新生儿感染光滑假丝酵母菌随机扩增DNA多态性分析

目的探讨采用随机扩增DNA多态性(RAPD)技术对临床新生儿血培养标本中分离的光滑假丝酵母菌进行基因分型;分析新生儿感染菌株的同源性,追踪其感染源与传播途径,从而为新生儿假丝酵母菌感染防治提供依据。方法 15例新生儿血培养标本中分离的菌株均经过法国科马嘉假丝酵母菌显色鉴定培养基和法国生物梅里埃API20CAUX酵母菌鉴定试剂盒进行鉴定、纯化,其后采用RAPD多态性分析,获得菌株的RAPD指纹图,应用NTSYS软件计算出相似系(SAB),并进行聚类分析,比较菌株间的同源性。结果 15株菌株中14株被鉴定为光滑假丝酵母菌,1株为白色假丝酵母菌,且鉴定分离的2¹4号的光滑假丝酵母菌相似系数均≥0.8,表明菌株之间基因型相似度较高,具有基因同源性,而第一株菌株与其他13株之间的相似系数均<0.6,不具有基因同源性。结论本研究发现新生儿感染的13株光滑假丝酵母菌具有基因同源性,初步证实了试验分离的光滑假丝酵母菌在住院患儿间进行水平传播,提示了光滑假丝酵母菌易引起新生儿院内交叉感染,预防宜采取综合措施,切断传播途径。     

北京市售食品污染酵母菌鉴定

目的　了解北京市售食品污染酵母菌种类　方法　用API 2 0CAUX生化鉴定条对从送检样品中分离出的酵母菌进行鉴定。结合API 2 0CAUX实验结果和酵母形态观察结果。结果　共分离出酵母菌 2 9株 1 5种。其中 ,膜醭毕赤酵母最多 ,占总株数的 2 0 6 9%。其次为拜耳结合酵母 (1 7 2 4 % )和克柔氏假丝酵母 (1 0 34% )。其中 7种 1 9株为腐败酵母 ,占总株数的 6 5 5 2 %。豆制品和酱油是酵母污染的主要对象。结论　市场监督部门和食品生产企业应加强酵母污染的检测 ,尤其是腐败酵母     

分子生物学技术在细粒棘球绦虫虫株分类研究中的应用

以往主要利用形态解剖学、生物学及生物化学方法对细粒棘球绦虫虫株进行分类鉴定,近年来分子生物学技术迅速发展,广泛应用于寄生虫分类学研究.本文拟对核酸序列分析以及AFLP、RAPD、微卫星DNA等分子生物学技术在细粒棘球绦虫虫株分类、鉴定及遗传变异中的应用概况及研究进展作一综述.     

志贺氏菌的RAPD鉴定研究

目的：建立水或食品中志贺氏菌的快速鉴定方法，方法：首先采用特异性PCR技术对细菌进行初步检测，以确定其是否为志贺氏菌；然后采用随机引物扩增DNA多态性（RAPD）技术对志贺氏菌再进行鉴定，结果：志贺氏菌特异性引物（ipaH引物）扩增阳性的细菌经RAPD技术进行基因水平的分型，发现相同种的志贺氏菌株产生了基本相同的条带模式，不同种的菌株，甚至同一种菌的不同型间的条带模式也存在一定差异，结果经实际分离样品的验证。结论：RAPD技术可用于水或食品中志贺氏菌的鉴定。     

蜜饯食品沾染真菌的调查分析

本文对33家工厂生产的120份蜜饯食品,进行了霉菌及酵母菌侵染状况的分离检验。68％的样品检出霉菌,平均每克292.12个菌落,范围0～29000个;19％的样品检出酵母菌,平均每克1397.42个菌落,范围0～786000个。分离鉴定真菌42种,菌相分散。曲霉属13种,97株菌,占40.25％;青霉属14种,49株菌,占20.33％;其他菌16种、95株菌、占39.42％。笔者建议制定蜜饯食品卫生标准,并对污染因素及其危害进行讨论。     

