下丘脑室旁核miR-132对心力衰竭大鼠外周交感神经兴奋性的影响

目的 观察下丘脑室旁核(PVN)灌注miR-132特异抑制剂对心力衰竭(HF)大鼠外周交感神经兴奋性、下丘脑谷氨酸(Glu)含量及心脏功能的影响。方法 雄性SD大鼠随机分为正常对照(Ctrl)+人工脑脊液(ACSF)组、HF+ACSF组、HF+miR-132抑制剂组。结扎心脏左冠状动脉前降支制造HF动物模型，HF+miR-132抑制剂组侧脑室插管向PVN内灌注miR-132特异抑制剂，Ctrl+ACSF组和HF+ACSF组灌注等量ACSF,灌注后4 w进行心脏功能指标检测；镜下观察心肌结构变化；检测肾脏交感神经放电(RSNA)、HF标志物脑钠肽(BNP)和外周交感神经兴奋标志物去甲肾上腺素(NE)在血浆中的含量；检测Glu在下丘脑PVN的含量。结果 与Ctrl+ACSF组相比，HF+ACSF组心功能指标恶化、外周交感神经兴奋性增强、下丘脑PVN Glu含量升高、心肌组织病理改变明显(P<0.05);HF+miR-132抑制剂组与HF+ACSF组比较，HF大鼠上述检测指标均显著改善(P<0.05)。结论 下丘脑PVN miR-132可影响HF大鼠的外周交感神经兴奋性和心脏功能...     

下丘脑室旁核氧化应激反应对心力衰竭时肾交感神经活动的影响

目的 探索心力衰竭(HF)时下丘脑室旁核(PVN)氧化应激反应是否能够增强肾交感神经(RSNA)活动,进而促进HF的发生发展.方法 取SD大鼠行冠脉结扎术制作心衰模型,对照组(SHAM)大鼠不结扎冠脉,两天后通过侧脑室插管给予tempol(氧自由基清除剂)或人工脑脊液(VEH).正常饲养4周后,测量各组大鼠血流动力学、RSNA、PVN区域NADPH亚基gp91 phox的表达.结果 HF组大鼠心功能明显低于SHAM组大鼠,RSNA增强、PVN区域NADPH亚基gp91 phox的表达增加.HF大鼠给予tempol治疗后心功能各项指标有所改善,RSNA减弱,PVN区域gp91 phox的表达降低,但达不到SHAM组水平.结论 心衰时PVN区域氧化应激反应增强与RSNA增加有关,降低该区域氧自由基水平可能延缓HF的发生发展过程.     

Beta3肾上腺素能受体对心力衰竭大鼠心室肌细胞钙通道的影响

目的探讨beta3肾上腺素能受体（beta3受体）对慢性心力衰竭（心衰）大鼠心室肌细胞钙通道的影响。方法 34只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham组）和心衰组。采用主动脉缩窄法建立慢性心衰大鼠模型。Sham组同样经麻醉、开腹及分离动脉等步骤,但不予动脉缩窄。笼养3个月。32只心衰组存活的大鼠随机分为心衰对照组（HF组）和BRL组。BRL组大鼠尾静脉注射beta3受体特异性激动剂BRL-37344、每周2次、连续4周。另外两组同时尾静脉注射相应剂量的生理盐水。测定大鼠心率（HR）、左心室收缩末压（LVESP）、左心室舒张末压（LVEDP）、左心室内压最大收缩和舒张速率（±dp/dtmax）。测定左心室质量指数（LVMI）。酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录钠通道电流;RTPCR检测心室肌细胞beta3受体、L型Ca²⁺通道mRNA表达。结果 （1）与Sham组比较,心衰组大鼠LVESP、dp/dtmax显著降低（P<0.01）,HR、LVEDP显著升高（P<0.01）。与HF组比较,BRL组LVESP、dp/dtmax显著降低（P<0.01）,HR、LVEDP显著升高（P<0.01）。BRL组大鼠的LVMI显著低于Sham组和HF组（P<0.01）。（2）大鼠心室肌细胞beta3受体表达心衰组明显高于Sham组（P<0.01）,BRL组明显高于HF组（P<0.01）。（3）与Sham组比较,HF组L型Ca²⁺通道电流(I_Ca,L)峰值明显减低（P<0.05）,BRL组I_Ca,L,峰值无明显变化（P>0.05）。于各组左心室肌细胞外液加入不同浓度的BRL-37344,Sham组的I_Ca,L峰值变化不明显（P>0.05）,HF组和BRL组I_Ca,L峰值明显增加（P<0.01）,且同等浓度下BRL组I_Ca,L峰值增加的更显著（P<0.01）。（4）Sham组与HF组L型Ca²⁺通道mRNA表达无明显差异（P>0.05）,BRL组表达明显增加。结论 BRL-37344可促进慢性心衰大鼠心室肌细胞beta3受体、L型Ca<     

