应用mRNA差异显示技术克隆人成骨肉瘤转移相关基因

目的：筛选与成骨肉瘤转移抑制相关的基因,探讨成骨肉瘤转移的分子机制。方法：应用改良的mＲＮＡ差异显示,比较成骨肉瘤细胞系ＳＯＳＰ－９６０７及其高转移亚系统ＳＯＳＰ－Ｍ的mＲＮＡ表达差异。克隆差异片断,进行测序。根据测序结果设计牧民性引物,ＲＴ－ＰＣＲ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ证实其表达特异性。结果：从低转移细胞ＳＯＳＰ－９６０７中分离出２条特异性表达的片断ＭＳＰ２和ＭＳＰ３,经ＲＴ－ＰＣＲ和Ｎｏｒ     

P－糖蛋白在胃癌中的表达意义

目的探讨Ｐ－糖蛋白在胃癌中的表达意义。方法应用Ｓ－Ｐ免疫组化方法研究８１例原发性胃癌Ｐ－糖蛋白的表达变化的关系，结果发现Ｐ－糖蛋白阳性染色率为２８．４％，Ｐ－糖蛋白的阳性染色与胃癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及胃癌细胞增殖活性无关，而与胃癌的ＣＥＡ表型显著相关（Ｐｅａｒｓｏｎ列联系数＝０．３５，Ｐ＜０．０５）。癌旁正常胃粘膜胃腺底部Ｐ－糖蛋白阳性染色率为７．４％。结论化疗前的胃癌患者自发性地存在Ｐ－糖蛋白过表达，可能是部分患者在治疗初始阶段即对化疗缺乏敏感性的一种标志。     

应用抑制性消减杂交技术筛选成骨肉瘤转移相关基因

目的：探讨与人成骨肉瘤转移相关的基因表达变化．方法：通过抑制性消减杂交技术从一对同一亲本、转移表型不同的人成骨肉瘤细胞株中分别提取细胞总RNA，筛选差异表达基因并测序，将结果与核酸数据库进行同源性比较．结果：获得12个在低转移成骨肉瘤中高表达的、均与已知的人类基因片段有很高同源性的核甘酸片段．结论：差异表达的基因可能与成骨肉瘤细胞转移生物学特性呈密切相关，特别是在维持肿瘤细胞自身稳定、防止转移中起重要作用．     

基质金属蛋白酶—2，9及其抑制剂在骨肉瘤中表达的意义

目的 探讨基质金属蛋白酶－2，9（MMP－2，9）及其特异性抑制剂TIMP－2，1在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤侵袭，转移，复发的关系。方法 采用免疫组织化学链酶菌抗生素一过氧化酶（SP）法检测了62例骨肉瘤（初发性骨肉瘤51例，复发性骨肉瘤11例，确诊时即伴有肺转移者9例，不伴有肺转移者53例）和正常对照组织中MMP－9，MMP－2，TIMP－1，TIMP－2的表达，并根据阳性瘤细胞占肿瘤细胞总数的比率进行半定量量化分析和非参数检验。结果 MMP－9，TIMP－1在骨肉瘤中的阳性表达率分别为76％，18％，与二者在正常对照组织中的阳性率相比，MMP－9表达明显升高，TIMP－1表达明显降低（P均＜0．01）。MMP－2，TIMP－2在骨肉瘤中的阳性表达率分别为69％，52％，与二者在正常对照组织中的阳性率相比差异无显著性（P均＞0．05）。MMP－9在肿瘤细胞的胞浆及胞膜中均有表达，且在肿瘤的侵袭边缘阳性细胞数目较多，染色强度较高。MMP－2，9及TIMP－1，2在初发性和复发性骨肉瘤之间以及在伴有肺转移和不伴有肺转移的骨肉瘤之间的表达差异无生。Spearman相关分析表明骨肉瘤中MMP－2与MMP－2，MMP－2与TIMP－2以及TIMP－1与TIMP－2之间的表达均显著性相关。结论 骨肉瘤组织中MMP－9表达升高，TIMP－1表达降低，二者协同促进肿瘤细胞的生长和局部的侵袭破坏。骨肉瘤术后是否复发与是否出现早期转移与MMP－2，9和TIMP－1，2无前。     

MMP-9在口腔鳞癌的表达

观察基质金属蛋白酶在口腔鳞癌的表达，以期了解ＭＭＰ－９在评估口腔鳞癌的组织学分级，肿瘤浸润以及转移等生物学特性中的意义。方法运用免疫组化ＳＰ法测定２２例口腔鳞癌和６例正常口腔粘膜组织中ＭＭＰ－９的表达。结果ＭＭＰ－９在正常口腔粘膜组织中呈阴性或弱阳性表达，癌组织中ＭＭＰ－９的阳性表达６８．２％。ＭＭＰ－９的表达与病理分级和颈淋巴结转移呈正相关（４＝０．４２９，Ｐ〈０．０５），结论ＭＭＰ－９可作为临     

