视网膜母细胞瘤中Survivin和EphB4表达及意义

目的:探讨Survivin和EphB4蛋白在视网膜母细胞瘤(retinobl astoma,Rb)中的表达与Rb分化程度和视神经浸润的关系。方法:采用免疫组织化学法(S-P法)观察34例Rb中Survivin和EphB4蛋白表达水平。结果:Survivin蛋白在正常视网膜中呈阴性表达,EphB4蛋白在正常视网膜中呈弱阳性表达,而在视网膜母细胞瘤中两者均呈阳性表达。两者在肿瘤组织细胞中的表达与在正常组织细胞中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。且两者在视网膜母细胞瘤视神经浸润组与未浸润组的表达之间差异也有统计学意义(P<0.05)。结论:Survivin和EphB4在Rb的发生和发展过程中起重要作用。且可能与视网膜母细胞瘤的浸润有关。     

Hedgehog信号分子在视网膜母细胞瘤中的表达

[目的]探讨Hedgehog(HH)信号通路相关因子在视网膜母细胞瘤(Rb)发生发展过程中的作用,寻找治疗Rb的特异性的靶向治疗途径。[方法]选取2004年4月～2004年8月因视网膜母细胞瘤于我院行患眼摘除的8例含较多活性肿瘤组织的标本。男性5例,女性3例;双眼1例,单眼7例。用RT-PCR方法检测Hedgehog信号通路相关因子SHH、PTC、SMO、GLI1蛋白基因在Rb组织中的表达情况。[结果]8份标本中4份表达SHH,3份表达PTC,5份表达SMO,4份表达GLI1。表达产物分别为233、144、140、412 bp。Hedgehog信号分子阳性标本外观上均呈灰白色半透明胶状,几乎无钙化灶。病理上7例为眼内期,1例为眼外期。[结论]HH信号通路可能参与了Rb的发生,在抑制Rb细胞分化、维持Rb细胞活性、促进Rb发展中有一定的作用。     

小鼠肝癌细胞移植瘤内淋巴管的形态与VEGF-C、VEGFR-3的表达

目的观察小鼠移植瘤内毛细淋巴管的形态结构,探讨肿瘤内淋巴管新生机制。方法将小鼠肝癌细胞株(H22)接种于昆明小鼠腹股沟区皮下,采用免疫组化法检测VEGF-C．和VEGFR-3在肿瘤内的表达;透射电镜观察肿瘤内淋巴管的超微结构。结果肿瘤细胞有VEGF-C阳性表达,且强度与肿瘤进展相关。毛细淋巴管内皮细胞有VEGFR-3阳性表达。透射电镜下,肿瘤周边区可见3种类型的毛细淋巴管,且内皮细胞细胞器发生改变。结论肿瘤细胞可能通过VEGF-C与VEGFR-3的作用诱导淋巴管内皮细胞增殖,在肿瘤周边形成新生淋巴管。     

视网膜母细胞瘤p53,bcl-2,bax及增殖细胞核抗原表达的研究

目的 :研究p5 3,bcl- 2 ,bax和增殖细胞核抗原 (Proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)在视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma ,Rb)中的表达 ,探讨其表达与Rb及其分化程度的关系。方法 :应用抗人 p5 3,bcl - 2 ,bax和PCNA单克隆抗体 ,采用链霉菌抗生物素蛋白 -过氧化酶免疫组化法 ,对 2 1例Rb常规石蜡标本和 6例正常视网膜常规石蜡标本行p5 3,bcl- 2 ,bax和PCNA表达的测定。结果 :bcl- 2 ,bax和PCNA在Rb中的表达较高 ,与正常视网膜相比有显著性差异 ;分化型Rb组织的bcl- 2阳性表达率较高 ,和未分化型Rb组织相比有显著性差异 ;p5 3,bcl- 2 ,bax在Rb中的表达与PCNA的表达有显著相关性。结论 :Rb的发生与多个细胞凋亡调控基因异常有关 ,测定及分析Rb的bcl- 2 ,bax和PCNA表达 ,对于Rb的诊断和分化程度有重要意义。     

