百草枯中毒大鼠急性肺损伤机制及姜黄素的干预研究

目的探讨急性百草枯中毒大鼠肺组织氧化应激及脂质过氧化损伤机制及姜黄素的干预作用。 方法将120只成年雄性SD大鼠按不同造模方法用随机数字表法分成对照组、百草枯中毒组、姜黄素干预组,每组大鼠40只。百草枯中毒组腹腔注射百草枯15 mg/kg,姜黄素干预组腹腔注射姜黄素200 mg/kg,15 min后腹腔注射百草枯15 mg/kg,对照组腹腔注射等容量的生理盐水。百草枯中毒组及姜黄素干预组于染毒后（对照组于腹腔注射后）3 h、6 h、24 h、3 d、7 d分别随机抽取8只大鼠取材。荧光实时定量PCR法测定各组大鼠肺组织中的转化生长因子（TGF）-β₁ mRNA的表达量,硫代巴比妥酸比色法、分光光度计比色法、黄嘌呤氧化酶法分别测定肺组织匀浆中丙二醛、髓过氧化物酶（MPO）、超氧化物歧化酶（SOD）活性,光镜下观察各组肺组织病理变化。 结果染毒后6 h、24 h、3 d、7 d,与对照组相比,百草枯中毒组和姜黄素干预组肺组织TGF-β₁ mRNA的表达量明显升高（F = 136.928、32.282、52.008、30.940,P均< 0.05）,丙二醛（F = 132.896、64.988、30.622、30.192）、MPO（F = 34.738、202.578、122.019、119.626）含量升高（P均< 0.05）,而SOD活力降低（F = 34.738、202.578、122.019、119.626,P均< 0.05）;与百草枯中毒组相比,姜黄素干预组各时间点肺组织TGF-β₁ mRNA表达量、丙二醛及MPO含量均降低（P均< 0.05）,肺组织SOD活力均升高（P均< 0.05）。 结论氧化应激及细胞膜脂质过氧化过程的启动可能是百草枯中毒急性肺损伤的机制之一,姜黄素可能通过阻止该过程减轻肺损伤的程度。     

血必净注射液联合地塞米松防治大鼠百草枯中毒慢性肺损伤的作用研究

目的 探讨血必净注射液联合地塞米松防治大鼠百草枯中毒慢性肺损伤的作用及可能机制.方法 30只雄性Wistar大鼠被随机均分为6组,每组5只.腹腔注射质量分数为20%的百草枯80 mg/kg制备大鼠中毒模型;正常对照组予生理盐水.染毒后2 h,治疗组分别向腹腔注射小剂量血必净注射液(1.25 g/kg)、大剂量血必净注射液(2.50 g/kg)、地塞米松(25 mg/kg)及大剂量血必净注射液联合地塞米松(联合治疗),正常对照组和模型组给予等量生理盐水,均每日1次,连用4 d.观察各组大鼠染毒后反应;于28 d处死各组大鼠取相应标本,检测肺系数、肺匀浆中羟脯氮酸(HYP)、血清转化生长因子-β1(TGF-β1),同时行肺组织病理学观察.结果 各治疗组血清TGF-β1、肺HYP均较模型组显著降低,以联合治疗组最为明显,血必净大剂量组和地塞米松组其次,血必净小剂量组仅TGF-β1好于模型组,差异有统计学意义(P均<0.05).比较各组肺系数,联合治疗组最佳,其他治疗组间差异无统计学意义.肺组织病理学观察显示,治疗组肺纤维化及实变程度较模型组轻,其中联合治疗组最轻.结论 血必净注射液联合地塞米松治疗百草枯中毒,通过抑制TGF-β1水平,减少纤维母细胞迁移、活化,抑制胶原蛋白产生,保护肺组织结构,可以更有效地抑制肺纤维化、肺实变.     