白色假丝酵母菌的随机扩增多态性DNA分型研究

目的建立医院感染白色假丝酵母菌的基因多态性DNA分型方法,了解白色假丝酵母菌医院感染的分子流行病学情况,并探讨其基因多态性与真菌药物敏感性检测结果的可能关系。方法收集临床各病区送检的住院患者白色假丝酵母菌感染标本30份和其相应患者资料、抗真菌药物敏感性检测结果,采用经优化的随机扩增多态性(RAPD)DNA方法,对30株白假丝酵母菌进行基因多态性分型,利用Phylip3.67聚类分析软件分别用邻接法和算术平均数的非加权成组配对法,对RAPD扩增条带结果进行聚类分析。结果随机引物OPE-03进行RAPD扩增的指纹图谱清晰,带型稳定,多态性丰富,可以作为分型引物;30株不同来源的菌株可大致分为3种亲缘关系;两种聚类分析结果相同,提示该实验结果可靠。结论白色假丝酵母菌基因多态性分布可能与菌株的来源有关;RAPD多态性可能与其耐药性有关;不同聚类分析方法的RAPD图谱分析结果相同。     

重症监护病房分离2株黏红酵母菌病原学特征及耐药性分析

目的 探讨2株在重症监护病房(ICU)引起感染的黏红酵母菌的真菌学特征,并对其进行分子生物学鉴定和抗真菌药物敏感性试验.方法 采用常规真菌学鉴定和菌株的ITS区序列测定,以及采用酵母菌液基稀释法(M27-A)进行体外抗真菌药物敏感性试验.结果 2株真菌经真菌学鉴定和ITS区序列测定均证实为黏红酵母菌,2株菌株均对两性霉素B、5-氟胞嘧啶敏感,对氟康唑、伊曲康唑和伏力康唑不敏感.结论 导管污染、静脉高营养、免疫抑制是黏红酵母菌感染的易感因素,使用两性霉素B和拔除导管应该是治疗黏红酵母菌感染的首选方法;唑类药物在体外抗真菌药物敏感性试验中对黏红酵母菌不敏感,应谨慎使用.     

湖州市食品中单增李斯特菌的污染状况调查

目的:了解湖州市食品中单增李斯特菌的污染状况。方法:按国标方法,采用进口显色培养基,对食品进行单增李斯特菌的分离、生化鉴定。结果:281份样品中共检出22株,污染率为7.83%。其中冷冻/藏鸡肉中污染率最高,为25.00%。结论:湖州市食品中单增李斯特菌的污染比较严重,应加强对生肉制品等的监督管理,以防食源性疾病的发生。     

245例女性阴道假丝酵母菌病的真菌分布及耐药性分析

目的 探讨女性阴道假丝酵母菌病的真菌分布及耐药性,为临床治疗提供依据.方法 对临床从阴道分泌物中分离出的245株假丝酵母菌属采用科玛嘉假丝酵母菌显色培养基和YBC鉴定卡进行鉴定,并采用Rosco纸片扩散法对5种抗真菌药物进行药物敏感试验.结果 245株假丝酵母菌属中白色假丝酵母菌193株占78.8％、光滑假丝酵母菌33株占13.5％、热带假丝酵母菌10株占4.1％、克柔假丝酵母菌6株占2.5％、其他假丝酵母菌3株占1.2％;在5种抗真菌药物中,耐药率最高的是伊曲康唑为33.1％(x2=99.20,P＜0.05),氟康唑耐药率为27.8％、酮康唑为18.8％、两性霉素B为7.4％、5-氟胞嘧啶为4.9％.结论 女性阴道假丝酵母菌感染以白色假丝酵母菌为主,对抗真菌药物有不同程度耐药,临床应重视药敏试验,合理用药.     