3-氨基苯甲酰胺对大鼠心肌梗死后心力衰竭心肌细胞细胞因子、多聚ADP核糖聚合酶和凋亡诱导因子蛋白表达的影响

目的:研究多聚ADP核糖聚合酶(PARP)阻滞剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对心力衰竭(HF)大鼠心肌白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及对PARP和凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达的影响。方法:结扎135只成年雄性Wistar大鼠冠状动脉前降支6周制备HF模型,随机分为HF组、3-AB治疗组(3-AB组)和Sham组。治疗组应用3-AB治疗(30 mg/kg)。治疗2、4、6周后采用放射免疫法测定大鼠心肌IL-10、TNF-α水平,采用免疫组化方法检测心肌PARP和AIF蛋白表达变化。结果:IL-10水平变化:与Sham组相比,HF组各时间点明显增高(P<0.05),3-AB组较HF组各相同时间点明显降低(P<0.05);TNF-α水平:HF组各时间点均较Sham组明显增高(P<0.05),而3-AB组较HF组各相同时间点明显降低(P<0.05)。PARP蛋白表达:HF组各时间点均较Sham组增加(P<0.05),3-AB组各时间点均较HF组明显减少(P<0.05)。AIF蛋白表达:HF组各时间点较Sham组增加,3-AB组各时间点较HF组明显减少(P<0.05)。结论:3-AB可抑制IL-10、TNF-α的释放;抑制PARP和AIF蛋白表达,从而抑制炎症反应和细胞凋亡,对HF大鼠心肌细胞发挥保护作用。     

早期生活应激所致功能性慢性内脏痛对成年后大鼠抑郁样行为和下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素表达的影响

目的:观察大鼠新生期经历直结肠扩张所致功能性慢性内脏痛对成年后大鼠抑郁样行为及下丘脑室旁核(corticotropin releasing hormone,PVN)内促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin releasing hormone,CRH)表达的影响,探讨早期生活应激所致的功能性慢性内脏痛大鼠伴发抑郁样行为的可能作用机制.方法:将新生期♂SD大鼠20只,随机分成2组(n=10):假手术(Sham)组,新生期结直肠扩张(colorectal distension,CRD)组.CRD组大鼠出生后第8、10、12天,每天给予两次结直肠扩张,成年后即出生后第8-10周,检测腹壁撤退反射(abdominal withdrawal reflex,AWR)评分、痛阈以及腹外斜肌放电幅度,出生后第10-12周检测旷场实验、糖水偏好及强迫游泳等抑郁样行为变化,行为学检测后取结肠进行HE染色观察组织病理变化,取血浆检测皮质酮(cortisol,CORT)水平,取脑PVN进行荧光检测CRH表达水平.结果:(1)大鼠新生期经历直结肠扩张,成年后痛阈值下降,AWR评分、腹外斜肌放电幅度增高(P<0.05,P<0.05),结直肠组织均未见明显病理改变;(2)与Sham组相比,CRD组大鼠在5 min旷场实验中的穿格子线数、直立次数和总运动距离明显减少(均P<0.05),总休息时间明显增多(P<0.05),糖水消耗率下降(P<0.05)强迫游泳过程中不动时间增加(P<0.05);(3)与Sham组相比较,CRD组大鼠血浆中CORT的水平增高(P<0.05),PVN内CRH表达也增加(P<0.05).结论:早期生活应激致功能性慢性内脏痛大鼠有抑郁样行为改变,其机制可能与PVN内CRH表达增加,HPA轴功能失调有关.     

