猪血红细胞膜中鞘磷脂降解成神经酰胺的实验研究

目的从红细胞膜中提取鞘磷脂并降解成神经酰胺.方法分离猪血细胞,用溶血,脱水,干燥等方法提取鞘磷脂,并用磷脂酶C降解鞘磷脂成神经酰胺.结果用此法可提取到红细胞膜中的鞘磷脂,并最后获得神经酰胺.结论用此法可将红细胞膜中的鞘磷脂降解成神经酰胺.     

猪血红细胞膜中鞘磷脂降解成神经酰胺的实验研究

目的　从红细胞膜中提取鞘磷脂并降解成神经酰胺。方法　分离猪血细胞,用溶血,脱水,干燥等方法提取鞘磷脂,并用磷脂酶C降解鞘磷脂成神经酰胺。结果　用此法可提取到红细胞膜中的鞘磷脂,并最后获得神经酰胺。结论　用此法可将红细胞膜中的鞘磷脂降解成神经酰胺。     

猪血红细胞膜中鞘磷脂的提取及含量测定

目的从红细胞中提取鞘磷脂。方法采用分离血液、取血球、溶血、脱水等方法提取鞘磷脂 ,并用高效液相色谱分析其含量。结果可提取到红细胞膜中的鞘磷脂 ,其含量为 5 .2 %。结论此法工艺可行 ,为工业化生产提供了依据     

利用细胞培养基或动物血浆中的荧光标记产物测定鞘磷脂合酶活性

鞘磷脂合酶（SMS）催化神经酰胺（ceramide,Cer．）转变为鞘磷脂（sphingomyelin,SM）。近来的研究表明神经酰胺和鞘磷脂参与了代谢综合征的过程,因而鞘磷脂合酶被认为是开发抗代谢综合征药物的潜在靶点。鞘磷脂合酶有两个同工酶,分别称为鞘磷脂合酶1（SMS1）和鞘磷脂合酶2（SMS2）。这两种同工酶的亚细胞定位不同,在不同组织中的表达水平也有差异。到目前为止,已发表有多种方法测定组织和细胞匀浆中的总SMS活性,这些方法通过分析总反应体系或细胞内的酶促反应产物来衡量SMS活性。本文介绍一种测定SMS活性或筛选SMS抑制剂的新方法。我们将荧光标记的神经酰胺（NBD-Cer．）作为底物与细胞孵育,或者将该底物注射到小鼠体内,然后监测在细胞培养基或小鼠血浆中出现的荧光标记的鞘磷脂（NBD-SM）的含量。采用这种办法可有效检测出D609（一种鞘磷脂合酶抑制剂）对细胞和小鼠整体SMs活性的抑制作用。我们进一步采用该方法检测了SMS1基因敲除小鼠和sMs2基因敲除小鼠的SMS活性,结果发现注射底物后,SMS2基因敲除小鼠（而不是SMS1基因敲除小鼠）血浆中NBD-SM的堆积被明显阻断。因而该方法可用于检测生理或药理条件下在体或离体组织的SMS活性、筛选SMS抑制剂、甚至筛选SMS2特异性抑制剂。     

非律平和制霉菌素对人羊膜上皮细胞鞘脂类代谢的影响

目的研究脂类干扰剂非律平和制霉菌素对人羊膜上皮细胞鞘脂类代谢的影响是否相同。方法应用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱分析方法分析不同剂量非律平和制霉菌素对人FL细胞株鞘脂类代谢的影响。结果非律平和制霉菌素均可影响FL细胞鞘脂类代谢,但是非律平(0.2和10μmol.L-1)诱导了多种新的神经酰胺类分子的合成,推测主要影响神经酰胺类分子的代谢。而制霉菌素(0.054和0.108μmol.L-1)在诱导了新的神经酰胺分子合成的同时,还导致鞘磷脂含量的增高,0.108μmo.lL-1可诱导更多神经酰胺分子的合成,推测制霉菌素可能对鞘磷脂类分子和神经酰胺类分子的代谢都有影响。结论非律平和制霉菌素均干扰鞘脂类代谢,但二者的靶点可能不同。     