microRNA-106b在视网膜母细胞瘤组织中表达的临床意义及其生物学功能研究

目的:研究microRNA-106b(miR-106b)在视网膜母细胞瘤组织中的表达及其临床意义,并探讨其对视网膜母细胞瘤细胞活力、增殖及凋亡的影响.方法:采用qRT-PCR检测33例视网膜母细胞瘤及相应癌旁组织中miR-106b的表达并分析其与不同临床病理特征的相关性.在视网膜母细胞瘤细胞中转染miR-106b类似物或miR-106b抑制物,采用MTT、BrdU-ELISA法及流式细胞仪检测细胞活力、增殖及凋亡,Western blot法检测Rb1蛋白表达变化.结果:miR-106b在视网膜母细胞瘤组织中的表达水平明显高于对应的癌旁组织(P<0.01).miR-106b表达与视神经浸润有关(P<0.05).miR-106b在视网膜母细胞瘤细胞系Y79及HXO-Rb44中的表达水平明显高于其在正常视网膜血管内皮细胞 ACBRI-181中的表达水平(P<0.01).miR-106b抑制物明显降低HXO-Rb44细胞中miR-106b的表达水平(P<0.01),并导致细胞活力降低(P<0.01)、增殖能力下降(P<0.01)及凋亡细胞百分比增加(P<0.01).miR-106b类似物明显增加Y79细胞中miR-106b的表达水平(P<0.01),并导致细胞活力增强(P<0.01)、增殖能力增强(P<0.01)及凋亡细胞百分比增加(P<0.05).同时,降低HXO-Rb44细胞中miR-106b水平显著增高细胞内Rb1蛋白表达水平,增高Y79细胞中miR-106b表达水平,明显降低细胞内Rb1蛋白表达水平(P<0.01).结论:miR-106b在视网膜母细胞瘤组织中表达升高且与恶性临床病理特征相关,miR-106b可增强视网膜母细胞瘤细胞活力、增殖能力,减少细胞凋亡,并可降低细胞内Rb1蛋白表达.miR-106b可能在视网膜细胞瘤的发生、发展中发挥重要作用.     

人视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50的建立及其生物学特性

从54例视网膜母细胞瘤(Rb)实体瘤体外培养研究中,在我国首先建成一个人类Rb连续细胞系:SO-Rb50,至今已连续传代32个余月,275代.形态学观察、免疫组化反应、染色体分析及裸小鼠皮下移植成瘤,均证实SO-Rb50细胞系是视网膜母细胞瘤细胞系.     

VEGF-C、VEGFR-3与LYVE-1在甲状腺癌中的表达及意义

目的：探讨VEGF-C、VEGFR-3和LYVE-1在甲状腺癌中的表达及意义。方法：用免疫组化S-P法检测87例甲状腺癌（其中有淋巴结转移者20例）VEGF-C、VEGFR-3和LYVE-1的表达水平，并对不同肿瘤的上述指标分别进行相关性分析。结果：在甲状腺癌中VEGF-C、VEGFR-3和LYVE-1均有不同程度的表达，其表达程度由高到低依次为乳头状癌、未分化癌、滤泡状癌及髓样癌，有淋巴结转移的肿瘤较无转移的肿瘤表达升高；VEGF-C、VEGFR-3的表达与LYVE-1的表达呈正相关。结论：VEGF-C、VEGFR-3与甲状腺癌淋巴管生成有关，从而推测甲状腺癌淋巴管生成与淋巴结转移密切相关。     