姜黄素对百草枯中毒致肺纤维化大鼠肺功能及TGF-β1、NF-κB表达的影响北大核心CSCD

目的观察姜黄素对百草枯中毒致肺纤维化大鼠肺功能及TGF-β1、NF-κB的影响,为其临床应用提供理论依据。方法SPF级Wistar大鼠72只随机（随机数字法）分为百草枯染毒组（百草枯50mg／kg一次性灌胃染毒）、姜黄素治疗组（百草枯染毒后30min给予姜黄素200mg／kg一次性腹腔内注射）,空白对照组（相同时间点注射等体积生理盐水）。常规饲养14d后观察大鼠肺功能,免疫组化法检测转化生长因子-β1（TGF-β1）、核因子-κB（NF-κB）蛋白的表达。结果姜黄素干预组动物生存率41．67％,百草枯中毒组生存率70．83％,两组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。与空白对照组相比,百草枯染毒组TE（呼气时间）、PIF（吸气峰流量）、PEF（呼气峰流量）、EF50（呼出50％气量时的流速）、TV（潮气量）、F（呼吸频率）等肺功能指标均下降,差异具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）,与百草枯染毒组比较,姜黄素治疗组Te、PEF、TV、F均升高,差异具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）;大鼠肺组织中TGF-β1、NF-κB在空白对照组有少量表达,与空白对照组比,百草枯染毒组表达明显增强（P〈0．01或P〈0．05）;姜黄素治疗组与百草枯染毒组比较,TGF-β1、NF-κB表达显著减弱（P〈0．01或P〈0．05）;结论抑制肺组织中TGF-β1、NF-κB的过度表达,是姜黄素减轻百草枯中毒肺纤维化程度的作用机制之一。     

氯沙坦对百草枯中毒致大鼠肺损伤的改善作用及与ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴表达的关系

目的分析氯沙坦对百草枯中毒致大鼠肺损伤的改善作用及与ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴表达的关系。方法将36只清洁级雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和实验组,三组各12只。对照组给予生理盐水;模型组给予百草枯溶液18 mg/kg,于一次性腹腔注射;实验组给予百草枯溶液18 mg/kg,于一次性腹腔注射,待0. 5 h后应用氯沙坦溶液进行灌胃,每日10 mg/kg。1周、2周、3周取各组大鼠肺组织,对其肺系数进行计算以评估其肺水肿的状况;采用HE染色对各组大鼠肺泡炎的程度进行观察,并用Masson染色评估大鼠肺纤维化的严重程度;采用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠肺组织匀浆中Ang-(1-7)和转化生长因子β1(TGF-β1)的水平,并通过免疫组织化学法对各组大鼠肺组织中Mas受体和血管紧张素转换酶II(ACE2)蛋白的表达水平进行检测。结果在染毒后1周、2周、3周时,模型组和实验组肺系数较对照组均显著升高(P 0. 01),而实验组各时间点时的肺系数较模型组均显著下降(P 0. 01)。在染毒后1周、2周、3周,模型组出现明显肺泡炎症,且随着染毒时间的增加,可出现肺纤维化,实验组肺泡炎症程度轻于模型组,实验组肺纤维化程度较模型组明显减轻。随着染毒时间的增加,Ang-(1-7)和TGF-β1在模型组与实验组肺组织匀浆中的水平均逐渐升高,且模型组与实验组各时间点Ang-(1-7)和TGF-β1的含量较对照组均显著升高(P 0. 01);染毒后1、2、3周,Ang-(1-7)在实验组肺组织匀浆中的水平较模型组明显升高,而TGF-β1的含量较模型组显著下降(P 0. 01)。随着染毒时间的增加,模型组与实验组大鼠肺组织中Mas受体和ACE2蛋白的表达水平均显著升高(P 0. 05),且实验组染毒后2周、3周Mas受体和ACE2蛋白的表达水平较模型组均显著升高(P0. 05)。结论在百草枯中毒后,肺组织匀浆中Ang-(1-7)和TGF-β1的表达水平明显上调,而氯沙坦可能通过升高ACE2/Ang-(1-7)/Mas受体轴的表达水平而起到下调纤维化因子TGF-β1表达的作用,因此可改善百草枯中毒所引起的肺损伤和肺纤维化的形成。     

