Forskolin对1，25－二羟维生素D_3受体mRNA表达的调节及其生物学意义

目的：研究腺苷酸环化酶激活剂ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（Ｆ）对１，２５－二羟维生素Ｄ３［１，２５（ＯＨ）２Ｄ３］受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ表达的调节作用及其可能的生物学意义。方法：以人原始巨核白血病细胞系（ＨＩＭｅｇ）为模型，ＶＤＲｍＲＮＡ的检测采用定量逆转录－聚合酶链反应；细胞增殖实验采用悬浮培养系统及甲基纤维素培养系统。结果：Ｆ对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ的表达具有向上调节作用，且有明显的时间依赖性特点；Ｆ本身虽然对ＨＩＭｅｇ细胞的增殖及分化过程无明显影响，但却可以显著地加强１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对该细胞系的作用，具体表现在：当Ｆ同时存在时，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＨＩＭｅｇ细胞的增殖过程和克隆形成率的抑制作用更为明显，对ＨＩＭｅｇ细胞分化过程的诱导作用亦更为显著；同时，１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＨＩＭｅｇ细胞周期分布的影响也更加突出。结论：Ｆ对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ具有向上调节作用，并伴有１，２５（ＯＨ）２Ｄ３生物学效应的提高，说明下对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ的向上调节作用具有生物学意义。     

Forskolin对1,25—二羟维生素D2受体mRNA表达的调节及其生物…

目的；研究腺苷酸环化酶激活剂ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ（Ｆ）对１，２５－二羟维生素Ｄ３「１，２５（ＯＨ）２Ｄ３」受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ表达的调节作用人可能的生物学意义。方法；以人原始巨核白血病细胞系（Ｈ１Ｍｅｇ）为模型，ＶＤＲｍＲＮＡ的检测采用定量逆转录－聚合酶链反应；细胞增殖实验采用悬浮培养系统及甲基繁华等比例纱培养系统。结果；Ｆ对ＨＩＭｅｇ细胞ＶＤＲｍＲＮＡ的表达具有向上调节作用。具有明显的时间依赖性     

1，25（OH）_2D_3及其类似物调节人原始巨核白血病细胞系增殖分化的机制

１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其两种新型类似物（ＭＣ９０３和ＥＢ１０８９）对人原始巨核白血病细胞系ＨＩＭｅｇ的增殖分化过程有重要调节作用。本研究利用分子杂交及逆转录－聚合酶链反应首次证明，ＨＩＭｅｇ细胞中有１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ的表达，强烈提示１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３对ＨＩＭｅｇ细胞的作用是由ＶＤＲ介导的。同时还发现，１，２５（ＯＨ）_２Ｄ_３及其类似物、维甲酸在调节ＨＩＭｅｇ细胞增殖分化过程中，Ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平迅速降低，６ｈ时已基本达到最低水平，提示这些作用因子对ＨＩＭｅｇ细胞的抑制增殖和诱导分化作用是和Ｃ－ｍｙｃ癌基因的表达改变密切相关的。     

维甲酸和1,25二羟维生素D3对LoVo细胞株细胞周期的影响

目的 观察全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）和１,２５－二羟维生素Ｄ３对大肠部细胞株ＬｏＶｏ细胞周期的影响。方法 流式细胞术测定细胞周期的分布。结果 ＡＴＡＲ和１,４５－二羟维生素Ｄ３使ＬｏＶｏ阻止在Ｇ０／Ｇ１期,未发现明显的亚Ｇ１峰。结论 单独或联合使用ＡＲＴＡ和１,２５－二羟维生素Ｄ３均具有诱导分化ＬｏＶｏ细胞的作用,这种诱导分化与细胞凋亡无关。     

地塞米松对内毒素损伤ET—1mRNA表达的影响

目的；观察地塞米松对内纱血症引起肺组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达的影响，方法：选用ＳＤ大鼠２１只，等分为三组：生理盐水组（Ｃ组）；内毒素组（Ｌ组）ＬＰＳ５ｍｇ／ｋｇ静注；地塞米松组，静注ＬＰＳ５ｍｇ／ｋｇ前１ｈ先给地塞米松（Ｄ组）３ｍｇ／ｋｇ静注动物观察５ｈ处于进行研究。用ＲＴ－ＰＣＲ法测定肺组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ的变化。结果：Ｌ组肺组织ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达比Ｃ组但无统计学差异，Ｄ组肺组织病理损害明显减轻     

