肝脏低温保存时肝窦内皮细胞损伤的研究

利用低温灌注技术，电镜技术和生化检测技术，对低温保存人肝脏肝窦内皮细胞的损伤进行了研究。结果显示：低温保存时不仅肝实质细胞受到损伤，而且肝窦内皮细胞发生更严重的损伤，随着保存时间延长，嘌呤核苷磷酸化酶（ＰＮＰ）逐渐升高。秀射电镜和扫描电镜显示：人肝脏低温保存后，肝窦内皮细胞可出现变性肿胀，肝窦内大泡形成，随着保存延长，肝窦内皮细胞出现变性坏死导致肝窦阻塞。肝窦内皮细胞损伤后可导致肝脏微循环系统连续     

不同器官保存液对大鼠肝脏透明质酸吸收率的影响

目的　探讨不同器官保存液对大鼠肝脏透明质酸吸收率的影响 ,以评价它们对肝窦内皮细胞的保护作用。方法　大鼠肝脏原位灌洗后 ,分别在UW液、Celsior液或Histidine Tryptopan Ketoglutarate液 (HTK液 )中低温保存 16和 2 4h ,然后用含透明质酸的Kreb Henseleit液在 37℃下连续循环灌注 90min ,分别于灌注 0、15、30、6 0和 90min时检测肝脏对外源性透明质酸的吸收率。结果　低温保存 16h ,再灌注 0、15、30、6 0和 90min时 ,3种保存液保存的肝脏对外源性透明质酸的吸收率均为负值 ,表明肝窦内皮细胞受到一定程度的损伤 ,但UW液和Celsior液对肝窦内皮细胞的保护作用较HTK液为优 (P <0 .0 1) ;保存 2 4h者 ,UW液对肝窦内皮细胞的保护作用优于Celsior液和HTK液。结论　UW液对肝窦内皮细胞具有较强的保护作用     

大鼠肝脏缺血再灌注损伤后5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性变化的研究

目的探讨大鼠肝脏经过UW、Celsior和HTK三种不同类型保存液低温保存和常温再灌注后5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性的变化.方法将大鼠肝脏在UW、Celsior和HTK液中低温4℃保存0、8、16和24 h后,采用离体连续灌注模型,用Krebs-Henseleit液37℃连续循环灌注90 min,灌注结束后取肝脏组织标本测定5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性,并测定胆汁分泌量的变化.结果经过16和24 h的UW和Celsior低温保存后的肝组织5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶的活性出现降低;HTK组8 h就出现降低.UW和Celsior组经过24 h的低温保存后,胆汁分泌量开始明显降低;在HTK组16 h后,胆汁分泌量就显著降低.结论 5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶的活性随着低温缺血时间的延长逐渐降低;UW和Celsior液对肝窦内皮细胞和肝实质细胞的保护作用均强于HTK.     

肝血窦内皮细胞缺血再灌注损伤(文献综述)

肝脏缺血再灌注见于许多临床情况。在缺血再灌注过程中,不但肝实质细胞发生损伤,而且肝微循环血管细胞也遭受损害。肝血窦内皮细胞是肝脏微循环毛细血管的主要组成细胞。本文简述了正常肝血窦内皮细胞的结构和功能特征;对肝缺血再灌注期间肝血窦内皮细胞损伤的基本表现、损伤的进程以及损伤的意义等有关问题的研究进展作了介绍。     

无心跳供体中供肝微循环的动态变化

目的 探讨不同热缺血时间下大鼠无心跳供体肝组织微循环的变化规律，预测供肝耐受热缺血的安全时限。方法 实验动物按供肝热缺血时间分别为0、15、30、45、60min，随机分为5组。然后按各组条件分别作原位肝移植．对肝移植术后各组血清透明质酸(HA)的水平进行动态检测，以及观察肝组织微循环超微结构的动态变化。结果 在热缺血30min以内，移植肝组织复流后能逐渐恢复至正常的微循环结构和功能。热缺血45min，复流后大部分肝血窦腔可逐渐恢复通畅。但部分血窦仍充满较多的膜浆泡和血细胞积滞；热缺血45min以前各组术后3d血清HA可基本恢复。热缺血60min，复流后内皮细胞损伤不但不能恢复，且出现加重、扩大趋势。结论 供肝经受30min以内热缺血损伤，肝组织微循环的变化处在可复性阶段。45min的热缺血时间可能县供肝微循环功能耐受热缺血损伤的极限．热缺血60min以后．呈现不可逆性的微循环障碍．     