骨肉瘤细胞核因子кB免疫组化研究

细胞核因子ＮＦ－кＢ在肿瘤血管生成中可能具有核心调节作用,本文选择８０例有随访结果的骨肉瘤,应用免疫组化方法检测 ＮＦ－кＢ ｐ６５亚单位以及血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）的表达,同时观察肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ）,旨在探讨 ＮＦ－кＢ表达与骨肉瘤血管生成的关系。结果：８０例骨肉瘤中 ４８例 ＮＦ－кＢ ｐ６５阳性,阳性产物主要定位于肿瘤细胞浆。ＮＦ－кＢ表达与ＶＥＧＦ表达和ＭＶＤ呈显著正相关,而且ＮＦ－кＢ阳性组病人存活时间显著低于阴性组。该结果表明：①ＮＦ－кＢ ｐ６５是骨肉瘤相关的一种癌蛋白,在骨肉瘤的发生和发展中发挥重要的作用;②ＮＦ－кＢ对ＶＥＧＦ可能有正向调节作用,进而影响骨肉瘤血管生成;③ＮＦ－кＢ　对肿瘤血管生成的作用,可能是影响骨肉瘤预后的主要原因之一。     

CD44V6和MMP-2在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的：探讨CD44V6和MMP－2在鼻咽癌（NPC）组织中的表达情况及其与NPC浸润转移的关系。方法：收集229例NPC存档保存完好的石蜡病理标本，采用免疫组织化学染色技术，检测CD44V6和MMP－2在正常鼻咽和NPC组织中的表达情况，分析CD44V6和MMP－2与NPC浸润转移的关系。结果：CD44V6和MMP－2在鼻咽炎症组织中均呈阴性表达；在NPC组织中CD44V6为高阳性表达，总表达率83．0％，但在NPC各TNM分期中，包括有颈淋巴结转移与无淋巴结转移，有远处转移与无远处转移，CD44V6阳性表达率差异均无显著性（P＞0．05），MMP－2总阳性表达率为52．0％，其中T3－4高于T1－2（P＜0．01），有淋巴结转移或远处转移者高于无淋巴结转移者（P＜0．01），N2－3高于N1（P＜0．05），N2，N3与M1相当（P＞0．05），而MMP－2和CD44V6在NPC的表达并无密切关系（P＞0．05），结论：CD44V6阳性表达对NPC诊断有辅助意义，但与NPC浸润转移程度无明显相关，对NPC侵袭转移预测意义不大，MMP－2与NPC浸润转移及其严重程度密切相关，值得进一步跟踪研究，可望成为预测NPC临床生物学行为特征的有用标记物。     

MMP-9和TIMP-1表达失衡与乳腺癌浸润、转移的相关性

目的 研究乳腺癌组织中基质金属蛋白酶（MMP－9）和金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP－1）的表达变化与乳腺癌生物学行为及淋巴结转移的关系。方法 应用SP免疫组织化学方法检测85例乳腺癌组织MMP－9，TIMP－1及细胞增殖核抗原ki-67的表达情况。结果 MMP-9阳性染色率90．59％，MMP－9阳性表达与肿瘤浸润，淋巴结转移，ki-67指数及TNM分期呈正相关（Pearson列联系数分别为P=0.03,P=0.02,P=0.004和P＝0．0000，P＜0．05，0．01。TIMP－1阳性染色率为78．82％，TIMP－1阳性表达与肿瘤浸润，淋巴结转移及TNM分期浸润，转移及ki-67指数显著相关（P＜0．05，P＜0．01，P＜0．001）。结论 MMP－9和TIMP－1表达失衡与乳腺癌浸润及淋巴结转移密切相关。     

大肠癌多向耐药基因表达与淋巴结转移的关系

目的：研究ＭＤＲ－１基因的ｍＲＮＡ表达水平与大肠癌患者临床特征的关系。方法：用逆转录ＰＣＲ定量法检测１６例原发大肠癌病人的正常大肠粘膜和癌组织中ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ的含量，多元线性回归分析其与患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及组织形态等多因素的关系。结果：筛选出ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ的表达量与淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０５），与其他因素无关。结论：ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ高表达的大肠癌细胞可能较相对低表达的大肠癌细胞具有更强的扩散转移能力；ＭＤＲ－１基因的作用可能不仅限于细胞耐药性，还影响细胞的其它生物学行为。     