乌司他丁对百草枯中毒大鼠肺脏病理变化的影响

目的 探讨乌司他丁对百草枯中毒大鼠肺脏病理变化的影响.方法 SD大鼠60只随机(随机数字法)分为正常对照组(A组)、百草枯染毒组(B组)和乌司他丁治疗组(C组),各20只.A组给予生理盐水1 mL一次性灌胃;B组给予PQ液40 mg/kg(稀释至1 mL)灌胃染毒,并每日给予1 mL生理盐水腹腔注射;C组给予PQ液40mg/kg(稀释至1 mL)灌胃染毒,给予UTI 2万U/kg,2次/d腹腔注射.在给药后7,14,21,28 d处死大鼠,用苏木素-伊红(HE)、Masson染色评价肺组织病理学变化的表达.数据采用SPSS 10.0统计软件处理,等级资料采用秩和检验,有统计学意义后进行两两比较(Bonferroni法).结果 百草枯染毒后大鼠肺泡炎、肺纤维化程度积分明显增高,乌司他丁治疗组肺组织水肿、出血、炎性细胞浸润及纤维聚集程度减轻.结论 乌司他丁能明显抑制百草枯中毒大鼠肺炎症及纤维化程度.     

氢气饱和生理盐水对百草枯中毒大鼠肺组织的作用

目的 探讨氢气饱和生理盐水对百草枯(PQ)中毒大鼠肺损伤及肺纤维化的保护作用.方法 该实验在南昌大学第一附属医院动物实验室完成.48只SD大鼠随机分为对照组、染毒组和干预组,每组16只.染毒组及干预组给予50 mg/kgPQ一次性灌胃染毒,对照组给予等量蒸馏水灌胃.干预组大鼠在染毒1 h后开始予腹腔注射氧气饱和生理盐水5 mL/kg,2次/d,直至处死;染毒组及对照组大鼠按体质量给予等量生理盐水腹腔内注射.于染毒第3天及第21天分别测定各组大鼠动脉血氧分压(PaO2)、肺组织8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)含量及转化生长因子β1(TGF-31)的表达.结果 (1)染毒后3 d,与对照组比较,染毒组及干预组PaO2均明显下降(P＜0.01);与染毒组比较,干预组PaO2有所改善(P＜0.05).21 d后,与对照组比较,染毒组PaO2仍明显减低(P＜0.01),干预组有一定程度下降(P＜0.05);与染毒组比较,干预组PaO2明显升高(P＜0.01).(2)染毒后3 d,与对照组比较,染毒组8-OHDG含量明显增加(P＜0.01),干预组亦有一定程度增加(P＜0.05);与染毒组比较,干预组8-OHDG含量有明显下降(P＜0.01).21 d后,各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).(3)染毒后3 d,与对照组比较,染毒组TGF-β1表达明显增加(P＜0.01),干预组有一定程度增加(P＜0.05);干预组较染毒组间比有一定下降(P＜0.05).21 d后,与对照组比较,染毒组TGF-β1表达明显增加(P＜0.01),干预组有一定增加(P＜0.05);与染毒组比较,干预组TGF-β1表达明显下降(P＜0.01).结论 氢气饱和生理盐水能改善PQ大鼠氧化应激状态,减轻肺氧化损伤,降低肺纤维化程度.     

百草枯致小鼠肺间质纤维化过程中转化生长因子-β1的表达

目的 用免疫组织化学的方法观察百草枯(PQ)致肺间质纤维化过程中转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达。方法 58只雄性C57BL/6J小鼠随机（随机数字法）分组。实验组48只,通过腹腔注射PQ(10 mg/kg)建立小鼠肺间质纤维化模型;对照组10只,腹腔注射等量生理盐水。实验组染毒后2,5,7,14 d和对照组7d时小鼠分别被处死,留取肺组织标本。标本进一步进行HE染色和TGF-β1的免疫组化研究,并进行TGF-β1的积分光密度(iOD)分析,两组间的数据比较采用成组t检验。结果 PQ致肺纤维化过程中,巨噬细胞中TGF-β1表达显著增加。随着纤维化进程的进展,TGF-β1染色阳性主要见于浸润的巨噬细胞和中性粒细胞的胞浆中。染毒后14 d,除了巨噬细胞外,TGF-β1染色阳性也见于成纤维细胞灶中的成纤维细胞和肌成纤维细胞。与对照组相比,实验组各时间点TGF-β1的积分光密度在纤维化开始后明显增加(P＜0.01)并呈上升趋势。结论 在PQ致肺间质纤维化过程中,TGF-β1的表达显著增加并对肺纤维化的发生发展具有重要的作用。     

