苯接触标志物尿中苯巯基尿酸的分析与评价

尿中苯巯基尿酸(SPMA)与苯接触存在良好相关性,是低浓度苯接触特异和敏感的生物标志物。SPMA可用高效液相色谱法(HPLC)、液质联谱(LC/MS)、气质联谱(GC/MS)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法检测。本文详细介绍了国外检测尿SPMA的方法,评价了尿SPMA作为职业苯接触生物标志物的有效性和应用。     

尿中苯巯基尿酸的高效液相色谱-质谱测定方法

目的 研制我国职业接触苯工人尿中苯巯基尿酸(SPMA)的生物限值.方法 在苯作业车间选择空气中苯浓度在32.5 mg/m~3以下接苯工人55人,应用个体采样器采集空气样品,用气相色谱法检测作业者个体苯接触水平,同时采集当日工人班后尿,应用高压液相色谱/质谱法(HPLC/MS)测定尿中SPMA含量以评价苯接触者的内暴露水平,内外暴露水平的比较用相对内暴露指数(RIE)加以评定.结果 接苯工人工作环境空气苯浓度范围为0.71～32.17 mg/m~3,几何平均浓度为6.98 mg/m~3,中位数为7.50 mg/m~3,尿中SPMA与个体苯暴露量存在良好的线性关系Y(μg/g Cr)=-8.625+18.367 X(mg/m~3),r=0.8035(P<0.01);将我国职业苯接触限值时间加权平均容许浓度(PC-TWA=6 mg/m~3)代入回归方程,推算工作班后尿中SPMA含量为101.58μg/g Cr.计算的RIE指数显示,接触1 mg/m~3苯可平均代谢转化为尿中SPMA 18.23 μg/g Cr,并且随接苯水平的上升其代谢转化效率呈下降趋势.结论 参考国外SPMA生物限值标准,建议我国职业接触苯生物限值班后尿中SPMA为100μg/gCr(47μmol/mol Cr).     

苯接触与尿中反-反式黏糠酸和苯巯基尿酸关系研究

目的探讨职业苯接触与尿中反-反式黏糠酸(ttMA)和苯巯基尿酸(SPMA)的相关性,评定两接触标志物作为生物监测指标的适用性。方法对44名制鞋厂接苯工人进行个体苯暴露水平的作业环境监测,采集当日班前与班后尿样,分别用高效液相色谱和液质联谱测定尿中ttMA和SPMA含量。结果个体苯接触浓度为2.57~146.11 mg/m3,几何平均浓度为(27.91±3.29)mg/m3。班后尿中ttMA和SPMA含量均较班前增高,差异有统计学意义(P0.01),班后ttMA和SPMA与空气苯浓度的相关系数分别为0.905(P0.01)和0.537(P0.01),个体苯接触代谢转化为ttMA和SPMA的相对内暴露指数(RIE)随苯接触浓度的增高而下降。结论在中、高浓度的苯接触时,班后尿ttMA与空气苯浓度的相关性优于SPMA。     

低苯暴露人群尿中t，t-MA及S-PMA的生物监测

目的分析职业低苯和环境低苯接触与人体尿液中t,t-MA和S-PMA浓度的相关性。方法选取广州市某制鞋厂钳帮和刷胶工人等苯职业接触人员作为职业低苯暴露人群（职业组）,选取非职业苯接触且家庭1年内装修过并已入住半年以上的人员作为环境低苯接触人群（环境组）。采用超高效液相串联质谱联用（UPLC—MS／MS）内标法测定尿中t,t-反式粘糠酸（t,t-MA）及苯巯基尿酸（S-PMA）含量,采用气相色谱法检测空气中苯浓度。结果职业组个体空气暴露的苯浓度（均值±标准差）为（0．16±0．06）mg／m^3,尿中t,t-MA及S-PMA含量分别为（42．7±39．2）和（0．28±0．19）μg／gCr;环境组个体空气暴露的苯浓度中位数（四分位间距）为0．01（0．02）mg／m^3,尿中t,t-MA及S-PMA含量的中位数（四分位间距）分别为20．5（16．2）和0．03（0．04）μg/gCr;经非参数Mann—WhitneyU—test检验分析发现：职业组的个体空气暴露苯浓度及尿中t,t-MA、S-PMA含量均高于环境组（均P〈0．01）。相关性分析结果显示,当空气中苯浓度为0．16mg／m^3时,尿中t,t—MA和S-PMA与空气中苯浓度存在良好的相关性（r=0．499、0．715）。结论t,t-MA及S-PMA可作为生物标记物用于职业低苯和环境低苯暴露的生物监测。     

