甲基汞通过miRNA对人胚胎神经干细胞细胞周期相关基因表达的调控

[目的]通过研究甲基汞对人胚胎神经干细胞miRNA表达的影响,探讨低剂量甲基汞对神经干细胞细胞周期调控基因的调节作用. [方法]以0、10、50 nmol/L甲基汞染毒人胚胎神经干细胞24h后,用MTT法测定甲基汞对细胞活力影响,应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测甲基汞对细胞周期调控基因(p16、p21)的mRNA的表达水平影响,利用实时荧光定量多聚酶链反应技术检测调控p16、p21的miRNA(miR-24、miR-106a)的表达情况. [结果]50 nmol/L甲基汞染毒组细胞活力降低为对照组的53.5％,差异有统计学意义(P＜0.05);p16与p21基因的mRNA表达水平随着甲基汞染毒浓度的升高而升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),但10 nmol/L与50 nmol/L组的p16基因表达差异无统计学意义.miR-24、miR-106a的表达水平随着甲基汞染毒浓度的升高而降低,差异有统计学意义(P＜0.05). [结论]50 nmol/L的甲基汞可以引起人胚胎神经干细胞增殖抑制,并可能通过miRNA调节细胞周期调控基因的表达.     

百草枯致神经发育毒性的研究进展

百草枯是目前世界上使用最广泛的除草剂之一.它的急性毒性和长期低剂量接触所致的神经毒性一直被人们关注,对机体神经发育产生的影响也不容忽视.本文以近年来国内外有关百草枯神经发育毒性的研究为基础,综述其流行病学研究、实验动物研究以及可能的毒性机制等方面研究进展;结合本课题组的已有研究,提示百草枯的神经发育毒性可能与帕金森病发展密切相关,应予以广泛关注.     

百草枯对小鼠神经行为发育及学习记忆功能的影响

【摘要】 目的 观察百草枯（PQ）对发育期C57BL/6J小鼠神经发育的毒性作用，并探讨百草枯对小鼠学习记忆的影响。方法 80只出生第21天的仔鼠分为对照组（生理盐水），1.25mg/kg/d，2.5mg/kg/d，5mg/kg/d，10mg/kg/d五组，灌胃染毒百草枯，每天一次，连续30d。观察小鼠的一般生理和神经行为发育情况，并在染毒结束后进行Morris水迷宫实验和避暗实验，测试小鼠的学习记忆功能。神经行为学测试结束后取小鼠大脑，称重并进行病理检查，同时利用透射电镜观察各组小鼠中脑黑质部超微结构。结果 染毒期间小鼠一般状况没有明显变化，染毒结束后各组体重没有统计学差异；在Morris水迷宫测试中，各组差异没有统计学意义，而避暗实验中与对照组相比，高剂量组的避暗潜伏期延长，差异具有统计学意义（P<0.05）；在病理切片和透射电镜观察中，在高剂量组分别观察到黑质细胞减少和神经元细胞凋亡。结论 百草枯暴露对发育期小鼠成年后神经行为有影响，同时会使小鼠成年后出现脑组织的病理变化，发生器质性的病变。     

1-溴丙烷暴露生物标志研究进展

1-溴丙烷作为氟氯烃类化合物的替代物,其使用和生产量都在逐年增加。近几年,学者开展了多项职业流行病学研究,探讨1-溴丙烷暴露的有效生物标志。拟通过文献综述,对1-溴丙烷可能的暴露标志进行比较分析。     