大鼠供肝冷保存时间延长损伤移植肝肝细胞和肝窦内皮细胞

目的 探讨供肝冷保存时间与肝移植后肝细胞和肝窦内皮细胞（SEC）损伤的关系。方法 选取健康雄性SD大鼠作为供、受者，建立原位肝移植（OLT）模型。随机分为3组，冷保存1h组（H=48）：供肝获取后，置于4C的冷保存液中保存1h，再行OLT。冷保存12h组（n=48）：供肝获取后，置于4℃的UW液中保存12h，再行OLT。对照组（H=6）：大鼠只打开腹腔，不进行移植。前2组分别于术后1、6、12、24、48、72、96和168h采取血液及组织标本，对照组仅在开腹时取血液及组织标本，检测各组、各时点血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及透明质酸（HA）的水平；观察移植肝的病理形态学变化，透射电镜观察其超微结构改变；原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记法（TUNEL）检测移植肝细胞的凋亡情况；观察术后168h时的大鼠存活率。结果 冷保存1h和冷保存12h组肝移植后各时点血清ALT、AST及HA均较对照组明显升高（P〈0．05），并且冷保存12h组又明显高于冷保存1h组（P〈0．05）。冷保存12h组术后24h移植肝组织出现片状坏死，而冷保存1h组病理学改变不明显。冷保存12h组肝窦内皮细胞凋亡指数（AI）明显高于冷保存1h组（F=63．58，P〈0．01），两组大鼠移植肝组织均于术后6h出现凋亡高峰，且肝窦内皮细胞的凋亡指数明显高于肝细胞。冷保存1h组和冷保存12h组大鼠肝移植后168h时的存活率分别为100％和50％，两组比较，差异有统计学意义（F=6．39，P〈0．05）。结论 肝移植后肝细胞和肝窦内皮细胞的损伤程度与冷保存时间密切相关。肝窦内皮细胞对冷保存及再灌注损伤的敏感性高于肝细胞，其损伤方式以细胞凋亡为主。     

大鼠肝脏缺血再灌注损伤后5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活化变化的研究

目的 探讨大鼠肝脏经过UW、Celsior和HTK三种不同类型保存液低浊保存和常温再灌注后5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性的变化。方法 将大鼠肝脏在UW、Celsior和HTK液中低温4℃保存0、8、16、和24h后,采用离体连续灌注模型,用Krebs-Henseleit液37℃连续循环灌注90min,灌注结束后取肝脏组织标本测定5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶活性,并测定胆汁分泌量的变化。结果 经过16和24h的UW和Celsior低温保存后的肝组织5′核式酸酶和乳酸脱氢酶的活性出现降低;HTK组8h就出现降低,UW和Celsior组经过24h的低温保存后,胆汁分泌量开始明显;在HTK组16h后,胆汁分泌量就显著降低。结论 5′核苷酸酶和乳酸脱氢酶的活性随着低温缺血时间的延长逐渐降低;UW和Celsior液以肝窦内皮细胞和肝实质细胞的保护作用均强于HTK。     

不同器官保存液对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时嘌呤核苷磷酸酶活性和透明质酸吸收率的影响