达格列净保护缺血性心力衰竭大鼠心脏的微小RNA表达谱系研究

目的探讨达格列净(DAPA)对结扎左前降支血管大鼠制作的心力衰竭(HF)模型的心脏微小RNA(miRNA)表达谱的影响。方法将9只雄性SD大鼠分为假手术组(Sham组,3只)、HF组(3只)、HF+达格列净组(HF+DAPA组,3只),手术后喂服达格列净5 mg/d持续8周,取心脏组织,观察心脏形态功能,用microarray技术筛选异常表达的miRNA,用RT-PCR验证筛选差异表达的miRNA。此外,12只构建缺血性HF模型大鼠,分4组,每组3只,通过鼠尾静脉分别注射miRNA激动剂(agomir)、抑制剂(antagomir)及空白对照(agomir-NC、antagomir-NC),8周后检测心脏功能,并分析预测差异表达miRNA影响心功能的可能机制。结果 (1)8周后3组大鼠的心脏形态及功能有明显差异,且miRNA表达也存在明显差异(均为P0.05);与HF组比较,HF+DAPA组低表达1.5倍以上的miRNA有341条,高表达1.5倍以上的miRNA有754条,低表达3倍以上的miRNA有25条,高表达3倍以上的miRNA有13条;(2)在差异表达3倍以上的miRNA中选择10条miRNA进行RT-PCR验证,结果与芯片数据趋势基本一致,其中差异表达5倍以上的有6条miRNA,包括rno-miR-3588、rno-miR-878、rno-miR-743a-3p、rno-miR-3584-3p、rno-miR-6317、rno-miR-671;(3) miR-671在HF+DAPA组中表达明显下降,在HF组中过表达时加重HF,低表达时可改善心脏功能(均为P0.05);(4)对差异表达的miRNA的靶基因进行GO分析、Pathway分析,发现差异表达miRNA潜在靶基因的生物学功能与代谢、细胞凋亡等过程密切相关,故对HF心肌细胞的能量代谢存在影响。结论达格列净影响缺血性HF大鼠心脏的miRNA表达,可能通过miRNA调控心肌细胞能量代谢从而改善预后。     

阻断中枢肿瘤坏死因子α合成对缺血诱发心力衰竭大鼠交感神经活动的影响

目的观察缺血诱发心力衰竭大鼠心血管中枢肿瘤坏死因子(TNF)α水平的变化,以及采用己酮可可碱(PTX)阻断中枢TNF-α合成对心力衰竭大鼠交感神经活动的影响。方法 48只雄性SD大鼠分为心力衰竭干预组(HF+PTX)、心力衰竭对照组(HF+VEH)、假手术干预组(SHAM+PTX)和假手术对照组(SHAM+VEH),每组12只。心力衰竭组采用冠状动脉结扎诱导心力衰竭,假手术组仅进行手术而不造成缺血状态。干预组通过侧脑室插管给予PTX,对照组给予人工脑脊液。4周后各组大鼠分别进行肾交感神经活动记录及血流动力学、右心室/体质量比值、肺/体质量比值的测量。免疫印迹法检测下丘脑室旁核TNF-α表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆去甲肾上腺素及细胞因子水平变化。结果 HF+VEH组与SHAM+VEH组相比,下丘脑室旁核中TNF-α水平升高,交感神经活动增强,左室舒张末压(LVEDP)及右心室/体质量比值、肺/体质量比值均明显升高,血浆去甲肾上腺素水平升高(均P<0.05)。左室最大上升速率和最大下降速率(LV±dp/dt_(max))明显降低(P<0.05)、HF+PTX组与HF+VEH组相比,中枢TNF-α水平下降,交感神经活动减弱,心功能改善(均P<0.05),右心室/体质量比值、肺/体质量比值均减小(P<0.05)。结论心力衰竭大鼠中枢TNF-α水平升高,交感神经活动增强,阻断中枢TNF-α合成可在一定程度上降低交感神经兴奋性,改善心力衰竭大鼠心功能。     

miR-132在慢性心力衰竭大鼠下丘脑室旁核表达

目的 建立慢性心力衰竭(CHF)大鼠模型,分析并观察微小RNA(miR)-132在下丘脑室旁核(PVN)中的表达特点及作用.方法 36只SD大鼠依据随机数字原则分成正常对照(Ctrl)组、假手术(Sham)组、CHF组各12只.以左冠状动脉前降支结扎的手术模式建立CHF模型,判断成功的标志是借助BL-420生物信号系统...     