假丝酵母菌血症的菌株鉴定及氟康唑耐药性分析

[目的]对引起假丝酵母菌血症的临床菌株进行分离鉴定,并分析其对氟康唑的耐药性情况,为合理使用抗生素提供依据.[方法]对2005-2008年江西44株来自血液的临床分离株,采用CHROMagar显色培养基和Vitek2YST鉴定条进行菌株鉴定,并根据美国国家临床实验室委员会制订的CISI M27-A2方案进行氟康唑药敏试验.[结果]在44株临床分离株中,白假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌和其他假丝酵母菌等分别为14(31.8%)株、18(40.9%)株、3(6.8%)株、2(4.5%)株和7(15.9%)株.其中0～20岁年龄组、20～40岁年龄组、40～60岁年龄组和60～岁年龄组假丝酵母菌的感染率分别为2(4.5%)、3(6.8%)、21(47.7%)、18(40.9%).44株假丝酵母菌中,40(90.9%)株对氟康唑敏感,1(2.3%)株为氟康唑剂量依赖(S-DD)株,3(6.8%)株对氟康唑耐药.ICU病房和烧伤科住院患者较易发生假丝酵母菌血症.其中,22(50%)株假丝酵母菌来源干ICU病房,6(13.6%)株来自烧伤科,其他科室为16(3613%)株.[结论]本次调查中,假丝酵母茵血症的临床菌株以光滑假丝酵母菌为主,其次为白假丝酵母菌,并且非白假丝酵母菌感染率约占假丝酵母菌感染的2/3.血液中假丝酵母菌对氟康唑的耐药率为6.8%,仅见于光滑假丝酵母菌和克柔假丝酵母菌.     

RAPD技术用于快速区分微囊藻有毒与无毒株系

（目的）探索PAPD技术用于微囊藻毒性株分型的可能性;（方法）使用微囊藻实验室建株的有毒和无毒株以及现场株系,作PAPD引物的扩增以及条带的对比;（结果）三种株系微囊藻可以扩增的PAPD引物各不相同,同种引物扩增出的条带也不相同。（结论）PAPD技术可用于微囊藻的毒性株系快速分型。     

金黄色葡萄球菌随机扩增DNA多态性分型研究

目的建立金黄色葡萄球菌随机扩增ＤＮＡ多态性（ＲＡＰＤ）分型技术，以应用于临床菌种鉴定及流行病学调查。方法对临床分离的１５株金黄色葡萄球菌，酚氯仿法提取其ＤＮＡ后行ＲＡＰＤ分型，同时进行噬菌体分型。结果１５株临床分离株大多数产生独特而稳定的ＲＡＰＤ带型，可分成５个噬菌体型和１４个ＲＡＰＤ谱型。采用同一反应体系，产肠毒素金黄色葡萄球菌未出现ＲＡＰＤ谱型。结论ＲＡＰＤ基因分型技术不需已知核酸序列，分型率高，分辨力强，简便快捷，可为金黄色葡萄球菌临床分离株提供分型标志，是分子流行病学研究的有效方法。     

金黄色葡萄球菌随机扩增DNA多态性分型研究

目的建立金黄色葡萄球菌随机扩增ＤＮＡ多态性（ＲＡＰＤ）分型技术，以应用于临床菌种鉴定及流行病学调查。方法对临床分离的１５株金黄色葡萄球菌，酚氯仿法提取其ＤＮＡ后行ＲＡＰＤ分型，同时进行噬菌体分型。结果１５株临床分离株大多数产生独特而稳定的ＲＡＰＤ带型，可分成５个噬菌体型和１４个ＲＡＰＤ谱型。采用同一反应体系，产肠毒素金黄色葡萄球未出现ＲＡＰＤ谱型。结论ＲＡＰＤ基因分型技术不需已知核酸序列，分型率高，分辨力强，简便快捷，可为金黄色葡萄球菌临床分离株提供分型标志，是分子流行病学研究的有效方法     

Antimicrobial Activity of Emilia sonchifolia DC., Tridax procumbens L. and Vernonia cinerea L. of Asteracea Family: Potential as Food Preservatives

Chemical preservatives have been used in the food industry for many years. However, with increased health concerns, consumers prefer additive-free products or food preservatives based on natural products. This study evaluated antimicrobial activities of extracts from Emilia sonchifolia L. (Common name: lilac tassel flower), Tridax procumbens L. (Common name: tridax daisy) and Vernonia cinerea L. (Common name: Sahadevi), belonging to the Asteracea family, to explore their potential for use against general food spoilage and human pathogens so that new food preservatives may be developed. Three methanol extracts of these plants were tested in vitro against 20 bacterial species, 3 yeast species, and 12 filamentous fungi by the agar diffusion and broth dilution methods. The V. cinerea extract was found to be most effective against all of the tested organisms and the methanol fraction showed the most significant (p < 0.05) antimicrobial activity among all the soluble fractions tested. The minimum inhibitory concentrations (MICs) of extracts determined by the broth dilution method ranged from 1.56 to 100.00mg/mL. The MIC of methanol fraction was the lowest in comparison to the other four extracts. The study findings indicate that bioactive natural products from these plants may be isolated for further testing as leads in the development of new pharmaceuticals in food preservation as well as natural plant-based medicine.     

