2H_3R_3Z_3E_3/4H_3R_3治疗老年初治涂阳肺结核效果分析

1996～ 1 998年世行贷款中国结核病控制项目在我县实施 ,采用短程间歇全监化疗方案治疗涂阳肺结核病患者。为了确切评价该方案对老年初治涂阳肺结核的治疗效果 ,本文对此期间在我科登记的 1 0 2例老年初治涂阳肺结核患者进行临床疗效分析。1 对象与方法对象　 1 996～ 1 998年我科共登记 6 5岁以上老年初治涂阳肺结核患者 1 0 2例 ,因肺结核或合并癌症死亡 3例 ,副反应严重拒治 2例 ,故以余 97例为分析对象 ( 1组 ) ,其中男 85例 ( 87.6 % ) ,女 1 2例 ( 1 2 .4 % ) ,平均年龄72 .6岁。以同期登记的 2 5～ 4 4岁初治涂阳肺结核 1 34例为对…     

血清rT_3和T_3/rT_3对危重病新生儿预后探讨

我院NICU及新生儿病房自1996年3月至1996年12月，应用放射免疫法测定了新生儿窒息、感染和健康新生儿共120例血清T3和rT3，并进行了动态观察。结果表明；①危重病新生儿的rT3升高程度与疾病的严重程度呈正相关，特别是rT3＞4000ng／L者，提示疾病危重，预后不良；②危重病新生儿的T3/rT3值与疾病的严重程度呈负相关，特别是T3/rT3值＜0.5者，提示疾病危重，预后不佳；③血清rT3的水平及T3／rT3的比值，可作为临床疾病严重程度和预后估计的指标之一。     

稳定表达神经营养素-3的NIH3T3细胞建立及鉴定

目的：建立稳定表达NT3的NIH3T3细胞株，通过体外共培养实验观察其对耳蜗螺旋神经节细胞生长的影响．方法：以阳离子脂质体作为载体，将携带有外源性基因NT3的重组真核表达载体pIRES2-EGFP-NT3转染小鼠成纤维细胞，进行RT-PCR，Western-blot分析及免疫组化鉴定，并与耳蜗螺旋神经节细胞进行共培养实验．结果：得到抗G-418的阳性细胞克隆；RT-PCR的产物约为744 bp；Western-blot可见一清晰的蛋白条带，与NT3的蛋白分子量相符合．NT3免疫组化染色结果显示转染NT3-cDNA的NIH3T3细胞胞质呈棕黄色着色．NT3转染组细胞与耳蜗螺旋神经节细胞共培养2wk后，与对照组相比，耳蜗螺旋神经节细胞无明显减少．结论：成功建立了稳定表达NT3的NIH3T3细胞株；该细胞对耳蜗螺旋神经节细胞有很好的营养支持作用．     

心血管疾病患者甲状腺激素T3及rT3的变化

长期反复发生心力衰竭、感染患者，随其心排量的降低、感染引起组织器官缺氧等可引起一系列的神经、内分泌代谢及周围脏器的变化。其中甲状腺激素的变化也日渐引起更多中、外学者的关注。甲状腺激素对心脏的代谢、舒缩功能有重要作用，其变化可能涉及到上述患者的病情转归、疗效及预后。１材料与方法１．１研究对象：本文选择１９９７年８月～１９９９年３月期间入住本院心内科的有甲状腺激素水平变化的３３例心力衰竭并感染患者，对其变化的结果进行观察分析。其中男性２０例、女性１３例；平均年龄６６．１２岁；高血压性心脏病１９例，冠…     

紫外辐射损伤NIH_3T_3细胞的特征

从形态学和生物化学上研究了UVA、UVB和UVC对细胞的杀伤作用，现报告如下。1材料和方法用紫外线荧光灯（功率为15W、UVA365urn。UVB320urn、UVC254urn）产生紫外线。照射前弃去培养基、加入O．5mlHank液。经巴氏染色后在光镜下计数。每个样本重复做三张细胞涂片，每张涂片计数50O个细胞，分别算出正常细胞、坏死细胞和调亡细胞的百分率，以3种细胞百分率的平均值作图。DNA提取和水平电泳场倒转凝胶电泳（FIGE）FIGE由水平凝胶电泳槽和一个脉冲转换器组成。电泳液由Tris一乙酸盐和lmmolEDTA组成，pHS．6；电压为SOV；倒转…     

14—3—3蛋白

14-3-3是一个在真核生物中广泛表达的酸性蛋白家族，主要以同源／异源二聚体形式存在，通过磷酸化丝／苏氨酸作用与靶蛋白或靶蛋白的两个结构域结合。七种不同亚型的高度保守的14-3-3蛋白与人类细胞中多种不同的信号通路有着密切的关系。14-3-3通过调节靶蛋白间的相互作用在MAPK级联放大效应等信号转导途径中发挥调控作用。     

