电针刺对兔肢体缺血再灌注诱发肺损伤内质网应激的影响

目的:评价电针对肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤时肺组织内质网应激的影响。方法:40 只健康雄性新西兰大白兔,采用随机数字表法分为4 组:假手术组、模型组、电针组和非穴位电针组,每组10 只。采用夹闭股动脉3 h、再灌注4 h的方法制备兔肢体缺血再灌注损伤模型。电针组于模型制备前4 d( 每天早8 点,30 min/ 次,1 次/d) 及模型制备过程中电针肺俞穴和足三里穴( 疏密波,刺激电流l~2 mA,频率2/15 Hz,波宽0.2~0.6 ms),以兔出现轻微肌颤为宜;非穴位电针组以相同的参数电针刺激肺俞穴和足三里穴旁开0.5 cm 非经非穴处。再灌注4 h 时处死兔,取肺组织行HE 染色和肺损伤评分,计算肺湿重/ 干重(W/D) 比值;采用TUNEL 法确定肺泡上皮细胞凋亡指数(AI) ;采用Western blotting 法检测肺组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/ 增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP) 及caspase-12 表达水平。结果:与假手术组比较,其余3 组的肺损伤评分、W/D 比值及肺泡上皮细胞AI 均升高,肺组织GRP78、CHOP 及caspase-12 表达均上调,差异有统计学意义(P <0.05) ;与模型组比较,电针组肺损伤评分、W/D 比值及肺泡上皮细胞AI 降低,肺组织GRP78、CHOP 及caspase-12 表达下调,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:电针刺激肺俞穴和足三里穴减轻兔肢体缺血再灌注诱发肺损伤的机制可能与抑制内质网应激诱导、减轻肺泡上皮细胞凋亡有关。     

电针对肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤的影响

目的:观察电针肺俞穴和足三里穴对肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤的影响。方法:40只健康雄性新西兰大白兔,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、电针组和非穴位电针组(每组n=10)。采用夹闭股动脉3 h、再灌注4 h的方法制备兔肢体缺血再灌注损伤模型。电针组于模型制备前1～4 d(30 min/次,1次/d)及模型制备过程中电针肺俞穴和足三里穴(疏密波,刺激电流l～2 mA,频率2/15 Hz,波宽0.2～0.6 ms,以兔出现轻微肌颤为宜);非穴位电针组以相同的参数电针刺激肺俞穴和足三里穴旁开0.5 cm非经非穴处。再灌注4 h时处死兔,取肺组织行肺损伤评分,计算肺湿/干重(W/D)比值;测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、Western blotting法检测肺组织核因子-κBp65 (NF-κBp65)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白表达水平。结果:模型组、电针组和非穴位电针组再灌注4 h时肺组织W/D比值分别为6.75±0.36、4.90±0.23、6.68±0.39,均明显高于假手术组(3.09±0.15, P0.05);上述三组肺损伤评分分别为8.12±1.05、4.38±0.64、8.23±0.98,均明显高于假手术组(0.87±0.29, P0.05);上述三组MPO活性分别为(5.18±0.45)U/g、(3.76±0.33) U/g、(5.24±0.39) U/g,均明显高于假手术组[(1.59±0.25) U/g,P0.05];与假手术组相比,模型组、电针组和非穴位电针组ICAM-1及NF-κBp65表达水平升高;与模型组比较,电针组再灌注4 h时肺组织W/D比值、肺损伤评分、MPO活性、ICAM-1及NF-κBp65表达水平降低(P0.05)。结论:电针肺俞穴和足三里穴可减轻肢体缺血再灌注诱发的兔肺损伤,其机制可能与抑制NF-κB激活,从而减少ICAM-1介导的中性粒细胞聚集有关。     