依那普利对百草枯中毒大鼠肺组织ACE表达的影响

目的：观察依那普利对百草枯（PQ）中毒大鼠肺组织病理改变、血管紧张素转化酶（ACE）表达的影响。方法一次性PQ 60 mg/kg灌胃建立大鼠百草枯中毒肺纤维化模型,干预组染毒后予依那普利10 mg/（kg·d）灌胃。于染毒后3 d、7 d、14 d取肺组织行HE染色和Masson染色,观察大鼠肺泡炎、肺纤维化程度;Quantitative Real-Time PCR检测ACE mRNA表达。结果干预组在染毒后3d、7d肺泡炎症减轻;染毒7d、14d后,纤维化程度积分低于模型组。模型组染毒后各时间点大鼠肺组织ACE mRNA表达逐步上调,持续至14 d。干预组各时间点ACE mRNA低于模型组。结论依那普利可能通过降低局部ACE表达,从而减轻百草枯中毒所致肺纤维化形成。     

血清淀粉样蛋白A在百草枯中毒致小鼠急性肺损伤中的表达及意义

目的:观察血清淀粉样蛋白A1(SAA1)在百草枯中毒小鼠急性肺损伤的表达及意义。方法:SPF级健康雄性昆明小鼠随机分为对照组和中毒组。中毒组予一次性腹腔注射百草枯(20 mg/kg)复制染毒小鼠模型,对照组予注射等剂量生理盐水,24 h后处死小鼠并取材。检测小鼠肺湿/干重比,苏木精-伊红染色观察肺组织病理变化,原位末端缺刻标记法观察细胞凋亡,酶联免疫吸附法检测小鼠血清SAA的表达情况,免疫荧光定量PCR法检测小鼠肺组织TGF-β1 mRNA表达的情况。结果:与对照组相比,中毒组小鼠肺组织湿/干重比、肺组织炎症及细胞凋亡显著增加,血清SAA含量明显增多(P0.05);肺组织TGF-β1 mRNA的表达均增高。结论:SAA在百草枯中毒小鼠肺损伤中显著增高,参与其炎症过程,并在其病程进展中发挥重要作用。     

异甘草酸镁对大鼠百草枯中毒肺纤维化治疗作用的研究

目的 探讨异甘草酸镁(MgIG)对大鼠百草枯(paraquat,PQ)中毒所致肺纤维化的防治作用及可能的机制.方法 健康的SD雄性大鼠30只,随机分成5组:正常对照组、染毒对照组、MgIG低剂量(15 mg/kg)组、MgIG中剂量(30 mg/kg)组和MgIG高剂量(45 mg/kg)组;用20% PQ溶液按15 mg/kg行腹腔注射制作大鼠PQ中毒肺损伤模型,各治疗组于染毒后24 h按相应剂量MgIG行腹腔注射,正常对照组及染毒对照组注射生理盐水(按MgIG中剂量组的相应容量计算),直至死亡或被处死.于染毒后第14天全部处死,取肺组织行HE染色及Masson染色行病理学观察,并测定肺组织内羟脯氨酸(HYP)含量,同时取血清测定细胞间黏附因子-1(ICAM-1)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量.结果 所有大鼠均无自然死亡;光镜观察到染毒对照组静脉瘀血、淋巴增生、纤维母细胞增多,肺泡上皮增生明显,间质增厚.与染毒对照组相比,MgIG中剂量组的肺组织瘀血、水肿明显减轻,肺纤维化病理表现明显较轻,且肺内HYP明显下降(P均<0.01);血清中ICAM-1及MMP-9含量也明显降低(P<0.05或P<0.01).结论 MgIG中剂量对百草枯中毒大鼠肺组织纤维化损伤有一定的防治作用.     