Galectin-3重组真核表达载体的构建及其在NIH/3T3细胞中的表达

目的:构建半乳糖凝集素-3(Gal-3)的真核表达载体,在NIH/3T3细胞中表达,并检测其表达?方法:通过DNA重组技术和PCR方法从人肿瘤细胞克隆Gal-3基因,插入真核表达载体pEGFP-N1中,通过酶切和测序鉴定重组载体的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒pEGFP-Gal-3瞬时转染NIH/3T3细胞,经荧光和Western blot方法检测Gal-3表达,MTT法检测Gal-3对NIH/3T3细胞增殖的影响?结果:限制性内切酶鉴定和核酸序列测序证实成功构建含Gal-3的重组真核表达载体pEGFP-Gal-3?以重组质粒瞬时转染NIH/3T3细胞,检测到Gal-3蛋白表达,并证实Gal-3蛋白促进NIH/3T3细胞增殖?结论:成功构建的pEGFP-Gal-3真核表达载体在小鼠NIH/3T3细胞中成功表达,并促进NIH/3T3细胞增殖?     

APA-3T3细胞微囊的深低温保存

目的:通过优选冻存液的成份和浓度,建立低温保存APA微囊化小鼠成纤维细胞(3T3细胞)的方法。方法:用海藻酸钙-多聚赖氨酸-海藻酸钙微囊(APA)包裹3T3细胞制成APA-3T3细胞微囊。以高糖DMEM培养液为基础冻存液,分别加入不同浓度的二甲基亚砜(DMSO)或牛血清白蛋白(BSA)。分别将不同的冻存液加入APA-3T3中。按程序控制降温梯度,置于液氮中保存。快速复温后,光镜下观察APA-3T3的形态、细胞活率及膜通透性。结果:①10%DMSO组的微囊内细胞活率降低最少,细胞活率达(75.68±1.54)%,P<0.01。微囊完好率达到(94.48±0.90)%,P<0.01。②与其它组相比,4%BSA组的微囊内细胞活率降低程度最小,活率达(73±1.26)%,P<0.01。微囊完好率最高,为(85.1±0.82)%,P<0.01。③加入不同成份和浓度的冻存液对微囊的通透性没有明显影响。结论:在冻存液中加入10%DMSO和4%BSA,可在低温保存的过程中较好地保护细胞的存活及微囊的完整性。     

槲皮素抗NIH-3T3细胞凋亡的作用

目的:探讨槲皮素对过氧化氢(H2O2)诱导NIH-3T3细胞凋亡的抑制作用。方法:体外培养小鼠成纤维细胞,取对数生长期的成纤维细胞分成四个实验组。对照组(C):仅加含有10%胎牛血清的DMEM培养基。槲皮素前保护组(Qb):先用含有50μmol/L的槲皮素培养基作用24 h,再换含有0.5 mmol/L H2O2作用细胞30 m in。槲皮素后保护组(Qa):先用0.5 mmol/L H2O2作用细胞30 m in,再换含有50μmol/L的槲皮素培养基作用24 h。H2O2实验组(H2):先用含有0.5 mmol/L H2O2作用细胞30 m in,再换仅含有10%胎牛血清的DMEM培养基作用24 h。取培养细胞提取DNA和制备1×107/m l细胞悬液的滴片,应用TUNEL和Ladder电泳检测细胞凋亡率;应用细胞免疫组化技术检测Bc l-2、Bax、Caspase-3蛋白质的表达。结果:由TUNEL和Ladder实验得出,Qb组的细胞凋亡率明显低于H2组和Qa组。由细胞免疫组化技术检测分析得出,Qb组与Qa、H2组相比,Bc l-2的表达增高,Bax、Caspase-3的表达减低。结论:槲皮素可能是通过上调Bc l-2的表达,下调Bax、Caspase-3的表达,对H2O2诱导NIH-3T3细胞的凋亡起到抑制作用。     

血清rT3和T3／rT3对危重病新生儿预后探讨

我院ＮＩＣＵ及新生儿病房自１９９６年３月至１９９６年１２月，应用放射免疫法测定了新生儿窒息、感染和健康新生儿共１２０例血清Ｔ３和ｒＴ３，并进行了动态观察。结果表明：①危重病新生儿的ｒＴ３升高程度与疾病的严重程度呈正相关，特别是ｒＴ３〉４０００ｎｇ／Ｌ者，提示疾病危重，预后不良；②危重病新生儿的Ｔ３／ｒＴ３值与疾病的严重程度呈负相关，特别是Ｔ３／ｒＴ３值〈０．０５者，提示疾病危重，预后不佳；③血清ｒ     

地龙醇提物对3T3细胞促生长作用的研究

地龙又名蚯蚓，其醇提液经稀释后作用于成纤维母细胞（３Ｔ３），结果显示：１：２７～１：２４３稀释时有明显的促生长作用，与纤维母细胞生长因子类同。醇提液经等同稀释作用于巨噬细胞后，细胞培养上清也能明显促进３Ｔ３细胞的生长，证明地龙醇提液能使巨噬细胞产生一种促纤维母细胞生长的因子。     