喉癌患者多药耐药基因,多药耐药相关蛋白基因的表达及临床意义

应用逆转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,检测了３５例喉癌患者ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ、ＭＲＰｍＲＮＡ基因的表达,同时,应用免疫组化ＳＡＢＣ法检测了６１例患者ＭＤＲ－１基因产物Ｐ－ｇｐ。喉癌组织中ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ及Ｐ－ｇｐ的阳性表达率分别为３７．１％（１３／３５）和３４．４％（２１／６１）;３５例ＲＴ－ＰＣＲ检测标本中,两项指标间有一定的相关性（Ｐ〈０．０１）。晚期患者（Ｔ３－４,１８／１０）,     

3种mRNA检测方法比较

目的：比较３种检测ｍＲＮＡ表达的方法。方法：采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ，ＲＴ－ＰＣＲ，原全杂交法检测基因ｍＲＮＡ的表达。结果及结论：在使用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交进行定量分析时，关键因素有：①ＲＮＡ的质量；②探针标记效率；③洗膜的控制。ＲＴ－ＰＣＲ检测很难用于定量分析。原位杂交法可进行细胞内ｍＲＮＡ的绝对含量。将这些方法结合使用，可全面了解基因ｍＲＮＡ的表达。     

自发性高血压大鼠血管紧张素Ⅱ－1型受体基因的表达

应用反转录一聚合酶链式反应（ＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，亚克隆出大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ－１型受体（ＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡＴｙｐｅ－１Ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＡＴＲ１）ｃＤＮＡ，并以此为探针，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析和定量ＰＣＲ方法，测定大鼠不同组织中ＡＴＲ１ｍＲＮＡ的分布，证明ＡＴＲ１ｍＲＮＡ广泛存在于不同组织中，其中以肾脏含量为最高，其次为心脏和小脑；自发性高血压大鼠（ＳｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅＲａｔ，ＳＨＲ）肾、心组织中ＡＴＲ１ｍＲＮＡ较正常对照大鼠（Ｗｉｓｔａｒ－ＫｙｏｔｏＲａｔ，ＷＫＹ）明显下隆。     

1,25（OH）2D3及其类似物调节人原始巨核白血病细胞系增殖分…

１，２５（ＯＨ）２Ｄ３及其两种新型类似物对人原始巨核白血清细胞系ＨＩＭｅｇ的增殖分化过程有重要调节作用。本研究利用分子杂交及逆转灵－聚合酶链反应首次证明，ＨＩＭｅｇ细胞中有１，２５（ＯＨ）２Ｄ３受体（ＶＤＲ）ｍＲＮＡ的表达，强烈提示１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对ＨＩＭｅｇ细胞的作用是由ＶＤＲ介导的。     

RT-PCR法测定胎鼠大脑皮质内皮素-1 Mrna

目的 建立一种检测先天性人巨细胞病毒感染胎鼠大脑皮质内皮素－１（ＥＴ－１）ｍＲＮＡ的方法。方法 采用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法并对实验条件进行优化。建立稳定的检测体系后,对胎鼠大脑皮质ＥＴ－１ ｍＲＮＡ进行检测,并以ＲＴ－ＰＣＲ后产物的ＯＤ值来反映起初ＥＴ－１ ｍＲＮＡ的模板相对含量。结果 在一定ＴａｐＤＮＡ酶、镁离子浓度、引物浓度等条件下,ＥＴ－１ ｍＲＮＡ经ＲＴ－ＰＣＲ扩增后产     