单克隆抗体在百草枯中毒模型中的作用

目的 探讨白细胞介素17单克隆抗体(IL-17 monoclonal antibody,IL-17 MAb)在百草枯致小鼠肺纤维化模型中的作用.方法 将雄性C57BL/6小鼠60只,随机(随机数字法)分为三组:对照组(n=12)腹腔注射生理盐水0.1 mL,染毒组(n=24)腹腔注射百草枯(25 mg/kg)溶液0.1 mL和治疗组(n=24)腹腔注射百草枯(25 mg/kg)同时予尾静脉注射IL-17MAb(5μg/mice);在注射处理后第1、7、14天采血,并用酶联免疫吸附法检测各组小鼠的白介素-17A (IL-17A)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平;肺组织切片进行HE染色,并观察其病理变化;记录各组病死数量,并计算生存率.运用SPSS 21.0软件进行统计分析,其中各细胞因子分泌水平的动态变化以及在各实验组间的差异都采用单因素方差分析(One-Way-ANOVA),各实验组的生存率差异采用费希尔精确检验(Fisher's exact test).结果 百草枯注射处理后,细胞因子IL-17A和TGF-β1的分泌水平都升高(P＜0.01),IL-17MAb的干预可抑制该升高程度;相反地,细胞因子IFN-γ的分泌水平在百草枯处理后呈下降的表达模式(P＜0.01),IL-17MAb的干预可抑制其下降程度;肺组织切片的病理组织学显示,百草枯注射能导致肺组织损伤,呈肺纤维化表现,而IL-17MAb的干预能减轻这种损伤;IL-17MAb的干预能提高百草枯致病的生存率(P＜0.05).结论 IL-17MAb能降低细胞因子IL-17A、TGF-β1的表达水平,增强IFN-γ分泌,从而改善百草枯致肺纤维化的进程.     

百草枯中毒致大鼠肺纤维化的实验研究

目的 探讨急性百草枯(PQ)中毒对大鼠肺纤维化的作用机制,为防治肺纤维化提供依据.方法 56只SD大鼠随机分为对照组和染毒组,染毒组32只,对照组24只,染毒组以4 mg/mL浓度的百草枯稀释溶液按14 mg/kg剂量一次性腹腔注射,对照组代以等剂量生理盐水注射.选取染毒组12只、对照组4只分别于第3、7、14、28天行活体肺组织Micro CT扫描,剩余大鼠分别于上述4 d每组各处死5只.处死剖胸后完整取出肺组织并观察整体肺的变化情况;称质量肺组织计算肺系数;通过HE染色观察肺组织的病理改变;测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)的含量变化.结果 大鼠染毒后均出现行为异常;光镜及Micro CT观察肺组织可见随染毒时间的延长肺泡炎及肺纤维化征象相继发生;染毒组大鼠肺系数在各时间段皆高于相应对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且染毒组内随染毒时间的延长肺系数亦显著升高(P<0.01);染毒组大鼠肺组织HYP含量在第7、14、28天时皆高于相应对照组,差异有统计学意义(P<0.01),且染毒组内随染毒时间的延长HYP含量亦显著增长(P<0.01).结论 百草枯中毒可导致大鼠肺组织发生纤维化,羟脯氨酸含量变化可判断纤维化程度,Micro CT可用于肺纤维化的检测.     

乌司他丁对百草枯中毒大鼠肺损伤的影响

目的观察乌司他丁对百草枯中毒大鼠肺损伤及纤维化的影响,探讨乌司他丁对百草枯中毒大鼠肺的保护机制。方法 SD雄性大鼠90只,体重(180±20)g,随机分为3组:空白对照组(Con组)、百草枯中毒模型组(Mod组)、乌司他丁治疗组(UTI组),每组又再分为5个不同时间点(1 d、3 d、7 d、14 d、21 d,每组6只)。Con组腹腔内注入生理盐水1 ml,其余各组腹腔内注入百草枯溶液18 mg/kg(用生理盐水稀释至1 ml)。0.5 h后,Con组和Mod组:生理盐水1 ml;UTI组:乌司他丁10万U/kg(生理盐水稀释至1 ml),每24 h重复给药一次,直至实验中止。分别于第1天、第3天、第7天、第14天、第21天处死大鼠,采集肺组织,HE染色观察肺组织病理形态学变化,Masson染色观察肺纤维化变化;测定血浆中SOD活性和MDA、HYP含量。结果 HE染色和Masson染色显示:对照组各时间点肺组织呈正常形态结构;Mod组第7天以肺组织炎症为主,第21天出现较明显的肺间质纤维化;UTI组肺组织炎症和肺间质纤维化较Mod组显著减轻。与Con组比较,百草枯染毒各组大鼠血浆SOD活性均显著降低(P<0.05);UTI组血浆SOD活性显著高于Mod组(P<0.05);与Con组比较,百草枯染毒各组血浆MDA和HYP含量均显著升高(P<0.05);UTI组血浆MDA和HYP含量较Mod组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乌司他丁能通过减轻炎性细胞与氧自由基对肺的损伤作用而发挥对肺的保护作用。     