离子色谱法测定尿中硫氰酸根的方法探究

目的 采用离子色谱检测技术，建立丙烯腈职业接触人群尿中硫氰酸根的检测方法。方法 尿样用去离子水稀释后离心；经固相萃取（ODS-C18）净化，由lonPac AS16(250 mm×4 mm)柱分离，淋洗液浓度为35 mmol/L；等度洗脱；抑制电流87 mA；进样体积25μl，电导检测器检测，外标法定量。结果 该方法线性范围在0.31～100.00μg/ml，相关系数r≥0.999，方法检出限为0.09μg/ml（以取1.00 ml尿样计算），方法定量限为0.31μg/ml（以取1.00 ml尿样计算）。加标回收率在98.40%～102.00%之间，批内精密度为0.37%～3.36%，批间精密度为0.70%～3.14%。结论 该方法可靠、稳定、操作简单，分析时间短、成本较低，对环境友好，适用于对丙烯氰职业接触人群尿中硫氰酸根的检测。     

职业接触苯工人尿中黏糠酸测定方法与生物限值研究

目的推荐我国职业接触苯尿中反-反式黏糠酸（uMA）生物限值并建立相应的高效液相色谱（HPLC）测定方法。方法选择职业苯接触者56人和非苯接触者24人，应用活性炭吸附管采集工人呼吸带空气、CS2洗脱、毛细管气相色谱法检测个体外暴露水平，同时采集当日工作班前和班末尿样本，应用HPLC测定尿中uMA以观察内暴露水平。尿样经2mol／L盐酸酸化、香草酸为内标、乙酸乙酯萃取预处理，采用ODS柱、冰乙酸：四氢呋喃：甲醇：水（体积比1：2：10：87）为流动相、流速0．9ml／min、紫外检验波长264nm、柱温25℃的色谱条件分离测定尿中uMA。结果uMA的线性范围为0．10～10．00mg／L，检出限为0．10mg／L，加标平均回收率为95．1％～100．5％，批内、批间精密度变异系数分别为4．4％～7．5％和6．2％～8．8％。接苯工人空气苯浓度范围0．332～146．000mg／m^3，平均浓度41．8mg／m^3，班末尿uMA与个体苯接触量存在良好线性关系y（mg／gCr）=2．103＋0．177x（mg／m^3），r=0．791，P〈0．01，将我国职业苯接触限值PC—TWA=6mg／m^3代入回归方程，推算工作班末尿中uMA含量为3．165mg／gCr。结论建立的HPLC测定uMA方法简便、快速、灵敏，可用于职业接触苯的生物监测，参考国内外文献和国外相关标准，建议我国职业接触苯生物限值班末尿uMA为2．4mmol／molCr（3．0mg／gCr）。     

环氧树脂厂工人双酚A接触水平调查

[目的]评估树脂厂工人双酚A接触水平,为下一步建立剂量反应关系作基础。[方法]2010年选择某树脂厂,在对现场生产工艺流程、设备等的调查基础上,进行定点及个体空气采样,并收集154名工人班前尿及班后尿,酶解检测总双酚A水平;另收集当地无明确双酚A源水厂的109名工人尿样作为生物监测的对照组。[结果]树脂厂96.5%的空气样品测出双酚A。树脂厂工人班前尿与班后尿肌酐校正总双酚A水平中位数分别为11.31、16.17μg/g,班后尿水平高于班前尿水平（P〈0.05）。对照组肌酐校正水平中位数分别为2.96、2.56μg/g,明显低于树脂厂工人的检测值（P〈0.001）,其单侧95%上限分别为19.05、28.84μg/g。[结论]树脂厂工人双酚A接触水平高,有必要采取措施控制接触水平。     

2011年荣成市沿海乡镇居民碘营养状况调查

[目的]了解沿海地区居民食用盐碘含量、人群尿碘水平、儿童甲状腺肿大情况,为进一步调整碘盐加碘量提供科学依据。[方法]2011年,在荣成市4处沿海乡镇,抽取部分8～10岁儿童、18～50岁成人和孕期、哺乳期妇女进行尿碘检测,对居民食用盐进行碘浓度检测,对8～10岁儿童进行甲状腺肿大情况调查。[结果]检测8～10岁儿童尿样414份,尿碘中位数为261.5μg/L,其中<100μg/L的占7.49%,>300μg/L的占40.10%。检测18～50岁成人尿样202份,尿碘中位数为265.0μg/L,其中<100μg/L的占8.91%,>300μg/L的占44.06%。检测孕期、哺乳期妇女尿样361份,尿碘中位数为164.1μg/L,其中<100μg/L的占22.44%,>300μg/L的占21.05%。检测食盐196份,盐碘中位数为29.1mg/kg,碘盐合格率为94.90%。碘盐覆盖率为100.00%,合格碘盐食用率为94.39%。检查440名8～10岁儿童,检出甲状腺肿大的5人,甲肿率为1.14%。[结论]荣成市沿海地区相当部分居民碘摄入过量。     