大肠癌多向耐药基因表达与淋巴结转移的关系

目的：研究ＭＤＲ－１基因的ｍＲＮＡ表达水平与大肠癌患者临床特征的关系。方法：用逆转录ＰＣＲ定量法检测１６例原发性大肠癌病人的正常大肠粘膜和癌组织中ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ的含量，多元线性回归分析其与患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移及组织形态等多因素的关系。结果：筛选出ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ的表达量与淋巴结转移有关（Ｐ〈０．０５），与其他因素无关。结论：ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ高表达的大肠癌组织可能较     

骨和软组织肿瘤中明胶酶的定位与活性分析

为探讨明胶酶（ＭＭＰ－２和ＭＭＰ－９０在间叶肿瘤的浸润与转移中的意义,用免疫组化和酶谱分析的方法,对多种病理分类的４５例骨和软组织肿瘤中,ＭＭＰ－２和ＭＭＰ－９的表达和活性进行了检测。结果发现骨和软组织来源的恶性肿瘤中,ＭＭＰ－２和ＭＭＰ－９的阳性表达率和活性均高于良性肿瘤和正常组织。     

基质溶素在食管癌中的表达及意义

目的：研究基质溶素（matrilysin,MMP-7)在食管癌组织中的表达及其在细胞浸润转移过程中所起的重要作用。方法：彩免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白－过氧化物酶（SP）法检测50例食管癌组织中MMP－7的表达。结果：MMP－7在食管癌组织的阳性率为64％，其表达与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移呈正相关（Pearson列联系数为0．384，P＜0．005）。结论：MMP－7阳性表达与食管癌浸润转移呈正相关，其在食管癌浸润转移中的关系表现为促进肿瘤转移为主。通过检测食管癌组织中的MMP－7的表达，对预后的评价有一定价值。     

改良差示PCR技术分离入成骨肉瘤转移基因片段

目的：建立优化的差示ＰＣＲ体系,通过对转移潜能不同的人成骨肉瘤细胞系进行差示比较,获得人成骨肉瘤转移相关基因片段。方法：Ｃ 低转移性人成骨肉瘤细胞系ＳＯＳＰ－９６０７及由此筛选 出的高转移亚系ＳＯＳＰ－Ｍ为研究对象,利用优化的差示ＰＣＲ技术获得两细胞系mＲＮＡ的表达差异,选取差异明显、片段较长的条带回收并克隆后,经点杂 交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交排队假阳性,并进行测序和同源性分析。结果：获得满意的差示     

直肠癌组织及肠周淋巴结MMP—2和骨桥蛋白的表达变化

正常细胞转化为肿瘤细胞的过程中，伴随一系列细胞生物学行为的变化，表现为增殖快、分化低、浸润和转移，肿瘤细胞的这些表型特征，除与细胞内一些相关基因表达有关外，细胞外基质与细胞之间的相互作用也是一个不容忽视的重要调节因素。细胞外基质重构包括基质成分的变化以及基质转换速率异常，它既是细胞转化的结果，又是肿瘤细胞增殖、浸润和转移的必要条件。基质金属蛋白酶－２（ＭＭＰ－２）是基质降解的关键酶，ＭＭＰ－２可由多种细胞合成分泌，快速增殖的细胞分泌ＭＭＰ－２的能力增强。但是，ＭＭＰ－２在肿瘤组织和转移淋巴结之间…     

膜型基质金属蛋白酶—1在人胃癌中的表达

研究膜型基质金属蛋白酶－１（ｍｅｍｂｒａｎｅｔｙｐｅ－１ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ，ＭＴ１－ＭＭＰ）基因，ｍＲＮＡ在人胃癌组织中的表达及其与胃癌浸润转移和临床分期的关系。方法应用ＲＴ－ＰＣＲ半定量的方法检测ＭＴ－１ＭＭＰ基因ｍＲＮＡ在３０例胃癌组织、正常粘膜和转移淋巴结中的表达。     