依普利酮对心力衰竭大鼠下丘脑室旁核内炎性因子的抑制作用

目的探讨依普利酮对心力衰竭大鼠下丘脑室旁核(PVN)内炎性因子的抑制作用。方法 SD大鼠结扎冠状动脉前降支造成急性心肌梗死后心力衰竭模型。其中一组给予核因子(NF)-κB拮抗剂PDTC灌胃(0.2 g/kg);另一组给予依普利酮(30 mg/kg);第3组以相同体积的蒸馏水灌胃作为对照。6 w后测量心脏功能,采集PVN和外周血标本,检测炎性细胞因子等指标。结果依普利酮与PDTC干预的大鼠心功能较心力衰竭组明显改善。心力衰竭组神经元活性增强,PDTC和依普利酮可显著降低PVN内神经元活性。对照组PVN内肿瘤坏死因子(TNF)-α、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、NF-κB表达明显升高(P0.05)。依普利酮与PDTC干预的大鼠与心力衰竭组大鼠相比这些指标表达减少(P0.05)。心力衰竭组外周血醛固酮(ALD)、去甲肾上腺素(NE)、TNF-α水平升高。依普利酮、PDTC治疗组ALD、NE、TNF-α水平较对照组明显降低。结论依普利酮可以改善大鼠心功能,可能与其抑制PVN内NF-κB表达,进而抑制PVN内炎性反应有关。     

miR-126在大鼠心肌缺血再灌注早期的表达及抗凋亡作用

目的 探讨miR-126在大鼠心肌缺血再灌注（I/R）早期的表达及抗凋亡作用。方法 48只SD大鼠随机分为假手术（Sham）、I/R 2 h、I/R 4 h、I/R 6 h组,每组12只大鼠,比较各组缺血区心肌细胞凋亡蛋白水平及miR-126表达水平。构建重组腺病毒rAAV9-ZsGreen-pre-miR-126载体,24只SD大鼠随机分为：⑤I/R组：大鼠转染空白病毒后I/R 2 h;⑥I/R miR-126组：大鼠转染 rAAV9-ZsGreen-premiR-126 后 I/R 2 h,再次比较各组缺血区心肌细胞凋亡蛋白水平。结果 与Sham组相比,I/R 2 h、4 h、6 h组大鼠心肌缺血区miR-126表达进行性降低（P<0.05）,非缺血区miR-126表达进行性升高（P<0.05）;心肌凋亡蛋白BAX及CASPASE-3表达水平升高（P<0.05）,抗凋亡蛋白BCL-2表达水平降低（P<0.05）;与I/R组相比,I/R miR-126干预组可明显减少心肌凋亡蛋白BAX及CASPASE-3表达水平并增加抗凋亡蛋白BCL-2表达水平（P<0.05）。结论 在I/R早期大鼠心肌缺血区miR-126表达随再灌注时间延长进行性下降,并伴随心肌细胞凋亡进展;过表达miR-126可减少I/R导致的心肌细胞凋亡,发挥保护心功能的作用。     

miR-132在动脉粥样硬化中的表达及对缺氧诱导的血管内皮细胞增殖凋亡的影响

目的探讨miR-132在动脉粥样硬化表达及对缺氧诱导的血管内皮细胞增殖凋亡的影响。方法 RT-PCR检测动脉粥样硬化中miR-132的表达;空转染组、阴性对照组和miR-132抑制剂组转染人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),转染48 h后RT-PCR检测各组细胞中miR-132 mRNA表达;后续实验分为正常培养组、缺氧组、缺氧+miR-132抑制剂组,各组细胞培养48 h后,CCK8及流式细胞仪分别检测细胞的增殖及凋亡情况;Western印迹检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)3、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达。结果 miR-132在动脉硬化组中的表达显著高于对照组(P0.05);转染组miR-132 mRNA表达显著低于空转染组(P0.05);缺氧组和缺氧+miR-132抑制剂组OD_(490)值及PI3K、p-AKT蛋白表达均显著低于正常培养组(P0.05),细胞凋亡率及Cleaved Caspase3蛋白表达显著高于正常培养组(P0.05),缺氧+miR-132抑制剂组OD_(490)值及PI3K、p-AKT蛋白表达显著高于缺氧组,细胞凋亡率及Cleaved Caspase3蛋白表达显著低于缺氧组(P0.05)。结论 miR-132在动脉粥样硬化中高表达,抑制其表达可促进血管内皮细胞增殖及降低细胞的凋亡,其机制与激活PI3K/AKT信号通路有关。     