氧化苦参碱对人前列腺癌PC-3细胞DD3的影响研究

目的：观察中药苦参提取物氧化苦参碱（Oxymatrine,OM）对人前列腺癌PC-3细胞DD3转录的影响。方法：用培养的人前列腺癌PC-3细胞与氧化苦参碱共孵育培养48h,RT—PCR检测氧化苦参碱对PC-3细胞DD3蛋白转录的影响。结果：PC-3细胞与氧化苦参碱共孵育后,RT—PCR结果显示,DD3条带明显减弱,而对照组转录水平无明显变化。结论：氧化苦参碱能抑制PC-3细胞DD3蛋白的转录。     

血吸虫14-3-3蛋白的免疫定位和功能

血吸虫病是一种遍及世界70多个国家、累及2亿多人口的地方性流行病，在我国约76万人受累。病原体为具有复杂生活史的血吸虫，其常见有6种，主要流行的是日本血吸虫(Sj)、曼氏血吸虫(Sm)及埃及血虫(Sh)，具有两个宿主，即人和淡水螺类。血吸虫的尾蚴穿透人的皮肤脱     

SRSV/3T3和NIH/3T3细胞膜的分离和蛋白质组分的初步比较

应用甘油低渗两相分配法分离了SRSV/3T3细胞质膜(SM)和NIH/3T3细胞质膜(NM)。经Na~+、K~+-ATP酶和葡萄糖-6-磷酸酶等标志酶活性鉴定,表明SM和NM纯度较高。经SDS-PAGE分析比较,发现SM和NM的蛋白质组分有较明显差异。SM有7种独特的组分,分子量分别为2.29×10~(-22)、2.18×10~(-22)、9.79×10~(-23)、9.60×10~(-23)、8.63×10~(-23)、5.49×10~(-23)和4.78×10~(-23)kg。NM有两种特有的组分(1.15×10~(-22)和4.17×10~(-23)kg)。在彼此共有的蛋白质组分中,也有许多组分在含量和电泳迁移速度上存在着程度不同的区别。     

血吸虫14-3-3蛋白疫苗的研究现状

血吸虫病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,主要流行于亚洲、非洲和拉丁美洲的76个国家和地区.采用疫苗防治该病是当前研究的热点领域,本文综述了血吸虫14-3-3的蛋白质疫苗、DNA疫苗、rBCG疫苗、重组酵母疫苗和Bm-sj14疫苗等方面的研究现状.     

14—3—3σ在鼻咽癌中的表达研究

目的研究14—3—3σ在鼻咽癌中的表达情况。方法选择65例手术切除的鼻咽癌及14例淋巴结转移鼻咽癌标本,并以20例慢性鼻炎组织作为对照,采用免疫组化S—P方法检测14—3—3σ蛋白表达,分析其表达与鼻咽癌发生及转移的关系。结果14—3—3σ蛋白表达在转移性鼻咽癌中低于原发性鼻咽癌患者,在鼻咽癌中低于正常鼻咽黏膜上皮,差异均有显著统计学意义（P〈0．01）。结论鼻咽癌组织中14—3—3σ蛋白表达与鼻咽癌的发生和转移有关。     

HTI低T3综合征288例血清T3,T4,rT3分析

探讨非甲状腺疾病低Ｔ３综合征患因清Ｔ３，Ｔ４，ｒＴ３浓度改变与疾病危害程度方法：收集２８８例ＮＴＩ低Ｔ３综合症患者资料进行分析。     

胭脂红对3T3细胞DNA损伤的SCGE检测

目的研究人工合成偶氮类色素胭脂红对体外培养小鼠胚胎成纤维细胞株（NIH3T3）DNA的损伤作用。方法单层培养的3T3细胞中加入不同浓度胭脂红培养4 h,用碱性单细胞凝胶电泳技术（single cell gel elec-trophoresis,SCGE）检测3T3细胞DNA的单链断裂（single-strand breaks,SSBs）情况。结果各染毒组彗星细胞率、彗星细胞的尾长、尾部DNA含量及尾矩与胭脂红浓度正相关,呈剂量-反应关系。结论胭脂红对体外培养3T3细胞DNA具有损伤作用,浓度越大,损伤越严重。     

Piwil2基因表达诱导NIH3T3细胞恶性转化

目的 通过建立稳定表达外源Piwil2基因的NIH3T3细胞,初步探讨Piwil2基因对NIH3T3细胞生物学特性的调控作用.方法 通过脂质体介导的方法和G418的筛选,建立稳定表达Piwil2基因的NIH3T3细胞株,之后利用细胞集落形成实验、细胞增殖实验、细胞周期分析和裸鼠成瘤实验,观察Piwil2基因表达对NIH3T3细胞的生物学特性的影响.结果 建立了稳定过表达Piwil2基因的NIH3T3细胞株.与对照组空白载体细胞系相比,过表达Piwil2基因的NIH3T3细胞增殖和集落形成能力增强;细胞周期G0/G1期减少、S期明显升高;接种裸鼠后形成的肿瘤体积显著大于对照组.结论 Piwil2基因在NIH3T3细胞中稳定表达具有诱导正常NIH3T3细胞发生恶性转化的重要生物功能.