液相色谱-质谱联用法测定人血浆中富马酸单甲酯药物浓度及应用

目的： 建立液相色谱-质谱联用（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中富马酸单甲酯的方法,并应用于检测中国健康受试者血浆中富马酸单甲酯的浓度。方法： 血浆样品用醋酸铵稀释后经过96孔固相萃取板前处理,以含0.5%甲酸的水溶液和甲醇作为流动相,采用梯度洗脱方式在ACE Excel 3 C₁₈-AR（2.1 mm×50 mm）色谱柱上进行分离,每个样品分析时间为4 min。在电喷雾负电离模式下,多反应监测检测离子对m/z 129.0→m/z 85.0（富马酸单甲酯）和m/z 134.0→m/z 90.0（内标,富马酸单甲酯-d₅）。结果： 富马酸单甲酯线性范围为4~1 200 ng·mL^-1（r²>0.99）,定量下限为4 ng·mL^-1,日内和日间精密度RSD ≤ 9.7%,准确度相对偏差均在±4.2%以内,平均回收率RSD ≤ 6.6%,基质效应在98.3%~100.9%之间。稳定性实验中,各种储存条件不影响对药品浓度的准确测定。结论： 本方法运行时间短,灵敏度高,重复性好,适用于富马酸单甲酯血浆浓度定量检测。     

液-质联用法测定大鼠血浆中ZTW-41浓度

目的： 建立快速、灵敏、准确的LC-MS/MS法测定大鼠血浆中ZTW-41的浓度，并将该方法应用于ZTW-41的药动学研究。方法： 以卡马西平为内标，血浆样品用甲醇沉淀蛋白后，通过ZORBAX Esplise XDB-C₁₈色谱柱（4.6 mm×100 mm，3.5-Micron）进行分离，选择75%甲醇溶液（含5 mmol·L^-1甲酸铵和0.1%甲酸）-甲醇溶液（含5 mmol·L^-1甲酸铵和0.1%甲酸）作为流动相进行等度洗脱，流速为0.5 mL·min^-1。通过ESI，以多反应监测模式（MRM）进行正离子检测，ZTW-41和卡马西平的MRM离子对分别为m/z 540.0→168.2和m/z 237.0→194.2；大鼠尾静脉给予ZTW-41前和给药后不同时间点采集血浆，血浆样品前处理后进行LC-MS/MS检测分析。结果： 大鼠血浆中ZTW-41在10~3 000 ng·mL^-1浓度范围内具有良好的线性关系，R² ≥ 0.99；定量下限和各浓度质控样品批间、批内精密度（RSD%）在5.82%以内，准确度（RE%）在-0.81%~4.87%之间。大鼠尾静脉给予20 mg·kg^-1的ZTW-41后，C_max为（244.78±46.67）ng·mL^-1，t_1/2为（21.17±2.08）h。结论： 本研究建立的LC-MS/MS定量分析方法可快速、灵敏、准确地测定大鼠血浆中ZTW-41的浓度，并成功应用于ZTW-41的药动学研究。     

超高效液相色谱-质谱联用法测定人血浆中沙丁胺醇浓度

目的：建立测定人血浆中沙丁胺醇浓度的超高效液相色谱-质谱联用方法。方法：内标选用沙丁胺醇-d9,以甲醇沉淀血浆中蛋白,取上清液吹干复溶;采用Welch Ultimate XS-C₁₈色谱柱（3.0 mm×100 mm,3 μm）,预柱选用Welch Ultimate XB-C₁₈柱（2.1 mm×5 mm,5 μm）,以含0.1%甲酸5 mmol·L^-1乙酸铵的5%乙腈和纯乙腈为流动相,梯度洗脱;应用电喷雾离子化,正离子模式下进行多反应监测沙丁胺醇（m/z 240.2→m/z 147.9）和内标沙丁胺醇-d9（m/z 249.1→m/z 149.1）的浓度。结果：沙丁胺醇的线性范围为5~2 000 pg·mL^-1,定量下限为5 pg·mL^-1,日内、日间准确度为101.93%~109.03%,精密度RSD为1.45%~8.50%。结论：本方法简便、准确、灵敏、稳健且经济,适用于硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂的临床药动学研究和生物等效性评价。     