下丘脑室旁核炎性细胞因子在依普利酮改善心力衰竭中的作用

目的探讨下丘脑室旁核(PVN)炎性细胞因子在依普利酮(EPL)改善心力衰竭中的作用。方法Wistar大鼠分为假手术组(n=6)、模型组(n=10)、吡咯烷二硫基甲酸盐(PDTC)组(n=10)、依普利酮组(n=10)。结扎左冠状动脉前降支诱导急性心肌梗死后心力衰竭,根据分组情况分别给予PDTC[(150 mg/(kg·d)]、依普利酮[30 mg/(kg·d)]和清洁蒸馏水灌胃,假手术组只在相同位置穿线而不结扎。6周后进行血流动力学测定,留取下丘脑、血浆标本,检测PVN内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB/p65(NF-κB/p65)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的表达,并检测血浆TNF-α、去甲肾上腺素(NE)、醛固酮(ALD)水平。结果依普利酮和PDTC干预后大鼠心功能较模型组明显改善。模型组血浆ALD、NE、TNF-α水平显著升高,而依普利酮和PDTC干预后ALD、NE、TNF-α水平降低(P0.05)。模型组PVN内CRH、AngⅡ表达显著增多,依普利酮和PDTC干预后PVN内CRH、AngⅡ表达显著减少(P0.05),NF-κB/p65在依普利酮组和PDTC组的表达较模型组显著降低(P0.05)。依普利酮、PDTC可降低PVN内CRH阳性神经元表达。结论心力衰竭时大鼠PVN内炎性细胞因子表达增多,依普利酮可以改善心力衰竭大鼠心功能,与抑制PVN内炎性细胞因子过表达有关。     

大蒜素通过调控SIRT3/PPARγ信号通路促进心衰大鼠血管再生和心功能改善

目的探究大蒜素通过调控Sirtuins3(SIRT3)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)信号通路促进心力衰竭(HF)大鼠血管再生和心功能改善的机制。方法 HF大鼠模型通过腹主动脉结扎得到。将HF模型大鼠随机分为HF组、HF+低剂量大蒜素组和HF+高剂量大蒜素组(n=15)。同期健康大鼠15只作为对照组。大蒜素的灌胃剂量分别为15 mg/kg·d和30 mg/kg·d。分析大蒜素对HF大鼠心肌损伤、纤维化、凋亡和血管生成的影响。比较各组SIRT3和PPARγ mRNA和蛋白的表达量。结果四组大鼠的上述指标比较差异显著(P0.05)。HF组的射血分数、血管数目、SIRT3和PPARγ mRNA水平显著低于对照组(P0.05);左室舒张末期内径(LVEDD)和左室收缩末期内径(LVESD)、纤维化水平、凋亡指数显著高于对照组(P0.05)。HF+低剂量大蒜素组的射血分数、血管数目、SIRT3和PPARγ mRNA水平显著高于HF组;LVEDD和LVESD、纤维化水平、凋亡指数显著低于HF组(P0.05)。HF+高剂量大蒜素组的射血分数、血管数目、SIRT3和PPARγ mRNA水平显著高于HF组和HF+低剂量大蒜素组;LVEDD和LVESD、纤维化水平、凋亡指数显著低于HF组和HF+低剂量大蒜素组(P0.05)。结论大蒜素可能通过剂量依赖性的诱SIRT3/PPARγ通路促进血管生成,从而抑制心肌细胞凋亡和纤维化,提高心脏射血功能。     