目的 探讨大鼠肝脏低温保存及常温缺血再灌注过程中在不同的保存液中嘌呤核苷磷酸酶(PNP)活性和透明质酸(HA)吸收率的变化.方法 将大鼠肝脏在三种不同保存液中低温保存16 h和24 h后,用37℃Krebs-Henseleit液连续循环灌注90 min,分别于不同灌注时间检测灌洗液中PNP活性和外源性透明质酸的吸收率的变化.结果 经过16 h的低温保存后,再灌注60 min前,HTK保存的肝脏中PNP明显高于uw和Celsior;60 min后HTK和Celsior保存的肝脏中PNP明显高于UW;经过24 h的低温保存后,再灌注15 min后,HTK保存的肝脏中PNP明显高于Celsior,而Celsior又明显高于UW.低温保存16 h后,再灌注时,3种保存液保存的肝脏对外源性透明质酸的吸收率均为负值,表明肝窦内皮细胞受到一定程度的损伤;保存24 h者,UW液保存肝脏外源性透明质酸的吸收率明显高于Celsior液和HTK液.结论 随着低温保存和再灌注时间的延长,大鼠肝脏中PNP活性逐渐增高,而外源性透明质酸的吸收率下降;二者可作为评价肝脏缺血再灌注损伤的指标.     

切应力对大鼠肝窦内皮细胞分泌功能的影响

目的了解不同切应力下肝窦内皮细胞分泌肝细胞生长因子（HGF）、白细胞介素-6（IL-6）、-氧化氮（N0）及-氧化氮合成酶（NOS）的分泌量，探讨切应力对原代培养的大鼠肝窦内皮细胞分泌功能的影响。方法构建血流动力学模型。实验分为对照组（切应力为0 dyn／cm^2）和实验组2组。实验组又按切应力不同分为12、24和48dyn／cm^2 3个亚组。每组分别在4、8、12及24h抽取1ml培养基，利用试剂盒检测培养基中HGF、IL-6、NO和NOS浓度。结果在不同切应力下，肝窦内皮细胞分泌HGF、IL-6、NO和NOS各不相同，在同一时相随着切应力的升高。HGF、IL-6、NO和NOS的分泌量也升高，实验组明显高于对照组（P〈0．01），且48dyn／cm^2组明显高于另两个亚组（P〈0．01）；实验组作用8、12、24h时，HGF、IL-6、No及NOS分泌量明显高于作用4h时。结论体外实验证实，切应力升高时肝窦内皮细胞分泌HGF、IL-6、NO和NOS的量明显增加，提示部分肝切除术后门静脉压力急剧升高能促使肝窦内皮细胞活化。分泌大量促肝细胞再生的细胞因子和介质。     

缺血预处理对大鼠移植肝脏微循环的保护作用

目的：探讨早期再灌注损伤中缺血预处理（IP）对大鼠移植肝脏微循环的保护作用。方法：采用SD大鼠原位肝移植动物模型，供肝冷保存时间100min，无肝期25min。32只SD大鼠随机平均分成两组，每组16只。对照组：获取供肝前仅以肝素生理盐水经门静脉灌注；IP组；获取供肝前阻断肝门血供10min，再灌注10min，然后再以肝素生理盐水经门静脉灌注。移植肝脏再灌注2h后取血及肝脏检测。结果：IP组的肝脏抗氧化酶活力明显高于对照组（P＜0．01），血清丙氨酸转氨酶（ALT）、门冬氨酸转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）及肝组织中的过氧化产物丙二醛（MDA）含量均明显低于对照组（P＜0．001）；肝组织损伤以窦状内皮细胞为主，并且是以凋亡的方式发生死亡，IP组窦状内皮细胞损伤明显轻于对照组（P＜0．001）。结论：IP对大鼠移植肝脏微循环的早期再灌注损伤有保护作用。     

辅助性肝移植治疗大鼠急性肝功能衰竭的实验研究

目的探讨辅助性肝移植对急性肝功能衰竭（简称肝衰）的治疗作用。方法在３０只肝功能衰竭大鼠模型上,于原残肝下移植同系异体６２％部分肝脏,手术成功２８例。观察了肝衰组和移植组大鼠存活、血液生化、９９ｍＴｃＨＩＤＡ肝显像、残肝和移植肝组织细胞形态改变。结果肝衰组（１５只）和移植组（２８只）大鼠４８小时存活率分别为０％和７１．４％。移植术后１４天残肝细胞明显增生,肝功能基本恢复正常,辅助肝开始萎缩,术后３０天辅助肝完全纤维化。结论辅助性部分肝脏异位移植可为衰竭之残肝提供暂时性功能支持。原残肝细胞再生,功能恢复过程中辅助肝逐渐萎缩、废用     