不同剂量薯蓣皂苷元的大鼠体内药动学研究

目的： 研究不同剂量薯蓣皂苷元的大鼠体内药物动力学特征,为阿尔茨海默病的临床前研究提供理论依据。方法： 大鼠灌胃低（17.5 mg·kg^-1）、中（35 mg·kg^-1）、高剂量（70 mg·kg^-1）薯蓣皂苷元后,于不同时间眼眶取血,以延龄草苷作为内标,血浆样品经液-液萃取后采用LC-MS/MS进行测定。利用DAS 2.0计算药动学参数。色谱、质谱条件：采用Sun Fire C₁₈（150 mm×2.1 mm,5 μm）为色谱柱,以甲醇-乙腈-10 mmol·L^-1乙酸铵（86∶11∶3）为流动相,流速为0.3 mL·min^-1,柱温40℃。采用电喷雾离子源（ESI源）,以选择反应监测（MRM）方式并在正离子模式下进行检测,用于定量的离子对分别为m/z 415.5→271.5（薯蓣皂苷元）和m/z 577.5→271.5（内标延龄草苷）。结果： 薯蓣皂苷元血药浓度在1~2 000 ng·mL^-1内线性关系良好,方法回收率在81.7%~83.9%之间,定量下限（LLOQ）为1 ng·mL^-1,日内、日间精密度RSD小于10%。药动学结果表明不同剂量薯蓣皂苷元药-时曲线符合二室模型,主要药动学参数为AUC_0-t分别为1 872,3 144,6 625 ng·min·mL^-1;C_max分别为136,276,470 ng·mL^-1;t_1/2分别为5.73,5.31,6.42 h。结论： 薯蓣皂苷元在17.5~70.0 mg·kg^-1范围内其药动学行为呈线性相关,无动力学行为差异。     

两种单硝酸异山梨酯缓释片在中国健康人体内的生物等效性研究

目的：研究2种单硝酸异山梨酯缓释片在中国健康人体内的药物动力学特征和生物等效性。方法：采用单次给药、随机、开放、两周期、双交叉的试验设计,健康受试者分别在空腹和餐后条件下口服单硝酸异山梨酯缓释片受试制剂与参比制剂各40 mg,利用高效液相色谱-质谱法测定血浆中药物浓度,计算相关药动学参数并评价其生物等效性。结果：（1）空腹试验中受试制剂与参比制剂的C_max分别为（546.52±102.32）,（521.71±85.80）ng·mL^-1,AUC_0-t分别为（7 398.89±1 298.56）,（7 278.29±1 173.38）ng·h·mL^-1,AUC_0-∞分别为（7 488.82±1 311.38）,（7 372.49±1 172.09）ng·h·mL^-1。（2）餐后试验中受试制剂与参比制剂的C_max分别为（529.41±82.52）,（502.21±65.15）ng·mL^-1,AUC_0-t分别为（7 305.10±1 320.74）,（7 066.12±1 136.99）ng·h·mL^-1,AUC_0-∞分别为（7 393.21±1 317.32）,（7 160.22±1 140.11）ng·h·mL^-1。（3）空腹和餐后试验中受试制剂与参比制剂C_max、AUC_0-t和AUC_0-∞几何均数的90%CI均在80.00%~125.00%范围内,表明2种制剂具有生物等效性。结论：单硝酸异山梨酯缓释片受试制剂与参比制剂在中国健康志愿者中具有生物等效性。     

柱前衍生化法UPLC-MS/MS检测肿瘤患者不同化疗周期顺铂血药浓度

目的：建立定量检测肿瘤患者血浆中顺铂浓度的柱前衍生化超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法,比较顺铂（75 mg·m^-2·d^-1） QD*1 d和（25 mg·m^-2·d^-1） QD*3 d在不同化疗周期顺铂血药浓度的变化。方法：血浆样品的顺铂与二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC）络合生成Pt （DDTC）衍生化产物,经蛋白沉淀后,采用UPLC-MS/MS测定,色谱柱为BEH C₁₈（2.1 mm×50.0 mm,1.7 μm）,流动相为乙腈-0.1%甲酸水,梯度洗脱,流速为0.35 mL·min^-1,采用电喷雾正离子模式,以多反应监测（MRM）定量分析。结果：顺铂在20~3 000 ng·mL^-1（r²=0.995 4）具有良好的线性范围;批内RSD在7.21%~12.06%,批间RSD在4.64%~11.17%;提取回收率为78.48%~99.2%,基质效应在90.7%~94.8%,稳定性良好。顺铂（75 mg·m^-2·d^-1） QD*1 d在整个化疗周期中血药浓度呈上升趋势,顺铂（25 mg·m^-2·d^-1） QD*3 d血药浓度呈下降趋势。结论：本研究建立的方法专属性高、稳定性好,适用于肿瘤患者血浆中顺铂浓度的检测。     

