用于氯霉素、克伦特罗和雌二醇三种兽药残留检测的高通量悬浮芯片技术研究

目的 建立一种氯霉素、克伦特罗和雌二醇(17-beta-estradiol,E2)的3种兽药残留的新型高通量悬浮芯片检测技术.方法 合成3种兽药的牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)结合物,并进行紫外和质谱鉴定.将3种蛋白结合物偶联于聚苯乙烯荧光微球上,在液相反应体系中3种小分子兽药抗原和微球上的结合物共同竞争液相中各自特异性的生物素化单抗,优化和筛选出微球上偶联BSA结合物和反应抗体的最适加入量.绘制出3种兽药残留检测的标准曲线;对不同浓度的干扰物和待测物分组,以此进行特异性检测和盲样测定.并用扫描电子显微镜(简称电镜)进行微球表面微观结构观察.结果 3种小分子兽药可与BSA成功偶联;3种结合物的加入量和抗体的加入量分别做了优化;悬浮芯片检测的标准曲线方程和方程相应的决定系数(R2)表现良好,R2>0.99;3种兽药悬浮芯片的检测区间分别为(40.00～6.25)×105ns/L,(50.00～7.81)×105ng/L和1.00×103～7.29×105ng/L;最低检出限为:40 ng/L、50 ng/L和1 μg/L;同时,悬浮芯片的特异度测试良好,与其他药物无明显交叉反应;对盲样测定的检测浓度值与实际浓度偏差在8.09%～17.03%,可认为偏差较小.电镜对微球表面微观结构的观察也直观地确证了蛋白在微球上的成功偶联.结论 高通量悬浮芯片技术操作简单,灵敏快速,成本低廉,为多种兽药残留的快速检测提供了新方法,具有广阔的应用和发展前景.     

便携式食品微生物检验箱的研究

本检验箱采用手提公文箱式结构,重量6.75kg,箱体由玻璃钢材料制成。适用于部队或地方基层单位进行食品中菌落总数、大肠菌群、沙门氏菌、志贺氏菌和葡萄球菌等的检验。对食品微生物检验技术方法,在国家标准方法的基础上,作了较大的简化、改进和提高。     

改性玻璃纤维滤纸用于水中噬菌体回收的初步探讨

本试验室在水中噬菌体检验过程中,吸附滤材曾经采用了天津造纸研究所研制的Ju型玻璃纤维滤纸,通过调节检水的pH值和加入一定量的CaCl来促进f_2噬菌体的吸附,此方法操作比较麻烦,而且对回收率有一定的影响。为此,我们又试用了天津造纸研究所研制的用于啤酒过滤的20％玻璃纤维改性滤纸,观察了不同条件对f_2噬菌体吸附效率的影响。吸附试验方法:1升水加入f_2悬液,摇匀取样作对照。然后取20ml经滤材过滤,收集滤液取样计数,根据过滤前后f_2计数计算吸附的百分率。试验条件:调节水样不同的pH,加     

发酵盒法检验食品中大肠菌群的研究

本研究以发酵盒法代替常规管发酵法检验食品中大肠菌群.以外形尺寸为79×36×56mm~3的塑料发酵盒代替9支玻璃发酵管;以0.15%软琼脂代替玻璃小倒. 管观察发酵过程中的产气现象.操作简便,结果准确,便于应用.     

烹调油烟雾诱导核酸氧化损伤及其标志物8-羟基脱氧鸟苷的形成机制

目的 了解烹调油烟雾的遗传毒性效应。方法 以核酸加合物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)作为DNA氧化损伤的生物学标志物,用高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-EC)对烹调油烟雾染毒的小牛胸腺DNA及Wistar大鼠气管灌注染毒的肺组织DNA中8-OHdG进行定量检测,通过气质联用法(GC-MS)进行有机成分和原子吸收法(AAS)进行无机元素分析,并从混合污染物化学组成成分的角度推断了烹调油烟雾造成DNA氧化损伤的分子机理。结果体外试验表明烹调油烟雾的各组分,包括油烟冷凝物、残留油、油烟颗粒物、油烟挥发性有机物均能能诱导DNA氧化产生8-OHdG,产生量的顺序为残留油>冷凝物>油烟颗粒物>油烟挥发性有机物。体内实验结果表明油烟冷凝物可诱导大鼠肺组织DNA的氧化且具有剂量一反应关系和时间一效应关系。结论烹调油烟雾具有明确的遗传毒性,可诱导核酸氧化产生加合物8-OHdG,其机制可能是烹调油混合污染物中存在痕量金属离子如Fe2+、Cu2+等,介导Fenton反应生成羟自由基,直接进攻DNA造成氧化损伤。     