原发性肝癌与非肝癌病人行肝移植治疗的比较研究

目的：探讨我国目前肝癌与非肝癌病人行肝移植治疗的风险及长期生存效果。方法：回顾性总结21例晚期肝癌病人行肝移植手术治疗风险及长期生存情况，并与同期所行另外19例非肝癌病人的肝移植进行比较。结果：晚期肝癌病人的手术前凝血状态好于因其它非肝癌原因而接受肝移植的病人，与此相应的手术中出血量、需要输血量、术中输液总量均少于非肝癌病人，手术中因出血而导致的低血压时间短，手术后较恢复顺利，围手术期病死率低。虽然肿瘤复发所致的远期死亡率明显高于非肝癌病人，但是，总生存率与非肝癌病人无明显区别，部分病人可长期无瘤生存。结论：现阶段肝移植仍是失去根治性切除机会的肝癌病人的有效治疗手段，术后部分病人有无瘤长期生存的可能性。     

How to estimate the size of the donor liver

Abstract  Of readily available methods to estimate the donor liver size, measurement of the body circumference at the xiphoid level (xiphoid measure) appeared to be the most accurate in the present prospective study of 60 donors and 57 recipients ( r = 0.64, P = 0.0001). The estimated liver volume could be calculated using the equation: bloodless liver volume (1) = 1.44 x xiphoid measure (m). The difference between donor and recipient xiphoid measures was significantly higher in slowly recovering patients than in those recovering uneventfully (7 ± 7 cm vs. - 5 ± 8 cm, P < 0.001). The bloodless donor liver volume measured by water displacement averaged 1249 k 230 ml and had increased by 3 weeks post-transplant by 64 ± 28 % as determined using computed tomography. The volume of the liver graft seemed to adapt to the recipient as it correlated positively with body weight ( r = 0.64, P < 0.01) and negatively with the age of the recipient (r = - 0.42, P < 0.01). The liver graft volume seemed to increase less markedly in patients with a slow recovery than in those with an uncomplicated recovery (37 %±15 % vs. 68 %± 24 %, P< 0.001). We conclude that a simple measurement of the body circumference at the xiphoid level can be used to estimate the donor liver volume. A gross mismatch of this parameter between the donor and the recipient seems to increase the risk of graft dysfunction. We also found that the change in the liver graft volume is influenced by the recipient's age and body weight.     

术前肝脏储备功能评估方法的研究进展

肝切除术是肝脏外科疾病,尤其是肝细胞癌的重要治疗手段。在我国,绝大多数肝癌患者合并有肝硬化等肝实质的广泛性损害,肝脏储备功能有不同程度的降低。肝切除术后肝功能不全甚至肝衰竭成为患者围手术期死亡及影响患者术后长期生存的重要原因。因此,术前精确评估肝脏储备功能十分重要。近年来评估肝脏储备功能的方法越来越多,但是临床上仍然缺少一种公认的、能全面评估肝脏储备功能的方法。通过综述目前临床常用的术前肝脏储备功能的评估方法,总结分析了其中几种重要方法的价值和不足,并对术前肝脏储备功能评估方法的发展进行展望。     

同种异体原位肝移植10例报告

目的 探讨原位肝移植的适应证、手术技术及手术期期处理特点。方法 对１例肝尾叶癌，２例先天性弥漫性肝内胆管囊性扩张症及７例晚期肝硬变进行了原位肝移植，对其中１便１１岁女孩进行了减体积肝移植（ＲＳＬＴ）。供肝均取２０－４０岁脑死亡的健康人。８例供、受者ＡＢＯ血型相同，２例供者为Ｏ型，受者为Ａ型。供肝采用单独肝脏切取法，以ＵＷ液进行门静脉和腹主动脉灌注。病肝采用经典式原位肝移植切肝法，在生物泵转流下切除     