UPLC-MS/MS法测定血液病儿童患者血浆中伏立康唑浓度及临床应用

目的： 建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法测定临床血浆样本中伏立康唑浓度。并用于1~14岁血液病儿童患者体内伏立康唑稳态血药谷浓度的测定,为指导临床用药奠定基础。方法： 采用UPLC-MS/MS法测定,以氟康唑为内标物,色谱柱Waters BEH C₁₈,检测器三重四级杆串联质谱,流动相0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温40℃,电喷雾离子源,以离子对m/z 350.112→281（伏立康唑）、m/z 307.112→238（内标）进行定量分析,并对测定的临床样本用SPSS 26软件统计分析。结果： 伏立康唑血药浓度在50~10 000 ng·mL^-1范围内线性关系良好（r²=0.998 0,n=8）,定量下限为50 ng·mL^-1;内标归一化基质因子94.89%~113.09%;提取回收率84.27%~105.78%;方法回收率89.70%~107.20%;日内、日间精密度RSD<10%;室温、冻融、长期稳定性、稀释与浓缩可靠性RSD<8%。采用该法对78例（175次）1~14岁血液病儿童患者体内伏立康唑的血药浓度进行检测,结果表明患儿伏立康唑的血药浓度范围为51.13~9 989.99 ng·mL^-1,中位数为1 429.67 ng·mL^-1。治疗总体有效率和肝功能异常发生率分别为92.31%和19.23%。患儿体内伏立康唑血药浓度与体质量日剂量（r=0.172,P=0.132）、年龄（r=0.148,P=0.195）、性别（P=0.503）、是否低蛋白血症（P=0.211）无显著相关性。低浓度组治疗有效率低于推荐浓度和高浓度组,但差异无统计学意义（P=0.093）。相比低浓度和推荐浓度组,高浓度组肝功能异常发生率显著升高（P<0.01）。本研究基于本检测方法对2例患儿实施药学监护,取得了良好效果。结论： UPLC-MS/MS法检测血浆中伏立康唑浓度具有快速、准确、灵敏度高的特点,适用于儿童伏立康唑的治疗药物监测。     

UPLC-MS/MS法分析非酒精性脂肪肝病小鼠血清中IAA异常变化

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）法定量检测小鼠血清中吲哚乙酸（IAA）,考察非酒精性脂肪肝病（NAFLD）小鼠血清中IAA水平。方法：采集对照组与NAFLD组小鼠的血清,UPLC-MS/MS法定量检测IAA含量。色谱条件：色谱柱为BEH C₁₈（2.1 mm×50.0 mm,1.7 μm）,流动相为0.01%甲酸乙腈-0.01%甲酸水,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,电喷雾正离子模式,多反应监测（MRM）。结果：IAA质量浓度在5~1 000 ng·mL^-1（r²=0.996 4）范围内线性关系良好,日间和日内精密度RSD均<15%,提取回收率为76.83%~98.8%,基质效应为90.2%~103.8%,稳定性良好。对照组小鼠血清中IAA浓度为（130.65±31.23） ng·mL^-1,NAFLD组小鼠血清中IAA浓度为（28.72±4.83） ng·mL^-1。结论：本研究建立的方法简单,专属性高,稳定性好,可准确检测小鼠血清中IAA的含量。NAFLD组小鼠血清IAA表达显著低于对照组,IAA可能是NAFLD诊断的潜在标记物。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人腹腔积液中伏立康唑浓度及临床应用

目的: 建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定人腹腔积液中伏立康唑浓度,并应用于临床样本检测。方法: 腹腔积液样品经纯乙腈沉淀蛋白后,通过Hypersil GOLD C₁₈色谱柱分离;流动相为0.1%甲酸水-纯乙腈(60∶40,V/V);流速0.4 mL·min^-1;柱温30 ℃。质谱采用电喷雾电离、正离子多反应监测模式扫描定量:m/z 350.0→281.0(伏立康唑)和m/z 353.1→284.1(伏立康唑-d3,内标)。结果: 腹腔积液样品中伏立康唑浓度在0.05~10.00 μg·mL^-1范围内线性良好(R²=0.999 9)。日内和日间精密度均小于2%,提取回收率为(100.35±4.37)% ~(107.68±3.97)%,内标归一化基质效应因子为(98.36±1.69)%~(100.57±1.10)%且RSD小于2%。此外,各项稳定性考察结果均合格。利用该方法测得4例重度肝硬化患者静脉用伏立康唑首剂给药(约滴注1 h)的腹腔积液0~12 h的浓度-时间曲线下面积(AUC_0-12)和血浆AUC_0-12的比值平均为0.54(范围0.49~0.61),提示肝硬化患者中伏立康唑具有较好的腹膜腔渗透性。结论: 该方法简单、快速、灵敏、准确,适用于人腹腔积液中伏立康唑的检测和临床药动学研究。     

