. after stress (p = 0.03). CONCLUSIONS: Immobilization stress induces bladder mast cell activation and the secretion of proinflammatory mediators, which are inhibited by sodium hyaluronate. Intravesical sodium hyaluronate may be a useful therapeutic option for interstitial cystitis, especially in patients with bladder mastocytosis who have symptom exacerbation with stress.     

Influence of the induced membrane filled with syngeneic bone and regenerative cells on bone healing in a critical size defect model of the rat’s femur

IntroductionThe induced membrane technique for the treatment of large bone defects consists of a 2-stage procedure. In the first stage, a polymethylmethacrylate (PMMA) cement spacer is inserted into the bony defect of a rat’s femur and over a period of 2–4 weeks a membrane forms that encapsulates the defect/spacer. In a second operation the membrane is opened, the PMMA spacer is removed and the resulting cavity is filled with autologous bone.Since little effort has been made to replace the need for autologous bone this study was performed to elucidate the influence of different stem cells and the membrane itself on bone healing in a critical size femur defect model in rats.Especially the question should be addressed whether the use of stem cells seeded on a β-TCP scaffold is equivalent to syngeneic bone as defect filling in combination with the induced membrane technique.Materials and MethodsA total of 96 male Sprague-Dawley (SD) rats received a 10 mm critical size defect of the femur, which was stabilized by a plate osteosynthesis and filled with PMMA cement. In a second step the spacer was extracted and the defects were filled with syngeneic bone, β-TCP with MSC + EPC or BM-MNC. In order to elucidate the influence of the induced membrane on bone defect healing the induced membrane was removed in half of the operated femurs. The defect area was analysed 8 weeks later for bone formation (osteocalcin staining), bone mineral density (BMD) and bone strength (3-point bending test).ResultsNew bone formation, bone mineral density and bone stiffness increased significantly, if the membrane was kept. The transplantation of biologically active material (syngeneic bone, stem cells on b-TCP) into the bone defect mostly led to a further increase of bone healing. Syngeneic bone had the greatest impact on bone healing however defects treated with stem cells were oftentimes comparable.ConclusionFor the first time we demonstrated the effect of the induced membrane itself and different stem cells on critical size defect healing. This could be a promising approach to reduce the need for autologous bone transplantation with its’ limited availability and donor site morbidity.     

Effects of sodium hyaluronate on epithelial healing of the vesical mucosa and vesical fibrosis in rabbits with acetic acid induced cystitis.

PURPOSE: To evaluate the effect of sodium hyaluronate on epithelial healing of the vesical mucosa and vesical fibrosis, and clarify the effect of the sodium hyaluronate solution concentration, we administered sodium hyaluronate in the bladder of rabbits with acetic acid induced cystitis. MATERIALS AND METHODS: Sodium hyaluronate at 3 concentrations (0.1%, 0.2% and 0.4%) was injected intravesically into rabbits with cystitis. Seven days after injection the effect of sodium hyaluronate was evaluated by bladder capacity measurement. Furthermore, the epithelial defective region of the mucosal membrane and bladder dry weight were determined and the condition of the epithelial membrane and extent of fibrosis were examined histologically. RESULTS: In all sodium hyaluronate treated groups a significant improvement in bladder capacity was observed compared to controls. In addition, a significant reduction was noted in the area of the epithelial defective region in the groups treated with 0.2% or 0.4% sodium hyaluronate and a significant decrease was noted in bladder dry weight in the group treated with 0.4% sodium hyaluronate. Histological examination revealed accelerated epithelial healing of the vesical mucosa and inhibited vesical fibrosis in the group treated with 0.4% sodium hyaluronate. CONCLUSIONS: Our findings suggest that sodium hyaluronate is effective for promoting epithelial healing of the vesical mucosa and inhibiting vesical fibrosis.     

膀胱灌注透明质酸钠联合膀胱区极超短波照射在非细菌性膀胱炎中的疗效研究

目的评价膀胱灌注透明质酸钠联合膀胱区极超短波照射在治疗非细菌性膀胱炎中的疗效。 方法选取兖矿集团总医院2013年3月至2016年6月诊断为非细菌性膀胱炎患者46例,按照治疗方式分为三组,对照组18例,采用膀胱灌注自配混合液（地塞米松+糜蛋白酶+利多卡因+无菌注射用水）;实验一组13例,采用膀胱灌注透明质酸钠液联合膀胱区极超短波照射;实验二组15例,采用单纯膀胱灌注透明质酸钠液。灌注疗程均为每周一次共12次,其后每2周1次,共6次。治疗前、治疗3个月、治疗结束后复查膀胱镜,在病变区行大体观拍照并取活检行HE染色,在治疗前、治疗3个月及疗程结束后分别进行问卷调查记录盆腔疼痛+尿频/尿急症状评分（PUF评分）、膀胱镜及HE染色淋巴细胞计算膀胱炎组织学评分、排尿日记计算日排尿次数及最大膀胱容量,记录治疗期间的不良反应,观察并分析三组患者的数据变化。 结果45例随访至6个月,实验二组1例因连续2次灌注后出现皮肤瘙痒而中断治疗。疗程结束后,实验一组和实验二组的PUF评分、膀胱炎组织学评分、日排尿次数及最大膀胱容积等指标与治疗前相比,差异有统计学意义（P<0.05）,与同期对照组相比差异亦有统计学意义（P<0.05）。疗程结束后,实验一组与实验二组的上述评价指标的差异没有统计学意义,但在治疗中期,实验一组的上述指标要好于实验二组,差异有统计学意义（P<0.05）。治疗期间无严重不良反应。 结论膀胱灌注透明质酸钠联合膀胱区极超短波照射治疗非细菌性膀胱炎疗效明确,无严重并发症。相比单纯灌注透明质酸钠,透明质酸钠联合极超短波治疗能更快的改善症状和炎症程度,为非细菌性膀胱炎的综合治疗提供了新的思路,开拓了新的空间。