益肝胶囊对刀豆蛋白A所致小鼠肝损伤JAK2/STAT3信号通路的影响

目的:研究益肝胶囊对刀豆蛋白A(ConA)所致小鼠肝损伤Janus蛋白酪氨酸蛋白激酶2/信号传导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路的影响及作用机制。方法:50只清洁级雄性小鼠按随机数字表法分为正常组、模型组及益肝胶囊高、中、低剂量组(剂量分别为1.872g/kg、0.936g/kg和0.468g/kg)每组各10只,连续灌胃给药14 d。末次给药后1h,除正常组外其余各组小鼠均一次性尾静脉注射ConA 20mg/kg诱导小鼠肝损伤,禁食不禁水8 h后处死。检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子а(TNF-а)和γ干扰素水平,Western blot法检测肝组织中细胞因子信号传导抑制因子3(SOCS-3)、p-JAK2和p-STAT3蛋白表达,HE染色观察肝组织的病理变化。结果:与模型组比较,益肝胶囊各剂量组小鼠血清中ALT、AST、IL-6、TNF-α和IFN-γ水平显著降低;肝组织中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达显著降低,SOCS-3蛋白表达显著升高,益肝胶囊各剂量组小鼠肝组织的病理损伤程度均有明显减轻。结论:益肝胶囊可能通过SOCS-3调控JAK2/STAT3信号通路以抑制炎症反应,从而起到肝保护作用。     

基于JAK2/STAT3信号通路研究七味净肝灵保肝作用机制

目的:基于JAK2/STAT3信号通路研究七味净肝灵的保肝作用机制。方法:将60只小鼠随机分为正常对照组、模型组、水飞蓟宾(0.5 g/kg)阳性对照组及七味净肝灵高(20 g/kg)、中(10 g/kg)、低(5 g/kg)剂量组,每组10只。各给药组小鼠均按相应剂量灌胃给药,正常对照组与模型组灌胃等体积注射用水,1次/d,共7 d。末次给药后,正常对照组腹腔注射花生油,其余各组均按10 mL/kg腹腔注射0.12%CCl4花生油建立急性肝损伤模型。禁食不禁水24 h后,测定血清ALT、AST、MDA、SOD、GSH-Px水平及肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平;Western blot检测肝组织SOCS-3、p-JAK2及p-STAT3蛋白表达;并观察肝组织病理改变。结果:与模型组比较,七味净肝灵各组小鼠血清MDA、AST及ALT水平显著降低,SOD及GSH-Px活性显著升高;肝组织TNF-α、IL-1β、IL-6水平及pJAK2、p-STAT3蛋白表达显著降低,SOCS-3表达显著升高(P0.05或P0.01);七味净肝灵组小鼠肝损伤程度明显减轻。结论:七味净肝灵有显著的保肝作用,其作用机制可能与抗氧化及通过SOCS-3调控JAK2/STAT3信号通路抑制炎症反应有关。     

白术内酯Ⅰ对自身免疫性肝损伤小鼠JAK/STAT信号通路的调节作用研究

目的基于Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)信号通路研究白术内酯Ⅰ对自身免疫性肝损伤小鼠的保护作用。方法将90只SPF级雄性小鼠随机分为正常对照组、肝损伤组、白术内酯Ⅰ低剂量组、白术内酯Ⅰ中剂量组、白术内酯Ⅰ高剂量组及泼尼松组,每组15只。除正常对照组,其余组小鼠尾静脉注射伴刀豆球蛋白A建立自身免疫性肝损伤模型。造模成功后,白术内酯Ⅰ低、中、高剂量组分别灌胃60 mg/kg、120 mg/kg、240 mg/kg的白术内酯Ⅰ,泼尼松组灌胃7.8 mg/kg的泼尼松,正常对照组和肝损伤组灌胃等量生理盐水,均1次/d,共灌胃21 d。使用全自动生化分析仪测定各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、总胆汁酸(TBA)、碱性磷酸酶(ALP)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理学改变,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肝组织中过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)水平,实时定量PCR测定肝组织中JAK2、STAT3、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-21(IL-21)、白细胞介素-6(IL-6) mRNA表达水平,Western blot法测定肝组织中JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平。结果与肝损伤组比较,白术内酯Ⅰ各剂量组和泼尼松组小鼠血清ALT、AST、TBil、TBA、ALP水平,肝组织中MDA、MPO水平,肝组织中JAK2、STAT3、IL-21、IL-6 mRNA表达水平和JAK2、STAT3、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3水平均明显降低,肝组织中CAT、GPx水平及IL-10 mRNA表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(P均0.05);且各指标随着白术内酯Ⅰ剂量的增加变化越明显,白术内酯Ⅰ各剂量组间两两比较差异均有统计学意义(P均0.05)。HE染色显示白术内酯Ⅰ各剂量组及泼尼松组小鼠肝组织空泡化、坏死明显轻于肝损伤组。结论白术内酯Ⅰ能够改善自身免疫性肝损伤小鼠肝功能,抑制肝组织氧化及炎症损伤,其机制可能与抑制JAK/STAT信号通路有关。     