PTEN、Rb基因蛋白在乳腺癌中的表达及其意义

目的:探讨张力蛋白同源物磷酸酯酶(PTEN)、视网膜母细胞瘤(Rb)基因蛋白异常表达在乳腺癌发生、发展中的作用及其意义。方法:应用免疫组织化学S-P法检测PTEN、Rb基因蛋白在150例乳腺癌标本及30例乳腺良性增生性病变中的表达,并分析其异常表达与乳腺癌若干临床病理参数的关系。结果:PTEN、Rb基因蛋白在乳腺癌组与乳腺良性病变组异常表达差异均有统计学意义(P<0.005)。PTEN基因蛋白的失表达与乳腺癌淋巴结转移、雌激素受体(ER)失表达有一定关系(P<0.05)。Rb基因蛋白的失表达与各临床病理参数均无关,只是在乳腺癌Ⅲ级中失表达率较高。ER的表达与Rb蛋白的表达具有相关性(P<0.05)。结论:PTEN、Rb基因蛋白在乳腺良性病变中有很高的表达率,在乳腺癌中表达率下降,表明其肿瘤抑制功能丧失,促进细胞的肿瘤性转化。PTEN蛋白的表达与淋巴结转移、ER失表达相关,对乳腺癌的预后判断有参考价值。     

cyclinD1、Rb基因产物与乳腺癌生物学行为的相关性

目的:探讨cyclinD1、Rb基因产物表达与乳腺癌生物学行为的关系.方法:应用甲醛固定石蜡包埋切片行免疫组化染色(S-P法),检测cyclinD1、Rb、ER在86例乳腺癌、12例乳腺纤维腺瘤和12例乳腺增生病中的表达.分析这些表达结果与乳腺癌生物学行为的关系.结果:cyclinD1与乳腺癌患者的预后及ER的阳性率,Rb与组织学分级均有显著性差异.结论:cyclinD1、Rb基因产物的表达与乳腺癌生物学行为的关系无规律性.乳腺良、恶性病变之间有显著性差异.检测细胞凋亡与合理的基因产物对判断乳腺癌的预后有一定意义.     

Cyclin D1、p16及Rb在视网膜母细胞瘤中的表达及其相关性

目的探讨CyclinD1、p16、Rb在视网膜母细胞瘤（retinoblastoma，RB）中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学方法（SP法）检测CyclinD1、p16及Rb在46例常规石蜡包埋的视网膜母细胞瘤标本中的表达，并在生物学行为及分化程度不同的视网膜母细胞瘤之间进行比较。结果正常视网膜组织与视网膜母细胞瘤组织中CyclinD1、p16及Rb蛋白表达差异有极显著性意义（P〈0．01）；视网膜母细胞瘤中，Rb与p16、CyclinD1表达之间无明显相关性（P〉O．05）；p16表达率在生物学行为不同的视网膜母细胞瘤之间差异显著，30例视神经未浸润组视网膜母细胞瘤的p16阳性表达率明显高于16例视神经浸润组（P〈0．05）；Rb及p16蛋白表达阳性率随组织学分级降低而下降，分化组与未分化组视网膜母细胞瘤中Rb及p16蛋白表达率差异有极显著性意义（P〈0．01）。结论p16、Rb、CyclinD1在视网膜母细胞瘤发生发展中起着重要作用。CyclinD1的过表达与p16和Rb的表达缺失或失活是视网膜母细胞瘤发生的重要分子事件，p16蛋白失表达可能与其视神经浸润能力有关，Rb及p16蛋白失表达则与其分化程度相关。     

Rb蛋白在胃癌及癌旁组织中表达的意义

目的　检测Rb蛋白在胃癌组织、癌旁组织中的表达及其分布特点。方法　采用S -P免疫组织化学法对 88例胃癌组织、5 2例癌旁组织进行Rb蛋白的定位观察。结果　各病理类型胃癌组织、癌旁组织均有Rb蛋白表达 ,阳性率分别为 6 1.36 %(5 4/ 88)和 84.6 1%(4 4/ 5 2 ) ,阳性细胞的棕黄色颗粒位于细胞核和细胞浆。胃癌Rb蛋白表达与性别、年龄、肿瘤部位在统计学上无差异 (P >0 .0 5 ) ;而与组织学类型、病理分级、淋巴结转移、临床病理分期在统计学上有差异 (P <0 .0 5 )。结论　Rb基因缺失和表达水平的改变与胃癌发生、发展密切相关 ,Rb蛋白表达的检测可作为胃癌预后判断的独立指标。     