扩张型心肌病miR-133a、miR-210、TGF-β检测及其与免疫指标相关性分析

目的 分析扩张型心肌病患者外周血微小RNA(miR)-133a、miR-210、转化生长因子-β(TGF-β)表达状况及其与免疫指标相关性。方法 选取金华市人民医院于2020年1月—2023年1月期间收治的98例扩张型心肌病患者作为研究组，98例健康人作为对照组。检测miR-133a、miR-210、TGF-β1、TGF-β2表达量及免疫指标CD4⁺T细胞表面CD25⁺、CD69⁺表达状况，分析在两组中的差异及miR-133a、miR-210、TGF-β1、TGF-β2与扩张型心肌病患者临床特征、免疫指标的关系，明确miR-133a、miR-210、TGF-β1、TGF-β2对扩张型心肌病的诊断价值。结果 研究组miR-133a表达量低于对照组，miR-210、TGF-β1、TGF-β2表达量高于对照组(P<0.05)。miR-133a在心功能Ⅲ级～Ⅳ级、有心房颤动、有心力衰竭患者中表达降低，miR-210、TGF-β1、TGF-β2在心功能Ⅲ级～Ⅳ级、有心房颤动、有心力衰竭患者中表达升高(P<0.05)。研...     

下丘脑弓状核Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响

目的:探讨下丘脑弓状核(arcuatenucleus,ARC)注射Ghrelin对糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)大鼠胃运动的调控作用.方法:240只Wistar大鼠按数字表法随机分为10个大组(每组24只):对照组(C)、生理盐水组(NS)、Ghrelin低剂量组(L)、Ghrelin高剂量组(H)、高剂量Ghrelin合并D-Lys3-GHRP-6(DLS)组(H+D)、糖尿病胃轻瘫大鼠组(DGP)、生理盐水DGP组(DGP+NS)、Ghrelin低剂量DGP组(DGP+L)、Ghrelin高剂量DGP组(DGP+H)和高剂量Ghrelin合并D-Lys3-GHRP-6DGP组(DGP+H+D).采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病大鼠模型;荧光免疫组织化学染色方法观察糖尿病大鼠下丘脑ARC中Ghrelin受体(GHS-R)表达变化;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(real-timePCR)进一步检测GHS-RmRNA在糖尿病大鼠ARC中表达变化;采用在体胃运动记录方法,观察下丘脑ARC注射Ghrelin对糖尿病大鼠胃运动的影响.结果:在DGP大鼠ARC中GHS-R免疫阳性细胞数(10.0/mm2±2.1/mm2)和mRNA相对含量(GHS-R1a/-actin:0.48±0.13)与正常大鼠(3.0/mm2±0.7/mm2,0.21±0.10)比较均显著降低(P<0.05).正常清醒大鼠胃运动幅度为8.14g±1.58g,频率为5.18/min±0.61/min.下丘脑ARC微量注射0.05nmol和0.5nmolGhrelin,胃运动幅度呈量效依赖性增加(L:14.6g±2.2gvsNS:8.14g±1.58g,P<0.05;H:22.28g±4.10gvsNS:8.14g±1.58g,P<0.01,vsL:14.6g±2.2g,P<0.05),胃收缩频率明显加快(L:7.45/min±0.87/minvsNS:5.18/min±0.61/min,P<0.05;H:10.98/min±1.03/minvsNS:5.18/min±0.61/min,P<0.01;vsL:7.45/min±0.87/min,P<0.05).DGP大鼠胃运动幅度明显下降(2.21g±0.89gvs8.14g±1.58g,P<0.05),收缩频率明显降低(1.81/min±0.23/minvs5.18/min±0.61/min,P<0.05).下丘脑ARC微量注射0.5nmolGhrelin,DGP大鼠胃运动幅度显著增加(5.04g±1.11gvs2.14g±0.23g,P<0.05),收缩频率明显加快(3.81/min±0.43/minvs1.80/min±0.19/min,P<0.05).GHS-R阻断剂D-Lys3-GHRP-6可完全阻断Ghrelin此作用.结论:糖尿病大鼠胃运动障碍可能与下丘脑GHS-R表达减少有关;Ghrelin在ARC参与糖尿病大鼠胃轻瘫的调控,该作用可能通过GHS-R实现.     