吲达帕胺缓释片人体药动学和生物等效性研究

目的：研究吲达帕胺试验制剂（缓释片）和参比制剂（片剂）的人体药动学和生物等效性。方法：24名健康志愿者按随机双周期交叉试验设计,分别口服受试制剂（吲达帕胺缓释片）和参比制剂（吲达帕胺缓释片）1.5 mg,采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析方法测定吲达帕胺的全血浓度。利用DAS药动学程序计算其药动学参数和评价其生物等效性。结果：吲达帕胺试验制剂和参比片剂的主要药动学参数：C_max分别为（32.9±7.1）,（32.3±5.4）ng·mL^-1;T_max分别为11（5,15）,12（5,15）h;T_1/2ke分别为（15.0±2.2）,（14.9±2.1）h;AUC_0-t分别为（977.3±217.7）,（965.1±179.6）ng·h·mL^-1;AUC_0-∞分别为（1 028.6±237.1）,（1 015.3±193.7）ng·h·mL^-1;受试制剂相对生物利用度为（101.27±11.3）%。结论：经方差分析及双单侧t检验结果显示,受试的吲达帕胺缓释片与参比的吲达帕胺缓释片具有生物等效性。     

高效液相串联质谱法监测女性风湿病患者备孕前血浆中特立氟胺浓度

目的:运用高效液相色谱串联质谱建立测定风湿病患者血浆中特立氟胺浓度的分析方法。方法:50μL血浆加入内标工作液200μL沉淀蛋白后稀释,再采用色谱柱Welch XB-C₁₈(2.1 mm×50 mm, 5μm)进行液相分离,流动相由10 mmol·L^-1甲酸铵溶液(A)和甲醇∶乙腈∶异丙醇=7∶1.5∶1.5(0.2%甲酸)(B)组成,梯度洗脱,流速0.7 mL·min^-1,分析时间2.5 min,进样量3μL,采用多反应监测,负离子模式,电喷雾离子化,监测离子对为m/z 268.4→82.0(特立氟胺)和m/z 272.9→82.0([2H4]-特立氟胺)。结果:特立氟胺在2～1 000 ng·mL^-1线性范围良好,各质控水平准确度为97.2%～105.5%,日内和日间相对标准偏差为4.4%～9.3%,回收率为93.4%～96.4%。结论:本方法专属性强、灵敏度和准确度高、耗时短、前处理简单,可应用于监测女性风湿病患者备孕前血浆中特立氟胺浓度。     

HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中替格瑞洛和阿司匹林及其代谢物

目的:建立液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)法同时测定人血浆中替格瑞洛、AR-C124910XX、阿司匹林和水杨酸的浓度.方法:色谱柱:Diamonsil C18(150.0mm×4.6mm,3.5μm),流动相:乙腈(B)-0.2％甲酸水溶液(A),梯度洗脱;流速:0.8 mL·min-1;柱温:35℃;进样量:...     

磷酸奥司他韦干混悬剂的人体药动学与生物等效性

目的:研究磷酸奥司他韦干混悬剂在健康受试者的人体药动学和生物等效性。方法:78例受试者分别空腹和餐后口服75 mg受试制剂或参比制剂。采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测奥司他韦和奥司他韦酸的全血浓度,用WinNonlin 8.2软件计算药动学参数,评价两制剂生物等效性。结果:空腹试验受试制剂和参比制剂的奥司他韦C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞分别为(52.07±23.44)和(50.54±16.09)ng·mL^-1、(150.8±32.0)和(153.6±29.3)h·ng·mL^-1、(154.2±32.2)和(157.8±30.9)h·ng·mL^-1;奥司他韦羧酸盐C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞分别为(259.66±42.65)和(267.10±44.06)ng·mL^-1、(3 235.1±549.9)和(3 321.6±567.5)h·...     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中舒巴坦和氨苄西林浓度的不确定度评价

目的:评价高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS法)测定人血浆中舒巴坦和氨苄西林浓度的不确定度。方法:用HPLC-MS/MS法测定人血浆中舒巴坦和氨苄西林浓度,分析称量、溶液配制、测量重复性及标准曲线拟合等因素对结果的影响,计算各因素的不确定度及合成不确定度,并评定扩展不确定度。结果:当置信概率P=95%(k=2)时,人血浆中低(120 ng·mL^-1),中(1 600 ng·mL^-1)和高(16 000 ng·mL^-1)浓度舒巴坦的拓展不确定度分别为8.06,81.60,765.79 ng·mL^-1。人血浆中低(180 ng·mL^-1),中(2 400 ng·mL^-1)和高(24 000 ng·mL^-1)质量浓度氨苄西林的拓展不确定度分别为9.16,113.24,1 069.69 ng·mL^-1。结论:本方法灵敏度高,分析处理时间短,能快速准确测定人血浆中舒巴坦和氨苄西林浓度,在不确定度分析中发现低浓度时...