比较苯那普利和坎地沙坦单用或联用对自发性高血压大鼠心肌胶原纤维的影响

目的 比较研究苯那普利和坎地沙坦(均抗高血压药)单用或联用对自发性高血压大鼠(SHR)心肌胶原纤维的影响.方法 12周龄SHR给予苯那普利10 mg·kg-1·d-1或坎地沙坦4 mg·kg-1·d-1及半剂量联合治疗,12周后测定血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PICP)、Ⅲ型前胶原氨基端肽水平(PⅢNP)和心肌胶原浓度;用饱和苦味酸-天狼猩红染色,观察心肌纤维化程度;用透射电镜观察心肌胶原超微结构;提取Ⅰ型胶原并进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳.结果 苯那普利和坎地沙坦治疗后,血清PICP、PIIINP和心肌组织胶原浓度均明显降低,心肌间质及血管周围胶原均明显减少,SDS-PAGE显示Ⅰ型胶原水平均下调;两药联合应用具有协同作用.结论 苯那普利和坎地沙坦联用对改善高血压心肌胶原纤维总量与性质具有协同作用.     

苯那普利与厄贝沙坦对心衰大鼠心室重构过程中AngⅡ受体及ACE2的影响

目的探讨苯那普利、厄贝沙坦及两者联合用药对心衰大鼠心室重构过程中心肌血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)、2型受体(AT2R)及ACE2蛋白表达的影响。方法采用大鼠腹主动脉缩窄法造成压力负荷性心肌肥厚致心力衰竭模型。苯那普利或(和)厄贝沙坦连续给药8wk,检测血流动力学参数、心脏指数、心肌和血浆AngⅡ含量、心肌中AT1R、AT2R和ACE2蛋白的表达情况。结果模型组心脏指数、LVEDP、血浆和心肌AngⅡ的含量及心肌AT1R、AT2R和ACE2蛋白的表达明显升高;各治疗组心脏指数、LVEDP明显下降;苯那普利组血浆和心肌AngⅡ的含量降低,厄贝沙坦组心肌AT1R蛋白的表达明显下降而AT2R和ACE2蛋白的表达明显升高,联合应用具有协同作用。结论联合应用苯那普利和厄贝沙坦对改善心衰大鼠心室重构具有协同作用,可能与AngⅡ和AT1R的下调而AT2R和ACE2的上调有关。     

自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化和巨噬细胞关系的研究——苯那普利干预试验

目的探讨巨噬细胞在自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化中的作用以及苯那普利对其影响及其机制。方法12wk♂SHR分为高血压组(SHR,n=10)、苯那普利治疗组(BenL、BenH亚组,分别予苯那普利1.7、17mg.kg-1.d-1灌胃;n=10),另设年龄、性别配对的WKY大鼠为对照(WKY,n=10)。干预18wk后,测量和计算各组大鼠收缩压(SBP)、左室重量(LVM)、左室重量指数(LVMI)、左室心肌胶原含量和巨噬细胞数目;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定各组大鼠心肌转化生长因子-β1(1(TGF-β1)和白介素-6(IL-6)的转录水平。结果SHR组SBP较WKY大鼠升高(P<0.01),BenH组的SBP明显低于SHR组(P<0.01),BenL组SBP无明显变化;SHR组较WKY心肌中巨噬细胞数目明显增多,TGF-β1和IL-6的信使核糖核酸(mR-NA)水平也明显升高(P<0.01);而BenL和BenH组SHR心肌中巨噬细胞数目和TGF-β1及IL-6的mRNA水平均较SHR组降低(P<0.05);大鼠心肌中巨噬细胞数目分别与心肌胶原容积分数(CVF)、心肌内血管周围胶原面积(PVCA)含量呈正相关(P<0.01)。结论巨噬细胞在SHR大鼠心肌纤维化中具有重要作用,苯那普利可减轻SHR心肌纤维化和巨噬细胞浸润,且可下调TGF-β1和IL-6的mRNA表达。     