亚甲蓝对大鼠机械通气相关肺损伤中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体的影响

目的评价亚甲蓝对大鼠机械通气相关损伤(VILI)中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法清洁级成年雄性SD大鼠36只,8周龄,体重240～260 g,采用随机数字表法分为三组:自主呼吸对照组(C组)、大潮气量模型组(H组)和大潮气量+亚甲蓝组(MB组),每组12只。三组大鼠均行气管切开插管术,MB组经腹腔注射1%亚甲蓝50 mg/kg,10 min后以V_T 20 ml/kg行机械通气;C组经腹腔注射等容量生理盐水后保持自主呼吸;H组经腹腔注射等容量生理盐水,10 min后以V_T 20 ml/kg行机械通气。通气参数:FiO_2 21%,I∶E 1∶1,RR 80次/分,PEEP 0,通气时间4 h。于基础状态、通气结束时经颈总动脉取血行血气分析,通气结束后颈总动脉放血处死大鼠,收集肺组织标本、支气管肺泡灌洗液(BALF)。光镜下观察肺组织病理学改变,记录肺损伤评分,计算肺组织湿/干重比值(W/D)。采用ELISA法测定BALF中总蛋白含量以及血清、BALF中白细胞介素(IL)-1β、IL-18浓度;鲁米诺化学发光法检测肺组织中活性氧(ROS)含量;RT-PCR法及Western blot法分别检测肺组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、天冬氨酸半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)mRNA表达量及蛋白含量。结果与C组比较,H组肺损伤评分、W/D明显升高(P0.01),BALF中总蛋白以及血清、BALF中IL-1β和IL-18浓度明显升高(P0.01),肺组织中ROS含量、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量及蛋白含量明显升高(P0.01)。与H组比较,MB组肺损伤评分、W/D明显降低(P0.05),BALF中总蛋白以及血清、BALF中IL-1β和IL-18浓度明显降低(P0.05),肺组织中ROS含量、NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量及蛋白含量明显降低(P0.05)。结论亚甲蓝通过抑制大鼠肺组织中NLRP3炎性小体的激活,阻碍促炎因子IL-1β及IL-18的形成,减轻大鼠VILI。     

电针足三里对严重烫伤致大鼠急性肺损伤的影响

目的 探讨电针足三里对严重烫伤致大鼠急性肺损伤的影响.方法 雄性SD大鼠40只,体重200～250 g,随机分为5组(n=8):对照组、烫伤组、足三里组、非经非穴组和α-银环蛇毒素组(α-BGT组).对照组尾静脉注射生理盐水1 ml.烫伤组、足三里组、非经非穴组和α-BGT组先制备30%总体表面积Ⅲ度烫伤模型,然后烫伤组尾静脉注射生理盐水1 ml;足三里组于双侧足三里穴垂直进针7 mm,给予脉冲电流(电压3V,电流2ms,频率3 Hz)持续刺激12 mim,间隔8 h刺激1次,持续2 d;非经非穴组于双侧足三里穴旁5mm处给予脉冲刺激,方法同足三里组;α-BGT组尾静脉注射α-BGT 1.0 μg/kg,再于双侧足三里穴给予脉冲刺激,方法同足三里组.各组处理结束后,处死大鼠,取肺组织,光镜下观察病理学结果,电镜下观察超微结构,采用ELISA法测定肺组织高迁移率族蛋白B1(HMGBl)含量,采用免疫组化法测定HMGBl蛋白表达,采用RT-PCR法测定HMGBl mRNA表达.结果 烫伤组肺组织光镜下可见肺泡壁崩解,泡内大量渗出液,间质水肿、肥厚和增生,伴大量炎性细胞浸润;电镜下可见细胞核形态不规则,核膜僵硬,部分凸凹不平和核溶解,胞质内板层小体明显减少,肺组织病理损伤程度较对照组减轻.与对照组比较,烫伤组、非经非穴组和α-BGT组肺组织HMGBl含量升高,HMGBl蛋白及其mRNA的表达上调(P<0.05),足三里组各指标差异无统计学意义(P>0.05);与烫伤组比较,足三里组肺组织HMGBl含量降低,HMGBl蛋白及其mRNA的表达下调,非经非穴组和α-BGT组肺组织HMGBl mRNA表达下调(P<0.05);与足三里组比较,非经非穴组和α-BGT组肺组织HMGBl含量升高,HMGBl蛋白及其mRNA的表达上调(P<0.05).结论 电针足三里可减轻严重烫伤致大鼠急性肺损伤,其机制与激活含α7亚基N型胆碱能受体介导的胆碱能抗炎通路,抑制肺组织HMGBl的表达有关.     