冠心病合并慢性心力衰竭病人血清鸢尾素、微小RNA-133与心功能指标的相关性

目的探讨血清鸢尾素、微小RNA-133(miR-133)与冠心病(CHD)合并慢性心力衰竭(CHF)病人心功能指标的相关性。方法选取2016年5月—2018年5月我院心内科收治的CHD合并CHF病人109例作为CHD+CHF组;选取同期我院收治的CHD稳定型心绞痛心功能代偿病人50例作为CHD组;选取同期到我院进行健康体检者50名作为对照组。比较3组间血清鸢尾素、miR-133a、miR-133b表达量,并分析血清鸢尾素、miR-133a、miR-133b与心功能指标的相关性。结果 CHD+CHF组和CHD组血清鸢尾素明显低于对照组,miR-133a、miR-133b表达量明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);CHD+CHF组血清鸢尾素明显低于CHD组,miR-133a、miR-133b表达量明显高于CHD组,差异均有统计学意义(P0.05)。随着心功能分级的升高,CHD+CHF组病人血清鸢尾素逐渐降低,miR-133a、miR-133b表达量逐渐升高,差异均有统计学意义(P0.05)。CHD+CHF组和CHD组左室射血分数(LVEF)明显低于对照组,左室舒张末期内径(LVEDD)明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);CHD+CHF组LVEF明显低于CHD组,LVEDD明显高于CHD组(P0.05)。随着心功能分级的升高,LVEF逐渐降低,LVEDD逐渐升高,差异均有统计学意义(P0.05)。Pearson相关性分析显示,鸢尾素与LVEF呈正相关(r=0.601,P0.01),与LVEDD呈负相关(r=-0.562,P0.01);miR-133a、miR-133b与LVEF呈负相关(r=-0.481,P0.01;r=-0.456,P0.01),与LVEDD呈正相关(r=0.437,P0.01;r=0.422,P0.01)。结论血清鸢尾素、miR-133可有效反映CHD合并CHF病人的心功能情况,有利于评估心室重构情况。     

重组人纽兰格林对心力衰竭大鼠线粒体功能的影响

目的观察重组人纽兰格林(neuregulin,NRG)对心力衰竭(HF)大鼠线粒体功能的影响,并探讨其机制。方法雄性Wister大鼠40只,结扎大鼠左冠状动脉建立缺血性HF模型。4周后,建模成功的24只大鼠随机分为NRG组[NRG 10μg/(kg·d)],AG825组[AG825 50μg/(kg·d)]及HF组,各组8只,另6只大鼠作为假手术组(Sham组)。各组干预10 d,于实验结束时提取左心室梗死区外心肌线粒体,测定线粒体膜电位(MMP)、呼吸控制率(RCR)及组织ATP酶活性,同时测定活性氧水平及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)mRNA水平。结果与Sham组比较,HF组大鼠线粒体功能受损,MMP下降、RCR及ATP酶活性降低,活性氧生成增加,GSHPX mRNA表达减少。与HF组比较,NRG组大鼠MMP增高,线粒体RCR改善,ATP酶活性增多,活性氧生成减少,GSHPXmRNA表达增加,而AG825组RCR、MMP和ATP酶活性均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 NRG明显改善衰竭大鼠线粒体功能,NRG对衰竭心肌线粒体功能的保护作用,可能与其抗氧化应激作用有关。     

JNK在室旁核内微量注射催产素对大鼠胃缺血-再灌注调控中的作用

目的: 观察胃黏膜细胞c-Jun氨基末端激酶(JNK)在室旁核(PVN)内微量注射催产素(OT)对大鼠胃缺血-再灌注(GI-R)损伤调控中的作用及机制.方法: 将SD大鼠随机分为4组: vehicle组, OT组, OT+atosiban组, atosiban组. 采用夹闭大鼠腹腔动脉30 min, 去除动脉夹再灌注1 h的GI-R损伤模型, 于单侧PVN微量注射OT. 运用免疫组织化学及免疫印迹等实验技术, 观察了PVN微量注射OT对GI-R后胃黏膜细胞p-JNK、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响.结果: 与vehicle组相比, PVN内微量注射OT(600ng)能明显减少GI-R后胃黏膜细胞p-JNK及Bax的表达(均P<0.01), 增加Bcl-2的表达( P<0.01).侧脑室给予OT受体特异性拮抗剂atosiban后,可取消OT的效应, 与OT组比较, 差异有统计学意义( F = 56.33, P<0.01;F = 145.2, P<0.01, F =49.32, P<0.01), 胃黏膜细胞p-JNK及Bax的表达较OT组明显增加, 而Bcl-2的表达减少.结论: PVN微量注射OT减轻GI-R损伤的调控机制, 在胃黏膜局部是通过抑制胃黏膜细胞p-JNK和Bax的表达, 促进Bcl-2的表达实现的.     