坎地沙坦对盐负荷高血压大鼠肾脏肾素-血管紧张素系统表达的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂坎地沙坦对盐负荷易卒中自发性高血压大鼠(SHRSP)肾脏肾素-血管紧张素系统(RAS)表达的影响及其肾脏保护作用。方法建立8%高盐Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和SHRSP模型。高盐WKY大鼠作为对照组,高盐SHRSP随机分为3组:高盐SHRSP组、坎地沙坦给药组和三氯噻嗪给药组。2wk末检测尿(白)蛋白排泄、肾脏AngⅡ水平,RT-PCR方法检测肾皮质RAS组分:血管紧张素原、肾素、组织蛋白酶D、血管紧张素转换酶、AT1和AT2受体mRNA表达,以及转化生长因子β1(TGF-β1)、骨桥蛋白和Ⅳ型胶原mRNA的表达。结果肾皮质RAS各组分mRNA表达,高盐SHRSP组高于高盐WKY组(P<0.01),坎地沙坦下调了高盐SHRSP肾皮质RAS组分mRNA的表达,降低了肾脏AngⅡ水平(P<0.01),抑制了肾皮质TGF-β1、骨桥蛋白和Ⅳ型胶原mRNA的表达(P<0.01),减少了尿(白)蛋白的排泄(P<0.01)。而等效降压剂量的TCM仅对血管紧张素原和ACE mRNA表达有抑制作用(P<0.05),对肾组织AngⅡ无明显抑制作用(P>0.05);TCM虽对TGF-β1和Ⅳ型胶原mRNA表达有抑制作用(P<0.05),对高盐SHRSP尿(白)蛋白排泄也无明显影响(P>0.05)。结论坎地沙坦对盐负荷SHRSP具有降压以外的肾脏保护作用,其机制与抑制肾脏RAS组分表达有关。     

玉夏胶囊对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响

目的:观察玉夏胶囊对自发性高血压（SHR）大鼠心肌纤维化的影响及可能机制。方法:SHR 28只,随机分为模型组（0.5%CMC-Na5 m L/kg）、玉夏胶囊高（0.6 g/kg）、中（0.3 g/kg）、低（0.15 g/kg）剂量组,每组7只。另设Wistar-Kyoto（WKY）正常对照组（0.5%CMC-Na 5 m L/kg）大鼠7只。每天灌胃一次,连续10周。VG染色观察心肌胶原纤维变化;检测心肌羟脯氨酸（Hyp）、血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）含量;免疫组化法检测转化生长因子β₁（TGF-β₁）蛋白的表达;Western blot检测心肌Ⅰ型胶原纤维（Col Ⅰ）、Ⅲ型胶原纤维（Col Ⅲ）和结缔组织生长因子（CTGF）蛋白的表达。结果:玉夏胶囊能减轻SHR心肌组织胶原纤维沉积,降低Hyp和Ang Ⅱ的含量,减少TGF-β₁、CTGF、Col Ⅰ和ColⅢ的蛋白表达。结论:玉夏胶囊可改善SHR的心肌纤维化,其机制可能与降低Ang Ⅱ含量,下调TGF-β₁和CTGF表达,减少Hyp、Col Ⅰ和Col Ⅲ产生有关。     

洛沙坦与苯那普利对高血压大鼠左室肥厚的影响

目的探讨洛沙坦与苯那普利及联合治疗对自发性高血压大鼠(SHR)血压、左室肥厚的影响。方法24只16周龄的雄性SHR大鼠,随机分为洛沙坦(Los)治疗组(SHR-L),苯那普利(Ben)治疗组(SHR-B;),洛沙坦与苯那普利联合治疗组(SHR-BL)。治疗16周。年龄、性别配对的SHR和WKY大鼠作对照组。测定收缩压、左心室重量,计算心体比。结果Los降压作用大于Ben,Los与Ben逆转左室肥厚的作用相当。结论两药联合治疗对SHR大鼠有协同降压、逆转LVH的作用。     