新生期大鼠化学物暴露对睾丸DNA甲基化及精子生成的影响

目的 通过新生期大鼠暴露DNA甲基转移酶抑制剂(5-Aza-CdR)、镉(Cd)和多氯联苯153(PCB153),探讨化学物新生期暴露对SD大鼠睾丸DNA甲基化变化、细胞凋亡和精子生成的影响.方法 将出生3 d(postnatal day 3,PND3)SD大鼠随机分组,每组24只动物.经口给予溶剂对照5-Aza-CdR(0.025、0.250mg/kg)、PCB153(0.025、0.250、2.500mg/kg)和Cd(1、2、4mg/kg),连续暴露5 d.最后1次暴露24 h后,解剖每组的一半动物,剩余动物在无暴露条件下继续喂养至12周龄(成鼠)解剖.检测睾丸细胞凋亡和DNA甲基化水平.结果 与对照组比较,新生期大鼠5-Aza-CdR、PCB153和Cd暴露后,在12周龄时精子计数均呈下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05).新生期化学物暴露后,与对照组相比,基因组整体DNA甲基化水平降低,新生期细胞凋亡上升,差异均有统计学意义(P<0.05). 5-Aza-CdR使p53启动子区BstUI位点甲基化水平下降,p53基因表达上调,提示p53通路可能是DNA甲基化诱导细胞凋亡的通路之一.新生期大鼠Cd暴露可诱导整体DNA甲基化变化,细胞凋亡增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),但p53 mRNA表达及p53启动子区BstUI位点甲基化水平和对照组相比,差异无统计学有意义(P>0.05),提示Cd暴露诱导的细胞凋亡可能是非p53通路依赖的.PCB153的体内暴露未发现基因组整体甲基化和细胞凋亡的明显变化.结论 新生期化学物体内暴露可诱导成年精子形成障碍.DNA甲基化异常和细胞凋亡可能是其中的机制之一.     

乐果对大鼠皮层神经元氧化损伤及兴奋性氨基酸递质含量的影响

目的 观察乐果染毒对原代培养的大鼠皮层神经元的的毒性作用及损伤机制.方法 体外原代培养SD大鼠皮层神经元6 d后,加入终浓度为1、5、10、50、100 μmol/L的乐果,于染毒后48 h收获细胞,取匀浆上清液用于氧化损伤及细胞内兴奋性氨基酸递质的测定,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 染毒48 h后,乐果浓度在5、10、50、100 μmol/L时,超氧化物歧化酶(SOD)活力[(1.04±0.02)、(0.99±0.02)、(0.96±0.02)、(0.91±0.02)U/mg pro]即明显降低,谷胱甘肽(GSH)含量[(219.35±6.79)、(205.6±6.29)、(194.06±2.63)、(93.68±7.56)mg/g pro]明显降低,丙二醛(MDA)含量[(21.22±0.29)、(24.01±0.34)、(27.15±1.02)、(32.91±1.39)nmol/mg pro]明显升高,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);10、50、100 μmol/L剂量组天冬氨酸含量明显升高,1、5、10、50、100μmol/L剂量组谷氨酸含鼍明显升高,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);1、10、100 μmol/L染毒组乐果对神经无细胞凋亡影响明显.乐果染毒后,神经元内MDA含量与兴奋性氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸)含量呈正相关,相关系数分别为0.937和0.759;而与GSH含量呈负相关,相关系数分别为-0.868和-0.801,有统计学意义(P<0.01).结论 乐果可引起神经元氧化损伤及兴奋性氨基酸递质含量变化,共同参与神经元的凋亡过程.     

极低频电磁场对人体健康效应的流行病学研究进展

极低频电磁场对人体健康的效应自20世纪70年代以来受到了广泛的关注,在肿瘤,尤其是儿童白血病以及神经行为、神经退行性疾病、心血管疾病、生殖功能、子代发育、免疫学和血液学等方面进行了大量的流行病学研究,本研究对上述研究结果进行综述。     