VEGF-C及其受体VEGFR-3 mRNA在大肠癌的表达和意义

目的研究大肠癌VEGF-C和VEGFR-3 mRNA的表达与大肠癌淋巴管生成的关系。方法采用RT—PCR检测32例新鲜大肠癌及相应正常组织中VEGF—C和VEGFR-3 mRNA表达,免疫组化染色淋巴管内皮特异标记物podoplanin计数淋巴管密度,以血管标记物CD34染色做对比。结果大肠癌VEGF—C及其受体VEGFR-3 mRNA水平显著高于正常组织,且二者表达具有显著正相关性。大肠癌VEGF-C mRNA高表达组癌周淋巴管密度显著高于低表达组。伴有淋巴管受累或淋巴结转移组VEGF-C mRNA显著高于无淋巴管受累或淋巴结转移组。结论VEGF-C／VEGFR-3信号转导途径可能对大肠癌癌周淋巴管生成具有重要作用,并可能进而促进癌组织淋巴结转移。     

Rb基因和PCNA在前列腺癌中表达的意义及相关性分析

目的　探讨视网膜母细胞瘤易感基因 (Rb)和增殖细胞核抗原 (PCNA)在前列腺癌中表达的意义及其相互关系 .方法　采用免疫组织化学 SABC法对 36例前列腺癌标本 Rb基因和 PCNA进行检测 ,并应用图像分析仪及统计学方法对两者在不同病理分级及临床分期中的表达进行对比及相关分析 .结果　 36例前列腺癌标本中 Rb表达阳性 17例 ,阳性率47.2 % ,其表达在前列腺癌的不同病理分级及临床分期之间有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;PCNA在标本中的表达强度在不同病理分级及临床分期之间有显著差异 (P<0 .0 5 ) ;同时还发现 Rb表达与 PCNA表达存在负相关 ,即 Rb阳性标本中 PC-NA表达弱而 Rb阴性标本中 PCNA表达强 ,两者比较有显著性差异 (P<0 .0 5 ) .结论　 Rb基因参与了前列腺癌的发生、发展过程 ,在发病机制中可能涉及到 Rb和 PCNA调节通路的异常 ,检测 Rb基因和 PCNA有助于前列腺癌恶性程度的判定及预后 .     

VEGF/PDGF相关因子在晚期肾透明细胞癌中的表达与舒尼替尼远期疗效的相关性

 目的  观察晚期肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血小板衍化生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)相关因子的表达,并分析其表达量与舒尼替尼远期疗效的相关性。方法  选取2010年1月-12月复旦大学附属中山医院收治的转移性晚期肾癌患者20例。所有患者均予患肾根治性切除术,病理证实均为ccRCC。所有患者术后均予舒尼替尼标准给药方案治疗,50 mg每天1次口服,服药4周、停药2周为1个疗程,每6周随访1次,随访至2015年12月底。免疫组化方法检测入组患者病理标本肿瘤组织中VEGF-A、VEGF-C、VEGFR-2、VEGFR-3、PDGF和PDGFR-α、β的表达水平,计算肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD),并与靶向治疗远期疗效进行相关性分析。结果  截至研究终点日期,所有患者均未出现因不能控制的严重不良反应而停药的情况,存活4人,死亡16人,死亡患者均因肿瘤进展导致。Spearman分析显示VEGFR-2高表达与较长的无进展生存时间(progression free survival,PFS)及总生存时间(overall survival,OS)存在显著相关,单因素Cox生存回归分析中VEGFR-2强阳性与肿瘤进展风险降低(OR=0.162,95%CI:0.031~0.839,P=0.030)及死亡风险降低(OR=0.204,95%CI:0.041~1.015,P=0.052)具有较为显著的相关性。结论  接受舒尼替尼治疗的晚期ccRCC患者中,VEGFR-2高表达与较长的PFS及OS存在显著相关,VEGFR-2强阳性与肿瘤进展风险降低及死亡风险降低显著相关,提示VEGFR-2有可能成为晚期肾癌靶向治疗的远期疗效预测因子。     