α7 烟碱型乙酰胆碱受体在电针减轻肢体缺血再灌注兔肺损伤中的作用

目的:观察α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在电针减轻肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤中的作用。方法:40只健康雄性新西兰大白兔,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、电针组和α-银环蛇毒素(α-BGT)组(n=10)。采用夹闭股动脉3 h、再灌注4 h的方法制备兔肢体缺血再灌注模型;电针组、α-BGT组于模型制备前1～4 d(30 min/次,1次/d)及模型制备过程中电针足三里穴和肺俞穴(电流l～2 mA,频率2/15 Hz,疏密波);α-BGT组于模型制备前30min腹腔注射α7nAChR拮抗剂α-BGT(1μg/kg)。再灌注4 h时采集颈动脉血样,随后处死兔取肺组织,观察病理学结果并行肺损伤评分,计算肺湿/干重(W/D)比值。采用ELISA法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)含量,Western blot法检测α7nAChR蛋白表达水平。结果:模型组、电针组和α-BGT组再灌注4 h时肺组织W/D比值分别为6.89±1.07、4.56±0.75、8.68±1.49,均明显高于假手术组(2.83±0.43,P0.05);肺损伤评分分别为7.52±1.05、4.16±0.68、9.23±1.57,均明显高于假手术组(1.19±0.22,P0.05);TNF-α分别为(13.3±2.3)pg/mg、(11.0±1.6)pg/mg、(14.1±3.0)pg/mg,均明显高于假手术组[(3.2±0.3) pg/mg,P0.05];IL-1β分别为(9.2±2.0)pg/mg、(7.4±1.7)pg/mg、(10.5±1.9)pg/mg,均明显高于假手术组[(2.1±0.5) pg/mg,P0.05];IL-6分别为(14.2±2.3)pg/mg、(11.7±2.0)pg/mg、(14.8±1.8)pg/mg,均明显高于假手术组[(4.2±0.7)pg/mg, P0.05];α7nAChR表达水平分别为(0.55±0.09)、(0.87±0.14)、(0.33±0.08),均明显高于假手术组(0.23±0.04,P0.05)。与模型组比较,电针组再灌注4h时肺组织W/D比值、肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著降低(P0.05),电针组α7nAChR表达均显著上调(P0.05)。与电针组比较,α-BGT组再灌注4h时肺组织W/D比值、肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量升高(P0.05),α7nAChR表达下调(P0.05)。结论:α7nAChR表达上调,可能参与了电针减轻肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤的过程。     

Nrf2 / HO-1通路在电针减轻肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤中的作用

目的:观察核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路在电针减轻肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤中的作用。方法:40只健康雄性新西兰大白兔,采用随机数字表法分为假手术组、模型组、电针组和全反式维甲酸组(n=10)。采用夹闭股动脉3 h、再灌注4 h的方法制备兔肢体缺血再灌注模型;电针组、全反式维甲酸组于模型制备前1～4 d(30 min/次,1次/d)及模型制备过程中电针足三里穴和肺俞穴,采用疏密波2/15 Hz,强度以兔出现轻微肌颤为宜;全反式维甲酸组于模型制备前30 min腹腔注射Nrf2抑制剂全反式维甲酸7 mg/kg。再灌注4 h时采集颈动脉血样,随后处死兔取肺组织,观察病理学结果并行肺损伤评分,计算肺湿/干重(W/D)比值;测定肺组织MDA含量及SOD活性,采用Western blotting法检测肺组织Nrf2总蛋白、Nrf2核蛋白及HO-l蛋白表达水平。结果:模型组、电针组和全反式维甲酸组再灌注4 h时肺损伤评分分别为5.43±0.82、4.03±0.56、6.21±0.75,均明显高于假手术组(0.92±0.21,P0.05);肺组织W/D比值分别为6.42±1.00、4.45±0.68、7.08±1.12,均明显高于假手术组(2.04±0.29,P0.05);MDA含量分别为(4.82±0.51)nmol/mg、(3.56±0.45)nmol/mg、(5.18±0.47)nmol/mg,均明显高于假手术组(2.10±0.23)nmol/mg,P0.05;SOD活性分别为(50.6±6.3)U/mg、(63.1±7.7)U/mg、(47.2±5.6)U/mg,均明显低于假手术组(72.6±6.3)U/mg,P0.05;Nrf2总蛋白、Nrf2核蛋白及HO-l蛋白表达水平均明显高于假手术组(P0.05)。与模型组比较,电针组再灌注4 h时肺损伤评分、肺组织W/D比值、MDA含量均明显降低(P0.05),SOD活性、Nrf2总蛋白、核蛋白及HO-l蛋白表达水平均明显升高(P0.05)。与电针组比较,全反式维甲酸组再灌注4 h时肺损伤评分、肺组织W/D比值、MDA含量均明显升高(P0.05),SOD活性、Nrf2总蛋白、核蛋白及HO-l蛋白表达水平均明显降低(P0.05)。结论:Nrf2/HO-1信号通路激活参与了电针减轻肢体缺血再灌注诱发兔肺损伤的过程。     