某民营企业苯污染的职业卫生学调查

[目的]了解企业苯污染的职业卫生状况。[方法]抽检原配料和空气样品中的苯、甲苯和二甲苯含量;以被调查企业185名工人作为接触组,并根据岗位不同分为A（手工喷涂55人）、B（自动喷涂50人）、C（丝印58人）、D（清洗、包装22人）4组,以34名不接触苯作业者作为对照组,对其进行职业健康体检。[结果]2次抽检原料甲苯中苯含量分别为64．8g／kg和（0．02g/kg。A、B组工人外周血血红蛋白和血小板减少,C组工人血红蛋白和血小板减少,D组工人血小板减少,与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。[结论]作业工人即使仅接触低浓度苯,仍可引起机体的健康损害。     

液-质联用检测人尿中的苯巯基尿酸

目的建立人尿中苯巯基尿酸的检测方法,并实际测定职业接苯人群尿中苯巯基尿酸的浓度。方法尿样经酸化水解后,调适宜pH值,液液萃取苯巯基尿酸,经高效液相色谱分离,负离子模式电喷雾离子源质谱检测,选择分子离子峰m/z238,峰面积定量。结果该方法在5～320μg/L范围内线性关系良好,r=0.9994±0.0003,检出限1.2μg/L(S/N=3),回收率在86.8%～94.2%之间,日内与日间精密度相对标准偏差(RSD)均小于7%;用该法对55名职业接苯工人班末尿中苯巯基尿酸进行了检测,并对苯巯基尿酸浓度与空气苯浓度进行回归分析(r=0.8035,P0.05)。结论该方法快速、灵敏,选择性好,结果准确可靠,可用于职业接苯工人班末尿中的苯巯基尿酸的生物监测,亦可用于环境污染中苯吸收的评价。     

LC-MS/MS法同时测定水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留量

[目的]建立测定水产品中孔雀石绿(MG)、结晶紫(GV)及其代谢产物残留量的液相色谱-串联离子阱质谱仪测定法(LC-MS/MS)。[方法]将样品中残留的MG或GV用硼氢化钾还原为其相应的代谢产物隐色孔雀石绿(LMG)或隐色结晶紫(LGV),经净化预处理,用串联离子阱质谱在电喷雾-全扫描二级质谱(MS/MS)模式进行质谱测定,与HPLC方法测定结果比对验证。[结果]在55件可疑样品中,用本法测定有46件为阳性,9件为假阳性,本法测定结果满意。[结论]采用LC-MS/MS法测定水产品中MG、GV及其代谢产物含量,结果准确,灵敏度高。     

尿中尼古丁含量的高效液相色谱测定法

目的建立一种实用的高效液相色谱法测定人尿中尼古丁含量的方法。方法在流动相为0.02mol/LH3PO4-KH2PO4(pH值=3)、流速为1.0ml/min、C18反相柱、室温、波长为262nm的条件下,测定尼古丁。结果标准曲线的相关系数0.9992,加标回收率大于91.5%,变异系数小于6.0%。结论应用该方法测定尿中尼古丁的含量,方法简便、准确、灵敏度高。     

恒温消解-原子荧光法测定尿中硒的研究

[目的]为开展人群尿中硒含量调查提供简便、可靠的检验方法。[方法]采用恒温消解仪消解尿样,以原子荧光法测定尿中硒。[结果]该方法的回归方程^Y=-7.120＋48.77X,相关系数为0.9991～1.000;测定尿中硒在0.5～300μg/L的范围内有良好的线性关系;精确度试验低、中、高3种不同尿样的RSD（%）分别为0.74、0.98、0.81;回收率试验低、中、高3种不同加入量回收率（%）分别为98.5、99.3、98.7。[结论]该方法是较理想的测定尿中硒的方法,尤其适用于大批量样品的检验分析。     