非小细胞肺癌VEGFR-2的表达及临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)在非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其与临床病理特征?预后的关系?方法:采用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测VEGFR-2在217例非小细胞肺癌中的表达情况,并结合临床病理资料进行单因素生存分析?结果:VEGFR-2在NSCLC中高表达,阳性率为63.1%,且该基因的表达与肿瘤分化程度?TNM分期?淋巴结转移?神经侵袭有显著相关性(P < 0.05)?VEGFR-2的表达与NSCLC的预后相关,阳性表达该基因的患者的平均中位生存期比阴性表达的患者长12个月(P=0.049)?结论:VEGFR-2基因在非小细胞肺癌的发生?发展过程及预后具有重要作用?     

抑癌基因产物Rb蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究乳腺癌组织中Rb蛋白的表达及其临床意义。 方法:采用S-P免疫组织化学染色法对52例乳腺癌组织和20例良性乳腺病变组织中Rb蛋白的表达进行检测。 结果:Rb蛋白阴性表达率在乳腺癌组中为76.9%（40/52）,显著高于良性乳腺病变组织 ［15.00%(3/20)］(P<0.01);Rb蛋白的阴性表达与乳腺癌临床病理参数间无关联（P＞0.05）。随访46例乳腺癌患者,38例Rb蛋白阴性表达者局部复发或远处转移为10.5%,而8例Rb蛋白阳性表达者则为0,两者比较差异有显著性（P<0.01）。结论:Rb蛋白的阴性表达与乳腺癌的发生有关;作为抑癌基因产物,Rb蛋白可以在蛋白质水平估计乳腺癌的病情,为临床制定治疗方案、估计病情及预后提供一个有意义的客观指标。     

Quantitative analysis of lymphangiogenic markers in human gastroenteric tumor

BACKGROUND: Lymphatic spread of gastroenteric tumor cells to regional lymph nodes is one of the early events in metastatic cancers and is often associated with distant metastatic spread and poor prognosis. Expression levels of newly described lymphatic endothelial markers, LYVE-1, VEGF-C, VEGF-D and the VEGF receptors VEGFR-3 were assessed in our study. METHODS: Paired (tumor and corresponding normal tissue) samples were obtained. The expression level of each factor was determined using RT-PCR and quantified by using a real-time quantitative PCR (RT-QPCR) technique, with respective cloned cDNA plasmids as internal standards. RESULTS: The expression of VEGF-C and lymphatic endothelial marker VEGFR-3 was significantly greater in patients with lymph node metastasis than in those without metastasis, but no different expression level of VEGF-D and LYVE-1 was detected in both groups of patients. Lymphatic vessel density (LVD), which was assessed by immunohistochemistry for LYVE-1, was correlated with lymphangiogenesis factors and lymph node metastasis. Expression of VEGF-C and VEGFR-3 was significantly associated with higher peritumoral LVD than normal group, and LVD was found greater in the node-positive group than in the node-negative group. CONCLUSIONS: These results indicate that quantitative analysis of lymphangiogenic marker VEGF-C and VEGFR-3 in gastroenteric specimens may be useful in predicting metastasis of gastroenteric cancer to regional lymph nodes, but the role of LYVE-1 in predicting metastasis of gastroenteric cancer requires further analysis.