TIMP—2基因转染对高转移性人巨细胞肺癌细胞系生物学行为的影响

探讨金属蛋白酶组织抑制因子ＴＩＭＰ－２对肿瘤恶性表型的逆转作用及其在肿瘤基因治疗上的意义。方法利用基因重组技术构建了含全长ＴＩＭＰ－２ｃＤＮＡ的真核表达载体，用脂质体法转染高转移性人肺癌细胞（ＰＧ），检测转染后ＰＧ细胞的金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）活性、体外侵袭、裸鼠体内成瘤性及转移能力等多项生物学行为的变化。并以ＴＩＭＰ－２基因转染前后ＰＧ细胞的裸鼠皮下移植瘤为研究对象，利用免疫组织化学和原位杂交方法，研究在整体环境下ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９和ＴＩＭＰ－１、ＴＩＭＰ－２的ｍＲＮＡ及蛋白表达情况。结果转染细胞较母系细胞ＴＩＭＰ－２ｍＲＮＡ表达增强，ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９的产生及活性无明显变化，体外增殖能力增强，但体外侵袭和软琼脂集落形成能力以及裸鼠体内成瘤性及自发转移能力下降。此外，ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９和ＴＩＭＰ－１、ＴＩＭＰ－２在ＰＧ细胞之裸鼠皮下移植瘤的间质细胞及肿瘤细胞均有表达，阳性的肿瘤细胞主要位于肿瘤和间质交界处。结论特异性上调ＴＩＭＰ－２基因的表达可在一定程度上逆转ＰＧ细胞的恶性表型。     

骨肉瘤中CD147、MMP-2的表达和意义

目的：探讨骨肉瘤组织CD147、MMP-2蛋白的表达及意义。方法：应用免疫组织化学染色SP法检N137例骨肉瘤及10例骨软骨瘤CD147和MMPP-2的表达。结果：骨肉瘤中CD147、MMP-2的阳性表达率均明显高于骨软骨瘤;骨肉瘤中CD147、MMP-2的阳性表达与Enneking分期和肺转移有关,且二者的表达呈正相关（P〈0．01）。结论：CD147NMMP-2在骨肉瘤的浸润和转移方面起重要作用,联合检测CD147和MMP-2有望成为判断骨肉瘤预后的新指标。     

P－选择素在胃癌中表达及其预后意义

应用免疫组化ＬＳＡＢ法对６０例胃癌患者检测Ｐ－选择素在胃癌组织中的表达，并对其中的５５例作长期随访，以研究与胃癌组织学分型、分化程度、淋巴转移、ＴＮＭ分期及其与；临床预后的关系。结果发现６０例胃癌组织中３２例阳性（阳性率５３．３％）。Ｐ－选择素不仅在肿瘤血管内皮上表达，也在肿瘤细胞膜上表达。淋巴结有癌转移者Ｐ－选择素阳性表达率为７０．３％（２６／３７例），显著高于无淋巴结转移的２６．１％（６／２３）（Ｐ＜０．０１）；晚期胃癌（Ⅲ、Ⅳ期）阳性率为８０％，显著高于Ⅰ、Ⅱ期早期胃癌２６．７％的表达率（Ｐ＜０．０１）。５５例随访资料分析表明，Ｐ－选择素阳性表达者平均生存期（２５．５±２１．８月）和五年生存率（１０．７％）显著低于阴性者（Ｐ＜０．０１）。研究结果提示Ｐ－选择素与胃癌浸润转移相关，可能是一种新的胃癌预后指标。     

骨肉瘤p53蛋白过度表达与微血管密度的关系

目的：研究骨肉瘤ｐ５３蛋白过度表达与肿瘤内微血管密度（ＭＶＤ）的关系，以及它们对骨肉瘤预后的影响，方法：应用免疫组化和形态计量的方法检测８０例骨肉瘤ｐ５３蛋白表达以及ＭＶＤ计数。结果：ｐ５３蛋白过度表达与ＭＶＤ密切相关，而且两者均为影响骨肉瘤预后的重要因素，依相对危险度大小依次为ｐ５３〉ＭＶＤ。结论：结果证实ｐ５３基因对ＭＶＤ有调节作用，ｐ５３蛋白过度表达是肿瘤重要的血管生成表型之一，ｐ５３蛋白和     

nm23—H1蛋白在原发性胆囊癌中的表达及临床价值探讨

目的：探讨转移抑制基因nm23-H1在原发性胆囊癌中的表达及其与临床病理参数的关系。方法：本研究包括45例胆囊癌和15例胆囊息肉样病变，相关临床病理资料如组织学类型，分化程度，临床分期，浸润[深度，局度淋巴结转移及肝脏浸润等一并记录。用免疫组化SABC法检测上述病变的nm23-H1表达。结果：胆囊癌的nm23－H1阳性表达率为46．7％，胆囊息肉样病变的阳性表达率为13．3％，两者比较有显著性差异（P＜0．05）；且其表达与胆囊癌分化程度，Nevin分期，浸润深度及有无淋巴结转移均密切相关。结论：nm23-H1蛋白表达可能有助于区分胆囊良恶性病变，对胆囊癌的临床分期，浸润转移的估计和病人预后的判断有重要的意义。