齐多夫啶半乳糖神经酰胺脂质体的制备及理化性质研究

目的 制备齐多夫啶半乳糖神经酰胺脂质体并对其理化性质进行研究。方法 采用两次乳化法，以半乳糖神经酰胺为主要膜材制备齐多夫啶半乳糖神经酰胺脂质体并进行形态学观察、检测其包封率和稳定性。结果 透射电子显微镜下观察齐多夫啶半乳糖神经酰胺脂质体为粒径均匀的球形或近球形的小单层颗粒；粒径范围为60～270nm，D50为140nm；包封率达72．5％，但10d后快速下降。结论 齐多夫啶半乳糖神经酰胺脂质体制备方法可行，需进一步提高包封率和稳定性。     

胆绿素经硼氢化钠还原制备胆红素

鸡、鸭、鹅等家禽的衰老红细胞释放的血红蛋白,被单核-巨噬细胞系统降解时,因缺乏胆绿素还原酶,只降解到胆绿素阶段。未加利用而被废弃。而胆红素则是贵重的中药原料。为此,我们用强还原则剂硼氢化钠和鸡胆汁反应,将其中的胆绿素还原为胆红素,然后用钙盐法提取。提取后的母液还可用来制备鹅脱氧胆酸及胆酸。这一方法为胆红素     

高效液相色谱分析血小板膜磷脂各组分

用高效液相色谱法对人血小板膜磷脂各组分进行测定。选用Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ硅胶色谱柱，流动相为乙腈∶甲醇∶８５％磷酸＝１００∶１０∶１．８，波长２０３ｎｍ。４分钟内完全分离膜的四种磷脂组分磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱和神经鞘磷脂，最低检出限为１ｍｇ／Ｌ，至少在４～２０００ｍｇ／Ｌ范围内标准品浓度与峰面积积分值呈线性关系，磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱和神经鞘磷脂的回收率分别为９８．１±２．３％、９９．８±０．７％、９９．４±１．８％、９０．６±２．２％。     

温石棉溶血机理

用５－氮氧自由基硬脂酸，１６－氮氧自由基硬脂酸和马来酰亚胺分别标记人红细胞膜，观察到两种不同产地的石棉一茫棉及沫棉可致膜浅层和深层脂质流动性降低及膜蛋白构象改变。从圆二色谱分析发现，茫棉及沫棉可降低膜蛋白α－螺旋量经柠檬酸铝处理后，茫棉及沫棉的上述作用明显减弱．用０．１ｍｏｌ·Ｌ－１盐酸浸脱茫棉或沫棉纤维中的镁，可致两种温石棉溶血能力下降．由上可知，茫棉或沫棉中的镁以及两种温石棉对膜脂流动性及膜蛋白构象的影响，在其溶血过程中起重要作用．     

一种草苔虫中的神经酰胺类化合物

目的研究草苔虫Bugula sp．的化学成分。方法利用Sephadex-LH-20和硅胶拄层析分离化合物，用光谱数据确定化合物结构。结果从产于我国南海深圳大亚湾海域一种草苔虫（Bugula sp．）的CH2Cl2提取物中，分离得到了8个神经酰胺类化合物（1～8）并确定了它们的化学结构。结论神经酰胺类化合物为首次从该海洋物种中得到。     

用高压液相快速测定血清中的卡那霉素和双脱氧卡那霉素

本文报道了用高压液相快速测定血清中的卡那霉素和双脱氧卡那霉素的方法,由于不需要溶剂或柱提取这些预处理步骤,使整个分析时间在不到15秒钟之内即可完成。此法的特点是快速、简单、准确而且重现性好,因而此法可用于临床监测用药。     

双波长倍增差法测定复方头孢氨苄胶囊的含量

复方头孢氨苄胶囊系头孢氨苄和甲氧苄氨嘧啶的复方制剂，应用双波长倍增差法［１］可同时测定二种组分的含量，且不用分离提取．此法简便、快速、准确．平均回收率为：头孢氨苄：９９．４３％；甲氧苄氨嘧啶：９９．９０％．     

SAGM红细胞保存液的应用

用SAGM红细胞保存液重悬高浓度红细胞，制备成晶体盐浓缩红细胞悬液(SAGM-RCS)．以利红细胞保存和输注．对促进红细胞的利用具有积极意义。现将我站应用情况报告如下。     