利金方对慢性阻塞性肺疾病大鼠模型JAK2-STAT3-RORyt信号通路的影响北大核心CSCD

目的探讨利金方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症细胞抑制作用的影响。方法将105只SPF级Wistar大鼠随机分为7组:空白组、模型组、利金方低剂量组、利金方中剂量组、利金方高剂量组、JAK2抑制剂组、STAT3抑制剂组,每组15只。除空白组外,其余各组通过烟熏等复合因素建立COPD大鼠模型。造模结束后,空白组、模型组给予生理盐水灌胃,利金方低剂量(3 g/mL)组、利金方中剂量(10.5 g/mL)组、利金方高剂量(21 g/mL)组分别给予不同浓度利金方灌胃,JAK2抑制剂组、STAT3抑制剂组分别予酪氨酸磷酸化抑制剂(AG490)试剂和STAT3信号传导通路抑制剂(WP1193)试剂腹腔注射。给药7天后,分别检测大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达,肺组织中JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清与支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-17含量。结果与空白组比较,模型组肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达与肺组织中JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达,及血清与BALF中IL-17分泌均升高(P<0.05);与模型组比较,用药组大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达和肺组织JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清、BALF中IL-17含量均下降(P<0.05,P<0.01);与利金方低剂量组比较,利金方高剂量组大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达和肺组织JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清、BALF中IL-17含量均下降(P<0.01);与利金方中剂量组比较,利金方高剂量组大鼠肺组织中JAK2、STAT3、p-STAT3、RORyt蛋白表达和肺组织JAK2、STAT3、RORyt mRNA表达以及大鼠血清、BALF中IL-17含量均下降(P<0.01)。结论利金方能够通过调控细胞免疫中上游JAK2-STAT3-RORyt信号通路,抑制炎症细胞分泌从而起到抗免疫炎症作用。     

五脏温阳化瘀汤对动脉粥样硬化大鼠JAK2/STAT3信号转导及IL-6/STAT3信号通路影响

目的:分析五脏温阳化瘀汤对动脉粥样硬化(AS)大鼠JAK2/STAT3信号传导及IL-6/STAT3信号通路影响。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠45只,随机数字表法将大鼠分成3组,正常组、模型组与观察组,观察组与模型组制备AS模型,造模后观察组灌胃2ml/kg的五脏温阳化瘀汤药液,模型组与正常组则灌胃等剂量生理盐水,共进行6周。观察组大鼠腹主动脉病理状况,ELISA检测血清IL-6、SOCS、JAK2、STAT3、p-JAK2及p-STST3含量,实时荧光定量PCR检测各组大鼠肝脏组织内TLR4、NF-B、p38MAPK、IL-6、SOCS3、STAT3及JAK2mRNA表达。结果:和正常组相比,模型组组大鼠血清IL-6、SOCS3、STAT3及JAK2含量上升;和模型组相比,观察组大鼠血清IL-6SOCS3、STAT3及JAK2含量下降,差异均有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠血清p-STST3、p-JAK2、p-STAT3/STAT3及p-JAK2/JSK2含量上升;和模型组相比,观察组大鼠血清p-STST3、p-JAK2、p-STAT3/STAT3及p-JAK2/JSK2含量下降,差异均有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠肝脏内TLR4、NF-B、p38MAPK、IL-6、SOCS3、STAT3及JAK2mRNA表达上升;和模型组相比,观察组大鼠肝脏内TLR4、NF-B、p38MAPK、IL-6、SOCS3、STAT3及JAK2mRNA表达下降,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:五脏温阳化瘀汤经过抑制p38MAPK和JAK磷酸化,降低TLR4mRNA水平,减少IL-6分泌量,对JAK2/STAT3信号传导路径产生影响,改善AS大鼠症状。     

化瘀解毒方含药血清通过JAK2/STAT3通路抑制人肺癌H1299细胞侵袭迁移

目的:探讨化瘀解毒方含药血清(HJRMS)对人肺癌细胞(H1299细胞)的增殖、侵袭与迁移的影响及其机制。方法:通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测化瘀解毒方含药血清对肺癌细胞增殖的抑制能力;利用划痕实验和Transwell小室法检测肺癌细胞的侵袭与迁移作用;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测蛋白酪氨酸激酶2(JAK2),信号传导及转录激活因子3(STAT3),磷酸化JAK2(p-JAK2)和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测JAK2,STAT3 mRNA表达水平。结果:(1)与空白组比较,1%~16%化瘀解毒方含药血清分别处理24,48 h,H1299细胞增殖能力受到显著抑制(P<0.01),并呈一定的浓度依赖性。(2)H1299细胞在经化瘀解毒方含药血清处理24 h,与空白组比较,4%,8%化瘀解毒方含药血清组细胞划痕愈合能力受到抑制(P<0.05,P<0.01)。(3)在侵袭实验和迁移实验中,与空白组比较,2%,4%,8%化瘀解毒方含药血清肺癌细胞透膜数均明显减少(P<0.05,P<0.01)。(4)Western blot显示,与空白组比较,4%,8%化瘀解毒方含药血清组均对肺癌H1299细胞中JAK2/STAT3信号通路相关蛋白(JAK2,p-JAK2,STAT3,p-STAT3)表达具有抑制作用(P<0.05,P<0.01)。(5)与空白组比较,使用8%化瘀解毒方含药血清处理肺癌H1299细胞24 h,JAK2,STAT3mRNA表达水平均下降(P<0.05)。结论:化瘀解毒方含药血清能够抑制肺癌H1299细胞的增殖、侵袭与迁移,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关。     