miR-132-3p靶向调控Gab2抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭分子机制的研究

背景 miR-132-3p在肿瘤中呈低表达,但miR-132-3p在胃癌(gastric cancer,GC)发生过程中的调控机制尚未阐明.Starbase靶基因预测显示Gab2可能是miR-132-3p的靶基因.本研究假设miR-132-3p可能通过调控Gab2表达从而影响GC细胞增殖、迁移及侵袭.目的探讨miR-132-3p对Gab2表达的调控作用及其对GC细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative realtime polymerase chain reaction,qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测正常胃黏膜上皮细胞系GES1与人GC细胞系SGC-7901、MKN45、BGC-823中miR-132-3p、Gab2的表达水平;以BGC-823细胞为研究对象,利用脂质体转染法分别将miR-132-3p模拟物(miR-132-3p组)、阴性对照(miR-NC组)、miR-132-3p与pcDNA(miR-132-3p+pcDNA组)、miR-132-3p与pc DNA-Gab2(miR-132-3p+pcDNA-Gab2组)转染至BGC-823细胞,通过qRT-PCR、Western blot验证转染效果.甲基噻唑基四唑检测各组细胞存活率; Transwell小室实验检测各组细胞迁移及侵袭;Starbase预测Gab2为miR-132-3p的靶基因,分别将野生型Gab2基因3’UTR荧光素酶报告基因载体与miR-132-3p靶序列突变型载体及相应的miRNA转染至BGC-823细胞,双荧光素酶报告实验检测荧光素酶活性; Western blot检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、P21、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达量.结果与GES1细胞相比, SGC-7901、MKN45、BGC-823中miR-132-3p的表达水平显著降低(P0.05), Gab2的表达水平显著升高(P 0.05);与miR-NC组相比,miR-132-3p组细胞存活率显著降低(P 0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P0.05), Cyclin D1、N-cadherin蛋白表达水平显著降低(P 0.05),P21、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P 0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-132-3p能够靶向调控Gab2基因;与miR-132-3p+pcDNA组相比, miR-132-3p+pcDNA-Gab2组细胞存活率显著升高(P 0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著增多(P0.05), Cyclin D1、N-cadherin蛋白表达水平显著升高(P0.05), P21、E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P0.05).结论 miR-132-3p能够通过靶向调控Gab2而抑制GC细胞增殖、迁移及侵袭.     

室旁核TLR4阻断改善2型糖尿病大鼠糖代谢及机制

目的 聚焦于下丘脑室旁核(PVN)区域，研究中枢Toll样受体(TLR)4阻断对2型糖尿病(T2DM)大鼠糖代谢的影响及探讨相应影响机制。方法 将SD大鼠随机分为：正常对照(NC+PVN vehicle)组、正常干预(NC+PVN TAK-242)组、糖尿病(DM+PVN vehicle)组、糖尿病干预(DM+PVN TAK-242)组。高糖高脂联合小剂量链脲佐菌素(STZ)方法建立T2DM大鼠模型，皮下植入室旁核微型渗透泵(28 d,输注速率0.11 L/h)给予TAK-242(一种TLR4特异性抑制剂)和人工脑脊液；各组大鼠监测体重、空腹血糖(FBG)、葡萄糖耐量试验(GTT)、胰岛素耐量试验(ITT)和丙酮酸耐量试验(PTT)评估体内糖代谢情况；肾交感神经放电检测交感神经活性；Western印迹检测还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶(NOX)4、Cu-Zn超氧化物歧化酶(SOD)、NF-κB通路激活标志物(TH)、谷氨酸脱羧酶(GAD)67蛋白表达；二氢乙淀(DHE)检测PVN中活性氧簇(ROS)水平；免疫荧光检测PVN中TLR4、TH阳性神经元表达数量；免疫组化...