气相色谱法测定人参提取液中有机氯农药残留量

目的探讨人参提取液中有机氯农药残留量的测定方法。方法采用气相色谱法测定人参提取液中有机氯农药及其降解产物的残留量。色谱柱为HP-1701毛细管柱（内径0．25mm，膜厚0．25μm，柱长为30m）、电子捕获检测器，检测器温度300℃，进样口温度250℃，恒温条件下柱温180～220℃，载气为He（99．999％），柱流量为30～50mL／min。结果人参提取液中农药残留量BHC-α为0．069×10^-6，BHC-γ为0．118×10^-6，BHC-δ为0．2×10^-6，PCNB的降解产物PCA和PCTA分别为0．779×10^-6和0．061×10^-6.结论方法简便、快诛．可用于人泰提取渣中残留有机氯农药及PCNB的降解产物PCA，PCTA的检测。     

双波长倍增差法测定复方头孢氨苄胶囊的含量

复方头孢氨苄胶囊系头孢氨苄和甲氧苄氨嘧啶的复方制剂，应用双波长倍增差法可同时测定二种组分的含量，且不用分离提取，此法简便、快速、准确、平均回收率为：头孢氨苄；９９．４３％；甲氧苄氧嘧啶：９９．９０％。     

神经酰胺的抗肿瘤特性

目的介绍了神经酰胺的抗肿瘤特性及其作为肿瘤抑制剂的原理及应用前景。方法通过查阅大量国内外有关神经酰胺的抗肿瘤特性方面的文献 ,对神经酰胺的信号传导、神经酰胺作为肿瘤抑制剂的实用性等进行综述。结果与结论神经酰胺可作为一种肿瘤抑制剂。提高内源性神经酰胺 ,并将其作为一种抗肿瘤疗法而应用是极富前景的。     

陈皮中橙皮苷的提取方法研究

目的：研究陈皮中橙皮苷最佳提取方法。方法：以橙皮苷含量为指标,用不同溶剂（纯化水、不同pH碱水溶液和不同浓度乙醇）、不同方式（微波和常规方法）提取陈皮中的橙皮苷,确定最佳的提取方法。结果：采用75％乙醇溶液作为溶剂结合微波法提取陈皮中橙皮苷收率最高,达2．586％。结论：此法稳定有效,收率高。     

罗汉果提取物提取工艺研究

目的建立罗汉果提取物的最佳提取工艺。方法单因素考察提取溶剂、提取次数和膜截留相对分子质量对罗汉果甜苷的收率、含量和提取率的影响。结果最佳提取工艺条件为用水提取2次，每次用3倍量水，过截留相对分子质量为40000的超滤膜，然后再经过纳滤，干燥。结论采用最佳提取工艺条件，可较好地提取纯化罗汉果中的罗汉果甜苷。     

C2-神经酰胺对线粒体膜间隙蛋白释放影响研究

目的 探讨外源性C2-神经酰胺对线粒体膜间隙蛋白释放的影响.方法 12.5、25和50μmol/L C2-神经酰胺作用人结肠癌HT-29细胞24 h,采用Mitochondrial/Cytosol Fractionation试剂盒分离细胞线粒体和细胞液,应用Western Blotting方法检测线粒体和细胞液中Cyt c、Smac和HtrA2蛋白表达水平.结果 C2-神经酰胺作用细胞后,Cyt c、Smae和HtrA2总蛋白的表达水平未见明显改变,但随着C2-神经酰胺浓度增加,Cyt c、Smac和HtrA2从线粒体释放入细胞液中的水平逐渐增加,具有剂量-效应关系.Caspases抑制剂存在下,50 μrnol/L C2-神经酰胺仍能使Cyt c和HtrA2从线粒体释放入胞液中,但Smac却不能释放.结论 C2-神经酰胺能通过Caspases依赖和非依赖的方式促进线粒体膜间隙蛋白的释放入细胞液,诱导细胞凋亡作用.     

齐多夫啶半乳糖神经酰胺脂质体在小鼠的药动学研究

目的　研究半乳糖神经酰胺脂质体包封的齐多夫啶(azidothymidine ,AZT)在小鼠体内的药动学。方法　以半乳糖神经酰胺 (galactosyceramide ,GalCer)为主要膜材制备齐多夫啶半乳糖神经酰胺脂质体 (AZT GalCer)并观察AZT Gal Cer及游离AZT在小鼠体内的药动学过程。结果　AZT GalCer组较游离AZT组血药浓度显著升高 ,特别是 30min后升高达数十倍 ;药物的Ke由 0 0 37h-1降至 0 0 2 1h-1,T1/2 由 19min延长至 35min ,AUC增加 2 .77倍。结论　齐多夫啶半乳糖神经酰胺脂质体可提高齐多夫啶的血药浓度 ,延缓药物消除速度。