苏木酮A通过抑制JAK2-STAT3信号通路发挥抗炎作用

目的 基于JAK2-STAT3信号通路探究苏木酮A(SA)在脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7细胞模型中的抗炎作用和机制。方法 MTT法检测苏木酮A、LPS、AG490对RAW264.7细胞活力的影响;建立LPS诱导的RAW264.7细胞炎性模型,通过ELISA法检测上清液中白细胞介素6(IL-6)的分泌水平;采用RT-PCR技术检测IL-6、酪氨酸激酶2(JAK2)和信号转导及转录激活因子3(STAT3)的mRNA表达;采用Western Blot法检测JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3及磷酸化STAT3(p-STAT3)的蛋白表达。结果 与空白对照组比较,模型组的IL-6分泌水平明显增加,IL-6、JAK2和STAT3的m RNA表达上调,p-JAK2和p-STAT3蛋白表达水平升高（均P<0.01）;与模型组比较,苏木酮A高剂量（5μg·mL-1）组明显降低了IL-6的含量,下调了IL-6、JAK2和STAT3的mRNA表达,抑制了p-JAK2和p-STAT3蛋白表达（均P<0.01）。结论 苏木酮A可能通过抑制JAK2-STAT3信号通路以抑制...     

艾灸对疲劳大鼠额叶皮层白细胞介素-6/信号转导及转录激活因子3信号通路的影响

目的:观察艾灸对疲劳大鼠额叶皮层白细胞介素-6(IL-6)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路的影响,揭示艾灸缓解疲劳的可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸组,每组7只。采用21 d负重力竭游泳法制备疲劳大鼠模型。艾灸组在造模的同时,采用自贴式小艾炷艾灸大鼠双侧"足三里"穴,每穴各灸3壮,隔日1次,共11次。ELISA法检测大鼠额叶皮层IL-6的含量,Western blot法检测大鼠额叶皮层JAK2、磷酸化JAK2(p-JAK2)、STAT3及磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白的表达。结果:造模第21天,艾灸组力竭游泳时间较模型组显著延长(P0.01)。与正常组比较,模型组额叶皮层IL-6含量、p-STAT3蛋白表达及p-STAT3/STAT3显著升高(P0.01);与模型组比较,艾灸组额叶皮层IL-6含量、p-STAT3蛋白表达及p-STAT3/STAT3显著降低(P0.05)。各组之间额叶皮层JAK2、p-JAK2、STAT3蛋白表达及p-JAK2/JAK2比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:艾灸可能通过抑制IL-6/STAT3信号通路活化,减轻炎性损伤,从而缓解疲劳。     

解毒护肝方对药物性肝损伤大鼠TLR3/TNF-α/JNK2信号通路的影响

目的观察解毒护肝方对药物性肝损伤大鼠TLR3/TNF-α/JNK2信号通路的影响。方法采用对乙酰氨基酚灌胃制作大鼠肝损伤模型。将实验大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、阳性对照组和解毒护肝方高、中、低剂量组,各给药组给予相应药液灌胃,正常组和模型组给予生理盐水灌胃。生化分析仪检测血清AST、ALT活性和总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)含量;RT-PCR和Western blot分别检测肝组织JNK2基因和蛋白的表达;酶标仪检测肝组织匀浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;免疫组化染色观察Toll样受体3(TLR3)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠ALT、AST、DBIL、TNF-α水平显著升高(P0.01),JNK2 mRNA和p-JNK2、TLR3蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,解毒护肝方中、低剂量组大鼠AST、ALT活性显著降低(P0.05,P0.01),解毒护肝方低剂量组大鼠DBIL含量显著降低(P0.05),解毒护肝方高剂量组大鼠TNF-α含量显著降低(P0.01),解毒护肝方高、中剂量组大鼠JNK mRNA和TLR3蛋白表达均显著下调(P0.05,P0.01),p-JNK2蛋白表达有降低趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。结论解毒护肝方对药物性肝损伤大鼠有明显的保护作用,以中、低剂量组效果最为明显,其机制可能与调控TLR3/TNF-α/JNK2信号通路有关。