Liver failure after major hepatic resection

Introduction  The consequence of excessive liver resection is the inexorable development of progressive liver failure characterised by the typical stigmata associated with this condition, including worsening coagulopathy, hyperbilirubinaemia and encephalopathy. The focus of this review will be to investigate factors contributing to hepatocyte loss and impaired regeneration. Methods  A literature search was undertaken of Pubmed and related search engines, examining for articles relating to hepatic failure following major hepatectomy. Results  In spite of improvements in adjuvant chemotherapy and increasing surgical confidence and expertise, the parameters determining how much liver can be resected have remained largely unchanged. A number of preoperative, intraoperative and post-operative factors all contribute to the likelihood of liver failure after surgery. Conclusions  Given the magnitude of the surgery, mortality and morbidity rates are extremely good. Careful patient selection and preservation of an obligate volume of remnant liver is essential. Modifiable causes of hepatic failure include avoidance of sepsis, drainage of cholestasis with restoration of enteric bile salts and judicious use of portal triad inflow occlusion intra-operatively. Avoidance of post-operative sepsis is most likely to be achieved by patient selection, meticulous intra-operative technique and post-operative care. Modulation of portal vein pressures post-operatively may further help reduce the risk of liver failure.     

原发性肝癌肝移植11例临床资料小结

目的探讨肝移植在原发性肝癌治疗中的意义。方法回顾分析2004年3月-2006年7月11例肝癌肝移植的临床资料。结果11例手术全部成功,围手术期无死亡。随访时间最长40个月,最短12个月,其中1例因乙肝复发,爆发性肝功能衰竭、肝肾综合症,于术后16个月死亡。1例在术后2个月因肺部巨细胞病毒感染,呼吸衰竭死亡。其余健康成活,1-3个月复查一次,无肿瘤复发,肝脏功能正常,α-FP<8ng/ml,HBV-DNA<103拷贝/毫升。结论肝移植治疗原发性肝癌仍要严格控制适应症;早期预防感染和长期治疗乙肝也是提高成功率的一个重要环节。     

Liver transplantation for small HCC in cirrhosis

Segmental liver resection is generally considered the treatment of choice for small HCC in cirrhotic livers. Although in selected patients with small encapsulated nodules and low alpha-fetoprotein levels long-term survival can be expected after resection [4], Western experience is still limited, and follow-up studies too short so that the data presently available cannot be considered satisfactory [3]. The true value of alcoholization as a possible alternative therapy in these patients is still to be ascertained. When using these treatment modalities, the major problem is the high tumour recurrence within the liver [1, 6]. Three main reasons could explain these clinical observations:

相似文献   

Protective Effects of Ambroxol in Hypothermic Liver Preservation: A Transplant Study

The bronchosecretolytic agent ambroxol added to histidine-tryptophan-ketoglutarate (HTK) solution has recently been shown to protect cold stored rat hepatocytes. The aim of the present study was to confirm these observations in a rat liver transplantation model. Before orthotopic liver transplantation, donor livers from 30 syngeneic Wistar rats were assigned to three groups (n = 10): (A) in situ flush (ISF) and ½-h cold storage (CS) with HTK solution, (B) ISF and 3-h CS with HTK, and (C) ISF and 3-h CS with HTK + 10^-3     

D-���洼������������δ������ܵ��ٴ��о�

目的探讨D山梨醇清除率在评估肝储备功能中的作用。方法2000年1月至2001年12月对50例行断流手术的肝硬化合并门静脉高压症病人术前进行肝功能分级及D山梨醇肝清除率测定,分析D山梨醇肝清除率与肝功能分级及断流术后并发症发生率的关系。结果ChildPugh肝功能分级为A级的病人比B级病人D山梨醇肝清除率高,断流术后无并发症病人比有并发症病人D山梨醇肝清除率高,在肝功能B级组中随着D山梨醇肝清除率降低,术后并发症发生率增高。结论D山梨醇肝清除率能够反映病肝储备功能,联合应用D山梨醇肝清除率和肝功能分级可以更客观地评估病肝储备功能。