通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化的防治作用

目的探讨通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化的防治作用及机制。方法用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型并给予通心络灌胃,12周后测定各组大鼠心脏重量指数,胶原容积积分,免疫组化测定心肌中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad7的蛋白表达水平,RT-PCR法检测TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA的表达水平。结果糖尿病组大鼠心脏重量指数、胶原容积积分明显增高,TGF-β1、Smad3蛋白的表达增加,Smad7蛋白的表达减少;TGF-β1、Smad3mRNA的表达增加,Smad7mRNA的表达减少,通心络组上述指标均得到改善。结论通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化有防治作用,其作用机制可能通过改善糖尿病大鼠心肌中TGF-β1、Smad3、Smad7的表达,从而减轻和延缓糖尿病大鼠心肌的纤维化有关。     

榅桲总黄酮对自发性高血压大鼠心肌肥厚的抑制作用及机制研究

目的研究榅桲总黄酮对自发性高血压大鼠心肌肥厚的抑制作用及可能的作用机制。方法自发性高血压大鼠分为模型组、卡托普利组(25μg·g~(-1))、杜仲平压片组(30μg·g~(-1))、榅桲总黄酮低(40μg·g~(-1))、中(80μg·g~(-1))、高剂量组(160μg·g~(-1)),WKY大鼠为正常对照组。给药16周后进行心脏组织病理学检查,评价靶器官损伤程度,测定血或心脏组织中血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮(aldosterone,ALD)水平,并分别通过RT-PCR和Western blot检测心肌组织ACE、ACE2和AT_1的mRNA和蛋白表达水平,评价榅桲总黄酮对RAAS系统的影响。结果与SHR组相比,榅桲总黄酮中剂量组(SHR+COMF-M)和高剂量组(SHR+COMF-H)心脏质量(HW)、心脏质量/体质量(HW/BW)、左室质量(LVM)、左室质量/体质量(LVM/BW)均有不同程度减小,榅桲总黄酮可抑制SHR心肌细胞肥大,使心脏和血液中的AngⅡ和ALD含量减少(P<0.01或P<0.05)。与SHR组相比较,榅桲总黄酮各剂量组心肌组织血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)和血管紧张素受体1(angiotensin receptor 1,AT_1)的mRNA和蛋白相对表达量有不同程度减少,ACE2的mRNA和蛋白相对表达量有不同程度增加(P<0.01或P<0.05)。结论榅桲总黄酮可抑制自发性高血压大鼠心肌肥厚,主要作用机制可能与抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统有关。     

姜黄素通过激活ATRAP信号通路抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大

目的探究姜黄素抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥厚相关病理机制。方法 MTT法和乳酸脱氢酶试剂盒检测姜黄素的心肌细胞毒性;200 nmol·L~(-1) AngⅡ孵育心肌细胞24 h诱导心肌肥厚;α-actinin染色观察心肌细胞形态大小;q PCR检测心肌肥大标记物ANF、BNP、β-MHC的m RNA水平;通过Western blot检测AngⅡ受体的抑制蛋白ATRAP的表达情况。结果姜黄素对心肌细胞无明显毒性;200 nmol·L~(-1)的AngⅡ刺激心肌细胞24 h显著诱导心肌细胞肥大;ANP、BNP、β-MHC的m RNA水平显著增高;AngⅡ受体的抑制蛋白ATRAP表达明显降低;姜黄素预作用细胞1 h显著抑制AngⅡ诱导的心肌肥大,逆转AngⅡ降低的ATRAP表达。结论姜黄素抑制AngⅡ诱导的心肌肥大可能与其激活ATRAP信号通路有关。     