兴奋性氨基酸递质系统在乐果诱导星形胶质细胞活化中的作用

Objective To study the involvement of excitatory amino acid system in astrocytes activation caused by dimethoate. Methods Pure-cultured astrocytes were gained by three passages from primary cultured rat nerve cells, then treated with 10-6,10-5,10-4 mol/L dimethoate for 48 h, 50 μmol/L and 100μmol/L MK801, a NMDA receptor blocker, was used to intervene the effects induced by 10-4 mol/L dimethoate.HPLC-FLD was utilized to measure the concentrations of excitatory amino acid (EAA), RT-PCR was used to detect the expression levels of NR2B, GLT-1, GLAST, GFAP and S100β mRNA, and immunofluresence staining method was applied to measure the expression levels of GFAP and S100β proteins. Results The expression levels of GLAST mRNA in all exposure groups were 67.8% ,68.6% and 76.2% of control level,respectively, which were significantly lower than that of control group (P＜0.05); The concentrations of EAA significantly decreased in 10-4 mol/L dimethoate group, as compared with control group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA in 10-4 mol/L dimethoate group, of S100β mRNA in 10-5 mol/L dimethoate group, of GFAP protein in 10-4 mol/L and 10-5 mol/L dimethoate groups and S100β protein in 10-4 mol/L dimethoate group were significantly higher than those in control group (P＜0.01). The expression levels of GLT-1 and GLAST mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01), the expression levels of NR2B mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μmol/L MK801 groups increased significantly, as compared with control group (P＜0.05 or P＜0.01); the concentration of Glu in 10-4 mol/L dimethoate plus 100 μ mol/L MK801 group increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA and protein in10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups decreased significantly (P＜0.01); S100β protein expression level in 50 μ mol/L MK801 intervention group was significantly higher than thatl in control group (P＜0.01). Conclusion Excitatory amino acid system involved in astrocytes activation caused by dimethoate. MK801 was useful to control astrocytes gliosis.     

结缔组织生长因子及α平滑肌肌动蛋白在百草枯致大鼠肺纤维化中的作用

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织结缔组织生长因子(CTGF)及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平的变化,探讨PQ致肺纤维化的机制.方法 SD大鼠随机分为对照组(生理盐水)和染毒组(PQ).染毒组给予生理盐水稀释的PQ(80 mg/kg)一次性灌胃,对照组给予生理盐水1ml/kg一次性灌胃.于不同处理后1、3、7、14、28、56 d分别以免疫组化(SABC)法检测大鼠肺组织中CTGF及α-SMA的表达强度和定位;免疫印迹(Western blot)法检测肺组织中CTGF及α-SMA蛋白的表达水平;初步分析两者表达的相关性及其表达与肺组织纤维化指标的相关性;同时观察中毒大鼠的肺组织病理变化.结果 与对照组比较,免疫组化和Western blot法检测染毒后大鼠肺组织中CTGF、α-SMA的表达变化规律较为一致,均随时间延长而逐渐升高,3、7 d时升高幅度缓慢,14～56d时增幅较大,各时段均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).CTGF与α-SMA、病理评分及羟脯氨酸含量均呈正相关(r=0.74,r=0.87,r=0.71,P＜0.05或P＜0.01).病理学Masson染色可见大鼠肺组织中14～28 d时成纤维细胞大量增殖,胶原纤维数量逐渐增多.结论 在染毒大鼠肺组织中CTGF及α-SMA的表达持续增高;CTGF可能通过促使肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,增加胶原分泌和基质合成,在PQ所致肺纤维化的发生发展中起重要作用.     

某校学生工频磁场暴露水平的调查

[目的]评估某校学生工频磁场的暴露强度、来源和24h内的变化趋势,为进一步的研究提供暴露水平数据。[方法]采用EMDEX-LITE个体测量仪器检测研究对象24h的工频磁场暴露情况,并以调查问卷收集其个人基本信息及当天的活动情况。[结果]收集92份个体测量数据,其中男性44人,女性48人,年龄在21~34岁之间。该校学生24h累积暴露量的中位数为1.249μT/h,四分位数间距（IQR）为0.930μT/h;不同性别、不同学历之间（本科生和研究生）的平均累积暴露水平差异无统计学意义。暴露于工频磁场的途径主要是使用电脑（占49%）,出现峰值的地点大致集中在学校的宿舍、图书馆、食堂。在24h的测量时间中,接触高于界点（〉0.4μT）工频磁场的人数因时间段不同而异,与个体的活动密切相关。[结论]该校学生在工频磁场暴露水平方面的数据显示,工频磁场的暴露强度与活动、地点密切相关。