液相色谱法快速分析奶粉及液态奶中三聚氰胺

目的建立奶粉及液态奶中三聚氰胺的液相色谱快速测定方法。方法以20％甲醇＋1％三氯乙酸为提取溶液,同时沉淀蛋白质等有机物,旋涡震荡混匀后,于30℃水溶中超声提取,在4℃下以4000r／min超速离心后取上清液经0．45μm滤膜过滤后上机测定;采用10mmol／L己烷磺酸钠＋10mmol／L柠檬酸：乙腈（92：8）为流动相,Agilent TC—C18柱（4．0nm×250mm,5μm）,235nm检测波长,根据保留时间和紫外光谱定性,峰面积定量。结果采用上述提取方式,在给定的色谱条件下,样品液中三聚氰胺与样液基质达到基线分离,精密度试验相对标准偏差〈5％。方法在0．500—100μg／mL范围内线性良好,相关系数为0．9995,在不同奶粉中加标回收率范围81．2％～112．1％。采用本方法测定奶粉和液态奶的检出限分别为2mg／kg和0．5mg／kg。结论应用液相色谱法二极管阵列检测器（LC—DAD）同时进行奶粉和液态奶中三聚氰胺的定性定量分析,样品处理简便快速,检测结果准确可靠,适用于基层检验室开展大批量样品的筛查监测。必要时可采用质谱（LC—MS／MS）进一步确认。     

HPLC-PDA法同时测定水源水中主要3种微囊藻毒素方法的研究

[目的]建立水中微囊藻毒素(MC)含量的高效液相色谱初筛、光谱定性、质谱确认分析方法。[方法]以Waters Atlantis dC18(3μ2.1×100 mm),色谱质谱柱为分析柱,流动相:20%甲醇溶液,Surveyor二极管阵列检测器(PDA)和Finnigan LCQ Deca XP MAX质谱仪为检测器。[结果]回归方程和相关系数为:MC-RR y=7.401998×1025 x+5.028972×102,r=0.998;MC-LR y=5.689824×105x+5.925834×102,r=0.9996;MC-YR y=4.816086×105x+6.145898×102,r=0.9994。平均回收率为=95.1%~105.0%,RSD为3.00%~4.99%。[结论]用HPLC-PDA法检测水源水中的微囊藻毒素方法简便,重现性好,灵敏度高,定性准确,定量精确。     

二甲基甲酰胺生物接触限值的研究

目的研究我国职业接触二甲基甲酰胺(DMF)的生物限值。方法气相色谱法检测工作场所空气中二甲基甲酰胺浓度和作业工人班末尿中甲基甲酰胺(NMF)浓度,同时研究两者的相关性。结果 DMF接触者班末尿中NMF浓度与工作场所空气中DMF浓度有密切正相关(Y=0.3389X+3.0297,r=0.9986,P0.01)。根据作业场所空气中DMF的国家职业卫生标准,按回归方程推导出职业接触DMF的生物限值。结论 DMF接触者生物接触限值推荐值:班末尿中NMF为12.0 mg/gCr。     

同时测定工作场所空气中二甲基甲酰胺和二甲基乙酰胺的气相色谱质谱联用测定法

目的建立工作场所空气中二甲基甲酰胺（DMF）和二甲基乙酰胺（DMA）的气相色谱质谱联用测定法。方法采用多孔玻板吸收管采集,经DB-5MS毛细管色谱柱分离后气相色谱质谱联用仪测定。结果该方法 DMF和DMA的分离效果好,检出限分别为1.2和1.1μg/ml;方法的重现性好,相对标准偏差分别为1.6%-3.1%和1.8%-3.5%;平均加标回收率分别为94.2%-102.5%和92.9%-104.4%。结论该方法精确、稳定、灵敏度高,适用于工作场所空气中DMF和DMA的同时测定。     

人尿中酚,粘糠酸,苯巯基尿酸的生物监测

为了探索接触低浓度苯的生物监测指标，在建立了灵敏、特异的尿中反，反－粘糠酸（ｔ，ｔ－ＭＡ）的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）、苯巯基尿酸（Ｓ－ＰＭＡ）的色谱／质谱／质谱（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）测定方法的基础上，对４９位接触低浓度苯的工人及２０位非职业接触者进行了生物监测。结果表明：在苯接触浓度低于３．２ｍｇ／ｍ３（１ｐｐｍ）的情况下，作业工人的尿ｔ，ｔ－ＭＡ和Ｓ－ＰＭＡ浓度与空气中苯的ＴＷＡ浓度显著相关；尿酚与空气中苯的ＴＷＡ浓度之间的相关性很差。吸烟能增加尿ｔ，ｔ－ＭＡ和Ｓ－ＰＭＡ的浓度。