高血压大鼠肥厚心肌中BMAL1蛋白表达的研究

目的选取了自发性高血压大鼠(SHR)与肾性高血压大鼠(RHR)作为肥厚心肌的供体,从整体水平检测了时钟体系中最为重要的BMAL1蛋白在3种不同心肌中的表达。方法建立了肾性高血压大鼠的模型,取自发性高血压大鼠,肾性高血压大鼠以及正常大鼠作为对照组,在每12h光暗交替的环境中饲养2wk后,每隔4h取心脏,测心重指数等各项指标,并用Westernblot方法检测高血压大鼠心肌组织与正常大鼠心肌组织中BMAL1蛋白表达的变化。结果RHR和SHR大鼠的左心重与全心重比值及全心重与体重比值与正常组相比差异都具有显著性,正常大鼠心肌组织中BMAL1蛋白表达呈现出明显的节律性,但RHR与SHR组心肌组织中的BMAL1蛋白表达丧失了应有的波动性与节律性,各时间点之间几乎无差异。结论在心肌肥厚的发病过程中时钟基因可能起一定的作用,时钟基因蛋白表达的改变可能是影响肥厚心脏逐渐丧失适应能力的一个因素。     

SHR大鼠肾组织AngⅡ和TGF-β/Smads水平变化与肾纤维化的关系及依那普利干预效果

摘要：目的 探讨依那普利对自发性高血压大鼠（SHR）肾组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和TGF-β/Smads通路相关因 子mRNA表达的影响。方法 20只雄性SHR随机分成模型组和依那普利组;另取雄性Wistar-Kyoto（WKY）大鼠10只 作为对照组。依那普利组给药剂量为1.05 mg/ （kg·d）,每日1次灌胃,持续10周,模型组和对照组灌胃等量生理盐水。 每2周监测1次血压,10周后处死动物并取材。使用脲酶法检测各组大鼠血尿素氮（BUN）水平,采用酶联免疫吸附测 定（ELISA）i法检测各组AngⅡ、血清胱抑素C（CysC）、尿微量白蛋白（mALB）水平,Masson染色观察大鼠肾组织病理变 化,实时荧光定量PCR检测肾组织中AngⅡ、转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad2、Smad3、Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）和Ⅳ型 胶原（CollagenⅣ）的mRNA相对表达量。结果 给药前（0周）,与对照组相比,模型组和依那普利组大鼠收缩压与舒张 压均显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,依那普利组收缩压与舒张压差异无统计学意义（P＞0.05）;药物干预后,与模 型组比较,依那普利组的收缩压与舒张压均显著下降（P＜0.05）。与对照组比较,模型组AngⅡ、BUN、CysC和尿mALB 水平明显升高（P＜0.05）;肾组织出现大量蓝色胶原纤维沉积,同时AngⅡ、TGF-β1、Smad2、Smad3、CollagenⅠ和Collagen Ⅳ的mRNA相对表达量明显升高（P＜0.05）。与模型组相比,依那普利组肾组织胶原纤维沉积程度明显减轻,血清及肾 组织中上述指标均明显下降（P＜0.05）。结论 依那普利可对SHR起到稳定的降压作用,并通过降低AngⅡ的水平、抑 制TGF-β/Smads信号通路的表达,减轻肾纤维化,改善高血压导致的肾损伤。     

Asiatic acid inhibits cardiac fibrosis throughNrf2/HO-1 and TGF-β1/Smads signaling pathways in spontaneous hypertension rats