卡介苗诱导人肺腺上皮细胞hBD—1 mRNA的增强表达

使用热灭活的卡介苗刺激培养的人肺腺上皮细胞（ＳＰＣ－Ａ－１）,利用逆转录聚合物酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析,证实了卡介苗能诱导ＳＰＣ－Ａ－１细胞β－防御素－１基因（ｈＢＤ－１）的增强表达。卡介苗菌量和刺激时间与ＳＰＣ－Ａ－１细胞ｈＢＤ－１基因表达量的关系曲线显示,ｈＢＤ－１ ｍＲＮＡ在人肺腺上皮细胞的增强表达在一定范围内表现为具刺激剂量和时间依赖关系。实验为开发增强粘膜抗菌     

高氟区青少年血清25－羟维生素D水平对骨龄延迟的影响

本文调查了６１名高氟区和４８名非高氟区７～１８岁青少年的骨龄，并测定了骨龄正常组和延迟组血清２５－羟维生素Ｄ（２５－ＯＨＤ）及血清钙、磷水平。结果发现，高氟区青少年骨龄延迟率显著高于非高氟区；高氟区骨龄延迟组的血清２５－ＯＨＤ水平显著低于该地骨龄正常组；高氟区２５－ＯＨＤ的水平低于非高氟区。提示，高氟区青少年骨龄延迟与血清２５－ＯＨＤ水平低有关。     

1α,25（OH）2维生素D3受体的分离和部分纯化

采用小牛胸腺提取１α，２５（ＯＨ）２维生素Ｄ３受体，基于未标记的和氚标记的１α，２５（ＯＨ）２维生素Ｄ３对其高特异性和高亲和力的受体发生竞争结合作用，可用以建立血清中１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３含量的放射受体测定法。本室用一种简便易行的方法自胸腺制备了１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３受体［１］，经放射受体测定法分析，该法制备的刚刚出生小公牛胸腺受体，其用量与标记物量匹配时，Ｂｏ可达４８．８％。试用于放射受体分析，血清１α，２５（ＯＨ）２Ｄ３的测定范围在３．９～６４．５ｐｇ／管，灵敏度为３．９ｐｇ／管，且样品前处理无需高效液相色谱［２］。     

78例绝经后骨质疏松症的诊断治疗

通过掌握绝经后骨质疏松症的诊治规律，为今后开展老年妇女保健工作提供有益的依据。选择１９９２．９～１９９４．１０在我院就诊的７８例绝经３～２８ａ有骨痛症状病员，测定血清促卵泡素（ＦＳＨ）、促黄体素（ＬＨ）、雌二醇（Ｅ_２）、骨钙素（ＢＧＰ）、尿羟脯胺酸（ＯＨＰＲＯＬ）、吡啶并酚（Ｐｙｄ）、尿钙（Ｃａ）、肌酐（Ｃｒ）；行双光子（ＤＥＸＡ）、骨密度（ＢＭＤ）检查。提供降钙素及１α－２５（ＯＨ）Ｄ_３治疗３个月，判断疗效。结果表示：与对照组相比，病员血清Ｅ２、ＢＧＰ、ＢＭＤ值下降（Ｐ＜０．０５），血ＦＳＨ、ＬＨ，尿Ｐｙｄ／Ｃｒ、Ｃａ／Ｃｒ比值增高（Ｐ＜０．０５），经治疗后症状改善，ＢＭＤ值升高（Ｐ＜０．０１）。病员ＢＭＤ值下降与绝经年限及血清Ｅ_２下降呈正相关（系数ｒ＝０．６８７２）。提示绝经后妇女应警惕骨质疏松发生，降钙素及１α－２５（ＯＨ）Ｄ_３应用有助于绝经后骨质疏松防治，病员经治疗后ＢＭＤ增高可减少骨质疏松并发骨折的发生，对减轻社会负担、减少医药耗资有一定意义。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后白细胞介素—1β基因表达的研究

探讨白细胞介素－１β参与缺氧缺血性脑损伤的发病机制。方法：通过结扎左颈总动脉制备左脑ＨＩＢＤ的新生大鼠模型。用反转录聚合酶链反应技术检测新生大鼠ＨＩＢＤ后不同时间海马,皮质ＩＬ－１βｍＲＮＡ的表达,经凝胶成像及分析系统扫描ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物,以内参照半定时分析ＩＬ－１βｍＲＮＡ的动态变化。     