红景天苷抑制大鼠肺纤维化机制研究

目的探讨红景天苷对大鼠肺纤维化的抑制作用机制。方法 SD大鼠18只,随机分为3组:对照组(6只),生理盐水组(A组,6只),红景天苷组(B组,6只)。大鼠气管内注射博来霉素制备肺纤维化模型后,A组每天腹腔注射生理盐水(5 mg/kg),B组每天腹腔注射红景天苷(5 mg/kg)。对照组气管和腹腔内注入等体积生理盐水。4周后处死动物,提取肺组织分别行Masson染色,免疫组化检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),PCR检测胶原I的mRNA表达。结果与对照组相比,A组Masson染色纤维化程度增强,α-SMA表达、胶原I mRNA表达明显升高(P0.05);同A组相比,B组Masson染色纤维化程度减弱,α-SMA表达、胶原I mRNA表达降低(P0.05)。结论红景天苷对肺纤维化有一定治疗作用,其机制可能与调控胶原相关蛋白有关。     

急性百草枯中毒大鼠肺组织MMP-2和TIMP-1的基因表达

目的 利用实时荧光定量PCR法测定急性百草枯中毒大鼠肺组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织因子抑制剂-1(TIMP-1)基因的表达,探讨其在急性百草枯中毒所致的大鼠急性肺损伤及纤维化中的作用.方法 80只SD大鼠,随机分为对照组(n:8)、染毒组(n:72);对照组一次性腹腔注射与染毒组等体积的生理盐水,染毒组一次性腹腔注射百草枯溶液(18mg/kg)染毒;分别于1、3、5、7、14、28 d光镜下观察两组大鼠的肺组织病理变化,同时利用实时荧光定量PCR法动态测定MMP-2、TIMP-1的mRNA表达量.结果 与对照组相比,染毒组大鼠早期主要表现为肺脏的急性炎症反应,肺水肿和出血明显,染毒5 d后观察到肺纤维化变化,第28天纤维化最明显;染毒组肺组织中的MMP-2的mRNA表达较对照组从第1天开始即明显增强,第7天达到高峰,为对照组的2.83倍,以后逐渐下降,但28 d时仍高于对照组,差异无统计学意义(P<0.01);TIMP-1的mRNA表达第1天也明显高于对照组,逐渐增强至14 d达到峰值,为对照组的7.28倍,后开始缓慢下降,28 d时仍明显高于对照组(P<0.01).结论 MMP-2、TIMP-1在急性百草枯中毒所致的急性肺损伤中起了重要的作用,同时大鼠的肺纤维化进程与MMPs/TIMPs的基因表达比例失调有很大的关系.     

地塞米松注射液对急性呼吸窘迫综合征干预作用的实验研究

目的:探讨地塞米松对油酸诱导大鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)后肺纤维化的影响。方法:将54只SPF级雄性SD大鼠随机分为3组(n=18)。A组注射生理盐水作为正常对照;B、C组以油酸(0.15 ml/kg)制作模型,制模后6 h测动脉血气,以氧合指数≤200为模型成功,A、B组经静脉注射生理盐水(5 ml/kg),c组经静脉给予地塞米松(2 mg/kg),每天1次,连续1w。各组在给药后第7 d、14 d、28 d麻醉后处死大鼠,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中Ⅲ型前胶原(PcⅢ)浓度,留取右侧肺经包埋后行Masson染色。结果:B组和C组PcⅢ浓度在第7 d、14 d、28 d时均明显高于A组(P0.05),且C组明显低于B组(P0.01),C组肺纤维组织增殖较B组明显减轻。结论:地塞米松可能对ARDS后肺纤维化有抑制作用。     