ObjectiveAsiatic acid (AA) has been suggested to inhibit pulmonary and hepatic fibrosis, while its influence on cardiac fibrosis remains unclear. We aimed to investigate whether AA could inhibit overpressure-induced cardiac fibrosis in spontaneous hypertension rats (SHRs).MethodSHRs were treated with AA (20 mg kg⁻¹ day⁻¹) for 12 weeks and cultured cardiac fibroblasts (CFs) were treated with Ang II (10⁻⁷ mol/L) in vitro. Markers of oxidative stress were measured and extent of cardiac fibrosis was evaluated with Sirius Red staining. Levels of Superoxide Dismutase (SOD), Malondialdehyde (MDA), reactive oxygen spices (ROS) and Glutathione (GSH) were measured by using commercial assay kits. Collagen deposition was detected. The expression of relative protein and mRNA was measured by Western blot and real-time PCR, respectively.ResultsAA reduced systolic blood pressure, attenuated myocardial hypertrophy, reduced college deposition and the expression of collagen I and III, connective tissue growth factor, and plasminogen activator inhibitor-1, in mRNA and protein levels, with inhibition of TGF-β1 expression, phosphorylation of Smad2/3, and increase of Smad7 expression. AA reduced malondialdehyde and reactive oxygen spices, while increased the activities of superoxide dismutase and glutathione, accompanied with elevation of nuclear translocation of nuclear-factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) and expression of heme oxygenase (HO-1) and NAD(P)H dehydrogenase [quinone] 1 (NQO-1) in vivo and in vitro. Moreover, pretreating CFs with siRNA for Smad7 or Nrf2 both partially reversed the inhibition of AA on Ang II-induced cardiac fibrosis.ConclusionAA attenuates pressure overload-induced cardiac fibrosis via enhancing of Nrf2/HO-1 and suppressing TGF-β1/Smads phosphorylation.     

Smad7和TGF—β1在结直肠癌中的表达及意义

目的检测Smad7和TGF—β1在结直肠癌中的表达,探讨其在不同临床病理特征中的表达意义,以期为研究结直肠癌的发生发展提供理论帮助。方法本实验以140例结直肠癌标本作为研究对象,70例正常结肠黏膜组织作为对照,采用免疫组织化学技术,分别检测Smad7和TGF—β1的表达及其在不同临床病理特征之间的关系。结果结直肠癌中Smad7和TGF—β1的表达明显低于对照组,Smad7和TGF-β1的表达与结直肠癌浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移密切相关,二者在结直肠癌中的表达呈正相关。结论Smad7和TGF-β1在结直肠癌发生发展中具有重要协同作用,联合检测Smad7和TGF-β1的表达可能与判断预后有关。     

FGF21对HepG2细胞TGF-β信号通路的影响

目的研究FGF21对TGF-β/Smads信号通路中相关蛋白和mRNA表达的影响。方法采用Western blot法检测HepG2 cells的TGF-1,TGF-βRⅡ,Smad 2,3,4,7的蛋白表达水平和采用Q-PCR方法检测HepG2 cells的TGF-β1,TGF-βRⅡ,Smad 2,3,4,7的mRNA表达水平。结果在不同FGF21浓度下,TGF-β1,TGF-βRⅡ,Smad 2,3,4,7蛋白和mRNA表达水平不同(P<0.05)。结论 FGF21通过促进TGF-β信号通路中的信号分子或受体的表达,或者通过下调此信号通路的阻断分子而抑制肿瘤发生。     

川芎嗪对人肝星状细胞TGF-β1信号传导的影响

目的：探讨中药单体川芎嗪（TMP）对肝星状细胞（HSC）转化生长因子-β1（TGF-β1）信号传导的影响。通过检测TGF-β1及其Ⅰ型和Ⅱ型受体、Smad 3及Smad 7 mRNA表达的变化,探讨川芎嗪抗肝纤维化作用的相关机制。方法：体外培养人肝星状细胞,RT-PCR法检测HSC中TGF-β1及其Ⅰ型和Ⅱ型受体、Smad 3及Smad 7 mRNA表达。结果：与阴性对照组相比,TMP A、B、C各组均可显著降低TGF-β1 mRNA（P〈0.01）;TMP B、C组TβRⅠmRNA相对表达量降低,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;TMP B、C浓度组的TβRⅡmRNA、Smad 3 mRNA表达量显著降低（P〈0.01）;TMP B、C组可显著升高Smad 7 mRNA表达量（P〈0.01）。结论：川芎嗪可降低HSC中TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体及Smad 3 mRNA表达,同时促进Smad7 mRNA表达,表明川芎嗪可抑制肝星状细胞的活化、增殖,这可能与阻断TGF-β/Smad通路的信号传导有关。     