PI3K/Akt/Nrf2信号通路在电针刺减轻兔内毒素休克诱发急性肺损伤中的作用

目的:评价磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路在电针刺减轻兔内毒素休克诱发急性肺损伤中的作用。方法:健康清洁级雄性新西兰大白兔80只,随机分成8组(n=10):对照组(C组)、内毒素休克诱发急性肺损伤模型组(L组)、渥曼青霉素+模型组(WL组)、渥曼青霉素组(W组)、二甲基亚砜组(D组)、模型+电针刺组(EL)、模型+电针刺激非穴位组(SEL)、模型+电针刺+渥曼青霉素组(ELW)。EL组、ELW组于模型制备前1~4 d及制备过程中电针刺激兔双侧足三里和肺俞穴,SEL组用同样方法电针刺激足三里和肺俞穴旁开0.5 cm处。L组、WL组、EL组、SEL组和ELW组经耳缘静脉注射脂多糖(LPS)5 mg/kg,C组、W组和D组给予等容量生理盐水。WL组、W组和ELW组在模型制备前30 min静注渥曼青霉素0.6 mg/kg,D组静注0.08 mL/kg DMSO,C组、L组静注生理盐水0.08 mL/kg。注射LPS或生理盐水后6 h,采集动脉血,检测TNF-α和IL-10浓度,处死动物后取肺组织,进行病理学损伤评分,测定SOD活性及MDA含量及检测p-Akt蛋白、HO-1蛋白、Nrf2核蛋白及总蛋白的表达。结果:L组、WL组、EL组、SEL组和ELW组肺损伤评分分别为(6.8±0.9)、(8.3±1.1)、(4.5±0.6)、(6.5±0.7)、(5.9±0.9),血清TNF-α浓度分别为(3.14±0.23)ng/mL、(4.62±0.32)ng/mL、(2.03±0.18)ng/mL、(3.18±0.25)ng/mL、(3.96±0.28)ng/mL,以及肺组织MDA含量分别为(4.34±0.39)nmol/mg、(6.29±0.54)nmol/mg、(3.09±0.26)nmol/mg、(4.31±0.35)nmol/mg、(5.74±0.47)nmol/mg,均较C组升高,IL-10浓度分别为(5.37±0.47)pg/mL、(3.14±0.25)pg/mL、(6.98±0.54)pg/mL、(5.34±0.43)pg/mL、(5.19±0.39)pg/mL,以及SOD含量分别为(67.6±3.8)U/mg、(42.3±2.6)U/mg、(87.5±5.6)U/mg、(62.3±4.1)U/mg、(57.4±3.5)U/mg,较C组降低,肺组织p-Akt蛋白分别为(1.58±0.29)、(1.23±0.21)、(1.93±0.32)、(1.52±0.28)、(1.46±0.24),HO-1蛋白分别为(0.67±0.09)、(0.48±0.07)、(1.05±0.12)、(0.69±0.08)、(0.74±0.09),Nrf2核蛋白分别为(0.84±0.11)、(0.61±0.09)、(1.37±0.18)、(0.89±0.12)、(0.94±0.13),以及总蛋白分别为(2.14±0.43)、(1.82±0.32)、(3.25±0.58)、(2.18±0.45)、(2.46±0.49),表达水平较C组上调(P0.05),W组、D组上述各指标差异无统计学意义(P0.05);与L组比较,EL组肺损伤评分、血清TNF-α浓度及肺组织MDA含量降低,而IL-10浓度及SOD活性升高,肺组织p-Akt蛋白、HO-1蛋白、Nrf2核蛋白及总蛋白表达水平上调,WL组肺损伤评分、血清TNF-α浓度及肺组织MDA含量升高,而IL-10浓度及SOD活性降低,肺组织p-Akt蛋白、HO-1蛋白、Nrf2核蛋白及总蛋白表达水平下调(P0.05),而SEL组上述各指标差异无统计学意(P0.05);与EL组比较,ELW组肺损伤评分、血清TNF-α浓度及肺组织MDA含量升高,而IL-10浓度及SOD活性降低,肺组织p-Akt蛋白、HO-1蛋白、Nrf2核蛋白及总蛋白表达水平下调(P0.05);与ELW组比较,WL组肺损伤评分、血清TNF-α浓度及肺组织MDA含量升高,而IL-10浓度及SOD活性降低,肺组织p-Akt蛋白、HO-1蛋白、Nrf2核蛋白及总蛋白表达水平下调(P0.05)。结论:PI3K/Akt/Nrf2信号通路介导电针刺激足三里和肺俞穴减轻兔内毒素休克诱发急性肺损伤的作用,机制可能与上调HO-1表达有关。     