转化生长因子β1/Smads通路在百草枯中毒所致上皮-间充质转变和肺纤维化中的作用研究

目的本研究通过观察百草枯诱导大鼠肺纤维化中转化生长因子β1（TGF-β1）/Smads信号通路的上皮-间充质转变（EMT）现象及相关蛋白的表达。 方法将60只雄性大鼠分为对照组及百草枯组,每组各30只。百草枯组腹腔注射80 mg/kg百草枯建立中毒模型,对照组注射3 mL等渗NaCl溶液。分别在建模后1、3、7、14、21、28 d分批处死大鼠,比较两组大鼠肺组织湿干比重及羟脯氨酸水平,取左肺下叶予苏木素-伊红（HE）染色及Masson染色。评估肺组织病理学和肺纤维化程度,采用Western-blotting检测百草枯中毒后1、3、7、14、21、28 d肺组织中EMT相关指标和TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白的表达。 结果两组各时间点肺湿干比重及羟脯氨酸水平的比较,差异有统计学意义（F=9.772、22.541,P均< 0.001）,且百草枯组湿干比重的比值在3、7、14、21、28 d均显著高于对照组（P均<0.05）,而羟脯氨酸表达水平仅在14、21、28 d明显高于对照组（P均<0.05）。病理结果显示百草枯组大鼠中毒后1~7 d,炎症细胞浸润,肺泡间质增厚水肿,中毒后21 d和28 d可见肺泡壁明显增厚及胶原纤维明显增生,而对照组大鼠肺组织无明显改变。对照组与百草枯组各时间点TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad4、p-Smad4、Smad7、p-Smad7、E-cad、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Vimentin和成纤维细胞特异性蛋白1（FSP-1）表达水平的比较,差异均有统计学意义（F=10.685、7.381、7.878、10.743、14.575、17.791、33.200、14.453、10.849、25.415、26.263,P均< 0.001）,且百草枯组TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad4、p-Smad4、α-SMA、Vimentin及FSP-1表达水平逐渐升高,中毒后21 d达高峰（P均<0.05）。而Smad7、p-Smad7及E-cad表达水平逐渐降低,Smad7、p-Smad7水平在中毒后7 d达到谷底;E-cad表达水平在中毒后21 d达到谷底（P均<0.05）。 结论TGF-β1/Smads信号通路可能通过调节EMT过程影响百草枯诱导的肺纤维化发生。     

甲泼尼龙联合环孢素A对百草枯中毒的防治

目的 在建立百草枯(paraquat,PQ)中毒致肺纤维化大鼠模型的基础上,探讨早期大剂量甲泼尼龙联合环孢素A治疗对PQ中毒大鼠肺组织病理变化、氧化一抗氧化指标和肺纤维化特异性指标的影响,以判断疗效.方法 (1)PQ中毒致肺纤维化大鼠模型的建立:40只雄性Wistar大鼠随机(随机数字法)分为5组,分别采用20 mg/kg,25 mg/kg,30 mg,/kg,35mg/kg和40 mg/kg5个PQ剂量水平进行染毒.计算各组大鼠的两周死亡率及观察肺组织病理形态学变化.以肺组织病理表现为纤维化、死亡率在可接受范围之内作为模型染毒剂量,并以生化指标验证.(2)甲泼尼龙联合环孢素A对PQ中毒大鼠肺纤维化的疗效观察:72只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(8只)、模型组(16只)、药物干预组(48只)3组.正常对照组注射25 mg/kg生理盐水;其余组PQ 25 mg/kg染毒.药物干预组再随机分为3组(每组16只),分别于染毒后2 h,24 h,72 h三个时间点单次应用甲泼尼龙(90 mg/kg)联合环孢素A(22.5 mg/kg).染毒后7 d,14 d观察大鼠肺组织病理变化,采用碱水解法、黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别测定肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HPY)的含量.组间比较采用两因素析因设计的方差分析,组内比较采用单因素3水平设计的方差分析.结果 25 mg/kg为肺纤维化大鼠模型的PQ染毒剂量.与模型组比较,各药物干预组大鼠肺组织肺泡数量明显增多,成纤维细胞增生程度较轻,胶原及纤维含量较少.与模型组比较,各药物干预组大鼠肺组织SOD含最增加,HPY和NDA含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01).与72 h药物干预组比较,2 h,24 h药物干预组大鼠肺组织成纤维细胞增生程度较轻,胶原、纤维较少,肺组织SOD含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01),MDA含量明显降低(P＜0.01).结论 早期联合应用大剂量甲泼尼龙和环孢素A治疗PQ中毒大鼠,可以显著减轻PQ中毒所致的肺组织氧化损伤和肺纤维化程度,改善预后.     