预测微生物学在食品真菌生长及产毒研究中的应用

真菌引起的食品腐败和食物中毒是重要的食品安全问题。通过环境因素对真菌生长和产毒影响的预测微生物学探讨,建立回归线性方程和预测模型,可随时了解食品中真菌的活动状况,对预测真菌引起的食品腐败变质和食物中毒具有重要价值。文章介绍了预测微生物模型在食品真菌生长及产毒研究中的应用。     

102株单核细胞增生李斯特菌随机扩增多态性DNA基因分型研究

目的:对单核细胞增生李斯特菌进行随机扩增多态性DNA(RAPD)基因分型研究。方法:以优化的随机引物和反应体系对生肉、熟肉、生奶、乳制品、水产品、冷冻食品、生食蔬菜共七大类食品中分离的102株单核细胞增生李斯特菌进行RAPD法基因分型,并按DNA条带数及片段大小绘制指纹图谱。结果:102株单核细胞增生李斯特菌共得26种RAPD指纹图谱,以第12、18、23和10型为主要型别,分别为15、14、8和6株。结论:RAPD技术可将单核细胞增生李斯特菌分型26种,我省食品中分离的单核细胞增生李斯特菌主要基因型为第12、18、23和10型。     

Comparison of an improved RAPD fingerprinting with different typing methods for discriminating clinical isolates of Staphylococcus spp.

Different epidemiological markers were used to characterize 2 Staphylococcus epidermidis and 8 Staphylococcus aureus strains isolated from patients with severe infections. We compared random amplified polymorphic DNA (RAPD) fingerprints, biotypes, antibiotic assays, plasmid profiles and chromosomal DNA restriction endonuclease analysis (REA). Data analysis based on numerical taxonomy methods indicates that RAPD and REA give similar results allowing a good discrimination of the two species and of each isolate. The RAPD method is easier and faster than REA, but the reproducibility of RAPD fingerprints obtained in independent experiments can be problematic. We have found simple technical devices to improve the reproducibility of the RAPD procedure which is therefore a very useful tool in epidemiology for identification and characterization of Staphylococcus spp.     

RAPD用于新生儿病房产气肠杆菌分子流行病学研究

目的 建立产气肠杆菌RAPD技术,用于新生儿病房产气肠杆菌分子流行病学研究.方法 在具有10张床位的新生儿病房,于同一时间采自4例同期住院患儿分离出5株产气肠杆菌,做RAPD分析及药敏试验,找出流行相关菌株及分析耐药情况.结果 两株具有相同RAPD指纹图谱的产气肠杆菌是流行相关菌株,分别采自住院第4天和第10天的两例患儿,在新生儿病房内获得;所有菌株不同程度地对氨基苷类、哌拉西林、三代头孢菌素耐药.结论 RAPD技术为产气肠杆菌分子流行病学研究提供了简便、可靠的手段,菌株的耐药情况可能与标本采集之前抗菌药物的应用有关.     

The Joys and Pains of Sampling and Analysis of Traditional Food of Indigenous Peoples

“Traditional food of Indigenous Peoples' is defined as food that comes from the local environment and is culturally accepted. Usually, this food is part of the subsistence base of a specific cultural group, and may be wild animals, plants and/or insects, earth elements, or subsistence agricultural crops and animals. Since this food is often unfamiliar to the researcher, identification and sampling requires close collaboration with Indigenous People, and working with them in harvest, perhaps in local preservation techniques, and preparation for consumption. The many pleasures and benefits of this research include encountering unique food species, learning about “new” cultural food practices, uncovering new knowledge about nutrient composition, and potentially identifying excellent nutrient sources. Difficulties include the frustrations of making scientific collections in the human field setting (often in developing areas), getting replicate samples when food resources may be scarce, securing sufficient sample size, making judgements on simplifying preparation techniques, and ensuring adequate storage, transportation and shipping to avoid spoilage. Examples of these principles are represented from traditional food research with the Hopi Nation, Nuxalk Nation, James Bay Cree of Quebec, and the Canadian Inuit.