黄芪甲苷预处理对大鼠肠缺血再灌注所致肺损伤的影响及其机制

目的:探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)预处理对大鼠肠缺血再灌注所致肺损伤的影响及其相关机制。方法:将45只成年雄性SD大鼠随机均分为假手术(sham)组、肠缺血再灌注(I/R)组、AS-Ⅳ预处理(AS-Ⅳ)组。I/R组和AS-Ⅳ组通过夹闭肠系膜上动脉(SMA)60 min后再灌注120 min以建立I/R模型，sham组仅进行SMA暴露处理。AS-Ⅳ组于模型制备前60 min给予AS-Ⅳ(60 mg/kg)灌胃，sham组和I/R组在相同时间点用等体积的生理盐水灌胃。于再灌注120 min时取肺组织，采用HE染色法观察病理学变化，测定肺组织湿/干(W/D)比值和支气管肺泡灌洗液(BALF)/血清中分子量为4 kDa的FITC标记右旋糖酐(FITC-dextran 4 kDa, FD4)比值，并用ELISA法测定肺组织中白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平，Western blotting法检测肺组织中NLRP3、ASC和caspase-1表达水平。结果:与sham组比较，I/R组肺组织病理学损伤评分、肺组织W/D比值和BALF/血清FD4比值升高，IL-1β和IL-18水平升高，NLRP3、ASC和caspase-1的表达水平升高(P<0.05)；与I/R组比较，AS-Ⅳ组肺脏组织病理学损伤评分、肺组织W/D比值和BALF/血清FD4比值降低，IL-1β和IL-18水平降低，NLRP3、ASC和caspase-1的表达水平降低(P<0.05)。结论:AS-Ⅳ预处理能够显著改善大鼠肠I/R所致的肺损伤，其机制可能与下调NLRP3炎症小体活化水平，减少细胞因子释放，从而减轻肺部组织炎症反应有关。     

内质网IRE1α/XBP1信号通路在小鼠内毒素性急性肺损伤中的作用：与NLRP3炎症小体的关系

目的评价内质网肌醇需要酶1α/X盒结合蛋白1(IRE1α/XBP1)信号通路在小鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)中的作用及其与NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的关系。方法 SPF级健康雄性C57BL/6小鼠36只, 6～8周龄, 体质量25～30 g, 采用随机数字表法分为3组(n=12):对照组(C组)、内毒素性ALI组(ALI组)和内毒素性ALI+STF-083010组(ST组)。ALI组和ST组雾化吸入LPS 3 mg/ml 30 min制备小鼠内毒素性ALI模型, C组雾化吸入等量生理盐水, ST组于雾化吸入LPS前1 h时腹腔注射IRE1α/XBP1信号通路阻断剂STF-083010 50 mg/kg, 其余2组腹腔注射等容量生理盐水。LPS或生理盐水雾化吸入后24 h时处死小鼠, 收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并取肺组织标本, 肺组织HE染色后光镜观察病理学结果, 行肺损伤评分并计算肺湿重/干重(W/D)比值;ELISA法测定BALF上清液IL-1β和IL-18浓度;Western blot法检测肺组织p-IRE1α、XBP1s、NLRP3、ASC和...     