基因芯片技术检测环境中常见致病菌的初步研究

目的：为了快速，准确地检测环境中存在的致病菌，建立一种采用基因芯片技术对环境中常见致病检测和鉴定的实验方法。方法：采用合成后点样的方法把自行设计合成的一系列寡核苷酸探针固定在经过醛基化修饰的显微镜载玻片上，制成用于致病菌检测的基因芯片。结果：在相同的条件下，扩增了涉及12个菌属的151株细菌的165rDNA基因片段并与基因芯片杂交，经Scan-Array3000芯片阅读仪扫描得到特异性的交杂图，归纳这些杂交图，得到一套属（种）特异的典型杂交图谱。待检的样品菌与基因芯片进行杂交，得到的杂交结果与典型图谱比对即可判断出样品的种类。用这样的方法对从实际样品中分离的细菌进行检测，准确率表达了96．2％（25／26）。结论：该项技术的建立为今后更大规模的检测研究奠定了基础，可以推广应用于感染性疾病诊断，环境监测，食品卫生监督，商品检验检疫等领域。     

燃汽油机动车尾气致核酸分子氧化损伤效应研究

目的：通过研究燃汽油机动车尾气成分，及其对DNA分子的氧化损伤，在分子生物学水平上探讨燃汽油机动车尾气污染物的遗传毒性效应与机制。方法：以DNA加合物8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)作为DNA氧化损伤的生物学标志物，用高压液相色谱-电化学检测(HPLC-EC)法对污染物染毒后的DNA中8-OHdG进行定量检测，通过气质联用法(GC-MS)进行有机成分分析和原子吸收法(AAS)对其进行无机元素分析，并从化学组成成分的角度探讨DNA氧化损伤的分子机理。结果：在燃汽油机动车尾气的颗粒物和挥发性有机物中分别检出有机污染物85种和46种，无机元素7种和5种。燃汽油机动车尾气颗粒物和挥发性有机物均可在体外直接诱导DNA氧化损伤，尾气颗粒物还可诱导大鼠肺组织DNA氧化损伤，并呈现一定的剂量—反应关系。结论：污染物直接以及间接的氧化作用，源于含有醌类、多酚等具有自氧化作用的化合物，不需要任何生物活化系统，在体外就可产生大量的活性氧自由基，并在金属离子的催化作用下进攻DNA的碱基形成8-OHdG，产生遗传毒性效应，而8-OHdG是DNA氧化损伤的较好的效应标志物。     

微量检压技术测定硫酸镁对损伤大肠杆菌修复作用的初步探讨

水源水特别经消毒处理过的生活饮用水,往往存在损伤菌。这些不同程度损伤的细菌在营养条件不适宜时被抑制或致死,使菌数检出率降低,但在适宜营养条件下可     

饮水及水源卫生细菌学检验的研究概况

水是人类生活的基本环境条件,也是各种传染病传播的重要媒介,因此水质卫生细菌学检查对部队平战时的卫生保障有着重要的意义。水的卫生细菌学检查主要是应用微生物学的理论和实验方法,根据卫生学的观点研究水中微生物的数量、性质、活动规律及其对人体健康的影响,检验内容通常包括细菌总数和大肠菌群两项指标,仅在特殊情况下和必要时方需进行水中致病菌的检查。水中细菌总数的检查细菌总数是指ImL水样在营养琼脂培养基中于37℃,24小时培养后所生长的细菌菌落总数。水中细菌总数与水的污染状况有一定的关系,因此,可以结合大肠菌的检查对水源     

f_2噬菌体作为水中病毒消毒效果评价指标及检验方法的研究

本文通过f_2与指标菌、T_2噬菌体及Polio 1型和Echo 1型病毒对氯、“69-1”和有机碘消毒剂的耐力比较,表明f_2噬菌体对常用卤素消毒剂比指标菌及T_2噬菌体耐力要强,与肠道病毒相近,可以用作水中肠道病毒灭活初步评价的指标。采用JU型玻璃纤维滤纸吸附-洗脱法定量检验水中f_2噬菌体,通过加CaCl_2及调节水样pH至3.0～3.5,促进吸附作用,并以pH8～9.5％牛肉膏汤过滤洗脱,可浓集水样1L,对人工污染水平均回收率为34～102％,总平均58％。