IL—1α,IL—1β基因mRNA表面与肺癌阴虚证的研究

本文以肺癌手术后肺组织标本为材料，用ＲＴ－ＰＣＲ为实验方法，初步观察了肺癌病人肺组织中ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－１Ｒａ基因ｍＲＮＡ表达与阴虚证之间的关系。选择２１例肺癌病人为对象，分为肺癌无阴虚组和肺癌阴虚组。结果表明肺癌阴虚组肺组织ＩＬ－１β基因ｍＲＮＡ表达水平有高于肺癌无阴虚组的趋势，但差异无统计学意义（Ｐ〉０．０５）；肺癌阴虚组肺组织ＩＬ－１β／ＩＬ－Ｒａ基因ｍＲＮＡ表达水平比值高于肺癌     

维生素D3,9—顺式维甲酸及其相应核受体对hsp90β基因？…

目的 研究维生素Ｄ３（ＶＤ３）、９－顺式维甲酸（９－ｓｉｃ－ＲＡ）及其相应核受体对ｈｓｐ９０β基因表达的调控作用。方法 采用ＤＥＡＥ－Ｄｅｘｔｒａｎ方法将人ｈｓｐ９０β基因调控片段（－１ ０３９ ｂｐ／＋１ ５３１ ｂｐ）介导的荧光素酶（Ｌｕｃ）报告基因质粒β１．１１转染Ｊｕｒｋａｔ细胞,并用ＶＤ３和９－ｃｉｓ－ＲＡ分别或同时刺激细胞,或将质粒β１．１１及野生型维生素Ｄ３受体（ＶＤＲ）或／和维甲酸     

端粒酶活性及其hTR表达在诱导大肠癌分化细胞中的变化

目的 观察全反式维甲酸（ＡＴＲＡ０和１，２５－二羟维生素Ｄ３（ＶＤ３）大肠癌细胞株诱导分化过程中粒酶活性的变化，并对其ＲＮＡ组分ｈＴＲ进行检测。方法 ＡＴＲＡ和ＶＤ３对大肠癌细胞进行诱导分化，在进行细胞活力测定，细胞增殖测定，流式细胞仪（ＦＣＭ）分析细胞周期及碱性磷酸酶比活性测定的时时，分别在诱导后第２天，第４天和第６天用ＴＲＡＰ法检测其端粒酶活性的变化，并同时用ＲＴ－ＰＣＲ的方法对端粒酶的ＲＮＡ     

大肠癌患者外周血CK—20mRNA基因表达的初步研究

目的 探讨大肠癌患者外周血ＣＫ－２０ｍＲＮＡ（细胞角蛋白－２０ｍＲＮＡ）基因表达及其临床意义。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ９志录－多聚酶链反应）法检测了３４例大肠癌患者外周血ＣＫ－２０ｍＲＮＡ的表达情况。结果 按Ｄｕｋｅｓ分期外周血ＣＫ－２０ｍＲＮＡ的表达率分别是：Ａ期２０％,Ｂ期３７．５％,Ｃ期５３．３％,Ｄ期８３．３％。结论 大肠癌患者外周血ＣＫ－２０ｍＲＮＡ的基因表达与Ｄｕｋｅｓ分期有一定关系,并且     

黑色素瘤抗原-1基因在肝细胞癌中的表达

目的 检测黑色素瘤抗原－１（ＭＡＧＥ－１）ｍＲＮＡ在肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达,为用ＭＡＧＥ－１基因编码蛋白作为疫苗对ＨＣＣ患者进行免疫治疗提供依据。方法 用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法对４５例ＨＣＣ患者组织和相应癌旁肝组织以及１６例肝硬化组织和１２例正常肝组织的ＭＡＧＥ－１ｍＲＮＡ表达情况进行了研究,对６例ＲＴ－ＰＣＲ扩增产物的目的基因片段进行ＤＮＡ序列测定,并以测序证实为ＭＡＧＥ－