七氟醚减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤

目的 探讨七氟醚对大鼠呼吸机相关性肺损伤（VILI）的影响并探讨其可能机制。
方法 健康SPF级雄性SD大鼠36只，6～8周龄，体重220～280 g。随机分为三组：对照组（C组）、VILI组（V组）和七氟醚组（S组），每组12只。大鼠给予1%戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉后行气管切开插管术，C组自主呼吸4 h，V组和S组插管后机械通气4 h，S组机械通气期间吸入2%七氟醚4 h。通气参数：V_T 20 ml/kg，RR 80次/分，I∶E 1∶1，FiO₂ 21%，PEEP 0 cmH₂O。机械通气结束时采集股动脉血测定PaO₂。处死大鼠，取肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF），计算肺组织湿/干重比值（W/D），采用ELISA法检测BALF中白细胞介素（IL）-1β、IL-18浓度，二氯荧光黄双乙酸盐法检测BALF中肺泡巨噬细胞活性氧（ROS）水平，Western blot法及qRT-PCR法检测肺组织NF-E2相关因子2（Nrf2）、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、caspase-1蛋白含量及其mRNA表达量，观察肺组织病理学改变并进行肺损伤评分。
结果 与C组比较，V组和S组机械通气结束时PaO₂、肺组织Nrf2蛋白含量及其mRNA表达量明显降低（P<0.05），肺组织W/D、BALF中IL-1β、IL-18浓度、BALF中肺泡巨噬细胞ROS水平、肺组织NLRP3、ASC、caspase-1蛋白含量及其mRNA表达量、肺损伤评分明显升高（P<0.05）。与V组比较，S组机械通气结束时PaO₂、肺组织Nrf2蛋白含量及其mRNA表达量明显升高（P<0.05），肺组织W/D、BALF中IL-1β、IL-18浓度、BALF中肺泡巨噬细胞ROS水平、肺组织NLRP3、ASC、caspase-1蛋白含量及其mRNA表达量、肺损伤评分明显降低（P<0.05）。
结论 七氟醚可能通过上调Nrf2和下调NLRP3炎性小体的表达，减轻肺组织氧化应激反应和炎症反应，减轻大鼠呼吸机相关性肺损伤。     

Hedgehog信号通路与骨质疏松症

Hedgehog信号通路是一条保守而重要的信号通路,涉及到多种细胞的增殖和分化活动。近年研究发现,Hedgehog信号通路可以通过上调Runx2和Osx等主要转录因子的表达促进间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSCs）向成骨细胞分化,并且抑制MSCs向脂肪细胞分化。Hedgehog信号通路还可以通过调节细胞周期蛋白促进成骨细胞增殖。本文综述总结了Hedgehog信号通路调节成骨细胞增殖分化的作用机制,认为Hedgehog信号通路通过促进成骨细胞增殖分化参与调节骨代谢,为骨质疏松症的治疗提供一种新思路。     

Wnt信号传导途径与骨质疏松

过去20年,在分子生物学和基础医学领域对骨质疏松症的研究取得了长足进展。Wnt信号通路在胚胎发育及生命体成长过程中起着关键的调控作用。2001年,基因学研究证实标准的Wnt信号通路在骨骼形成过程中起到关键的调控作用,最近,有报道非经典的Wnt信号通路在骨骼形成过程中有调控作用。由于目前应用调控合成代谢途径预防和治疗骨质疏松症尚无有效的报道。因此,本文主要从Wnt信号通路与骨质疏松症的发病机制及治疗进展的角度展开综述。     

Wnt信号通路与成骨细胞

经典Wnt信号通路在成骨细胞的发生及骨形成过程中扮演重要角色.研究表明上调或下调Wnt通路中相关因子的表达或改变它们的功能,通过影响成骨细胞的发育、分化、骨基质的形成和矿化,间接影响破骨细胞的发生和骨吸收等,导致骨量减少或高骨量的变化.随着Wnt通路与成骨细胞发育及分化研究的深入,一系列新靶点的发现将有助于骨质疏松的治疗.笔者综述了目前Wnt通路与骨形成及相关疾病治疗的研究进展.     

Rapamycin-induced cytotoxic signal transduction pathway

We examined the effects of rapamycin on activation, proliferation, and expression of cytotoxic effector molecules in Molt-4 human T lymphocytes. We investigated the effects of rapamycin on cell viability, caspase family protein activities. Western blots of Bcl-2, Bak, p53, p21, p27, Rb, CDK2, and cyclin B1, as well as measurement of reactive oxygen species (ROS) generation and mitochondrial membrane potential transition. Cells were cultured in the presence or absence of rapamycin. Flow cytometric analysis was performed using propidium iodide stain. Viability of Molt-4 cells was decreased by the addition of rapamycin in dose- and time-dependent manners. Rapamycin induced no nuclear fragmentation in Molt-4 cells. Generation of H₂O₂ in rapamycin-treated Molt-4 cells increased in a time-dependent manner. There were no changes among catalytic activities of caspase proteases. And there was no evidence of expression of Bcl-2, p53, p21, p27, or Rb proteins. G2/M phase cell cycle arrest was identified by flow cytometry. We noted decreased expressions of CDK2 and cyclin B1. We also noted increased Bak protein expression and change in mitochondrial membrane potential transition. In conclusion, rapamycin-induced cytotoxicity was characterized by generation of ROS, which modulated Bak protein expression and mitochondrial dysfunction. G2/M phase cell cycle arrest was achieved by decreased expressions of CDK2 and cyclin B1.