Fluvastatin decreases cardiac fibrosis possibly through regulation of TGF-beta(1)/Smad 7 expression in the spontaneously hypertensive rats

Statins ameliorate myocardial fibrosis after myocardial infarction. We designed this study to determine whether fluvastatin reduced hypertension-induced myocardial hypertrophy and fibrosis and whether these fluvastatin effects involved transforming growth factor beta1 (TGF-beta1) and Smad 7, factors known to play a role in the myocardial hypertrophy and fibrosis. We randomized 14 week old spontaneously hypertensive rats (SHRs) to receiving vehicle or 5-20 mg/kg/day fluvastatin for 8 weeks. Wistar Kyoto (WKY) rats receiving vehicle or 10 mg/kg/day fluvastatin were also studied. SHRs had an increased blood pressure, left ventricular hypertrophy and fibrosis compared with WKY rats. SHRs also had an elevated TGF-beta1 expression and a decreased Smad 7 expression. These changes in SHRs were dose-dependently attenuated by fluvastatin. For example, the hydroxyproline content was 3.2+/-0.1, 4.0+/-0.1 and 3.5+/-0.1 microg/mg heart and the Smad 7 protein expression was 5.1+/-0.6, 1.0+/-0.1 and 4.1+/-0.7 arbitrary units for WKY rats, SHRs and SHRs receiving 20 mg/kg/day fluvastatin, respectively. The hydroxyproline content in the SHRs treated with or without fluvastatin was positively correlated with the left ventricular mass index, systolic blood pressure and the amount of TGF-beta1 proteins and negatively correlated with the Smad 7 expression level. The left ventricular mass index was positively correlated with the systolic blood pressure. Fluvastatin did not alter the blood pressure, left ventricular mass index and collagen content of WKY rats. These results suggest that fluvastatin reduces hypertension-induced myocardial hypertrophy and fibrosis. These effects may involve an increased expression of Smad 7 and a decreased expression of TFG-beta1. Our results call for clinical studies to evaluate these fluvastatin effects in hypertensive patients.     

糖皮质激素调控哮喘大鼠气道重塑中TGF-β_1/Smad信号通路的研究

目的观察糖皮质激素对哮喘大鼠气道重塑中转换生长因子β1(TGF-β1)/Smad信号通路的作用。方法以卵清白蛋白(OVA)致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型。SPF级♂SD大鼠40只分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、布地奈德组(C组)和地塞米松干预组(D组),每组10只。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β1的浓度,免疫组化法检测肺组织TGF-β1、P-Smad2、P-Smad3、Smad6和Smad7蛋白的表达。结果与A组比较,B组支气管壁厚度(Wat)、平滑肌厚度(Wam)、血清、BAFL中TGF-β1的浓度、P-Smad2和P-Smad3的蛋白表达均增高,Smad6、Smad7的蛋白表达低于A组,经布地奈德组和地塞米松干预后,Wat、Wam、血清、BAFL中TGF-β1的浓度、TGF-β1、P-Smad2和P-Smad3的蛋白表达均下降,Smad6、Smad7的蛋白表达增强。C组和D组Wat、Wam、血清、BAFL中TGF-β1的浓度、TGF-β1P-Smad2、P-Smad3、Smad6和Smad7的蛋白表达比较无明显差异。免疫组化显示TGF-β1和Smad6蛋白表达于胞质,Smad7、P-Smad3和P-Smad2蛋白表达于胞质和胞核,主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞及散在的炎性细胞。大鼠肺组织中Smad6蛋白和Smad7蛋白表达呈正相关,P-Smad2蛋白和P-Smad3蛋白表达呈正相关。结论糖皮质激素可通过调控TGF-β1/Smad信号通路而拮抗哮喘气道重塑。