阿司匹林对百草枯中毒大鼠肝肾功能的保护作用

目的探讨阿司匹林对百草枯（PQ）中毒大鼠肝。肾功能的保护作用。方法60只健康SD大鼠随机分为PQ单纯染毒组、赖氨酸阿司匹林治疗组及生理盐水对照组,每组20只。单纯染毒组予20％PQ50mg／kg一次性灌胃,3h后予1ml生理盐水腹腔注射;治疗组予20％PQ50mg／kg一次性灌胃染毒,3h后予200mg／kg赖氨酸阿司匹林一次性腹腔注射;对照组予生理盐水2ml一次性灌胃,3h后予1ml生理盐水腹腔注射。在第1、3、7和14d分批处死大鼠,腹主动脉采血,高速离心后取上清液,全自动生化仪检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肌酐（cr）和血尿素氮（BUN）水平,分离肝、肾予苏木素一伊红染色并观察病理结果变化。结果PO染毒后第3、7和14d染毒组血清中ALT、AST、Cr和BUN的水平明显高于治疗组和对照组（P〈0．05）,第1、3和7d治疗组明显高于对照组（P〈0．05）,第1d染毒组血清中ALT、AST、Cr和BUN的水平明显高于对照组（P〈0．05）,与治疗组相比,差异没有统计学意义（P〉0．05）,第14d治疗组与对照组比较,差异没有统计学意义（P〉0．05）。染毒组病理改变有充血水肿、炎症细胞浸润、变性坏死及结构紊乱等;治疗组改变明显减轻,且无结构紊乱;对照组结构清晰,未见充血水肿、炎症细胞浸润及坏死等病理表现。结论阿司匹林对百草枯中毒大鼠的肝肾功能有一定的保护作用。     

甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠肺损伤病理变化的影响

目的：通过研究甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠肺病理学改变的作用,探讨甲泼尼龙对百草枯中毒大鼠早期肺损伤的保护作用。方法：60只Wistar大鼠,随机分为4组,正常对照组（A组）、模型组（B组）、甲泼尼龙15 mg/kg组（C组）、甲泼尼龙5 mg/kg组（D组）。B、C、D组采用百草枯22 mg/kg腹腔注射一次性染毒,C、D组从染毒后2 h开始,分别予腹腔注射甲泼尼龙15 mg/kg和5 mg/kg,每日1次,同期A、B组用等体积无菌生理盐水腹腔内注射,每日1次,至处死前。染毒后24、72、168 h分批处死大鼠,每组每时间点6只,摘取肺脏,制备肺组织标本,光镜下观察肺组织的病理学改变并行肺损伤评分。结果：光镜下C、D组大鼠肺组织的病理学改变比B组轻,其中以D组减轻最为明显。染毒后24 h C、D组的肺损伤评分明显低于B组（P均〈0.05）;72 h D组的肺损伤评分明显低于B组（P〈0.05）,而B、C组的肺损伤评分比较差异无统计学意义（P〉0.05）;168 h B、C、D组的肺损伤评分均明显高于A组（P〈0.05）,其中C、D组的肺损伤评分明显低于B组（P均〈0.05）,C、D组的肺损伤评分比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：甲泼尼龙对急性百草枯中毒大鼠的肺损伤具有保护作用,且小剂量（5 mg/kg）甲泼尼龙优于常规剂量（15 mg/kg）。